宋韶鶴　苗明三

（1　河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院藥學(xué)部，鄭州　45008；2　河南中醫(yī)學(xué)院科研處，鄭州　450008）

益母草堿的研究概況※

宋韶鶴1苗明三2*

（1河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院藥學(xué)部，鄭州45008；2河南中醫(yī)學(xué)院科研處，鄭州450008）

益母草堿有較強(qiáng)的活血化瘀、利水消腫作用，在治療前列腺增生的研究中有重要意義。綜述近年來有關(guān)益母草堿的研究情況，包含其理化性質(zhì)、制備和測定方法、藥理評價及毒性研究等，以期為益母草堿的進(jìn)一步開發(fā)應(yīng)用尋找新的信息和思路。

益母草堿；理化性質(zhì)；制備和測定方法；前列腺增生；綜述；中藥化學(xué)

益母草堿(Leonurine)是益母草的有效成份，具有廣泛的生物學(xué)活性［1］。近年來研究揭示了其治療前列腺增生的良藥［2］，還具有改善抗血小板聚集、改善血循環(huán)、抗炎鎮(zhèn)痛、興奮子宮、保鉀利尿和保護(hù)心肌等功效［3-4］。文章對近幾年益母草堿的研究進(jìn)行簡要概述，以期為益母草堿的進(jìn)一步開發(fā)應(yīng)用尋找新的信息和思路。

1　理化性質(zhì)

益母草堿是生物堿。幾乎不溶于水，熔點238℃（分解），溶于戊醇。益母草堿在自然界中只有極少一部分是以單體的形式存在，多以其鹽的形式存在，含一結(jié)晶水的鹽酸鹽（如圖1）。益母草堿水加氯化鋇生成白色沉淀，再加硝酸，沉淀不溶解。

圖1　鹽酸益母草堿結(jié)構(gòu)

2　制備方法

2.1硅膠柱色譜法硅膠柱色譜法是常用的方法，在一定條件下，硅膠與被分離物質(zhì)之間產(chǎn)生作用，這種作用是由于硅膠表面與溶質(zhì)分子之間的范德華力、硅膠表面的硅羥基與待分離物質(zhì)之間的氫鍵產(chǎn)生作用，這種方法分離效果好，處理量大是天然產(chǎn)物提取有效成分的常用手段。張琳等［5］應(yīng)用硅膠柱色譜對益母草堿提取分離。

2.2大孔吸附樹脂法大孔吸附樹脂采用特殊吸附劑，通過物理吸附從水溶液中選擇性地吸附有機(jī)物。該法設(shè)備簡單、易操作、產(chǎn)品純度高等優(yōu)點，因此大孔樹脂吸附法在中藥精制純化應(yīng)用日益廣泛。李雪麗等［6］在大孔吸附樹脂對益母草總堿提取分離，應(yīng)用SP825樹脂對益母草總黃酮和總生物堿提取分離，并且能提高藥材使用率。

2.3合成法研究報道益母草中益母草堿含量很低，提取法制備得到量很少，分析結(jié)構(gòu)可用化學(xué)合成方法來制備。以丁香酸為原料，用氯甲酸乙酯對其活潑的碳基保護(hù)和酰化、路易斯酸催化條件下四氫呋喃開環(huán)、酰氯的醇解等反應(yīng)制備羰基化產(chǎn)物（4-乙氧羰基-氧基-丁香酸-丁酯），用該蓋布瑞爾成胺法制備益母草胺，最后與甲基異硫脲反應(yīng)制成益母草堿［7］。此法減少了反應(yīng)步驟和操作的技術(shù)難度，并提高了收率，是常用得到益母草堿的方法。

2.4超聲波和微波提取法傳統(tǒng)益母草堿回流提取率較低。相比較微波具有加熱迅速和均勻、穿透力強(qiáng)等特點；超聲波輔助提取能使細(xì)胞破碎完全提取效率高、提取物生物活性不受影響。周本宏等［8］應(yīng)用超聲波提取法的超聲頻率和強(qiáng)度對益母草堿提取結(jié)果影響的探討。

3　測定方法

3.1化學(xué)法

3.1.1沉淀反應(yīng)原理是利用益母草堿中硫酸根離子與鋇離子形成不溶于硝酸白色沉淀。方法是在益母草堿中加水溶解后，加氯化鋇液，生成白色沉淀，加入硝酸后，沉淀不溶解。

3.1.2顯色反應(yīng)原理是利用益母草堿中含有酚羥基與三氯化鐵反應(yīng)顯色。方法是樣品加水溶解，加入三氯化鐵振搖，溶液顯茶褐色。

3.2紫外分光光度法(U V) 鑒于益母草堿結(jié)構(gòu)中的共軛結(jié)構(gòu)，在200～400 nm的紫外區(qū)有兩個吸收峰，一般在217 nm和277 nm有最大吸收峰，但217 nm易受甲醇吸收干擾，277 nm沒有影響，所以選擇277 nm作為檢測波長。UV快速和精確，不需要貴重儀器，是實驗室簡單測定益母草堿的方法。

3.3高效液相色譜法(H P L C) 高效液相色譜法高效、高靈敏度、分析和載液速度快、樣品不被破壞等，是現(xiàn)代研究益母草堿測定常用方法。鞏長芹等［9］發(fā)現(xiàn)用酸性流動相測定益母草堿單體時只出現(xiàn)單一的峰。Zhu Q等［10］對益母草堿混懸液經(jīng)口服后，用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，檢測大鼠血漿中樣品的含量，這種方法簡便且靈敏度高，為益母草堿混懸液口服后的藥物代謝動力學(xué)研究提供幫助。

4　藥理作用

4.1對子宮作用益母草堿對子宮有興奮作用，明顯增加收縮力和作用時間。文獻(xiàn)報道益母草堿能顯著抑制藥物流產(chǎn)后大鼠子宮的出血量和出血時間［11］。靜脈注射益母草半分鐘后，出現(xiàn)子宮興奮，證明其劑量與強(qiáng)度成正相關(guān)。

4.2對血液系統(tǒng)作用實驗表明益母草堿能抗血小板聚集，降低動脈粥樣硬化進(jìn)程。劉新華等［12］報道益母草堿用于炎性血管疾病研究，通過抑制NF-kB信號通路和ROS產(chǎn)生發(fā)揮抗炎作用。另有報道益母草堿能改善微循環(huán)和紅細(xì)胞的變形能力，降低血液黏度來治療血淤癥。

4.3對心肌作用實驗表明益母草堿是從抗氧化、抗細(xì)胞凋亡和調(diào)節(jié)線粒體功等方面對心肌保護(hù)具有一定作用。另外其還能強(qiáng)化缺血預(yù)處理，對大鼠心肌再灌注的保護(hù)作用［13］。

4.4對腦部作用益母草堿對神經(jīng)毒素6-羥基多巴損傷的神經(jīng)細(xì)胞有保護(hù)和改善作用，益母草堿對大腦也有保護(hù)作用。Loh［14］發(fā)表在《Stroke》上的研究表明經(jīng)益母草堿預(yù)處理一周的腦缺血大鼠，在神經(jīng)行為學(xué)癥狀中能減少中風(fēng)引起梗死面積，而且增強(qiáng)腦組織抗氧化，提高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶的活性，降低自由基損傷保護(hù)缺血性損傷。實驗發(fā)現(xiàn)腦缺血能引起線粒體功能下降，但是益母草堿能保護(hù)線粒體功能。

4.5對前列腺作用劉紹龑等［15］發(fā)現(xiàn)益母草堿能顯著降低前列腺小鼠前列腺濕重和前列腺指數(shù)，減輕前列腺病理變化以及睪丸、附睪病理變化，同時益母草堿有保鉀利尿作用。

5　毒性研究

5.1急性毒性益母草堿能興奮呼吸中樞，之后麻醉中樞神經(jīng)；具有箭毒樣作用，肌肉松弛；有麥角堿樣作用，收縮子宮、擴(kuò)張小動脈、血壓下降；前益母草素可使纖維蛋白原和血黏度降低［16］。黃偉等［17］比較益母草不同炮制品95%乙醇熱回流提取物對小鼠急性毒性大小，發(fā)現(xiàn)鮮益母草急性毒性最大，酒炙益母草毒性最低，并通過酒炙益母草MTD得出益母草主要毒性成分是益母草總堿。

5.2亞急性毒性謝敏妍等［18］報道益母草總生物堿對肝功能和腎功能無明顯毒副作用，但大劑量服用益母草總堿對肝功能有潛在影響。羅毅等［19］也報道益母草總生物堿對小鼠肝和腎的亞急性毒性，大劑量能影響小鼠肝功能，對腎功能影響不明顯，提示小鼠肝臟比腎臟對益母草生物堿更敏感。

5.3靶器官毒性近些年來臨床報道益母草能引起藥物性腎損害，經(jīng)羅毅等研究報道益母草對動物的腎臟產(chǎn)生毒性，機(jī)制可能是脂質(zhì)過氧化的損傷。文章沒有發(fā)現(xiàn)益母草堿對腎損害的臨床報道和研究報告。

6　結(jié)語

益母草堿具有顯著改善微循環(huán)和抗血小板聚集、抗炎鎮(zhèn)痛、興奮子宮、保鉀利尿和保護(hù)心肌等功效。益母草堿是益母草中一種單體活性有效成分。由于僅存在于益母草中，全草中的含量較少，且提取分離工作量大、純度也不高，因此多采用全合成的方法得到益母草堿。有關(guān)益母草堿的研究取得了一定成果，對其開發(fā)成新型藥物有著廣闊的應(yīng)用前景。

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Research Surveyon Leonurlne

SONG Shaohe1， MIAO Mingsan2*
(1. Department of Pharmacy， The First Affi1iated Hospita1 of Henan University of TCM， Zhengzhou 450000， China；
2. Scientific Research Office， Henan University of TCM， Zhengzhou 450008， China)

Leonurine has effect on Promoting b1ood circu1ation for removing b1ood stasis and inducing diuresis for removing edema，which has imPortant in the treatment of benign Prostatic hyPerP1asia.The recent survey of 1eonurine was summarized，inc1uding PreParation and determination method，Physica1 and chemica1 ProPeries of bioactivity and toxicity，in order to seek further deve1oP-ment and aPP1ication of new information and ideas.

1eonurine；Physica1 and chemica1 ProPerties；PreParation and determination method；benign Prostatic hyPerP1asia；review；Chemistry of Chinese Materia Medica

10.3969/j.issn.1672-2779.2016.03.066

1672-2779（2016）-03-0141-03

國家自然科學(xué)基金項目（No：81173474）

miaomingsan@163.com

（本文編輯：蘇玲本文校對：張洪瑋2015-10-28）