陳紅香　隋霜　才仁　王琳　劉江超　古麗加娜提　王芬　沈澤虹　瑪依努爾·尼牙孜

·論著·

SCC和Ki67在宮頸鱗癌不同分期的表達(dá)及其關(guān)系

陳紅香隋霜才仁王琳劉江超古麗加娜提王芬沈澤虹瑪依努爾·尼牙孜

目的：探討腫瘤標(biāo)志物鱗狀細(xì)胞癌抗原（SCC）和Ki67在宮頸鱗癌不同分期的表達(dá)及其關(guān)系。方法：收集新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院婦科宮頸鱗癌130例，早期宮頸鱗癌組60例（包括ⅠB1、ⅡA＜4 cm）和中-晚期宮頸鱗癌組70例（包括ⅡB、Ⅲ、ⅣA期），宮頸炎為對(duì)照組50例。采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)SCC和免疫組化法檢測(cè)Ki67。結(jié)果：宮頸鱗癌組血清SCC的含量明顯高于宮頸炎組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），中-晚期宮頸鱗癌明顯高于早期宮頸鱗癌，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。宮頸鱗癌組Ki67的表達(dá)明顯高于宮頸炎組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），中-晚期宮頸鱗癌明顯高于早期宮頸鱗癌，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。中-晚期宮頸鱗癌高表達(dá)占94.28%，早期宮頸鱗癌低表達(dá)占71.67%。結(jié)論：隨著宮頸鱗癌臨床分期進(jìn)展，SCC和Ki67的表達(dá)逐漸升高。Ki67明顯高表達(dá)提示中-晚期宮頸鱗癌可能性大，Ki67低表達(dá)提示早期宮頸鱗癌可能性大。

SCC；Ki67；宮頸鱗癌；臨床分期

【Abstract】Objective：To investigate the expression and relationship between squamous cell carcinoma associated antigen（SCC），Ki67 in differentclinical stage of cervicalsquamous cell carcinoma.M ethods：We collected in Xinjiang Uygur Autonomous Region people's hospitaldepartmentofgynaecology cervicalsquamouscellcarcinoma in 130 cases（according to FIGO clinicalstage isdivided intoearly cervicalsquamous cell carcinoma group in 60 cases（includingⅠB1、ⅡA＜4 cm）and in-advanced squamouscervical carcinoma group 70 cases（includingⅡB、Ⅲ、ⅣA）.Cervicitisas the controlgroup of50 cases.Chemical luminescencemethodwasused todetectSCCand immunohistochemicalmethod for detection of Ki67.Results：Cervicalsquamous cell carcinomagroup，theserum levelsof SCCof the contentswere significantly higher in chronic cervicitis group，the differencewas statistically significant（P＜0.05）.In advanced cervical squamous cell carcinoma was significantly higher than thatofearly cervicalsquamous cell carcinoma，the difference is statistically significant（P＜0.05）；cervicalsquamous cell carcinoma Ki67 expressionwassignificantly higher in chronic cervicitisgroup，the difference isstatistically significant（P＜0.05）.In advanced cervicalsquamous cell carcinomawassignificantly higher than thatofearly cervicalsquamous cell carcinoma，and the difference is statistically significant（P＜0.05）.In themiddle and late stageofcervicalsquamous cell carcinomawasmainly high expressionmainly accounted for94.28%，low expression ofearly cervicalsquamous cell carcinoma accounted for 71.67%.Conclusion：Ki67 and SCC in cervicalsquamouscellcarcinomawith clinicalstage，SCCand Ki67 expression gradually increased.Ki67washighlyexpressed in thehigh expression ofadvanced cervicalsquamouscellcarcinoma，Ki67 low expression ofearly cervicalsquamouscellcarcinoma is thepossibilityof large.

【Key words】SCC；Ki67；cervicalsquamous cell carcinoma；clinicalstage

宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)的惡性腫瘤之一，屬于高發(fā)疾?。?］。宮頸鱗癌的診斷因子或者標(biāo)志物鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原（squamous cell carcinoma associated antigen，SCC）被認(rèn)為是特異性較高的診斷標(biāo)志物之一。研究發(fā)現(xiàn)Ki67是一種核抗原，它與細(xì)胞的增殖息息相關(guān)，檢測(cè)Ki67的表達(dá)能夠反映出宮頸癌細(xì)胞的增殖情況。宮頸癌目前仍采用臨床分期，臨床分期一般是在治療前確定，且定好的臨床分期往往不發(fā)生變化。但臨床分期存在疑問(wèn)時(shí)，必須歸于較早分期，此時(shí)需要結(jié)合CT、MRI等檢查作為參考。本研究通過(guò)聯(lián)合檢測(cè)SCC和Ki67，觀察這兩個(gè)因子與宮頸鱗癌臨床分期的關(guān)系，為臨床醫(yī)師提供宮頸鱗癌臨床分期有效參考指標(biāo)。

1　資料與方法

1.1臨床資料收集2012年2月至2016年2月在新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院婦科住院宮頸鱗癌患者130例作為病例組，根據(jù)FIGO分期，早期宮頸癌組60例（包括ⅠB1、ⅡA＜4 cm），中-晚期宮頸癌組70例（包括ⅡB、Ⅲ、ⅣA期），選擇50例宮頸炎患者為對(duì)照組。

1.1.1納入標(biāo)準(zhǔn)。①活檢病理明確診斷宮頸鱗癌；②年齡25～75歲，平均年齡55.4歲；③有完整的病歷資料。

1.1.2剔除標(biāo)準(zhǔn)。①妊娠或哺乳期婦女；②合并其他婦科腫瘤，以及食管癌、肺癌、頭頸部癌等其他鱗狀上皮細(xì)胞源性腫瘤疾??；③宮頸腺癌、腺鱗癌等其他類(lèi)型宮頸癌；④已接受手術(shù)、化療、放療等治療干擾措施患者。

1.2方法①SCC檢測(cè)方法：取已制備的病人血清，通過(guò)美國(guó)i2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀，采用MEIA微粒子酶聯(lián)免疫分析技術(shù)檢測(cè)。結(jié)果判定：陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)為SCC＞l.5ng/ml；陰性標(biāo)準(zhǔn)為SCC＜1.5ng/ml。②Ki67檢測(cè)方法：免疫組織化學(xué)法（SP法），將病變組織固定、包埋、切片、脫蠟、脫水，檸檬酸鹽抗原修復(fù)，PBS沖洗，過(guò)氧化氫阻斷過(guò)氧化物酶，PBS沖洗，加一抗：鼠抗人Ki67單抗，4℃過(guò)夜，PBS沖洗，加二抗：羊抗鼠，PBS沖洗，DAB顯色，蘇木精復(fù)染，梯度酒精脫水，二甲苯透明，封片。陰性對(duì)照：用PBS液代替一抗，其他步驟相同。試劑盒：鼠抗人Ki67單克隆抗體、SP超敏試劑盒和DAB（均購(gòu)自福州邁新生物）。

1.3結(jié)果判定陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)為細(xì)胞核有棕黃色顆粒出現(xiàn)。計(jì)分方法（陽(yáng)性率）：200個(gè)細(xì)胞/視野，5個(gè)視野/ HP，陽(yáng)性細(xì)胞率≤25%為0分；26%～50%為1分；51%～75%為2分；＞75%為3分。染色強(qiáng)度：無(wú)著色為0分；淺棕黃色為1分；棕黃色為2分；棕褐色為3分。綜合陽(yáng)性率和染色強(qiáng)度進(jìn)行賦分：0分為（-）；1～2分為（+）；3～4分為（++）；5～6分為（+++）。低表達(dá)：（-）或（+），高表達(dá)：（++）或（+++）。

1.4數(shù)據(jù)處理采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）描述，采用單因素方差分析，各組間比較用LSD法；率的比較用卡方檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Spearman；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1SCC值在宮頸炎及宮頸鱗癌不同分期的含量

早期及中-晚宮頸鱗癌與宮頸炎組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。早期宮頸鱗癌與中-晚期宮頸鱗癌之間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1　SCC值在宮頸炎及宮頸鱗癌不同分期的含量（ng/m l,±s）

表1　SCC值在宮頸炎及宮頸鱗癌不同分期的含量（ng/m l,±s）

注：與宮頸炎比較#P＜0.05；與早期宮頸鱗癌比較*P＜0.05

類(lèi)型宮頸炎早期宮頸鱗癌中-晚期宮頸鱗癌n 50 60 70治療前SCC 0.8±0.3 1.7±1.4#16±8.4#*F 9.014 P 0.016

2.2Ki67在宮頸炎及宮頸鱗癌不同分期的表達(dá)Ki67

在早期宮頸鱗癌、中-晚期宮頸鱗癌組織陽(yáng)性表達(dá)率分別為75%（45/60）和97.14%（68/70），明顯高于正常宮頸炎組織6%（3/50），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2= 110.116，P＜0.05）。Ki67在早期宮頸鱗癌中低表達(dá)為71.67%，中-晚期宮頸鱗癌組織高表達(dá)為94.28%。見(jiàn)表2。

表2　Ki67基因產(chǎn)物在宮頸炎及宮頸鱗癌不同分期的表達(dá)［例（%）］

2.3SCC和Ki67在宮頸鱗癌中表達(dá)的相關(guān)性隨著SCC在宮頸鱗癌中值的升高，Ki67表達(dá)也增強(qiáng)，兩者呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.86，P＜0.05）。

3　討論

宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)的惡性腫瘤之一，早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷、早期治療對(duì)提高宮頸癌的生存率尤為關(guān)鍵［2］。宮頸癌根據(jù)宮頸癌浸潤(rùn)的范圍、腫瘤的大小和直徑、是否轉(zhuǎn)移以及轉(zhuǎn)移的范圍和途徑等多種因素進(jìn)行臨床分期，這對(duì)宮頸鱗癌的治療和預(yù)后都具有指導(dǎo)作用。臨床分期屬于主觀因素，存在不確定性。排除這些主觀因素就要將特異性腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)納入，這對(duì)宮頸鱗癌臨床分期有很大幫助［3］。近年來(lái)，雖對(duì)宮頸鱗癌臨床分期的標(biāo)志物有研究，但是卻報(bào)道較少。

SCC是在1977年Kato等人由宮頸鱗癌組織中分離出來(lái)的一種分子量為48000的糖蛋白。SCC雖然廣泛分布于不同器官的正常組織內(nèi)，其含量非常少，但卻參與了細(xì)胞調(diào)亡的調(diào)控。一般健康成人SCC＜1.5ng/ m l，而患有宮頸鱗癌或者其他鱗狀上皮癌的病人血清中SCC的含量增加［4］。由此認(rèn)為，SCC可能參與了腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)調(diào)控，由于腫瘤細(xì)胞這種靶基因表達(dá)和調(diào)控異常，在蛋白質(zhì)水平也造成了合成紊亂，最終使腫瘤的生長(zhǎng)繼續(xù)，導(dǎo)致臨床分期也繼續(xù)進(jìn)展。所以SCC可作為鱗狀細(xì)胞癌的一種檢測(cè)指標(biāo)，可以用來(lái)評(píng)價(jià)宮頸鱗癌的進(jìn)展程度、復(fù)發(fā)情況以及治療的效果等［5］。本研究發(fā)現(xiàn)，隨著臨床分期進(jìn)展，SCC的表達(dá)逐漸升高。Sandri等［6］研究結(jié)果顯示SCC與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況、腫瘤大小都具有較高的相關(guān)性。王金華等［7］的研究結(jié)果也證實(shí)，SCC的上升程度與臨床分期的進(jìn)展具有正相關(guān)，并且隨著腫瘤體積和范圍的增大，SCC也會(huì)上升。綜合上述結(jié)果，說(shuō)明細(xì)胞的增殖和凋亡不平衡是導(dǎo)致腫瘤發(fā)生的重要機(jī)制之一。

Ki67是一種核抗原，它與細(xì)胞的增殖情況相關(guān)，檢測(cè)Ki67的表達(dá)能夠反映出宮頸癌細(xì)胞的增殖情況。本研究發(fā)現(xiàn)，隨著臨床分期進(jìn)展，Ki67的表達(dá)逐漸升高。在早期宮頸鱗癌中低表達(dá)占71.67%，中-晚期宮頸鱗癌組織高表達(dá)占94.28%。Rosamilia C等［8］通過(guò)免疫組化檢測(cè)了Ki67在正常宮頸上皮與宮頸鱗癌的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Ki67的表達(dá)在這兩種組織中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這與本研究的結(jié)果基本一致。目前的研究同樣發(fā)現(xiàn)，Ki67在前列腺癌、乳腺癌以及口腔癌等［9］癌癥中，也可以作為預(yù)后指標(biāo)，Ki67表達(dá)過(guò)高，預(yù)后較差。Kuznetsova ME等［10］回顧性研究89名宮頸鱗癌患者腫瘤組織中Ki67的表達(dá)，指出Ki67的增殖指數(shù)對(duì)治療及治療結(jié)局有重要的預(yù)測(cè)意義。Wang S等［11］認(rèn)為Ki67增殖指數(shù)可作為疾病獨(dú)立的預(yù)后指標(biāo)。

綜上所述，本研究初步認(rèn)為SCC和Ki67在宮頸鱗癌組織中是高表達(dá)的，并探討了SCC和Ki67與宮頸鱗癌的臨床分期有密切關(guān)系，為臨床醫(yī)生確定臨床分期提供參考價(jià)值，但要最終用于臨床常規(guī)檢測(cè)，還有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

［1］Schmid MP，Kirisits C，Nesvacil N，et al.Local recurrences in cervical cancer patients in the setting of image-guided brachytherapy:a comparision of spatial dose distribution within amatched-pair analysis［J］.RadiotherOncol，2011，100（3）:468.

［2］Menczer J.Patient-tailored conservative surgical treatment of invasive uterine cervical squamous cell carcinoma［J］.Minerva Ginecol，2013，65（4）:407-415.

［3］曾亮，朱紅，鄧亞平，等.應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)篩選宮頸癌臨床分期相關(guān)蛋白［J］.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2009，9（16）:3049-3052.

［4］Byoung-Gie Kim.Squamous cell carcinoma antigen in cervical cancer and beyond［J］.JGynecolOncol，2013，24（4）:291-292.

［5］SandriMT，SalvaticiM，Mauro C，et al.Detection of squamous cell carcinoma antigen with two systems in the follow-up of patientswith cervical cancer［J］.Int JBiolMarkers，2013，28（3）:403-404.

［6］王金華，鄭秀，陳麗紅，等.血清鱗癌相關(guān)抗原、糖類(lèi)抗原125表達(dá)與宮頸癌臨床分期的相關(guān)性［J］.中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志，2015，31（15）: 1546-1548.

［7］閔玲，鐘亮星，陳琳娜，等.血清TSGF、SCC聯(lián)合檢測(cè)在宮頸癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值［J］.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2014，30（6）:898-890.

［8］奈嫚嫚，尹如鐵，謝聰，等.Rho C和Ki67在宮頸鱗癌中的表達(dá)和意義［J］.四川大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2009，40（2）:236-239.

［9］Klimowicz AC，Bose P，Nakoneshny SC，etal.BasalKi67 expressionmeasured by digital image analysis is optimal for prognostication in oral squamous cell carcinoma［J］.Eur JCancer，2012，48（14）:2166-2174.

［10］Kuznetsova ME，PozharisskiǐKM，Vinokurova VL，etal.Ki67 expression asa predictor of the effectiveness of radiotherapy and ofoutcome in locally advanced squamous cell carcinoma of the uterine cervix（immunohistochemicalstudy）［J］.VoprOnkol，2007，53（2）:175-180.

［11］王帥，馬曉艷，夏陽(yáng)，等.上皮性卵巢癌組織中Ki67和PCNA的表達(dá)及有絲分裂指數(shù)［J］.四川大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2010，41（5）:575-580.

Expression and relationship of SCC and Ki67 in different clinicalstage of cervical squamous cell carcinoma

Chen Hongxiang1,2,Sui Shuang2,Cai Ren3,Wang Lin2,Liu Jiangchao4,Gulijianati2,Wang Fen2,Shen Zehong4,Mayenur·Niyiz2.1.Xinjiang Medical University, Urumqi830054,China；2.Gynecology Department,People'sHospital ofXinjiang UygurAutonomous Region,Urumqi830001,China；3.ClinicalMedicalResearch Institute,The FirstAffiliated HospitalofXinjiang MedicalUniversity,Uramqi830054,China；4.SurgicalDepartment,Chinese People's Liberation Army 69220Hospital,Akesu 842000,ChinaCorresponding author：Mayenur·Niyiz，E-mail:mynr68@126.com

A

1004-2725（2016）09-0641-03

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)：81360317）

830054新疆烏魯木齊，新疆醫(yī)科大學(xué)（陳紅香）；830001新疆烏魯木齊，新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院婦科（陳紅香、隋霜、王琳、古麗加娜提、王芬、瑪依努爾·尼牙孜）；830054新疆烏魯木齊，新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)研究院（才仁）；842000新疆阿克蘇，中國(guó)人民解放軍69220部隊(duì)醫(yī)院外科（劉江超、沈澤虹）

瑪依努爾·尼牙孜，E-mail:mynr68@126.com