杜洪　馬桂　王曉銀　葉娟珍　金明麗

一次染色清染色法與液基細(xì)胞巴氏染色在宮頸病變檢測中的比較研究

杜洪馬桂王曉銀葉娟珍金明麗

目的：通過比較一次染色清染色法和液基細(xì)胞巴氏染色的特點，探討一次染色清染色法在宮頸病變應(yīng)用中的價值。方法：對從2013年1月至2014年1月白銀市第二人民醫(yī)院及甘肅省腫瘤醫(yī)院門診體檢和宮頸癌篩查的3000例患者中隨機(jī)抽取568例。每人取2張涂片，編號分別為A組和B組，A組進(jìn)行一次染色清染色液染色，B組進(jìn)行液基細(xì)胞巴氏染色，比較兩種方法在宮頸致病微生物學(xué)檢測及宮頸鱗狀上皮病變檢測中的診斷結(jié)果。結(jié)果：568例標(biāo)本進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，兩種染色方法對癌細(xì)胞，核異質(zhì)細(xì)胞檢出效果均較好（χ2=0.010，P＞0.05），而且一次染色清染色法對宮頸致病微生物的陽性檢出率較高（χ2=47.072，P＜0.01）。結(jié)論：一次染色清染色液可一次染出核異質(zhì)細(xì)胞、癌細(xì)胞，與液基巴氏染色結(jié)果基本一致；但一次染色清染色法對宮頸涂片的致病微生物陽性檢出率較高，微生物形態(tài)清晰。一次染色清染色法操作簡便，染色效果好，值得臨床推廣使用。

一次染色清染色液；液基細(xì)胞巴氏染色；宮頸病變；微生物；診斷

1　資料與方法

1.1一般資料從我院和白銀市第二人民醫(yī)院病理科2013年1月至2014年1月門診體檢和宮頸癌篩查的3000例患者中隨機(jī)抽取568例。每人取2張涂片，編號分別為A組和B組，A組進(jìn)入一次染色清染色液染色，B組進(jìn)入液基細(xì)胞巴氏染色。

1.2試劑與儀器脫落細(xì)胞一次染色清染色液（專利號ZI200610104561，白銀科微生物技術(shù)開發(fā)公司提供），傳統(tǒng)的巴氏染色液，顯微鏡（日本奧林巴斯）。

1.3染色方法

1.3.1液基細(xì)胞巴氏染色檢查。暴露宮頸，用無菌干棉球輕輕擦去宮頸表面和穹窿部的粘液及分泌物，將宮頸刷伸于宮頸管內(nèi)達(dá)宮頸外口，將采樣刷順時針方向旋轉(zhuǎn)4～5圈并稍停2～3s收集宮頸外口和宮頸管內(nèi)的脫落細(xì)胞，將宮頸刷放于備有Thinprep保存液的洗脫管中送檢，采用離心沉淀技術(shù)最終制成直徑為2cm的均勻薄層細(xì)胞涂片［4］，然后用95%乙醇固定，經(jīng)過固定、加水、染核、脫水、染漿、脫水透明、封片、鏡檢，約

1.5～2小時。

1.3.2一次染色清染色法。暴露宮頸，用無菌干棉球輕輕擦去宮頸表面和穹窿部的粘液及分泌物，將宮頸刮板插入子宮頸管內(nèi)，以宮頸外口鱗柱狀上皮交界處為圓心用刮板輕刮一圈，取后均勻涂于玻片上，待其自然干燥，輕滴染液4～5滴，3～5min后流水沖洗，濕片鏡檢。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件，率的比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1兩種方法在致病微生物檢測中的結(jié)果比較568例標(biāo)本進(jìn)行分類統(tǒng)計，致病微生物檢測宮頸液基細(xì)胞巴氏染色陽性細(xì)胞數(shù)363例，一次染色清染液陽性細(xì)胞數(shù)473例。一次染色清染色法檢測宮頸致病微生物陽性數(shù)多于宮頸液基細(xì)胞巴氏染色法，兩組數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=47.072，P=0.000）。見表1。

表1　兩種檢查方法在宮頸致病微生物檢測中的陽性結(jié)果（例）

2.2兩種方法在宮頸鱗狀上皮病變檢測中的結(jié)果比較一次染色清染色液檢測568例，檢出陽性涂片54例（19.0%），液基細(xì)胞巴氏染色檢出陽性涂片55例（19.3%）；兩種方法檢陽性檢出率比較（（χ2=0.010，P= 0.920））。見表2。

表2　兩種檢查方法在宮頸鱗狀上皮病變檢測中陽性例數(shù)（例）

3　討論

3.1一次染色清染色法一次染色清染色法操作簡便，染色只需3～5min，流水沖洗，濕片鏡檢，即刻發(fā)報告，克服了其他方法的不足。不僅適合大醫(yī)院，更適合基層醫(yī)院開展細(xì)胞學(xué)防癌篩查工作的應(yīng)用［5］。

3.2一次染色清染色法與液基細(xì)胞巴氏染色法的比較液基細(xì)胞巴氏染色技術(shù)是目前宮頸病變，宮頸癌篩查的首選檢查方法，其過程程序較復(fù)雜，耗時多（一個小標(biāo)本的處理時間在15min左右），再通過傳統(tǒng)的巴氏染色耗時1.5～2h。尤其在基層醫(yī)院因為細(xì)胞學(xué)的工作量太小，花大價錢買設(shè)備去做這樣工作是受一定限制的，除了引進(jìn)機(jī)器外，還要培訓(xùn)病理細(xì)胞醫(yī)生和臨床婦科醫(yī)生，還要投入大量的資金和人力，面臨病例量的短缺和投入人力去組織工作量［6］。所以，此項技術(shù)在基層醫(yī)院開展有一定的局限性。本研究用兩種染色方法檢測568例患者的結(jié)果顯示，在細(xì)胞學(xué)方面，一次染色清染色液可一次染出核異質(zhì)細(xì)胞，癌細(xì)胞。宮頸脫落細(xì)胞核呈天藍(lán)色，胞漿呈鮮亮的粉紅色，呈現(xiàn)紅藍(lán)分明，鮮艷亮麗核漿比明顯，共檢出54例陽性病例；對宮頸及宮頸上皮內(nèi)病變的檢查結(jié)果較好。在微生物方面，雖然宮頸細(xì)胞學(xué)檢測感染性微生物并不是其主要目的，但也是其篩查中的重要內(nèi)容；如霉菌性陰道炎是常見的婦科感染性疾?。?］，易反復(fù)發(fā)作，久治不愈，嚴(yán)重影響婦女身心健康。在傳統(tǒng)巴氏染色中霉菌呈現(xiàn)隱約的嗜伊紅色到灰棕色，較難辨別；一次染色清染色液可使霉菌孢子呈深藍(lán)色［8］，霉菌菌絲染成深藍(lán)色或紫紅色；滴蟲性陰道炎也是婦科的一種常見病，有很多見有滴蟲的涂片中，背景臟亂，核周“暈”，這些改變具有提示和旁證作用；液基薄層細(xì)胞技術(shù)采用離心［6］、沉淀、分離技術(shù)，使涂片變的“干凈”并不利于滴蟲的檢出。再者球桿菌覆蓋細(xì)胞并伴有炎細(xì)胞，在液基涂片背景“干凈”，一次染色液涂片中的球桿菌不但覆蓋表層鱗狀細(xì)胞而且在細(xì)胞外也可分布［6］。568例患者中有205例為細(xì)菌性陰道炎病原體感染，加德納菌呈淡綠色，像撒落的“胡椒粉末”，雙球菌呈深藍(lán)或紫紅色。

3.3一次染色清染色法的臨床意義在我國，文化程度低、保健意識不強(qiáng)、經(jīng)濟(jì)條件差的農(nóng)村婦女是“兩癌”的高發(fā)人群，也是重點干預(yù)對象［9］。有調(diào)查表明：宮頸浸潤癌5年的生存率只有67%、宮頸早期浸潤癌的生存率達(dá)90%，而宮頸原位癌的生存率幾乎為100%；宮頸癌早期多無任何癥狀。但宮頸癌的發(fā)生也是一個循序漸進(jìn)的過程，從CIN、原位癌、早期浸潤癌、是一個較為漫長的過程，潛伏期長達(dá)10年左右［10］，所以早期篩查是防治宮頸癌的關(guān)鍵。近年來，液基薄層細(xì)胞技術(shù)，對宮頸癌的防治做出了重要的貢獻(xiàn)，也是目前宮頸病變，宮頸癌篩查的首選檢查方法；但是由于耗材貴、耗時多，在基層醫(yī)院開展有很大的局限性。政府雖然已在開展宮頸癌篩查，但受經(jīng)費和技術(shù)條件限制，每年受益人群有限，相對于育齡婦女的龐大基數(shù)而言可謂杯水車薪。針對中國農(nóng)村育齡婦女人數(shù)多、知識不足的實際，亟待加大宮頸癌預(yù)防知識宣傳力度。一次性染色清染液操作簡單、成本低、易學(xué)、幾滴染液、一臺顯微鏡，便可做檢查，大大提高了宮頸癌篩查在基層醫(yī)院的可行性。

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［7］曹躍華.細(xì)胞病理學(xué)診斷圖譜及實驗技術(shù)［M］.北京:科學(xué)技術(shù)出版社，2009:14-18.

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Comparative study between disposable staining agent method and pap staining of liquid based cells in the diagnosing cervical lesion

Du Hong1，Ma Gui1，Wang Xiaoyin2，Ye Juanzhen3，Jin Mingli4.1.Department of Pathology，Cancer Hospital of Gansu Province，Lanzhou 730050，China；2.Department of Pathology，the Second People's Hospital of Baiyin City，Baiyin 730900，China；3.Department of Cardiology，the Baiyin Branch in Traditional Chinese Medicine Hospital of Gansu Province，Baiyin 730900，China；4.the Service Station of Population and Family Planning in Baiyin district of Baiyin City，Baiyin 730900，China

Ma Gui，E-mail:majia.jia123@163.com

Objective:Through comparation of a disposable staining agent method and pap staining of liquid based cells in the detecting cervical lesion，to explore the applied values of disposable staining agent method in the detecting cervical lesion.Methods:3000 cases from Jan 2013 to Jan 2014 in physical examination in outpatient clinic and cervical cancer screening of the second people's hospital of Baiyin city and cancer hospital of Gansu province，were randomly collected 568 cases.Of 568 cases，each got 2 piece smears respectively in group A and group B in which group A was given disposable staining agent method and group B was given pap staining of liquid based cells. Diagnostic results of pathogenic microbiology and cervical squamous intraepithelial lesions were compared in two methods.Results:Of 568 cases，two dyeing methods for cancer cells and nuclear quality effect were same good（χ2=0.010，P＞0.05），but the positive rate of microbial detection in the disposable staining agent method was high quality than that of pap staining of liquid based cells（χ2=47.072，P＜0.01）.Conclusions:The disposable staining agent method can dyed a nuclear heterogeneous cells，cancer cells which is good as pap staining of liquid based cells method.The disposable staining agent method is easy，good dyeing effect which has high positive rate of microbial detection，and clear microbial morphology.

disposable staining agent method；pap staining of liquid based cells；cervical lesion；microorganism；diagnosis液基薄層技術(shù)是目前宮頸病變、宮頸癌篩查首選的檢查方法［1］，但是液基薄層技術(shù)巴氏染色需要20多個步驟，耗時1.5～2h［2］、耗材貴、同時對微生物的染色效果不及一次染色清染色法。一次染色清染色法染色時間僅用3～5min［3］，流水沖洗，濕片鏡檢，效果良好。本文就兩種檢測結(jié)果報告如下。

A

1004-2725（2016）02-0093-03

730050甘肅 蘭州，甘肅省腫瘤醫(yī)院病理科（杜洪、馬桂）；730900甘肅 白銀，白銀市第二人民醫(yī)院病理科（王曉銀）；730900甘肅 白銀，甘肅省中醫(yī)院白銀分院心內(nèi)科（葉娟珍）；730900甘肅 白銀，白銀市白銀區(qū)人口和計劃生育服務(wù)站（金明麗）

馬桂，E-mail：majia.jia123@163.com