南文金，黃健強(qiáng)，吳靜波，胡鴻惠，彭國良

（1.韶關(guān)學(xué)院 動(dòng)物疫病實(shí)驗(yàn)室，韶關(guān) 512005；2.韶關(guān)學(xué)院 英東農(nóng)業(yè)科學(xué)與工程學(xué)院，韶關(guān) 512005；3.粵北生豬生產(chǎn)及疫病防控協(xié)同創(chuàng)新發(fā)展中心，韶關(guān) 512005）

豬場獸醫(yī)

豬瘟免疫程序優(yōu)化及免疫效果評價(jià)

南文金1，3，黃健強(qiáng)1，3，吳靜波1，3，胡鴻惠1，3，彭國良2，3

（1.韶關(guān)學(xué)院 動(dòng)物疫病實(shí)驗(yàn)室，韶關(guān) 512005；2.韶關(guān)學(xué)院 英東農(nóng)業(yè)科學(xué)與工程學(xué)院，韶關(guān) 512005；3.粵北生豬生產(chǎn)及疫病防控協(xié)同創(chuàng)新發(fā)展中心，韶關(guān) 512005）

為了提高豬瘟疫苗免疫效果，增強(qiáng)豬群抵抗豬瘟病毒感染能力，采用ELISA方法對某豬場仔豬母源抗體消長情況進(jìn)行監(jiān)測，根據(jù)母源抗體消長規(guī)律對豬瘟疫苗首免日齡由原來的20日齡調(diào)整為35日齡，二免日齡由60日齡調(diào)整為65日齡。連續(xù)兩批商品豬的豬瘟抗體監(jiān)測數(shù)據(jù)表明，免疫程序調(diào)整后豬群的豬瘟抗體合格率上升，變異系數(shù)下降，疫苗免疫效果提高明顯。

豬瘟；母源抗體；免疫程序；免疫效果

豬瘟（Classical Swine Fever， CSF）是一種高度接觸性傳染病，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）列為必須上報(bào)的傳染?。?］，是目前危害養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的主要傳染病之一。我國對豬瘟采取強(qiáng)制免疫措施，有效防控了豬瘟的暴發(fā)和流行，但非典型豬瘟在部分豬場存在，一旦發(fā)生，影響豬場整體健康和生產(chǎn)成績，造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。非典型豬瘟的發(fā)生和豬瘟疫苗免疫程序和免疫效果關(guān)系密切，本研究通過對某規(guī)?；i場豬瘟抗體水平進(jìn)行監(jiān)測，通過抗體水平變化規(guī)律，對該豬場豬瘟免疫程序進(jìn)行優(yōu)化，調(diào)整后的豬瘟疫苗免疫效果提高明顯，增強(qiáng)了豬群對豬瘟病毒侵襲的抵抗力。該研究以期為規(guī)模化豬場如何進(jìn)行豬瘟疫苗的科學(xué)免疫提供了參考。

1　材料與方法

1.1 試驗(yàn)豬場基本情況

試驗(yàn)于廣東某豬場進(jìn)行，存欄基礎(chǔ)母豬900多頭，分區(qū)飼養(yǎng)，全進(jìn)全出。種豬每年豬瘟疫苗普免3次，每次4頭份，商品豬豬瘟免疫程序?yàn)?0日齡首免豬瘟疫苗1頭份，60日齡二免豬瘟疫苗2頭份，豬瘟疫苗為某公司生產(chǎn)的豬瘟ST傳代細(xì)胞苗。

1.2 檢測試劑盒與判定標(biāo)準(zhǔn)

豬瘟病毒抗體檢測試劑盒（阻斷ELSIA），美國IDEXX公司產(chǎn)品，批號：D361，按試劑盒說明書進(jìn)行操作，所有孵育反應(yīng)都在23 ℃恒溫箱中進(jìn)行，在陰性和陽性對照成立，檢測結(jié)果有效時(shí)通過計(jì)算樣本阻斷率來判定抗體水平，具體判斷標(biāo)見表1。

表1　豬瘟抗體檢測結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

1.3 第1次豬瘟免疫抗體監(jiān)測

為評價(jià)該豬場現(xiàn)行的豬瘟免疫程序免疫效果，隨機(jī)選擇20頭母豬、豬瘟疫苗首免1個(gè)月的保育豬20頭和二免后1個(gè)月的生長育肥20頭，前腔靜脈采集血液樣本3～5 mL，實(shí)驗(yàn)室離心分離血清，使用豬瘟病毒抗體檢測試劑盒對樣本抗體水平進(jìn)行檢測，對檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

1.4 仔豬母源抗體監(jiān)測及首免日齡確定

為科學(xué)地確定該豬場豬瘟免疫程序，選擇分娩時(shí)間相差1 d的10窩仔豬進(jìn)行母源抗體監(jiān)測，每窩仔豬隨機(jī)選擇2頭仔豬，打好耳號，分別于出生7、14、21、28、35和42日齡前腔靜脈采血，實(shí)驗(yàn)室檢測豬瘟母源抗體水平，根據(jù)母源抗體變化規(guī)律和該場仔豬斷奶日齡，對該場仔豬豬瘟首免時(shí)間調(diào)整為35日齡，二免時(shí)間為65日齡。

1.5 免疫程序優(yōu)化后的豬瘟免疫效果監(jiān)測

連續(xù)監(jiān)測了2批豬瘟免疫程序優(yōu)化后的商品豬群抗體水平，分別在豬瘟疫苗首免和二免后1個(gè)月，每批豬每次隨機(jī)選擇20頭前腔靜脈采血分離血清進(jìn)行豬瘟抗體水平檢測。

2　結(jié)果

2.1 第1次豬瘟免疫抗體監(jiān)測結(jié)果

檢測結(jié)果顯示，該場母豬豬瘟免疫效果較好，抗體合格率達(dá)到95%，抗體平均阻斷率85.65%，抗體變異系數(shù)為24.47%。但商品豬采用的豬瘟20日齡首免，60日齡二免的免疫程序免疫效果較差，首免和二免后30天豬瘟抗體合格率分別為35%和60%，抗體水平不均勻，變異系數(shù)較高（表2）。

2.2 仔豬母源抗體消長規(guī)律監(jiān)測結(jié)果

母源抗體監(jiān)測結(jié)果表明，14日齡前仔豬母源抗體都維持較高水平，抗體合格率為100%，平均阻斷率在80%以上，變異系數(shù)小于10%；14日齡到28日齡抗體水平隨日齡增長逐步下降，28日齡時(shí)母源抗體合格率還能達(dá)到70%；28日齡后母源抗體迅速下降，35日齡母源抗體合格率為40%，平均阻斷率為48.17%，42日齡時(shí)母源抗體合格率僅20%，平均阻斷率下降到32.29%，變異系數(shù)升高到33.66%（見表3）。

2.3 優(yōu)化后的豬瘟免疫抗體監(jiān)測結(jié)果

對免疫程序優(yōu)化后的兩批豬首免和二免后1個(gè)月豬瘟抗體水平檢測結(jié)果表明，豬瘟抗體合格率和平均阻斷率都有較大幅度提升，抗體水平更加均勻，變異系數(shù)明顯下降（表4）。

表2　第1次豬瘟免疫抗體檢測結(jié)果

表3　仔豬豬瘟母源抗體檢測結(jié)果

表4　豬瘟免疫程序優(yōu)化后商品豬群抗體水平

3　討論

抗體合格率、平均阻斷率和變異系數(shù)是評價(jià)豬瘟疫苗免疫效果幾個(gè)重要參數(shù)，杜希珍等的研究報(bào)道［2］，豬瘟控制較好，沒有隱性感染的豬場，豬群抗體合格率可以達(dá)到90%以上，抗體變異系數(shù)小于25%。在對該豬場第1次豬瘟抗體檢測中，所檢測的母豬樣品豬瘟抗體較為理想，抗體合格率達(dá)到95%，變異系數(shù)低于25%，平均阻斷率高于80%，但商品代豬群豬瘟抗體水平較差，豬瘟疫苗首免和二免后1個(gè)月抗體率僅為35%和60%，且抗體變異系數(shù)較高，說明該豬場采用的20日齡首免豬瘟疫苗，60日齡加強(qiáng)免疫的商品代豬瘟免疫程序沒有達(dá)到免疫效果，尚未達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的豬瘟抗體合格率70%最低要求，免疫失敗。

豬瘟疫苗是我國獸用疫苗中為數(shù)不多的僅有一個(gè)疫苗毒株的商品疫苗，雖然豬瘟病毒流行毒株呈現(xiàn)多樣性，基因亞型也不斷復(fù)雜［3，4］，但研究表明［5］用于生產(chǎn)疫苗的“C”株仍然可以對現(xiàn)在流行的豬瘟野毒有很好的保護(hù)作用。仔豬可以通過吮吸免疫母豬初乳獲得對豬瘟的被動(dòng)免疫保護(hù)，但母源抗體隨著仔豬日齡增長而降低［6］，因此需要通過接種疫苗產(chǎn)生主動(dòng)免疫來增加豬群對豬瘟野毒感染抵抗力。養(yǎng)豬生產(chǎn)實(shí)踐中，豬瘟免疫失敗時(shí)有發(fā)生，影響豬瘟免疫效果有多種因素，但學(xué)者［7］普遍認(rèn)為，豬瘟疫苗首免日齡不當(dāng)是造成豬瘟免疫失敗的主要原因之一。表3對仔豬母源抗體檢測數(shù)據(jù)可知，21日齡和28日齡仔豬母源抗體合格率分別為85%和70%，而研究表明首免后豬瘟抗體上升率和上升幅度和母源抗體水平呈負(fù)相關(guān)［8-9］，母豬母源抗體對疫苗接種仔豬的主動(dòng)免疫有明顯抑制作用［10］，而該場采用的20日齡首免豬瘟疫苗時(shí)間過早，母源抗體和疫苗抗原形成抗原抗體復(fù)合物被機(jī)體免疫系統(tǒng)清除，首免沒有形成記憶細(xì)胞從而導(dǎo)致二免后豬瘟抗體水平上升緩慢，是導(dǎo)致商品豬群免疫失敗主要原因。

通過對母源抗體消長規(guī)律研究，將該豬場商品代豬群的豬瘟免疫程序調(diào)整為35日齡首免，65日齡二免，免疫劑量為2頭份，通過對調(diào)整后兩批商品代豬群抗體水平檢測，抗體合格率大幅度提高，變異系數(shù)降低，整體抗體水平顯著提高，但同時(shí)也發(fā)現(xiàn)，首免后的抗體合格率還沒有超過70%，因?yàn)闂l件所限，試驗(yàn)只采取了一種免疫程序和免疫劑量，免疫程序是否還有進(jìn)一步優(yōu)化空間還需增加免疫程序試驗(yàn)進(jìn)行比較。

通過仔豬豬瘟母源抗體消長規(guī)律來選擇合適的免疫程序可以發(fā)揮豬瘟疫苗免疫最大效果，提高豬場疫病防控能力。

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2016-04-12）

韶關(guān)市科技計(jì)劃項(xiàng)目（2013CX/N09，2014CX/N319）。

南文金（1981-），男，河南靈寶人，助理研究員，碩士，主要從事動(dòng)物疫病防控技術(shù)研究