張敏

南京鼓樓醫(yī)院集團宿遷市人民醫(yī)院有限公司病理科，江蘇宿遷 223800

體液細胞塊免疫組化在病理診斷中探討

張敏

南京鼓樓醫(yī)院集團宿遷市人民醫(yī)院有限公司病理科，江蘇宿遷 223800

目的 探討體液細胞蠟塊免疫組化在臨床病理中診斷中應用。 方法 回顧性分析2015年1—12月90例體液細胞涂片與細胞塊免疫組化對照，觀察和分析其細胞塊免疫組化在病理診斷中可靠性分析。 結果 細胞學病理診斷結果，90例細胞體液標本中，除4例涂片僅見幾個腫瘤細胞，細胞塊陰性，另86例標本涂片與細胞塊檢查結果完全符合（95.6%），其中51例良性，涂片及細胞塊結果為間皮增生或炎性病變，未見腫瘤細胞。病理細胞學涂片診斷為腫瘤細胞陽性39例，腺癌為11例，鱗癌為9例，小細胞癌為5例，淋巴瘤7例，難以定性腫瘤為4例，其他腫瘤為3例。用細胞塊、免疫組化聯(lián)合診斷難以定性腫瘤，2例為腺癌，1例為鱗癌，1例為間皮瘤。另31例腫瘤細胞陽性細胞塊免疫組化與細胞涂片結果相符合。其他類型腫瘤中，2例為神經內分泌腫瘤，1例為組織細胞瘤。體液細胞塊、免疫組化聯(lián)合應用診斷率高于單一細胞學涂片。 結論 細胞涂片、細胞塊免疫組化聯(lián)合應用具有操作方便、診斷率高特點。

體液細胞塊；免疫組化；病理診斷

體液細胞學診斷在胸水、腹水、小便、腫塊穿刺液等標本經離心直接涂片固定、染色。單靠細胞學涂片存在漏診情況，而且鑒別診斷率低[1-2]；在各種體液脫落細胞送檢標本經過處理做成細胞塊，在細胞塊的基礎上進行免疫組化檢測，此方法可大大提高體液細胞病變病理診斷準確性[3-5]。回顧性分析2015年1—12月90例體液標本，細胞塊及免疫組化對于腫瘤細胞的來源和腫瘤細胞類型、感染性疾病的診斷，尤其是惡性腫瘤的定性方面起到重大的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該研究選取該院門診與住院患者中各種體液脫落細胞送檢標本90例，年齡18～81歲，平均年齡為50歲，男58例，女32例。胸水60例，腹水18例，小便8例，腫塊穿刺液4例。

1.2 試劑及儀器

10%中性甲醛（pH7.4）、無水乙醇(H11022051)、伊紅(H31020840)等試劑，離心機，冷藏冰箱，微波爐等。

1.3 細胞塊制作方法

將送檢體液放在一次性塑料試管中離心后傾其上清液，再用一次性吸管吸干沉淀物上少許殘留液體，用剪刀剪去一次性試管空管部分，留取一次性塑料管與沉淀物粘連部分一起用胃鏡紙包裹后置于10%中性甲醛中固定30 min，然后放在常規(guī)組織片中進行脫水、浸蠟、包埋、制成細胞塊后，常規(guī)切片、HE染色。

1.4 免疫組化

在常規(guī)細胞涂片、細胞塊切片基礎上難以作出病理診斷情況下，將做成的細胞塊，并用免疫組化方法對體液細胞學進一步病理診斷。疑為鱗癌、腺癌，選用抗體為CKpna、TTF-1、P40、CK7、CK20、CEA、EMA、CR、KI67等抗體，疑為小細胞癌，選用抗體CGA、SYN等抗體，免疫組化均采用陰陽性對照。

1.5 統(tǒng)計方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計學軟件進行數據分析，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 細胞學病理診斷結果

90例細胞體液標本中，除4例涂片僅見幾個腫瘤細胞，細胞塊性，另86例標本與細胞塊檢查結果完全符合（95.6%），其中51例良性，涂片及細胞塊結果為間皮增生或炎性病變，未見腫瘤細胞。病理細胞學涂片診斷為腫瘤細胞陽性39例（見表1、圖1）。用細胞涂片、細胞塊免疫組化聯(lián)合診斷腫瘤39例，其中4例腫瘤細胞少，細胞塊陰性。腺癌免疫組化抗體選用 CKpan、TTF1、CEA、EMA、CK7、LCK、KI67等。難以定性腫瘤其中2例TTF1+、LCK+、EMA+、CK7+診斷為腺癌；鱗癌免疫組化選用抗體CKpan、TTF1、ESA、P40、HCK、KI67等，難以定性腫瘤其中 1例CKpan+、P40+、K167+診斷為鱗癌；小細胞癌選用抗體CgA、Syn、TTF1、SCLC、Leu7等，難以定性腫瘤1例CR+、CK5/6+,CK+,診斷為間皮細胞瘤；免疫組化LCA+、CD20+、 CD30+等診斷為淋巴瘤；其他腫瘤中另2例Syn+、CK+為神經內分泌腫瘤，另1例AAT+、vim+為組織細胞瘤。腫瘤細胞涂片陽性中細胞塊免疫組化與細胞涂片結果完全符合31例（見圖2、表2），細胞塊性的4例中，2例為腺癌，2例為鱗癌。

表1 39例細胞學涂片陽性結果情況（n）

圖1 左圖為細胞塊HE染色×100倍；右圖為細胞涂片HE染色×100倍

圖2 左圖為細胞塊免疫組化染色×100倍；右圖為細胞塊免疫組化染色×100倍

3 討論

根據體液細胞學病理檢測資料統(tǒng)計，在90例體液細胞病理診斷中，細胞塊及免疫組化檢出率約95.6%（86/ 90），與魏謹等[6]報道胸腔積液細胞塊組檢出率83.3%（25/ 30）大致相符。

表2 35例腫瘤患者細胞塊及細胞免疫組化結果

常規(guī)的細胞學涂片檢查檢測體液是診斷的可靠方法，具有重要的臨床價值，其操作簡便，損傷小，但是由于涂片的細胞量過少、變形、或混有其他的紅細胞、炎性物質、多種粘液，或細胞涂片不均勻，則會出現假陰性或假陽性的結果，并且炎性增生、間皮細胞增生及腺癌細胞難以鑒別。單一的細胞學涂片免疫組化準確性低，可重復性差[7]。體液細胞學采用細胞塊、免疫組化聯(lián)合應用，具有以下應用的優(yōu)點：①避免常規(guī)涂片厚薄不均致細胞定位不清，而出現假陰性或假陽性，給臨床診治帶來困難。②細胞塊能根據病理診斷需要連續(xù)切片，還能永久保留標本，基于細胞病理診斷特殊性，可用免疫組化對各種病變進行進一步診斷、分型，還可以判斷轉移腫瘤組織來源。③細胞塊最大優(yōu)點可以連續(xù)切片，在此基礎上可以做多種抗體染色，以滿足臨床病理診斷需要，還可以用于分子技術研究及治療，從而彌補細胞涂片不足[8]。④細胞塊經過特殊處理后，能夠提供更多的細胞數量和細胞完整的結構及形態(tài)學特征，可以多次切片的同時可以進行免疫組化多種抗體染色的檢查[9-10]。⑤體液細胞塊、免疫組化聯(lián)合應用能夠保證病理診斷的準確性，同時也能減輕病理醫(yī)生診斷風險，在細胞學診斷中具有較高的應用價值。

總之，將各種體液標本制作細胞塊并聯(lián)合免疫組化進行病理診斷陽性率高、對于鑒別組織來源及細胞的良惡性具有良好的臨床應用價值，對于提高細胞學的診斷水平具有重大的作用。

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Study on the Pathological Diagnosis of Humoral Cell Block by Immunohistochemistry

ZHANG Min
Department of Pathology,Gulou Hospital Group Suqian People's Hospital,of Nanjing,Suqian,Jiangsu Province,223800 China

Objective To explore the humoral and cellular immunohistochemistry in paraffin blocks in clinical pathological diagnosis. Methods Retrospective analysis of 90 cases of humoral cell smear and cell block from December to January 2015 were compared,and the analysis of the reliability of cell block immunohistochemistry in pathological diagnosis was observed and analyzed.Results Diagnostic results of cytological disease,90 cases of cells specimens,except 4 cases of smear was observed in several tumor cells,cell block negative,the other 86 cases were smear and cell block examination results accord with the (95.6%),including 51 cases of benign,smear and cell block results for mesothelial hyperplasia or inflammatory lesions,no tumor cells.The pathological diagnosis of tumor cells smear，the cell was positive in 39 cases,adenocarcinoma in 11 cases,9 cases of squamous cell carcinoma,small cell carcinoma in 5 cases,7 cases of lymphoma,difficult to characterize tumors of 4 cases,3 cases of other tumors.Using cell block,immunohistochemistry diagnosis difficult to characterize tumors,2 cases of adenocarcinoma,1 cases of squamous cell carcinoma.1 cases of mesothelioma.Another 31 cases of positive cells in tumor cell block by immunohistochemistry and cell smear results.Other types of tumors,2 cases of neuroendocrine tumors,1 cases of humoral and cellular histiocytoma.Block,immunohistochemistry combined diagnosis rate is higher than the single smear.Conclusion Smear,cell block immunohistochemistry combined with convenient operation, The diagnosis rate is high.

Body fluid cell block；Immuno histochemistry；Pathologic diagnosis

R36

A doi 10.11966/j.issn.2095-994X.2016.02.04.11

2016-10-17；

2016-11-25

張敏（1964.5-），女，江蘇沭陽人，本科，主治醫(yī)師，研究方向：細胞學診斷。