陳睿彥，曾波，李艷

(云南省昭通市食品藥品檢驗所，云南 昭通 657000)

·中藥工業(yè)·

頂空進(jìn)樣-氣相色譜法測定云南白藥酊中甲醇量

陳睿彥*，曾波，李艷

(云南省昭通市食品藥品檢驗所，云南 昭通 657000)

目的：建立以頂空進(jìn)樣-氣相色譜法測定云南白藥酊中甲醇量的方法。方法：色譜柱為 SGE PEG-20M毛細(xì)管柱(30 m×250 μm×0.25 μm)；柱溫：采用程序升溫，檢測器為FID(溫度為250 ℃)；載氣為氮氣；分流比為2∶1。結(jié)果：甲醇在0.001%～0.05%的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.999 9)；回收率為97.22%，RSD為2.74%，最低檢測限為0.000 2%。結(jié)論：本方法簡便、準(zhǔn)確，適用于云南白藥酊中甲醇量的測定。

頂空進(jìn)樣；氣相色譜法；云南白藥酊；甲醇量

云南白藥由云南民間名醫(yī)曲煥章先生于1902年創(chuàng)制，問世百年來，以其神奇的療效被世人譽(yù)之為“傷科圣藥” “中華瑰寶”。云南白藥酊誕生于1983年，有著“關(guān)節(jié)護(hù)理專家”的美稱，對于跌打損傷、風(fēng)濕麻木、筋骨及關(guān)節(jié)疼痛、肌肉酸痛及凍傷有良好的藥效，內(nèi)外兼顧，標(biāo)本同治[1]。云南白藥酊在制備過程中用到大量的乙醇，這使得產(chǎn)品中或多或少的會殘留少量甲醇。本文根據(jù)《中華人民共和國藥典》2010年版一部收載的甲醇量檢查法[2]，對云南白藥酊中甲醇量[3-5]進(jìn)行測定。

1 儀器與試藥

Agilent7890A氣相色譜儀、Agilent7694E頂空進(jìn)樣器、Agilent OpenLAB CDS ChenStation Edition氣相工作站。

云南白藥酊(美國Fisher Scientific公司，批號分別為ZKB1308，ZGB1403，ZGA1502，ZAA1506)；甲醇為色譜純；實驗用水為哇哈哈純凈水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：SGE PEG-20M毛細(xì)管柱(30 m×250 μm×0.25 μm)；柱溫：程序升溫，初始40 ℃,保持5 min，然后以10 ℃·min-1的速率升到200 ℃，保持5 min；進(jìn)樣口溫度150 ℃；FID檢測器，溫度為250 ℃；分流進(jìn)樣，分流比為2∶1；進(jìn)樣量為1 μL；載氣為氮氣；平衡溫度為85 ℃；傳輸管溫度為110 ℃；進(jìn)樣環(huán)溫度為105 ℃；平衡時間為15 min。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備 精密量取甲醇1 mL，置于100 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取10 mL置于100 mL容量瓶中，加水定容并搖勻，即得對照品儲備液。精密量取1、5、10、25、50 mL對照品儲備液，分別置100 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，精密量取3mL置頂空進(jìn)樣瓶中，密封，作為0.001%、0.005%、0.01%、0.025%、0.05%的系列對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 精密量取3 mL供試品置10 mL頂空進(jìn)樣瓶中，密封，作為供試品溶液。

2.3 系統(tǒng)適用性試驗

取空白溶劑、對照品溶液和樣品溶液,按2.1色譜條件分析，色譜圖見圖1。

注：A.空白溶劑；B.對照品溶液；C.樣品溶液。圖1 空白溶劑、對照品溶液及樣品溶液的GC色譜圖

結(jié)果表明，甲醇峰與其他色譜峰完全分離，分離度大于1.5，甲醇峰的理論塔板數(shù)大于90 000，溶劑不干擾樣品中甲醇量的測定。

2.4 線性試驗

分別取系列對照品溶液，按2.1色譜條件進(jìn)行測定，以峰面積為縱坐標(biāo)(Y)，濃度為橫坐標(biāo)(X)，進(jìn)行線性回歸，結(jié)果表明：甲醇在0.001%～0.05%的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好?；貧w方程為Y=18 788X+4.353 5，r=0.999 9(n=5)。

2.5 回收率試驗

精密量取供試品(批號：ZKB1308)5 mL 9份，分別置10 mL容量瓶中，分別加入不同量的對照品溶液(0.01%)，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取3 mL置頂空進(jìn)樣瓶中，密封，即得加樣回收率測定試樣，按上述色譜條件進(jìn)行測定，計算回收率[6]。結(jié)果見表1。

表1回收率試驗結(jié)果(n=9)

原有(%)添加量(%)測得量(%)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)00006200010000160980000006200010000156940095662180000620001000015795000000620001200018199170000620001200018510250100002210000620001200018098330000620001500020696000000620001500020897339600139000062000150002049467

2.6 精密度試驗

分別取濃度為0.05%的對照品溶液3 mL置于6個不同的頂空進(jìn)樣瓶中，密封，按上述色譜條件進(jìn)行測定，得峰面積的RSD為2.7%，符合《中華人民共和國藥典》2010年版二部規(guī)定的殘留溶劑外標(biāo)法精密度測定要求(RSD≤10%)。

2.7 最低檢出限試驗

逐步稀釋對照品溶液，按上述色譜條件進(jìn)行測定，以信噪比為3∶1時注入儀器的量來確定檢出限[7]。測得檢出限為0.000 2%。

2.8 穩(wěn)定性試驗

取同一供試品溶液，分別在0、1、2、4、6、8、16 h時進(jìn)行測定，記錄峰面積。結(jié)果RSD為0.61%，說明供試品溶液在16 h內(nèi)穩(wěn)定[8]。

2.9 重復(fù)性性試驗

取同一批號的供試品溶液6份，按供試品溶液制備方法制備溶液并測定甲醇?xì)埩袅?。結(jié)果供試品的甲醇量為0.001 1%，RSD為1.77%。

2.10 樣品含量測定

精密量取供試品3 mL，置10 mL頂空進(jìn)樣瓶中，密封，按上述色譜條件進(jìn)樣測定。每個批次取3份樣品，按峰面積計算各樣品甲醇量，見表2。

結(jié)果表明，供試品的甲醇量符合《中華人民共和國藥典》2010年版一部要求。

表2 樣品中甲醇量測定結(jié)果

3 討論

在《中華人民共和國藥典》2010版一部附錄中，對于酒劑或酊劑中甲醇含量的檢測有兩種方法，分別為毛細(xì)管柱法、填充柱法。為了使所用的方法準(zhǔn)確可靠，在確定使用何種方法之前，對兩種方法都進(jìn)行了考查。結(jié)果表明，填充柱法有諸多缺陷。而對于毛細(xì)管柱法，其分離效果較好、柱效高，故本實驗采取毛細(xì)管柱法。

[1] 張立群，閆俊嶺，張信岳，等.云南白藥酊口服加外用的抗炎作用研究[J].云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2012，04：29-33.

[2] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

[3] 陳建琴.云南白藥酊甲醇量測定的不確定度評估[J].中國藥師，2013，16(09)：1435-1437.

[4] 劉冬.頂空氣相色譜法用于藥物中殘留溶劑檢測的研究[D].北京：北京中醫(yī)藥大學(xué)，2007.

[5] 房方，伍乃英，李祥，等.頂空氣相色譜法測定藿香正氣水中的甲醇[J].中藥新藥與臨床藥理，2009，20(04)：351-353.

[6] 李楊，黃德友，李連杰，等.頂空氣相色譜法測定苯妥英鈉中有機(jī)溶劑殘留量[J].中國藥師，2014，17(6)：1062-1063.

[7] 中國標(biāo)準(zhǔn)化委員會.食品衛(wèi)生檢驗方法理化部分：GB/T 5009.1-2003[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2003.

[8] 肖順經(jīng)，曾慶艷，倪兆武，等.氣相色譜法測定苯酒劑及蒸餾酒中乙醇量[J].中國藥業(yè)，2010，19(18)：40.

(2015-11-17)

DeterminationofMethanolinYunnanBaiyaoTincturebyHeadspaceSamplingGC

Chen Ruiyan*，Zeng Bo，Li Yan

(ZhaotongInstituteforFoodandDrugControl，Zhaotong657000,China)

Objective：To establish a Headspace Sampling GC method for the determination of methanol in Yunnan Baiyao Tincture.Methods：An SGE PEG-20M capillary column(30 m×250 μm×0.25 μm)was used for the determination with temperature programming，F(xiàn)ID detector temperature was 250 ℃ with nitrogen as carrier gas，and the split ratio was 2∶1.Results：The linear range of the method in methanol was 0.001%～0.05% (r=0.999 9).The recovery rate was 97.22%，and RSD was 2.74%，and the detection limit was 0.000 2%.Conclusion：The method was simple，accurate，and suitable for the determination of methanol in Yunnan Baiyao Tincture.

Headspace Sampling；GC；Yunnan Baiyao Tincture；methanol

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.10.023

*

陳睿彥，主管藥師，研究方向：食品藥品檢驗；Tel:(0870)3156097，E-mail：343475513@qq.com