呂春蘭， 杭國琴， 許 云， 蘇大林， 陳 艷， 黃晶晶

襄陽市中醫(yī)醫(yī)院血流感染病原菌的分布與耐藥性分析

呂春蘭， 杭國琴， 許 云， 蘇大林， 陳 艷， 黃晶晶

目的 了解醫(yī)院血流感染病原菌的分布和耐藥狀況，為臨床治療血流感染提供依據。方法 收集襄陽市中醫(yī)醫(yī)院2014年1—12 月門診及住院血流感染患者血培養(yǎng)分離的病原菌及藥敏試驗資料進行回顧性分析。結果 血培養(yǎng)共分離病原菌637株，其中以革蘭陽性球菌為主，占55.4 %；革蘭陰性桿菌占44.1 %；真菌占0.5 %。病原菌檢出率排在首位的是凝固酶陰性葡萄球菌，占34.9 %；其次為大腸埃希菌，占14.4 %；肺炎克雷伯菌，占9.9 %；腸球菌屬，占9.9 %；金黃色葡萄球菌（金葡菌），占8.3 %；鮑曼不動桿菌，占7.4 %等。血培養(yǎng)葡萄球菌屬細菌對青霉素高度耐藥，對紅霉素、克林霉素耐藥率相對較高，對利福平的耐藥率相對較低，尚未發(fā)現耐萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺的菌株。腸球菌屬中屎腸球菌的耐藥率明顯高于糞腸球菌。甲氧西林耐藥金葡菌（MRSA）和凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）的檢出率分別為47.2 % 和59.0 %。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對第一、二代頭孢菌素耐藥率較高，對阿米卡星耐藥率較低。產超廣譜β內酰胺酶大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌檢出率分別為50.0 %和36.5 % 。血流感染中鮑曼不動桿菌對亞胺培南的耐藥率為51.1 %，對米諾環(huán)素耐藥率為29.7 %；銅綠假單胞菌檢出比例相對較小，對哌拉西林耐藥率較高，對其他抗菌藥物耐藥率相對較低。結論 血培養(yǎng)以革蘭陽性球菌為主。應加強對醫(yī)院血培養(yǎng)病原菌進行耐藥監(jiān)測，掌握其耐藥特點，合理使用抗菌藥物，防止耐藥菌的傳播。

血培養(yǎng)； 病原菌； 耐藥性

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1菌株來源 收自本院2014年1—12月門診和住院患者的血培養(yǎng)標本6 378份，共獲得分離病原菌637株，排除同一患者重復菌株。血培養(yǎng)陽性率為10.0%。

1.1.2質控菌株 質控菌株為大腸埃希菌ATCC 25922、ATCC 35218，金黃色葡萄球菌（金葡菌）ATCC 25923，糞腸球菌ATCC 29212和銅綠假單胞菌ATCC 27853，均購自湖北省臨床檢驗中心。

1.1.3實驗材料 培養(yǎng)基、哥倫比亞瓊脂及MH瓊脂、抗菌藥物紙片，均購自英國OXOID公司。

1.2方法

1.2.1細菌鑒定及藥敏試驗 細菌鑒定嚴格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》常規(guī)方法進行。藥敏試驗采用K-B法，按CLSI 2014年版制定的標準判斷結果。

1.2.2菌株檢測 甲氧西林耐藥金葡菌（MRSA）檢測采用CLSI 2009年推薦的頭孢西丁法檢測。超廣譜β內酰胺酶（ESBL）試驗采用CLSI推薦的表型確定試驗，即用頭孢噻肟-克拉維酸和頭孢他啶-克拉維酸兩組紙片同時進行檢測，并用大腸埃希菌ATCC 25922和肺炎克雷伯菌ATCC 700603作為質控菌株。

1.2.3數據統計 使用數據采用WHONET 5.6版本進行統計分析。

2　結果

2.1病原菌構成

血培養(yǎng)共分離病原菌637株，以革蘭陽性球菌為主，占55.4 %；革蘭陰性桿菌占44.1 %；真菌占0.5 %。病原菌檢出率排在首位的是凝固酶陰性葡萄球菌，占34.9 %，其次為大腸埃希菌占14.4 %，肺炎克雷伯菌占9.9 %，腸球菌屬占9.9 %，金葡菌占8.3%，鮑曼不動桿菌占7.4 %，見表1。

表1　血培養(yǎng)常見病原菌構成Table 1 Distribution of pathogens isolated from blood samples

2.2菌株檢測

MRSA、甲氧西林耐藥凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）檢出率分別為47.2 %（25/53）和59.0 % （131/222）。產ESBL大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌檢出率分別為50.0 %（46/92）和36.5 %（23/63）。

2.3葡萄球菌屬細菌對常用抗菌藥物耐藥率

葡萄球菌屬對青霉素高度耐藥，對紅霉素、克林霉素耐藥率相對較高，對利福平的耐藥率相對較低，尚未發(fā)現耐萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺菌株，見表2。

表2　葡萄球菌屬對常用抗菌藥物敏感率和耐藥率Table 2 Susceptibility of the Staphylococcus strains isolated from blood to antibiotics（%）

2.4腸球菌屬細菌對常用抗菌藥物耐藥率

藥敏試驗結果顯示屎腸球菌的耐藥率明顯高于糞腸球菌，見表3。

表3　腸球菌屬對常用抗菌藥物敏感率和耐藥率Table 3 Susceptibility of the Enterococcus strains isolated from blood samples to commonly used antimicrobial agents （%）

2.5腸桿菌科細菌對常用抗菌藥物耐藥率

大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對第一、二代頭孢菌素耐藥率較高，對阿米卡星耐藥率較低，見表4。

2.6不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌對常用抗菌藥物耐藥率

血流感染中鮑曼不動桿菌對亞胺培南的耐藥率為51.1 %，對米諾環(huán)素耐藥率為29.7 %；銅綠假單胞菌對哌拉西林耐藥率較高，對其他抗菌藥物耐藥率相對較低，見表5。

3　討論

本組統計資料顯示，我院血流感染以革蘭陽性球菌為主，占55.4 %，革蘭陰性桿菌占44.1 %與劉彩林等［1］報道較為一致；與徐寧等［2］報道有一定差異，該文獻血流感染以革蘭陰性桿菌為主。血流感染的分布因不同地區(qū)而有所不同。國外報道血培養(yǎng)陽性率為8 %～12 %，國內報道血培養(yǎng)陽性率6.5 %～17.4 %［3］， 我院2014年全年血培養(yǎng)6 378份檢出各種病原菌637株，陽性率為10.0 %。血培養(yǎng)病原菌的檢出率居首位的是凝固酶陰性葡萄球菌（34.9 %），其余依次為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、腸球菌屬、金葡菌、鮑曼不動桿菌等。凝固酶陰性葡萄球菌為人體皮膚表面的正常菌群，在采血過程中易導致污染，本次研究采用了我國公認的血流感染與污染的判斷標準剔除污染菌［4-5］，只統計感染菌。

表4　腸桿菌科細菌對常用抗菌藥物敏感率和耐藥率Table 4 Susceptibility of Enterobacteriaceae strains isolated from blood samples to commonly used antimicrobial agents （%）

表5　不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌對常用抗菌藥物敏感率和耐藥率Table 5 Susceptibility of the nonfermenting gram negative bacteria isolated from blood samples to commonly used antimicrobial agents （%）

表5（續(xù)）Table 5（continued）

本次研究顯示，葡萄球菌屬對青霉素高度耐藥，與文獻報道一致［6］，MRSA和MRCNS的檢出率分別為47.2 %和59.0 %，多表現為多重耐藥。近年來，凝固酶陰性葡萄球菌引起的血流感染逐年增多，可能與近年來廣譜抗菌藥物的廣泛使用、侵襲性操作、免疫力下降使條件致病菌增殖等有關［7］。

腸球菌屬細菌的血流感染常繼發(fā)于尿路、腹腔、盆腔感染。在各種留置導管、動脈通道、腹膜透析、燒傷、壓瘡潰瘍等患者中發(fā)病增多，且多系醫(yī)院內獲得。此外，住院時間長，先前曾應用廣譜抗菌藥物，尤其對該菌抗菌活性差的頭孢菌素的應用是引起血流感染的危險因素［8］。本研究顯示，醫(yī)院血流感染腸球菌屬中屎腸球菌的檢出率高于糞腸球菌。屎腸球菌的耐藥率明顯高于糞腸球菌，與文獻報道一致［2］。醫(yī)院血流感染未發(fā)現耐萬古霉素的革蘭陽性球菌。

本次統計資料顯示，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌是血流感染主要革蘭陰性桿菌。對第一、二代頭孢菌素、環(huán)丙沙星、慶大霉素具有較高的耐藥性，對含β內酰胺酶抑制劑的復合制劑、碳青霉烯類抗生素耐藥率較低，治療上可作為重癥感染的首選。血流感染中ESBL陽性的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌檢出率分別為50.0 %和36.5 %，與文獻報道較為一致［9］。產ESBL病原菌常顯示為多重耐藥、泛耐藥菌。

血流感染中鮑曼不動桿菌對亞胺培南的耐藥率為51.1 %，略低于文獻報道［8］。但也超過了50 %。鮑曼不動桿菌引起的血流感染多系醫(yī)院內獲得，患者?；加袊乐氐陌l(fā)熱性疾病，臨床治療相當棘手。碳青霉烯類抗生素耐藥菌株體外試驗對含舒巴坦制劑、多黏菌素B或黏菌素敏感［10］。

血流感染銅綠假單胞菌檢出比例相對較小，對哌拉西林耐藥率較高，對其他抗菌藥物耐藥率相對較低。近年來，多重耐藥和泛耐藥菌株的出現給臨床抗感染治療帶來嚴重問題［11］，且泛耐藥株引起的血流感染多來自ICU患者［12］，病情兇險、病死率極高，血流感染中銅綠假單胞菌對頭孢他啶的耐藥率明顯低于頭孢吡肟，可作為治療的選用藥物之一。

與綜合醫(yī)院相比，從病原菌檢出率來看中醫(yī)醫(yī)院血流感染革蘭陽性球菌和凝固酶陰性葡萄球菌的檢出率（55.4 %，34.9 %）低于綜合醫(yī)院的檢出率（61.9 %，43.6 %），鮑曼不動桿菌和腸球菌的檢出率（7.4 %，9.9 %）高于綜合醫(yī)院的檢出率（3.7 %，7.7 %）［8］。從藥敏結果來看，綜合醫(yī)院血流感染分離的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對亞胺培南、美羅培南有耐藥的情況。本次研究中，我院的血流感染尚未發(fā)現耐亞胺培南、美羅培南的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌。萬古霉素、利奈唑胺對血流感染葡萄球菌和腸球菌的敏感率為100 %，與綜合醫(yī)院較為一致［13］。

全球耐藥菌株的增長和播散使臨床用藥面臨嚴峻挑戰(zhàn)，中醫(yī)院血流感染與綜合醫(yī)院既有相似之處同時也存在一定的差異，加強中醫(yī)院血流感染細菌耐藥監(jiān)測，掌握病原菌耐藥規(guī)律，根據藥敏結果正確使用抗菌藥物，減少耐藥菌株尤其是多重耐藥菌株的發(fā)生和傳播對治療血流感染有著重要的意義。

［1］劉彩林，孫自鏞，朱旭慧，等. 2001—2010年培養(yǎng)病原菌變遷耐藥性分析［J］.中華醫(yī)院感染學雜志，2012，22（3）：624-626.

［2］徐寧，李豐良.血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析［J］.中華醫(yī)院感染雜志，2012，22（3）：627-629.

［3］趙敬煥，劉迪，李亭，等.血流感染的病原菌分析［J］.中國感染與化療雜志，2012，12（5）：384-389.

［4］中華人民公和國衛(wèi)生部.醫(yī)院感染診斷標準（試行） ［J］. 中華醫(yī)學雜志，2001，81（5）：314-320.

［5］王輝，張悅嫻，謝秀麗，等.血培養(yǎng)凝固酶陰性葡萄球菌的臨床意義［J］.中國抗感染化療雜志，2001，1（2）：79-82.

［6］韓福祿，王文艷，龐莉.血培養(yǎng)常見病原菌分布及耐藥性分析［J］. 中華醫(yī)院感染學雜志，2012，22（3）：630-631.

［7］鄭海斌，俞根龍，葉智穎，等.海島地區(qū)血漿凝固酶陰性葡萄球菌的臨床分布及耐藥分析［J］.中華醫(yī)院感染學雜志，2013，23（15）：3762-3763.

［8］李光輝，朱德妹，汪復，等. 2011年中國CHINET血培養(yǎng)臨床分離菌的分布及耐藥性［J］.中國感染與化療雜志，2013，13（4）：241-247.

［9］徐葉進，范須富，郭玉香，等.敗血癥患者病原菌分布及耐藥性分析［J］.中華醫(yī)院感染學雜志，2014，24（17）：4188-419

［10］FISHBAIN J，PELEG AY. Treatment of Acinetobacter infections［J］. Clin Infect Dis，2010，51（1）：79-84.

［11］張煒博，倪語星，孫景勇，等. 2010年中國CHINET銅綠假單胞菌耐藥性檢測［J］.中國感染與化療雜志，2012，12（3）：161-166.

［12］HARRI AD，JOHNSON JK， THOM KA，et al. Risk factors for development of intestinal colonization with imipenemresistant Pseudomonas aeruginosa in the intensive care unite setting［J］. Infect Control Hosp Epidemiol，2011，32（7）：719-722.

［13］周碧云，朱旭慧，陳中舉，等. 2009—2013年血液標本病原菌耐藥性監(jiān)測［J］.中國感染與化療雜志，2015，15（1）：1-5.

讀者· 作者· 編者

《中國感染與化療雜志》常用縮略語

Distribution and antibiotic resistance of pathogenic bacteria isolated from bloodstream infections in Xiangyang Traditional Chinese Medicine Hospital

Lü Chunlan， HANG Guoqing， XU Yun， SU Dalin， CHEN Yan， Huang Jingjing. （Department of Laboratory Medicine， Xiangyang Traditional Chinese Medicine Hospital Affiliated to Hubei University of Chinese Medicine，Xiangyang Hubei 441000， China）

Objective To analyze the distribution and resistance profile of the pathogens isolated from bloodstream infections for better management of bloodstream infections. Methods The pathogenic bacteria were isolated from outpatients and inpatients with bloodstream infection during the period from January to December in 2014 and subjected to antimicrobial susceptibility testing. The susceptibility data were reviewed retrospectively. Results A total of 637 strains of pathogenic bacteria were isolated from blood culture， including gram positive cocci （55.4%， 353/637）， gram negative bacilli （44.1%， 281/637）， and fungus （0.5%， 3/637）. The most common pathogen was coagulase-negative Staphylococcus （34.9%）， followed by Escherichia coli （14.4%）， Klebsiella pneumoniae （9.9%）， Enterococcus （9.9%）， Staphylococcus aureus （8.3%） and Acinetobacter baumannii （7.4%）. The staphylococcal strains isolated from blood were highly resistant to penicillin， erythromycin， clindamycin， but showed low resistance to rifampin. No staphylococcal strain was found resistant to vancomycin， linezolid， or teicoplanin. Enterococcus faecium isolates showed significantly higher resistance rate than Enterococcus faecalis. The prevalence of methicillin-resistant S. aureus was 47.1% in the staphylococcal strains isolated from blood. And 59.0% of the coagulase-negative Staphylococcus isolates from blood were resistant to methicillin. E. coli and K. pneumoniae isolates were highly resistant to the first and second generationcephalosporins， but showed relatively low resistance to amikacin. Extended-spectrum beta-lactamases were produced in 50.0% of the E. coli isolates and 36.5% of the K. pneumoniae isolates. Of the A. baumannii strains isolated from bloodstream infections，51.1% were resistant to imipenem， and 29.7% resistant to minocycline. A few of Pseudomonas aeruginosa strains were isolated from bloodstream infections， which were highly resistant to piperacillin. Conclusions More than half of the pathogens isolated from bloodstream infection in this hospital are gram positive bacteria. The resistance profile of these pathogens are helpful for doctors to select appropriate antimicrobial therapies in this hospital.

blood culture； pathogenic bacteria； antibiotic resistance profile血流感染是臨床常見嚴重感染性疾病，起病急、病死率高。為了解我院血流感染病原菌的臨床分布及耐藥情況。本研究對2014年1—12 月門診及住院患者血培養(yǎng)分離的637株病原菌進行了回顧性分析?，F將結果報道如下。

英文縮寫　英文全稱中文全稱AIDS　acquired immune deficiency syndrome　　獲得性免疫缺陷綜合征ALT　alanine aminotransferase 　　丙氨酸氨基轉移酶AST　aspartate aminotransferase 　　天冬氨酸氨基轉移酶BUN　blood urea nitrogen　　血尿素氮CLSI　American Clinical and Laboratory Standards Institute　　美國臨床和實驗室標準化協會Cr　creatinine　　肌酐ESBL　extended spectrum β-lactamase　　超廣譜β內酰胺酶FDA　Food and Drug Administration　　食品藥品監(jiān)督管理局HIV　human immunodeficiency virus　　人類免疫缺陷病毒I intermediate中介ICU　intensive care unit　　重癥監(jiān)護病房MIC　minimum inhibitory concentration　　最低抑菌濃度MRCNS　methicillin-resistant coagulase-negative Staphylococcus　　甲氧西林耐藥凝固酶陰性葡萄球菌MRSA　methicillin-resistant Staphylococcus aureus　　甲氧西林耐藥金黃色葡萄球菌MSCNS　methicillin-susceptible coagulase-negative Staphylococcus甲氧西林敏感凝固酶陰性葡萄球菌MSSA　methicillin-susceptible Staphylococcus aureus　　甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌PCR　polymerase chain reaction 　　聚合酶鏈反應R resistant耐藥S susceptible or sensitive　　敏感VRE　vancomycin-resistant Enterococcus　　萬古霉素耐藥腸球菌WHO　World Health Organization　　世界衛(wèi)生組織

·論著·

R378

A

1009-7708（2016）01-0024-06

10.16718/j.1009-7708.2016.01.006

湖北中醫(yī)藥大學附屬襄陽市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，湖北襄陽 441000。

呂春蘭（1973—），女，學士，副主任技師，主要從事臨床微生物研究。

呂春蘭，E-mail： lvchunlan888@163.com。

2015-05-14

2015-08-10