程從遠(yuǎn)　李海云

（南陽(yáng)市中心血站，河南 南陽(yáng) 473000）

D抗原遮斷引起Rh（D）定型困難的分析

程從遠(yuǎn)李海云

（南陽(yáng)市中心血站，河南 南陽(yáng) 473000）

目的正確鑒定新生兒的血型，找出新生兒溶血病原因，制定合理的治療方案。方法用直抗、游離試驗(yàn)、放散試驗(yàn)、不規(guī)則抗體篩選及抗體鑒定試驗(yàn)鑒定其Rh（D）血型。結(jié)果該患兒為B型Rh（D）陽(yáng)性，由母體IgG抗-D抗體引起新生兒溶血。結(jié)論由于抗-D抗體致敏了紅細(xì)胞而誤認(rèn)為Rh（D）血型為陰性。

抗原遮斷；Rh（D）定型；抗體鑒定

Rh（D）的鑒定是加入試劑和待檢紅細(xì)胞懸液，混合均勻，鹽水立即離心的結(jié)果。因其試劑效價(jià)高，凝集明顯，很容易判斷結(jié)果?，F(xiàn)有1例因母親有抗-D抗體產(chǎn)生而影響Rh（D）定型困難，實(shí)驗(yàn)過程如下。

1　材料與方法

1.1一般材料：KA-2200型離心機(jī)（日本久保田）、FYQ型免疫微柱孵育器（長(zhǎng)春博研）、數(shù)字顯示式恒溫水浴箱（上海一恒）、TD-3A型血型血清學(xué)用離心機(jī)（長(zhǎng)春博研）、Baso 2005-1離心機(jī)（臺(tái)灣貝索）。紅細(xì)胞試劑；IgM型抗-D血清、IgG型抗-D血清、標(biāo)準(zhǔn)抗-A、抗-B血清、抗人球蛋白、抗-IgG、抗-C3d、抗-E、抗-e、抗-C、抗-c、抗人球蛋白試劑、篩選細(xì)胞、譜細(xì)胞（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司）；Rh血型分型卡、抗人球蛋白卡（長(zhǎng)春博迅）；生理鹽水（河南華利制藥公司）；AB血漿（本實(shí)驗(yàn)室自制）。所有試劑均在有效期內(nèi)使用。血型定型法、抗體篩選與鑒定、吸收放散試驗(yàn)等按文獻(xiàn)［1-2］方法操作。

1.2方法

1.2.1直接抗人球蛋白試驗(yàn)：多特異性抗人球蛋白反應(yīng)3+，單抗-IgG3+，抗-C3d陰性，AB血漿陰性（陰性對(duì)照）。結(jié)果表明患者紅細(xì)胞上致敏的為單一IgG抗體。

1.2.2血型鑒定：氯喹放散患者紅細(xì)胞，使其放散后直接抗人球蛋白試驗(yàn)陰性，此時(shí)檢查其紅細(xì)胞血型為B RhD陰性。

1.2.3抗體篩選：首先對(duì)患者血清中進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果見表1，說明患者血清中無IgM類抗體，而有IgG類抗體。需要進(jìn)一步鑒定抗體類型。

2　血型檢測(cè)

2.1加入待檢紅細(xì)胞懸液50 μL，標(biāo)準(zhǔn)血清50 μL，抗-D血清50 μL，做鹽水法，結(jié)果見表1。

表1　新生兒正定型及抗-D檢測(cè)

依據(jù)上述結(jié)果初步判斷：該患兒血型為“B”型，Rh（D）陰性。嬰兒尚未產(chǎn)生自己的抗體或有從母親被動(dòng)獲得的抗體，故對(duì)新生兒通常不做血型反定型。

2.2抗-D鑒定：加入抗-D試劑各50 μL，待檢紅細(xì)胞懸液50 μL，做鹽水法和間接抗人球法，結(jié)果見表2。

表2　抗-D鑒定

依據(jù)上述結(jié)果判斷，患兒的Rh（D）血型為陽(yáng)性。

2.3不規(guī)則抗體篩選：加入待檢血清100 μL，篩選細(xì)胞50 μL，做鹽水法和間接抗人球法，結(jié)果見表3。

表3　不規(guī)則抗體篩選

查篩選細(xì)胞反應(yīng)格局表，初步判斷為抗-D抗體，但患兒為Rh （D）陰性，做Rh分型，結(jié)果為：CCee（因未采集母親血樣，故未做母親的Rh分型）。

2.4直抗檢測(cè)：加入直抗試劑50 μL，待檢紅細(xì)胞懸液50 μL，做鹽水法，結(jié)果見表4。

表4　直抗檢測(cè)

依據(jù)上述結(jié)果初步判斷：患兒紅細(xì)胞上致敏了不規(guī)則抗體，可能為Rh系統(tǒng)的抗體。

2.5抗體鑒定：加待檢紅細(xì)胞1 mL，生理鹽水1 mL，乙醚2 mL，離心3400 rpm 2 min，充分混合均勻。離心3400 rpm 5 min，取最下層的放散液，平均分配至11支試管，各加入譜細(xì)胞50 μL，做間接抗人球法，查譜細(xì)胞反應(yīng)格局表，該不規(guī)則抗體為抗-D抗體。結(jié)果見表5。

3　討 論

經(jīng)上述證實(shí)該患兒為B型Rh（D）陽(yáng)性，由母體IgG抗-D抗體引起新生兒溶血。

表5　抗體鑒定

上述試驗(yàn)中Rh（D）檢測(cè)的陰性為假陰性，是由于母體的抗-D抗體致敏了患兒紅細(xì)胞所致，且抗-D抗體相對(duì)過剩，患兒紅細(xì)胞表面的抗原位點(diǎn)全部被抗體占據(jù)，故Rh（D）檢測(cè)為陰性。孕婦有輸血史或者妊娠史，都可導(dǎo)致孕婦產(chǎn)生高效價(jià)的抗-D抗體，高效價(jià)抗-D抗體進(jìn)入胎兒血液循環(huán)，講胎兒紅細(xì)胞上的D抗原完全封閉，此時(shí)患兒紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗(yàn)程強(qiáng)陽(yáng)性，此時(shí)鹽水法抗-D結(jié)果會(huì)得到假陰性，這種現(xiàn)象成為遮斷現(xiàn)象。通過乙醚放散及譜細(xì)胞鑒定才最終確認(rèn)患兒為Rh（D）陽(yáng)性。該患兒Rh定型情況符合遮斷現(xiàn)象引起的假陰性［4］。正確鑒定新生兒的血型，找出新生兒溶血病真正原因，才能制定合理的治療方案。我們廣大的醫(yī)學(xué)工作者遇到此類問題時(shí)，一定要細(xì)心，冷靜，選擇合理的試驗(yàn)方法，對(duì)照試驗(yàn)，務(wù)必使我們得出真是的結(jié)論，為臨床提供權(quán)威的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，保障每一名就醫(yī)患者的生命安全。

［1］丁蘇鄂.常用血清學(xué)技術(shù)［M］//劉達(dá)莊.免疫血液學(xué).上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2002：194-220.

［2］中華人民共和國(guó)醫(yī)政司.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［M］.3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：246-270.

［3］劉達(dá)莊.免疫血液學(xué)［M］.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2002：136.

［4］李延孝，閆東河，冀寶軍.孕婦高效價(jià)抗-D遮斷D抗原致新生兒Rh定型假陰性1例［J］.中國(guó)輸血雜志，2005，18（3）：245-246.

D Antigen Interrupt Cause Difficulties Rh (D) to Finalize the Design Analysis

CHENG Cong-yuan， LI Hai-yun
（Nanyang Blood Center， Nanyang 473000， China）

ObjectiveTo correct identification of neonatal blood types， and identify the reasons for newborns hemolytic disease， formulate reasonable treatment scheme. MethodsUsing direct resistance， free trial， tossing in the test， irregular antibody screening antibody evaluation test and evaluation the Rh blood type （D）. ResultsThe children with positive for type B Rh （D）， caused by anti-D matrix IgG antibody neonatal hemolysis. ConclusionDue to the anti-D sensitization of red blood cells and antibodies for Rh negative blood type （D）.

Interrupt； Rh antigen （D）； Antibody identification

R457.1+1

B

1671-8194（2016）24-0036-02