王丹麗，馬珂，邢振楠，范冬如

(伊春林業(yè)科學(xué)院，黑龍江伊春153000)

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黑木耳LK4母種培養(yǎng)基優(yōu)化

王丹麗，馬珂，邢振楠，范冬如

(伊春林業(yè)科學(xué)院，黑龍江伊春153000)

通過對(duì)黑木耳 LK4 號(hào)菌株在 10種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)情況、包括萌發(fā)時(shí)間、菌絲顏色、菌絲密度、長(zhǎng)勢(shì)以及生長(zhǎng)速度等指標(biāo)進(jìn)行比較分析，通過spss統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析分析，得到最終篩選結(jié)果，結(jié)果表明，配方D(馬鈴薯200g，葡萄糖20g；柞樹葉50g)菌絲生長(zhǎng)的總體指標(biāo)優(yōu)于其它供試配方，是最適合黑木耳 LK4 母種菌絲體生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。

黑木耳；LK4；培養(yǎng)基篩選；菌絲生長(zhǎng)情況

隨著林區(qū)天然林保護(hù)工程的實(shí)施和木材采伐量的日益減少，食用菌生產(chǎn)作為林區(qū)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的替代產(chǎn)業(yè)，已經(jīng)逐步形成規(guī)模。 其中， 黑木耳在伊春林區(qū)食用菌產(chǎn)量構(gòu)成中占重要地位。 由于伊春生產(chǎn)的黑木耳品質(zhì)好，產(chǎn)量大，使其成為黑龍江省黑木耳生產(chǎn)重要基地之一。 但是， 隨著黑木耳栽培量的擴(kuò)大，母種質(zhì)量問題已成為林區(qū)職工關(guān)心的問題。 為此，筆者進(jìn)行了黑木耳母種培養(yǎng)基的優(yōu)化試驗(yàn)， 為黑木耳生產(chǎn)發(fā)展和資源利用提供科學(xué)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1供試菌種

林科 4 號(hào)(LK4)，由伊春林業(yè)科學(xué)院原生態(tài)食用菌研究所提供。

1.2培養(yǎng)基配方

A.馬鈴薯200g,葡萄糖20g,磷酸二氫鉀2g,硫酸鎂0.5g；

B.馬鈴薯200g，葡萄糖 20g，KH2PO42g，MgSO40.5g；

C.馬鈴薯200g,葡萄糖20g,玉米30g,磷酸二氫鉀2g,硫酸鎂0.5g；

D.馬鈴薯200g，葡萄糖20g，柞樹葉50 g；

E.馬鈴薯200g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀2g，硫酸鎂 0.5g，VB1 10mg，柞樹葉50g；

F.馬鈴薯200g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀3g，硫酸鎂 1.5g，VB1 10mg，柞樹葉50g；

G.馬鈴薯200g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀2g，硫酸鎂 0.5g，麩皮50g；

H.馬鈴薯200g,葡萄糖20g,玉米20g,VB110mg，柞樹葉50g;

I.馬鈴薯200g,葡萄糖20g,玉米30g,VB110mg，柞樹葉50g;

J.馬鈴薯200g,葡萄糖20g,玉米40g，VB110mg，柞樹葉50g。

以上各配方均含有瓊脂 20g，水 1000mL。麩皮要求無霉變，柞樹葉為干葉。 將麩皮、柞樹葉加到一定量的水中，煮沸 30min，用 8層紗布過濾，取其濾液。其它過程均按常規(guī)方法進(jìn)行。

1.3試驗(yàn)方法

按配方制備 10種培養(yǎng)基，自然 pH，分裝于20mm×200mm 試管，滅菌，擺斜面冷卻。無菌操作取供試菌株 3mm×3mm 大小的菌塊接入培養(yǎng)基斜面中央， 接種塊盡量要求一致。 每種培養(yǎng)基接種 5 支試管，然后置于 26℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每天要按時(shí)觀察、并記錄菌絲生長(zhǎng)狀況等。比較菌絲在不同的培養(yǎng)基上的萌發(fā)時(shí)間、菌絲顏色、長(zhǎng)勢(shì)，從中篩選出母種生長(zhǎng)較好的培養(yǎng)基配方。

2　結(jié)果與分析

2.1黑木耳 LK4 在 10 種培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)狀況

表1 表明,黑木耳 LK4 在供試的 10種培養(yǎng)基中，從總體菌絲長(zhǎng)勢(shì)來看，配方D的生長(zhǎng)狀況最好，菌絲潔白、濃密，菌落豐厚，邊緣整齊，生長(zhǎng)速度快；其次是配方F和I； 配方J從密度和長(zhǎng)勢(shì)衡量， 稍次于配方F和I；配方A和B的菌絲纖細(xì)、淡白，生長(zhǎng)較密，但生長(zhǎng)速度較慢；配方C的菌絲顏色淺白，密度與配方A和E基本相同，長(zhǎng)勢(shì)較弱；配方G的菌絲細(xì)弱，顏色淺白，生長(zhǎng)較稀疏，且粗細(xì)不均；配方H菌絲長(zhǎng)勢(shì)較弱；配方菌絲長(zhǎng)勢(shì)最弱，菌絲細(xì)弱無力，菌落小而稀薄，且均在接種后 10 d 左右出現(xiàn)中心點(diǎn)老化現(xiàn)象。

2.2黑木耳LK4在10種培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)速度

菌絲生長(zhǎng)速度見表2；應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析在方差齊性檢驗(yàn)后進(jìn)行，經(jīng)F檢驗(yàn)，見表3；用Duncan法進(jìn)行不同配方上菌絲長(zhǎng)速之間的多重比較，結(jié)果見表4。

表1　黑木耳LK7在不同培養(yǎng)基中生長(zhǎng)狀況

注：密度：+稀疏；++較稀疏；+++較密；++++濃密長(zhǎng)勢(shì)：+弱；++較弱；+++一般；++++強(qiáng)。

表2　黑木耳LK7菌絲在10種培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)速度　mm·d-1

表3　黑木耳LK7菌絲在10種培養(yǎng)基上日生長(zhǎng)速度方差分析

根據(jù)表3,F=88.146，Sig<0.05，所以不同配方的菌絲生長(zhǎng)差異顯著。

表4　黑木耳LK4菌絲在10種培養(yǎng)基中生長(zhǎng)速度的多重比較

多重比較表明，配方F和配方D上的菌絲生長(zhǎng)速度顯著快于其它配方，且配方F與配方D之間的差異不顯著。

3　結(jié)論

從菌絲生長(zhǎng)速度看，配方D﹥配方F﹥配方I﹥配方J。綜合對(duì)比，黑木耳LK4在供試配方D上表現(xiàn)出了較強(qiáng)的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)，同時(shí)各重復(fù)之間的菌絲生長(zhǎng)速度較一致，因此，適合生產(chǎn)上使用。其次是配方I，可以考慮菌種保存。配方F和J長(zhǎng)勢(shì)雖然較好，但菌絲生長(zhǎng)速度較慢。其它配方菌絲生長(zhǎng)速度慢，長(zhǎng)勢(shì)弱，不值得推廣應(yīng)用。

[1]黃年來.中國(guó)食用菌百科[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1993.

[2]張金霞.食用菌菌種生產(chǎn)規(guī)范技術(shù)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社, 2007.

[3]張德巖，范冬茹，王丹麗，等.黑木耳母種培養(yǎng)基優(yōu)化試驗(yàn)[J]. 中國(guó)食用菌, 2011(6).

2016-06-16

王丹麗，碩士，工程師，從事森林食品研究，E-mail: 47291349@qq.com。

S646.6

A

DOI.:10.13268/j.cnki.fbsic.2016.05.009