茍庚午，蔣　明，文　華，吳　凡，劉　偉，田　娟

(1.上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院，上?！?01306；2.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)部淡水生物多樣性保護(hù)與利用重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室，武漢　430223)

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飼料中添加L-肉堿對(duì)吉富羅非魚生長(zhǎng)、肝臟脂肪代謝及抗氧化能力的影響

茍庚午1,2，蔣明2，文華2，吳凡2，劉偉2，田娟2

(1.上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院，上海201306；2.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)部淡水生物多樣性保護(hù)與利用重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室，武漢430223)

分別在3組等氮等能的吉富羅非魚(GIFT,Oreochromisniloticus)飼料中添加不同水平的L-肉堿[0(對(duì)照組)、150和300 mg/kg]，試驗(yàn)選用初始體重為(8.21±0.33) g的幼魚投喂9周，探討L-肉堿對(duì)吉富羅非魚生長(zhǎng)、體成分、血清生化指標(biāo)、肝臟脂肪代謝酶活性和抗氧化能力的影響。結(jié)果表明：添加150或300 mg/kg L-肉堿顯著提高了羅非魚增重率(WGR)和特定生長(zhǎng)率(SGR)，顯著降低了實(shí)驗(yàn)魚肝體比(HSI)和臟體比(VSI)；添加150 mg/kg L-肉堿組WGR和SGR最高，HSI和VSI最低。添加150 mg/kg L-肉堿顯著提高了魚體肥滿度(CF)。飼料系數(shù)(FCR)和存活率(SR)在對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組間無顯著差異。添加150或300 mg/kg L-肉堿顯著提高了魚體肝臟中粗蛋白含量，添加150 mg/kg L-肉堿顯著降低了肝臟粗脂肪含量。添加150或300 mg/kg L-肉堿時(shí)，血清甘油三酯(TG)含量顯著降低，肝臟脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)、總酯酶(LPL)和脂肪酶(LPS)活性顯著上升，肝臟過氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性顯著增加，肝臟丙二醛(MDA)含量顯著下降。添加300 mg/kg L-肉堿顯著提高了魚體肝臟超氧化物歧化酶(SOD)活性和溶菌酶(LZM)活性。綜上，飼料中添加適量L-肉堿對(duì)提高吉富羅非魚生長(zhǎng)性能，促進(jìn)其脂肪代謝和提高魚體抗氧化能力有良好效果。基于L-肉堿對(duì)羅非魚增重率和特定生長(zhǎng)率的影響，推薦L-肉堿在吉富羅非魚飼料中的添加量為150 mg/kg。

吉富羅非魚(GIFT,Oreochromisniloticus)；L-肉堿；生長(zhǎng)；脂肪代謝；抗氧化

1905年兩位俄國科學(xué)(Gulewitsch和Krimberg)從肉浸汁中發(fā)現(xiàn)肉堿(Carnitine)?；瘜W(xué)名稱為β-羥基-γ-三甲基氨基丁酸，分為L(zhǎng)-型和D-型，是一類非蛋白氨基酸，其中只有L-肉堿(L-Carnitine)具有生理活性，常稱之為維生素BT[1]。L-肉堿廣泛分布于自然界，是動(dòng)物體內(nèi)脂肪代謝不可或缺的物質(zhì)，其主要作用是攜帶長(zhǎng)鏈脂肪酸的脂?；鶊F(tuán)通過線粒體內(nèi)膜，進(jìn)而促進(jìn)脂肪酸β-氧化釋放能量[2-3]。大部分動(dòng)物能合成肉堿，魚類本身也能在肝臟中合成肉堿，隨著魚類高密度集約化養(yǎng)殖模式的發(fā)展和顆粒配合飼料的應(yīng)用，魚體內(nèi)合成肉堿的速度不能滿足魚類快速生長(zhǎng)的需求，可能會(huì)造成魚體脂肪代謝受阻，影響魚類攝食，存活率降低。據(jù)報(bào)道幼齡動(dòng)物合成肉堿的能力低于成年動(dòng)物，所以幼齡動(dòng)物更容易缺乏肉堿[4-5]。

國內(nèi)外已有研究報(bào)道，飼料中添加外源L-肉堿提高了奧尼羅非魚(Oreochromisniloticus♀×Oreochromisaureus♂)[6-7]、虹鱒(Oncorhynchusmykiss)[8]、草魚(Ctenopharyngodonidellus)[9]、銀鱸(Bidyanusbidyanus)[10]的生長(zhǎng)性能和飼料利用率，提高了奧尼羅非魚[6-7]和銀鱸[10]的蛋白利用率，使草魚[9]和銀鱸[10]全魚的脂肪含量和腹脂率下降。同時(shí)Twibell等[11]研究發(fā)現(xiàn)飼料中添加低濃度L-肉堿對(duì)雜交條紋鱸(Moronesaxatilis♂×M.chrysops♀)的增重率、攝食量和體組成沒有顯著影響。杜震宇等(2002)[12]報(bào)道了L-肉堿對(duì)羅非魚生長(zhǎng)、體成分無顯著影響，但能降低肝脂沉積。

吉富羅非魚(GIFT，Oreochromisniloticus)是我國高密度集約化養(yǎng)殖中重要的養(yǎng)殖對(duì)象之一。當(dāng)前由于羅非魚市場(chǎng)價(jià)格較低，其使用的飼料中的廉價(jià)低質(zhì)飼料原料較多，而長(zhǎng)期投喂低質(zhì)飼料會(huì)導(dǎo)致羅非魚肝臟代謝負(fù)荷大，出現(xiàn)代謝紊亂，肝臟脂肪異常沉積，抗氧化和抗應(yīng)激能力差，容易死亡等問題。L-肉堿作為長(zhǎng)鏈脂肪酸通過線粒體內(nèi)膜的轉(zhuǎn)運(yùn)載體，促進(jìn)長(zhǎng)鏈脂肪酸氧化供能，同時(shí)對(duì)短鏈脂肪酸的氧化起輔助作用；L-肉堿可以防止鐵螯合物形成，可以作為次級(jí)抗氧化劑捕捉體內(nèi)自由基，維護(hù)機(jī)體健康。肉堿對(duì)養(yǎng)殖魚類的營養(yǎng)作用報(bào)道較多，在奧尼羅非魚上也有相應(yīng)報(bào)道，但研究結(jié)果顯示肉堿在不同試驗(yàn)條件下的作用不同。鑒于上述問題，本研究選用吉富羅非魚為研究對(duì)象，研究和探討L-肉堿對(duì)吉富羅非魚生長(zhǎng)、體組成、血清生化指標(biāo)、肝臟脂肪代謝酶活性和抗氧化能力的影響，旨在為L(zhǎng)-肉堿在生產(chǎn)實(shí)際中的應(yīng)用效果提供一定的理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)飼料

以玉米蛋白粉、豆粕、棉粕和菜粕為蛋白源，混合油脂(玉米油、大豆油，質(zhì)量比為1∶1)為脂肪源，面粉為糖源配制成3組飼料，其基礎(chǔ)飼料配方和營養(yǎng)成分見表1。實(shí)驗(yàn)飼料中L-肉堿的添加水平為0(對(duì)照組)、150、300 mg/kg(L-肉堿添加水平的增減用微晶纖維素來調(diào)平)。飼料原料粉碎過60目篩，稱重后混勻，少量的成分采用逐級(jí)擴(kuò)大法混合，用飼料機(jī)制成直徑為2 mm，長(zhǎng)約3 mm的圓柱形顆粒，自然風(fēng)干后，選取顆粒大小適宜的飼料用膠袋密封，置于冰柜中冷藏備用。

1.2實(shí)驗(yàn)魚及日常管理

實(shí)驗(yàn)用魚來源于廣西羅非魚國家級(jí)育種實(shí)驗(yàn)場(chǎng)。正式實(shí)驗(yàn)前挑選健康活潑、規(guī)格一致的吉富羅非魚暫養(yǎng)于長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)養(yǎng)殖桶(500 L)中。用對(duì)照組飼料馴化2周后，挑選規(guī)格均勻的吉富羅非魚[平均初始體質(zhì)量為(8.21±0.33) g]隨機(jī)投放到9個(gè)養(yǎng)殖桶中，每養(yǎng)殖桶放養(yǎng)40尾，隨機(jī)分為3組，每組3個(gè)重復(fù)，分別投喂3組實(shí)驗(yàn)飼料，每天投喂3次(9:00，13:00，17:00)，表觀飽食投喂，每天早上9:00反沖1次，清除桶內(nèi)糞便并加注約20%新水。每3周稱取一次魚體質(zhì)量，每天記錄水溫、攝食情況和實(shí)驗(yàn)魚死亡情況。飼養(yǎng)期間水溫為24～30 ℃，溶解氧>5 mg/L，pH：6.5～7.0，總氨氮<0.2 mg/L，亞硝酸鹽<0.05 mg/L，自然光照周期，養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)持續(xù)9周。

表1　基礎(chǔ)飼料的原料組成及營養(yǎng)成分Tab.1　Ingredients and proximate chemical composition of the basic experimental diet

注：1)維生素預(yù)混料可為每千克飼料提供：VA 5 000 IU，VD32 000 IU，VE 60 mg，VB15 mg，VB220 mg，VB610 mg，VC 120 mg，VK35 mg，肌醇400 mg，煙酸120 mg，泛酸鈣10 mg，葉酸1 mg，生物素0.1 mg。

2)礦物質(zhì)預(yù)混料可為每千克飼料提供：Ca(H2PO4)226 000 mg，Ca(CH3CHOHCOO)26 540 mg，F(xiàn)eSO442.5 mg，MgSO41 340 mg，NaH2PO41 744 mg，NaCl 870 mg，AlCl33 mg，KIO32.5 mg，KCl 1 500 mg，CuCl22 mg，MnSO416 mg，CoCl220 mg，ZnSO460 mg。

1.3樣品采集

養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)開始前，實(shí)驗(yàn)魚均饑餓24 h，隨機(jī)選取10尾魚，使用MS-222(100 mg/L)將樣品魚麻醉后用于初始體成分分析。養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，將魚體饑餓24 h，以桶為單位計(jì)數(shù)并稱重。每桶隨機(jī)取3尾樣品魚測(cè)定全魚常規(guī)營養(yǎng)成分。另外取3尾樣品魚用于測(cè)定生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)和組織常規(guī)營養(yǎng)成分、肝臟脂肪代謝酶和抗氧化酶活性。具體操作如下：先測(cè)量體長(zhǎng)體重；再從尾部靜脈采血，全血在4 ℃靜置4 h后，以3000 r/min離心10 min，制成血清；然后解剖取出內(nèi)臟并稱重，再分離出肝臟稱重后裝袋保存；最后取肌肉(第一根背鰭至最后一根背鰭之間，側(cè)線以上白肌)。將所有樣品存放在-80 ℃冰箱備用。

1.4指標(biāo)測(cè)定

1.4.1生長(zhǎng)性能指標(biāo)測(cè)定

根據(jù)以下公式，計(jì)算增重率、特定生長(zhǎng)率、飼料系數(shù)、成活率、肥滿度、肝體比和臟體比。

增重率(WGR)=(Wt-W0)/W0×100%

特定生長(zhǎng)率(SGR)=(LnWt-LnW0)/t×100%

飼料系數(shù)(FCR)=Wf/(Wt-W0)

成活率(SR)=Nt/N0×100%

肥滿度(CF)=Wt(g)/[L(cm)]3×100

肝體比(HSI)=Wh(g)/W(g)×100%

臟體比(VSI)=Wv(g)/W(g)×100%

式中：Wt代表魚體末質(zhì)量(g)，W0代表魚體初始重量(g)，t代表實(shí)驗(yàn)天數(shù)，Wf代表投喂飼料總質(zhì)量(g)，L代表魚體體長(zhǎng)(cm)，W代表魚體質(zhì)量(g)，Wh代表魚體肝臟質(zhì)量(g)，Wv代表魚體內(nèi)臟質(zhì)量(g)。

1.4.2常規(guī)營養(yǎng)成分測(cè)定

飼料水分采用105 ℃恒溫干燥失重法測(cè)定(GB/T 5009.3)；肌肉、肝臟和全魚水分含量采用冷凍干燥法測(cè)定，即使用CHRIST型冷凍干燥機(jī)冷凍干燥48 h；粗蛋白采用凱氏定氮法(GB/T 5009.5)測(cè)定；粗脂肪采用索氏抽提法(GB/T 5009.6)測(cè)定；粗灰分采用馬福爐550 ℃灼燒法稱重法(GB/T 5009.4)測(cè)定。

1.4.3血清生化指標(biāo)測(cè)定

總膽固醇(TCHO)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、總蛋白(TP)含量及谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性由Sysmex全自動(dòng)生化分析儀(CHEMIX-800)測(cè)定，所用試劑均購自Sysmex公司。

1.4.4肝臟脂肪代謝酶和抗氧化酶測(cè)定

脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)、脂肪酶(LPS)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶(LZM)活性和丙二醛(MDA)含量均采用南京建成生物技術(shù)研究所測(cè)試盒測(cè)定。

1.5數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)結(jié)果均采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行單因素One-Way ANOVA方差分析和Duncan′s多重比較法對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的差異顯著性進(jìn)行處理分析，以P<0.05為顯著性水平。

2　結(jié)果

2.1飼料中添加L-肉堿對(duì)吉富羅非魚幼魚生長(zhǎng)性能和飼料利用的影響

由表2可知，飼料中添加L-肉堿顯著提高了羅非魚FBW、WGR和SGR，均在150 mg/kg實(shí)驗(yàn)組最高。FCR和SR在對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組間無顯著性差異，但150 mg/kg實(shí)驗(yàn)組FCR有降低趨勢(shì)。飼料中添加L-肉堿顯著降低了羅非魚HSI和VSI，150 mg/kg實(shí)驗(yàn)組魚體CF顯著高于對(duì)照組。綜合各生長(zhǎng)指標(biāo)可知，添加量為150 mg/kg時(shí)，生長(zhǎng)效果最好。

2.2飼料中添加L-肉堿對(duì)吉富羅非魚全魚、肌肉和肝臟營養(yǎng)成分的影響

由表3可知，飼料中添加L-肉堿對(duì)全魚和肌肉組織的體成分(水分、粗蛋白和粗脂肪)含量無顯著影響；添加150或300 mg/kg L-肉堿顯著增加了肝臟組織的粗蛋白含量，150 mg/kg實(shí)驗(yàn)組肝臟粗脂肪含量顯著低于對(duì)照組。

表2 飼料中添加L-肉堿對(duì)吉富羅非魚幼魚生長(zhǎng)性能和飼料利用率的影響Tab.2 Effect of dietary L-Carnitine levels on growth performance and feed utilization of GIFI,O.niloticus

注：同一行數(shù)據(jù)肩標(biāo)字母不同表示差異顯著(P< 0.05)。下表同。

表3　飼料中L-肉堿水平對(duì)吉富羅非魚全魚、肌肉和肝臟營養(yǎng)成分的影響Tab.3　Effects of dietary L-Carnitine levels on body,muscle and liver composition of GIFT,O.niloticus

2.3飼料中添加L-肉堿對(duì)吉富羅非魚血清生化指標(biāo)的影響

由表4可知，飼料中添加L-肉堿對(duì)血清TCHO、HDL-C、LDL-C含量無顯著影響，血清甘油三酯含量顯著低于對(duì)照組，AST和ALT活性隨L-肉堿水平升高呈下降趨勢(shì)，均低于對(duì)照組，但差異不顯著。血清總蛋白含量在150 mg/kg顯著高于對(duì)照組。

表4　飼料中添加L-肉堿對(duì)吉富羅非魚血清生化指標(biāo)的影響Tab.4　Effects of dietary L-Carnitine levels on serum biochemical indices of GIFT,O.niloticus

2.4飼料中添加L-肉堿對(duì)吉富羅非魚肝臟脂肪代謝酶的影響

由表5可知，添加150 mg/kg L-肉堿時(shí)，肝臟LPL、HL、TL和LPS活性分別較對(duì)照組提高了43.15%、83.71%、65.23%和39.03%；添加300 mg/kg L-肉堿時(shí)，LPL、HL、TL和LPS分別較對(duì)照組提高了76.03%、92.13%、84.31%和53.01%。且LPL、TL和LPS酶活性隨L-肉堿添加水平增加呈顯著上升趨勢(shì)。

表5　飼料中添加L-肉堿對(duì)吉富羅非魚肝臟脂肪代謝酶的影響Tab.5　Effects of dietary L-Carnitine levels on liver lipid metabolism enzymes of GIFT,O.niloticus

2.5飼料中添加L-肉堿對(duì)吉富羅非魚肝臟抗氧化酶的影響

由表6可知，飼料中添加150或300 mg/kg L-肉堿顯著提高了吉富羅非魚肝臟CAT和GSH-PX活力，在150和300 mg/kg兩實(shí)驗(yàn)組間無顯著差異；肝臟SOD活性隨L-肉堿添加有上升趨勢(shì)，添加量為300 mg/kg時(shí)顯著高于對(duì)照組；實(shí)驗(yàn)組肝臟MDA含量較對(duì)照組顯著降低，并隨著L-肉堿水平升高而逐漸降低；添加300 mg/kg L-肉堿顯著提高了實(shí)驗(yàn)魚肝臟LZM活性。

表6　飼料中添加L-肉堿對(duì)吉富羅非魚肝臟抗氧化酶活性的影響Tab.6　Effects of dietary L-Carnitine levels on liver antioxidase activities of GIFT,O.niloticus

3　討論

3.1飼料中添加L-肉堿對(duì)吉富羅非魚生長(zhǎng)性能的影響

L-肉堿是長(zhǎng)鏈脂肪酸進(jìn)入線粒體內(nèi)膜進(jìn)行β-氧化的重要因子，參與脂肪酸氧化供能，同時(shí)排除體內(nèi)多余?；苊鈾C(jī)體內(nèi)?；鄯e變成代謝毒素[1,13]。L-肉堿在生物體內(nèi)的合成需要賴氨酸和甲硫氨酸[14-15]，這兩種必需氨基酸屬于魚類生長(zhǎng)發(fā)育的限制性氨基酸，在魚、蝦類飼料中容易缺乏。補(bǔ)充L-肉堿可以提高脂肪利用率，同時(shí)減少魚體內(nèi)生長(zhǎng)限制性氨基酸的消耗，達(dá)到促進(jìn)生長(zhǎng)和節(jié)約蛋白質(zhì)的目的。本實(shí)驗(yàn)中，添加L-肉堿顯著提高了羅非魚FBW、WGR、SGR和CF，綜合各生長(zhǎng)指標(biāo)，添加L-肉堿能夠提高吉富羅非魚生長(zhǎng)，在150 mg/kg組生長(zhǎng)效果最好。這可能與肉堿的營養(yǎng)機(jī)理有關(guān)，作為脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體促進(jìn)了長(zhǎng)鏈脂肪酸氧化，為羅非魚快速生長(zhǎng)提供了所需能量；同時(shí)外源L-肉堿減少了羅非魚體內(nèi)賴氨酸和甲硫氨酸的消耗，有利于羅非魚增長(zhǎng)。FCR在對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組間沒有差異，這可能與實(shí)驗(yàn)魚的投食頻率為每天3次，同時(shí)飽食投喂提高了攝食量有關(guān)。此外，L-肉堿添加組FCR低于對(duì)照組，也說明添加L-肉堿對(duì)降低吉富羅非魚飼料系數(shù)有積極作用。

國內(nèi)外研究報(bào)道了飼料中添加L-肉堿顯著提高了奧尼羅非魚(150 mg/kg)[6]、雜交條紋鱸(369.7 mg/kg)[11]、鯽魚(Carassiusauratus)(100 mg/kg)[16]、吉富羅非魚(200 mg/kg)[17]、草魚(200 mg/kg)[9]、異育銀鯽(carassiusauratusgibelio)(200 mg/kg)[18]、牙鲆(Paralichthysolivaceus)(1 200 mg/kg)[19]、青魚(MylopharyngodonPiceus)(150 mg/kg)[20]、白鯨(HusohusoL.)(350～650 mg/kg)[21]、小龍蝦(AstacusleptodactylusleptodactylusEschscholtz)(650 mg/kg)[22]生長(zhǎng)性能和飼料效率，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相似。也有研究報(bào)道了L-肉堿對(duì)歐洲鱸魚(Dicentrarchuslabrax)(300～3 000 mg/kg)[23]、非洲鯰魚(Clariasgariepinus)(660 mg/kg)[24]、羅非魚(200 mg/kg)[12]、大口鱸(Micropterussalmoides)(1 000 mg/kg)[25]、虹鱒(500 mg/kg)[26]生長(zhǎng)和飼料利用率無顯著影響，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果存在差異。造成了這種差異的因素很多，比如實(shí)驗(yàn)魚種類不同[8,12]，L-肉堿添加量不同[6,12]，溫度差異[7,12]，魚體發(fā)育階段不同[24]以及飼料中脂肪和蛋白質(zhì)含量不同均會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

肝體比(HSI)和臟體比(VSI)也是評(píng)價(jià)魚體健康和品質(zhì)的重要指標(biāo)，飼料中添加150 mg/kg L-肉堿顯著降低了肝體比和臟體比，說明添加適量的L-肉堿對(duì)吉富羅非魚健康生長(zhǎng)有利。周萌等[27]指出添加肉堿(100 mg/kg)降低了軍曹魚(Rachycentroncanadum)HSI和VSI；黃凱等[7]也表明添加肉堿(200 mg/kg)能降低羅非魚HSI；與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相同。Yang等[10]研究表明L-肉堿(400 mg/kg)對(duì)銀鱸HSI和VSI無顯著影響。這可能與魚類食性、脂肪添加量和L-肉堿水平不同有關(guān)。

3.2飼料中添加L-肉堿對(duì)吉富羅非魚脂肪代謝的影響

L-肉堿參與機(jī)體脂肪酸氧化供能，外源L-肉堿促進(jìn)了脂肪氧化活動(dòng)，減少游離脂肪酸含量，促進(jìn)脂肪利用，減少甘油三酯含量和脂肪積累。本實(shí)驗(yàn)添加L-肉堿對(duì)全魚和肌肉體成分無顯著影響，添加150 mg/kg L-肉堿顯著降低了肝臟粗脂肪含量，提高了肝臟粗蛋白含量，血清TG含量顯著降低，血清TP含量顯著高于對(duì)照組，而對(duì)TCHO、HDL-C和LDLC無顯著影響。肝臟和血液是機(jī)體內(nèi)物質(zhì)和能量代謝的重要場(chǎng)所，肝臟脂肪和血清中TG降低均能說明L-肉堿對(duì)羅非魚脂肪氧化和利用有一定促進(jìn)作用。Santulli等[28]報(bào)道了L-肉堿降低了鱸魚(Dicentrarchuslabrax. L.)肝臟和肌肉中的脂肪含量；Burtle等[29]指出添加L-肉堿降低了斑點(diǎn)叉尾鮰(Ietaluruspunetaus)全魚、肝臟和肌肉中的脂肪含量，腹脂率也相應(yīng)降低，同時(shí)提高了全魚粗蛋白含量；Ji H等[30]研究表明L-肉堿對(duì)降低大西洋鮭(Salmosalar)腹脂含量有重要作用。亦有部分報(bào)道表明L-肉堿對(duì)虹鱒[31]、奧尼羅非魚[6]、雜交條紋鱸[11]、歐洲鱸魚[23]全魚、肌肉和肝臟的體組成無顯著影響，對(duì)減少體脂沉積沒有明顯效果。

王立新等[16]研究表明飼料中添加L-肉堿對(duì)血清TP和TCHO和TG含量無顯著影響；Selcuk等[26]也報(bào)道了飼料中添加L-肉堿對(duì)虹鱒血清TCHO和TG含量無顯著影響；田娟等[9]指出飼料中添加400 mg/kg L-肉堿顯著降低了草魚血清TG含量；造成這種差異的原因可能因?yàn)閷?shí)驗(yàn)飼料的脂肪源不同，飼料中所含脂肪酸成分和含量不同，而L-肉堿只促進(jìn)長(zhǎng)鏈脂肪酸的氧化作用，而對(duì)于機(jī)體內(nèi)其他脂肪酸沒有轉(zhuǎn)運(yùn)作用或效果微小。這也合理解釋了L-肉堿對(duì)高脂(26%)飼料投喂下虹鱒的體脂含量無影響[31]，但顯著降低了低脂(10%)飼料投喂的大西洋鮭的體脂沉積[30]。

LPL、HL是重要的脂肪分解酶，TL是LPL和HL的總和，其活性直接影響肝胰臟的脂肪代謝，LPS是重要的脂肪消化酶。本實(shí)驗(yàn)中，添加150或300 mg/kg L-肉堿顯著提高了肝臟LPL、HL、TL和LPS活性，也表明飼料中添加L-肉堿對(duì)脂肪代謝有促進(jìn)作用。血清AST和ALT活性在一定程度上反映了肝臟的健康程度，AST和ALT維持在較低水平有利于肝臟健康[32]，本實(shí)驗(yàn)中AST和ALT活性較對(duì)照組有降低趨勢(shì)，說明L-肉堿降低肝脂和提高蛋白含量的同時(shí)對(duì)保護(hù)肝臟也有積極作用。

3.3飼料中添加L-肉堿對(duì)吉富羅非魚抗氧化能力和抗免疫的影響

Arduini[33]認(rèn)為肉堿可以防止鐵螯合物的形成，捕捉自由基，可以作為次級(jí)抗氧化劑，肉堿作為長(zhǎng)鏈脂肪?；妮d體，對(duì)膜修復(fù)過程中膜磷脂的去酰化和重?；兄匾饔茫?dāng)初級(jí)抗氧化屏障不能完全清除自由基時(shí)，可以作為次級(jí)抗氧化防御屏障。CAT、GSH-PX、SOD和MDA是主要的抗氧化指標(biāo)，CAT、GSH-PX和SOD組成抗氧化酶系統(tǒng)，在體內(nèi)的主要作用是清除自由基和過氧化物，使機(jī)體免受氧化自由基損害。MDA是脂質(zhì)過氧化的終產(chǎn)物，其含量能反映脂質(zhì)過氧化程度[34]。研究表明L-肉堿可以通過提高抗氧化酶活性和mRNA基因表達(dá)來提高機(jī)體抗氧化能力。José L等[35]指出L-肉堿提高了大鼠體內(nèi)GSH-PX和SOD的基因表達(dá)量。明建華等[20]報(bào)道添加L-肉堿提高了青魚血清CAT、GSH-PX和SOD活性，降低了MDA含量。Mohseni等[21]報(bào)道了飼料中添加350～650 mg/kg L-肉堿顯著提高了白鯨肝臟SOD和GSH-PX活性。Safari等[22]指出，飼料中添加650 mg/kg L-肉堿顯著提高了小龍蝦SOD和GSH-PX活性，提升了抗氧化能力。本實(shí)驗(yàn)中，添加適量L-肉堿顯著提高了肝臟CAT、GSH-PX和SOD活性，顯著降低了MDA含量，說明添加L-肉堿提高了肝臟抗氧化能力，對(duì)減少魚體內(nèi)自由基和過氧化物含量，降低脂質(zhì)過氧化有良好效果，L-肉堿可以作為抗氧化劑在動(dòng)物營養(yǎng)上加以利用。溶菌酶屬于非特異性免疫物質(zhì)，本實(shí)驗(yàn)添加300 mg/kg L-肉堿提高了肝臟溶菌酶活性，說明L-肉堿提高了機(jī)體非特異性免疫能力。耿愛蓮等[36]報(bào)道了L-肉堿對(duì)腹水敏感肉仔雞溶菌酶活性沒有影響，目前關(guān)于L-肉堿對(duì)魚體免疫作用的研究報(bào)道較少，其作用機(jī)理需進(jìn)一步深入研究。

4　小結(jié)

本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明：飼料中添加L-肉堿對(duì)吉富羅非魚生長(zhǎng)性能、肝臟脂肪代謝和抗氧化能力影響明顯。以生長(zhǎng)為評(píng)價(jià)指標(biāo)，建議羅非魚中L-肉堿添加量為150 mg/kg。

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(責(zé)任編輯：鄧薇)

Effects of dietary L-carnitine supplementation on growth,hepatic lipid metabolism and antioxidant ability in GIFT,Oreochromis niloticus

GOU Geng-wu1,2,JIANG Ming2,WEN Hua2,WU Fan2,LIU Wei2,TIAN Juan2

(1.CollegeofFisheryandLife,ShanghaiOceanUniversity,Shanghai201306,China；2.KeylaboratoryofFreshwaterBiodiversityConservationandUtilizationofMinistryofAgriculture/YangtzeRiverFisheriesResearchInstitute,ChineseAcademyofFisherySciences,Wuhan430223,China)

A 9-week feeding experiment was performed to investigate the effects of dietary L-carnitine supplementation on growth performance,body composition,serum biochemical indices,hepatic lipid metabolism and antioxidant in juvenile GIFT strain (Genetically Improved Farmed Tilapia) of Nile tilapiaOreochromisniloticus(initial body weight:8.21±0.33 g,means±SD).Three practical diets were formulated with the incorporation of L-carnitine at the levels of 0(control),150 and 300 mg/kg.Our results were as follows:Compared with control group,dietary L-carnitine supplementation significantly increased weight gain rate (WGR) and specific growth rate(SGR),and significantly reduced hepatosomatic index(HSI) and viscerosomatic index (VSI).The highest WGR and SGR were observed on fish fed the diet containing 150 mg/kg L-carnitine,and HSI and VSI were the lowest in this group.There were no significant differences in feed conversation rate(FCR) and survival rate(SR) among all the groups.Feed added 150 or 300 mg/kg L-cranitine significantly increased the content of liver crude protein,and crude lipid of liver that fed with 150 mg/kg L-carnitine was significantly lower than that of the control group.Dietary L-carnitine supplementation significantly reduced triglyceride in serum,but there were no significant differences in total cholesterol(TCHO),high-density lipoprotein cholesterol(HDL-C) and low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C).Dietary L-carntine supplementation significantly elevated the activities of lipoprotein lipase(LPL),hepatic lipase(HL),total lipase(TL) and lipase(LPS) in liver.Feed added 150 or 300 mg/kg L-carnitine significantly increased catalase(CAT),glutathione peroxidase(GSH-PX) activities and significantly reduced malondialdehyde(MDA) content in liver,the superoxide dismutase(SOD) and lysozyme(LZM) activities that fed with 300 mg/kg L-carnitine were significantly higher than that of the control group.All the above results indicated that appropriate dietary L-carnitine supplementation could improve growth performance and antioxidant ability,promote lipid degradation and utilization.Regarding the effects on growth performance,the proper dose of L-carnitine in the juvenile GIFT diet was suggested to be 150 mg/kg.

GIFT,Oreochromisniloticus;L-carnitine;growth performance;lipid metabolism;antioxidant ability

2016-03-11；

2016-04-28

現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金項(xiàng)目(CARS-49)；農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè)科研專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)項(xiàng)目(201003020).

茍庚午(1990-)，女，碩士研究生，專業(yè)方向?yàn)轸~類營養(yǎng)與飼料研究。 E-mail:249698592@qq.com

文華。 E-Mail：wenhua.hb@163.com

S963.73

A

1000-6907-(2016)05-0081-08