張曉玉， 張修彥， 詹純列（廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院動物實驗中心， 廣州 510010）

新西蘭兔臟器參數(shù)、血液指標、心率、心室壓的性別間比較

張曉玉， 張修彥， 詹純列
（廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院動物實驗中心， 廣州 510010）

目的 測定并比較普通級新西蘭兔臟器參數(shù)、血液指標、心率及心室壓。方法 取70～80日齡普通級新西蘭兔60只，雌雄各半，飼養(yǎng)一周后，精確稱量體質(zhì)量后，采集動脈血用于測定血液生理生化及血氣指標； 呼吸支持情況下開胸進行心室壓測定； 解剖取各臟器并稱量。結(jié)果 性別間比較: 胸腺、肺的臟器系數(shù)差異顯著（P＜0.05或P＜0.01）； 血液指標中，嗜酸性細胞百分率、中性粒細胞百分率、單核細胞百分率、淋巴細胞百分率、中性粒細胞、單核細胞、紅細胞平均體積、平均血紅蛋白量、血清白/球蛋白、血糖、補體C3、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、pH值、pH溫度校正、血氧飽和度差異均顯著（P＜0.05或P＜0.01）； 左心室舒張壓、右心室舒張壓差異有顯著性意義（P＜0.05）。結(jié)論 普通級新西蘭兔部分臟器系數(shù)，血液生理生化、血氣以及心室壓指標性別間存在差異，用于相關(guān)實驗研究時應(yīng)注意。

普通級新西蘭兔； 臟器參數(shù)； 血液學指標； 心室壓

新西蘭兔常用于心腦血管研究、免疫抗體制備、過敏反應(yīng)實驗、解熱藥研究、生殖生理實驗等。相對于標準化嚙齒類動物而言，普通級新西蘭兔在實際應(yīng)用中質(zhì)量控制的影響因素較多，針對其生物學特性的測定尚不夠全面、及時。目前，僅有少量研究報道不同微生物級別和或品種兔的生長發(fā)育、臟器重量、臟器系數(shù)、血液生理生化指標、血液酸堿值與血氣分析、呼吸及心率等指標中的一項或幾項進行測定和比較，飼料對普通級新西蘭兔血液指標的影響以及肺動脈高壓模型兔中心室壓變化的分析等［1-4］。本實驗全面測定并比較了70～80日齡不同性別的普通級新西蘭兔主要臟器參數(shù)、血液生理生化及血氣、心率及心室壓指標，為其使用提供詳實的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，以彌補以往文獻和教材中數(shù)據(jù)之不足。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

70～80日齡普通級新西蘭兔雌雄各30只， 由信華實驗動物養(yǎng)殖場提供［ SCXK（粵）2014-0023］， 飼養(yǎng)于廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院動物實驗中心普通環(huán)境［SYXK（粵）2014-0100］， 適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后用于實驗。

1.2 儀器及試劑

體質(zhì)量和臟器稱量儀器: 德國賽多利斯BSA124S型電子天平，稱量范圍: 0.1 mg～120 g。血生理生化測定的儀器: 日本光電MEK-7222型全自動血細胞分析儀、美國IL GEM premier 3000型全自動血氣分析儀、日本日立7020型全自動生化分析儀、美國貝克曼Allegra 64R型臺式高速冷凍離心機。心室壓測定儀器及試劑: 上海奧爾科特ALC-V8型小動物呼吸機、北京微信斯達Pclab-430C型生物醫(yī)學信號采集處理系統(tǒng)、北京微信斯達PY-2型血壓傳感器、BD-24G靜脈留置針、體積分數(shù)3%戊巴比妥鈉注射液、25 000 U/mL肝素鈉生理鹽水注射液。

1.3 方法

1.3.1 體質(zhì)量和臟器重量的測定 實驗前禁食12 h，禁水1 h， 耳緣靜脈采血及心室壓測定后放血處死，立即剖取腦、腦垂體、甲狀腺、胸腺、心、肺、肝、胃、脾、左腎、右腎、腎上腺、睪丸/子宮、附睪/卵巢， 并用濾紙吸干組織表面水分后稱重， 記錄數(shù)據(jù)， 計算臟器系數(shù)［（臟器重量/體質(zhì)量）×100%］。

1.3.2 血液樣品檢測 耳緣動脈采血， 其中約1 mL注入EDTA二鉀抗凝管，用全自動血細胞分析儀檢測22項血常規(guī)指標； 約2 mL注入肝素抗凝管， 用全自動血氣分析儀檢測23項血氣指標； 約2 mL注入不抗凝普通采血管，室溫靜置30 min， 3 000 r/min離心10 min，分離血清，用全自動生化分析儀檢測21項血生化指標。

1.3.3 左右心室壓測定 新西蘭兔稱重后耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉（1 mL/kg），麻醉后固定，進行氣管插管，打開小動物呼吸機進行輔助呼吸。做開胸手術(shù)前，耳緣靜脈注射肝素鈉生理鹽水注射液（1 000 U/kg），進入胸腔后調(diào)整人工呼吸機的潮氣量到雙側(cè)肺臟膨起適度為止。打開心包膜，將與壓力換能器連接好的留置針直接插入心尖處，并立即收回針尖，將套管部分繼續(xù)插入左心室內(nèi)，觀察套管中血液顏色和泵出節(jié)奏，數(shù)值穩(wěn)定后記錄心率真、左心室壓。調(diào)整套管針針尖， 穿過心室隔到達右心室， 收回針尖， 將套管部分繼續(xù)插入右心室，觀察套管中血液顏色和泵出節(jié)奏， 記錄右心室壓。

1.4 統(tǒng)計學分析

數(shù)據(jù)處理采用SPSS19.0 統(tǒng)計軟件進行，數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標準差表示， 性別間比較采用t檢驗， P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 主要臟器參數(shù)

雌雄臟器重量心、肝2項指標差異顯著（P＜0.05），體質(zhì)量，腦、胸腺、胃重量4項指標差異極顯著（P＜0.01）； 雌、雄胸腺、肺臟器系數(shù)差異顯著（表1）。

表 1 雄性與雌性普通級新西蘭兔主要臟器參數(shù)

2.2 血常規(guī)

雌、雄性粒細胞（NEUT）、單核細胞（MONO）、NEUT%、淋巴細胞（LYMPH） %、MONO %、紅細胞平均體積（MCV）、平均血紅蛋白量（MCH） 7項指標的差異極顯著，血小板壓積（PCT）、嗜酸性粒細胞（EO） %的差異顯著（表2）。

2.3 血液生化

雌、雄A/G、血糖（GLU）、補體C3三項指標的差異顯著； 谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）的差異極顯著（表3）。

2.4 血氣分析

雌雄pH、pH溫度校正（pHT）、血氧飽和度（SaO2） 三項指標差異顯著（表4）。

表 2 雄性與雌性普通級新西蘭兔血常規(guī)

表 3 雄性與雌性普通級新西蘭兔血液生化

表 4 雄性與雌性普通級新西蘭兔血氣分析

2.5 心率、心室壓

雌雄左心室舒張壓LVD P、右心室舒張壓（RVDP） 二項指標差異顯著（表5）。

表 5 雄性與雌性普通級新西蘭兔心率、心室壓

3 討論

實驗動物的臟器重量及臟器系數(shù)受品種、體質(zhì)量、性別、年齡等因素的影響［1-5］。有報道［6］，家兔的臟器系數(shù)雌雄間差異不明顯，而本文結(jié)果顯示雄性新西蘭兔肺的臟器系數(shù)顯著高于雌性（P＜0.05），雌性胸腺的臟器系數(shù)顯著高于雄性（P＜0.05），而胸腺是免疫系統(tǒng)中重要的中樞淋巴器官。普通級新西蘭兔相對SPF級新西蘭兔而言，受環(huán)境因素影響大，機體的免疫應(yīng)答反應(yīng)更加多樣。作者通過血液生理、生化、血氣檢測表明，雌兔的淋巴細胞百分率、EO百分率、血清白/球蛋白值極顯著顯著或地高于雄兔； 雄兔的NEUT、MONO、NEUT百分率、MONO百分率、補體C3值極顯著或顯著地高于雌兔。這些免疫相關(guān)細胞及因子的差異是否能反映出雌雄之間免疫功能的差異還有待免疫細胞的進一步測定［7］。

22項血常規(guī)指標中，MCV、MCHC、MCH是反映紅細胞形態(tài)特征的指標。雄性MCV、MCH均在正常參考值范圍內(nèi)顯著低于雌性，與丁雷等［8］測定結(jié)果稍有不同。PCT的變化由PLT、MPV的變化引起，與凝血作用有關(guān)。岳秉飛等［9］報道10周齡的雌兔PLT明顯高于雄兔，而本實驗結(jié)果顯示雄性PCT顯著高于雌性。21項血生化指標中， GGT是臨床上評估腎臟和肝臟功能的常用指標，而以往文獻中少有檢測，結(jié)果顯示雌兔GGT極顯著低于雄兔； 雌雄間GLU差異的主要原因可能是血液樣品離體時間及動物禁食時間的影響［10，11］。血氣分析是判斷機體呼吸功能及酸堿平衡的重要指標， 雌、雄兔23項血氣指標比較中，雌性pH值與SaO2顯著低于雄性且差異存在一致性: 血液pH下降，CO2分壓升高，Hb與氧的親和力降低，SaO2降低。此外，實驗動物的血液學指標也受測定方法、儀器設(shè)備和樣本量等因素的影響［12］，在實驗過程中應(yīng)注意排除。心室壓是反映和評價心臟收縮與舒張功能的重要指標，實驗人員易受到操作因素的影響，在測定心室壓過程中出現(xiàn)誤差，因此提供新西蘭兔的正常值具有重要意義。結(jié)果顯示，新西蘭兔左心室、右心室舒張壓性別間存在顯著差異［13，14］。

比較而言，本實驗在前人［1-4］測定新西蘭兔臟器重量、臟器系數(shù)及血液生理生化的基礎(chǔ)上，補充并比較了腦垂體、甲狀腺、胸腺、附睪、卵巢的臟器參數(shù)， GGT、AMY、補體C3/C4、其他12項血氣指標及心室壓的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和性別間差異。

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Comparison on Organ Parameter， Blood Parameter，Heart Rate and Ventricular Pressure between Male and Femele New Zealand White Rabbit

ZHANG Xiao-yu， ZHANG Xiu-yan， ZHAN Chun-lie
（Animal Experiment Center， Guangzhou General Hospital of Guangzhou
Military Command of PLA， Guangzhou 510010， China）

Objective To determine and compare the parameters of organ and blood， heart rate and ventricular pressure in New Zealand white rabbit. Methods A total of 60 New Zealand white rabbits about 70-80 days old were fed for a week. Weight of rabbit and main organ， blood physiological and biochemical index and blood gas， ventricular pressure and heart rate were determined on respiratory supportmale and female rabbits （P＜0.05 or P＜0.01）. Percentage of eosinophils， neutrophils， mononuclear cell and lymphocyte， neutrophils， mononuclear cell， mean corpuscular volume， average amount of hemoglobin，serum albumin /globulin， blood glucose， complement C3， glutamyl- transpeptidase， value of pH，temperature correction pH， oxygen saturation differences were significant （P＜0.05 or P＜0.01）. The left and right ventricular diastolic blood pressure differences were also significant（P＜0.05）. Conclusion Some of the organ coefficient， blood physiological and biochemical index， blood gas analysis and ventricular pressure exist significant difference between male and female New Zealand white rabbit， it should be paid attention in related research.

New Zealand white rabbit； Organ parameter； Blood parameter； Ventricular pressure

Q95-33

B

1674-5817（2016）01-0032-05

10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.006

2015-06-19

廣東省科技計劃基礎(chǔ)條件建設(shè)項目（2012B060300022）

張曉玉（1989-）， 女， 碩士， 研究方向: 人類疾病動物模型的開發(fā)利用。E-mail: zhxiaoyu11@163.com

詹純列（1963-）， 男， 主任醫(yī)師， 研究方向: 實驗動物與人類疾病動物模型。E-mail: 1513508151@qq.com