孫金輝，范　澤，金東華，程鎮(zhèn)燕，白東清，喬秀亭

（天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)學(xué)院，天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點(diǎn)試驗(yàn)室，天津西青 300384）

飼料糖水平與投喂頻率對(duì)鯉生長性能、腸道消化能力及肝功能的影響

孫金輝，范澤△，金東華，程鎮(zhèn)燕，白東清，喬秀亭*

（天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)學(xué)院，天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點(diǎn)試驗(yàn)室，天津西青 300384）

為研究飼料糖水平（5%、10%、20%）和投喂頻率（2、4次/d）及其交互作用對(duì)鯉生長、腸道消化能力和肝功能的影響，本試驗(yàn)擬選用平均體重為（55.37±3.55）g的鯉為試驗(yàn)對(duì)象，采用3×2雙因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，在池塘浮式網(wǎng)箱（1m×1m×1.5m）中進(jìn)行養(yǎng)殖試驗(yàn)。養(yǎng)殖周期為8周。結(jié)果表明：投喂頻率對(duì)鯉的增重率、特定增長率、蛋白質(zhì)效率及肥滿度影響顯著（P＜0.05）；投喂頻率、飼料糖水平及其交互作用均對(duì)肝體比影響顯著（P＜0.05）。在5%和10%糖水平組中，4次/d投喂組的增重率較2次/d投喂組分別提高了33.4%和44.9%，4次/d投喂組的蛋白質(zhì)效率較2次/d投喂組分別提高了33.6%和45.1%（P＜0.05）。在10%糖水平組中，4次/d投喂組的特定生長率較2次/d投喂組提高了30.7%（P＜0.05），餌料系數(shù)較2次/d投喂組降低了31.3%（P＜0.05）。投喂頻率對(duì)前腸蛋白酶、中腸淀粉酶及中腸脂肪酶活性影響顯著（P＜0.05），飼料糖水平對(duì)中腸蛋白酶、中腸淀粉酶活性影響顯著（P＜0.05）。在10%糖水平組中，4次/d投喂組的中腸蛋白酶活性顯著高于投喂頻率為2次/d投喂組（P＜0.05）。飼料糖水平和投喂頻率對(duì)鯉血清和肝臟中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶及谷草轉(zhuǎn)氨酶影響均不顯著（P＞0.05）。在同一糖水平下，血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶均隨投喂頻率提高而降低（P＜0.05）。綜合分析，從降低飼料成本，提升魚體生長性能、消化能力及肝功能的角度出發(fā)，在固定日投喂率的情況下，投喂頻率為4次，飼料糖水平為10%為最佳選擇。

糖水平；投喂頻率；生長；消化；肝功能

［Abstract］A 8-week 3×2 two-factorial experiment was conducted to investigate the effects of dietary carbohydrate levels（5%，10%，20%）and feeding frequencies（fourth daily and twice daily）on the growth，digestion and liver function of common carp with initial average weight of（55.37±3.55）g，cultured in floating net cages.Three replicates with 180 common carp were randomly allotted to one treatment with combination of dietary carbohydrate level and feeding frequency in a complete randomized design.The results showed that the weight gain ratio（WGR），special growth ratio（SGR），protein efficient ratio（PER），hepatosomatic（HSI）and condition factor（CF）were significantly affected by feeding frequency（P＜0.05）.Compared with fish fed twice daily at 5%and 10%dietary carbohydrate levels，WGR of fish fed fourth daily at 5% and 10%dietary carbohydrate levels was increased by 33.4%and 44.9%，respectively，and PER was increased by 33.6% and 45.1%，respectively（P＜0.05）.At 10%dietary carbohydrate level group，SGR of fish fed twice daily was increased by 30.7%and（P＜0.05），and feed conversion rate（FCR）was decreased by 31.3%（P＜0.05）.Feeding frequency had significant effect on activities of protease of forecgut，amylase of midgut and lipase of midgut，and dietary carbohydrate levels had significant effect on activities of protease and amylase of midgut（P＜0.05）.At 10%dietary carbohydrate level group，activities of protease of fish fed fourth daily was significantly higher than fish fed twice daily.Feeding frequency and carbohydrate leve had no significant effect on liver and serum alanine transaminase（ALT）and aspartate transaminase（AST）level（P＞0.05）.Regardless of dietary carbohydrate level，higher feeding frequency could lead to lower serum ALT and AST level.Combined the results of this study and the practice of common carp production，the common carp should be fed at 4 meal/d，and the carbohydrate content of the dietary can be appropriately increased to 10%.

［Key words］carbohydrate level；feeding frequencies；growth performance；digestion；hepatic function

糖類作為營養(yǎng)素對(duì)動(dòng)物生長有著重要意義。但與畜禽動(dòng)物相比，“先天糖尿病體質(zhì)”的魚類并不能夠很好地利用飼料中作為供能物質(zhì)的糖類。因此，如何充分有效地提高魚類對(duì)糖的利用能力成為魚類營養(yǎng)研究的重要課題。投喂頻率與實(shí)際養(yǎng)殖生產(chǎn)密不可分。合理的投喂頻率，在一定程度上能夠提高魚體生長速度，提高飼料的轉(zhuǎn)化率，改善魚體生化成分，提高消化酶的活力，減少殘餌和代謝廢物對(duì)于環(huán)境的污染（何吉祥等，2014；孫瑞健等，2013）。

國內(nèi)外有關(guān)鯉飼料中糖水平和養(yǎng)殖生產(chǎn)實(shí)踐中投喂頻率對(duì)其生長的影響已有較多的報(bào)道，但大都是單因素研究 （鄧志武，2015；李晉南等，2015），缺少將兩者結(jié)合探討對(duì)其消化能力，肝功能及糖利用能力的相關(guān)研究。本試驗(yàn)擬通過研究飼料糖水平和投喂頻率之間的交互作用對(duì)鯉生長、消化能力、肝功能及糖代謝能力的影響，以確定不同投喂頻率下鯉飼料的合適糖水平，同時(shí)也為低氮飼料的開發(fā)和降低養(yǎng)殖成本提供理論指導(dǎo)和實(shí)踐基礎(chǔ)。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)動(dòng)物及飼料試驗(yàn)于天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)學(xué)院產(chǎn)學(xué)研基地的養(yǎng)殖池塘中開展，試驗(yàn)用鯉于2015年7月購自天津換新水產(chǎn)良種場，馴化時(shí)間一周，使用基地提供的普通鯉飼料進(jìn)行馴化。

試驗(yàn)飼料為含3種不同小麥淀粉水平的并設(shè)有3個(gè)糖水平的3種不同蛋白質(zhì)和糖含量的等脂、等能飼料，在蛋白質(zhì)含量較低的處理組中通過增加糖的含量達(dá)到等能效果。飼料組成與營養(yǎng)水平見表1。

表1　飼料組成及營養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)采用3×2雙因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，試驗(yàn)飼料采用表1中配制的3種糖水平梯度的配合飼料，投喂頻率設(shè)定為 2次/d（8∶00、17∶00）和 4 次/d（8∶00、11∶30、14∶00、17∶00），每個(gè)處理設(shè)置 3個(gè)重復(fù)。

暫養(yǎng)1周后，試驗(yàn)魚饑餓24 h，挑選出規(guī)格一致、無病的鯉隨機(jī)分組。試驗(yàn)在池塘網(wǎng)箱進(jìn)行，網(wǎng)箱規(guī)格為1 m×1 m×1.5 m。試驗(yàn)魚初重 （55.37± 3.35）g，每網(wǎng)箱放養(yǎng)60尾。整個(gè)試驗(yàn)周期均采用固定投喂率的方法進(jìn)行。試驗(yàn)期間池水水溫為26.5～30.5℃，溶解氧含量在6 mg/L以上。

1.3樣本收集與分析8周（2015年8月2日至9月27日）生長試驗(yàn)結(jié)束后，試驗(yàn)魚饑餓 24 h后，計(jì)數(shù)并稱重。每處理組取 15尾魚，稱重后量體長，計(jì)算肥滿度；每3尾魚的血液為一個(gè)樣本，于4℃、4500 r/min離心20 min，取血清備用；解剖得到肝胰臟、前腸、中腸和后腸，肝胰臟分別稱重，用于計(jì)算肝體指數(shù)。

粗酶液的制備：肝臟、前腸、中腸及后腸在冰生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙?jiān)嚫?，用移液管加?倍于組織塊質(zhì)量的預(yù)冷勻漿介質(zhì)（0.85%生理鹽水），在勻漿器中進(jìn)行勻漿，4℃、4500 r/min離心15 min，取上清液備用。

1.4指標(biāo)測定

1.4.1飼料營養(yǎng)成分測定飼料樣品常規(guī)營養(yǎng)成分分析采用國際標(biāo)準(zhǔn)方法，即分別用常壓恒溫烘干法（GB/T 5009.3-2010）、杜馬斯燃燒法（GB/T 24318-2009）、索氏抽提法（GB/T 5009.6-2010）和馬弗爐550℃高溫灰化法 （GB/T 5009.4-2010）測水分、蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分含量。

1.4.2生長性能指標(biāo)測定生長試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)，測定試驗(yàn)魚體長和體重，計(jì)算存活率、增重率、特定生長率、餌料系數(shù)、蛋白質(zhì)效率、肝體指數(shù)及肥滿度。公式如下：

增重率/%=（終末體重-初始體重）/初始體重× 100；

特定生長率/（%/d）=（ln終末體重-ln初始體重）/養(yǎng)殖天數(shù)×100；

餌料系數(shù)=餌料攝取量/凈增重；

肝體指數(shù)/%=100×肝胰臟重/魚體總重；

蛋白質(zhì)效率=（終末體重-初始體重）/（飼料攝入量干重×飼料粗蛋白質(zhì)含量）；

肥滿度/%=終末體重/試驗(yàn)?zāi)~體長3×100。

1.4.3酶活力的測定酶活力檢測均采用商業(yè)試劑盒（南京建成生物工程研究所），每個(gè)樣品每種酶活力均重復(fù)測定3次，具體步驟按說明書的描述進(jìn)行。蛋白酶采用福林酚法測定。脂肪酶（LPS）采用比濁法測定。淀粉酶采用碘-淀粉比色法進(jìn)行測定。谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）及谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）采用賴氏法測定。

1.5數(shù)據(jù)分析采用Excel軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步分析，再采用SPSS16.0對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行雙因素方差分析。當(dāng)P＜0.05時(shí)，差異顯著，則進(jìn)行鄧肯氏多重比較；當(dāng)兩個(gè)因素存在交互作用時(shí)，則固定一因素，對(duì)另一因素進(jìn)行鄧肯氏多重比較。數(shù)據(jù)均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2　結(jié)果與分析

2.1飼料糖水平和投喂頻率對(duì)鯉生長及飼料利用的影響由表2可見，經(jīng)過8周的生長試驗(yàn)，投喂頻率對(duì)鯉的增重率、特定增長率、蛋白質(zhì)效率影響顯著 （P＜0.05），對(duì)鯉的餌料系數(shù)影響不顯著（P＞0.05）。飼料糖水平對(duì)鯉的增重率、特定生長率、餌料系數(shù)、蛋白質(zhì)效率影響均不顯著 （P＞0.05）。投喂頻率和飼料糖水平的交互作用對(duì)鯉的增重率、特定生長率、餌料系數(shù)、蛋白質(zhì)效率影響均不顯著（P＞0.05）。

表2　飼料糖水平和投喂頻率對(duì)鯉生長及飼料利用的影響

在5%和10%糖水平組中，4次/d投喂組的增重率較2次/d投喂組分別提高了33.4%和44.9% （P＜0.05），4次/d投喂組的蛋白質(zhì)效率較2次/d投喂組分別提高了33.6%和45.1%（P＜0.05）。在10%糖水平組中，4次/d投喂組的特定生長率較2 次/d投喂組提高了30.7%（P＜0.05），且4次/d投喂組的餌料系數(shù)較2次/d投喂組降低了31.3%（P＜0.05）。在4次/d投喂組中，隨飼料糖水平提高，增重率、特定生長率與蛋白質(zhì)效率均呈下降趨勢，餌料系數(shù)則呈升高趨勢，但各組之間并無顯著差異（P＞0.05）。而在2次/d投喂組中，增重率、特定生長率與蛋白質(zhì)效率均呈先下降后上升的趨勢，餌料系數(shù)則呈先升高后下降的趨勢，但各組之間并無顯著差異（P＞0.05）。

2.2飼料糖水平和投喂頻率對(duì)鯉形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響由表3可見，飼料糖水平和投喂頻率均對(duì)肝體比產(chǎn)生顯著影響（P＜0.05）。肥滿度僅受到投喂頻率的顯著影響（P＜0.05）。飼料糖水平和投喂頻率對(duì)肝體比的交互作用顯著（P＜0.05）。

表3　飼料糖水平和投喂頻率對(duì)鯉形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響

在5%和10%糖水平組中，4次/d投喂組的肝體比較2次/d投喂組分別降低了34.4%和23.3% （P＜0.05）。在10%糖水平組中，4次/d投喂組的肥滿度較2次/d投喂組提高了19.5%（P＜0.05）。在4次/d投喂組中，隨飼料糖水平提高，肝體比及肥滿度均呈升高趨勢，均在20%糖水平組達(dá)到最大值，其中肝體比較5%糖水平組提高了47.5% （P＜0.05）。而在2次/d投喂組中，肝體比呈先升高后下降的趨勢，肥滿度呈升高趨勢，但各組之間并無顯著差異（P＞0.05）。

2.3飼料糖水平和投喂頻率對(duì)鯉腸道消化能力的影響

2.3.1飼料糖水平和投喂頻率對(duì)鯉腸道中蛋白酶活性的影響由表4可見，投喂頻率對(duì)前腸蛋白酶活性影響顯著（P＜0.05），對(duì)中腸、后腸蛋白酶活性影響不顯著 （P＞0.05）。飼料糖水平對(duì)中腸蛋白酶活性影響顯著（P＜0.05），對(duì)前腸、后腸蛋白酶活性影響不顯著（P＞0.05）。投喂頻率和飼料糖水平的交互作用對(duì)前腸、中腸、后腸蛋白酶活性影響均不顯著（P＞0.05）。

表4　飼料糖水平和投喂頻率對(duì)鯉腸道中蛋白酶活性的影響

在10%糖水平組中，4次/d投喂組的中腸蛋白酶活性顯著高于2次/d投喂組 （P＜0.05），而在5%和20%糖水平組中，4次/d投喂組的中腸蛋白酶活性與2次/d投喂組的差異不顯著（P＞0.05）。在各飼料糖水平下，4次/d投喂組的前腸及后腸蛋白酶活性均高于2次/d投喂組，但并無顯著差異（P＞0.05）。在兩個(gè)投喂組中，隨飼料糖水平提高，前腸、中腸及后腸蛋白酶活性均呈先升高后下降的趨勢，但各組之間并無顯著差異（P＞0.05）。

2.3.2飼料糖水平和投喂頻率對(duì)鯉腸道中淀粉酶活性的影響由表5可見，飼料糖水平和投喂頻率均對(duì)中腸淀粉酶活性影響顯著（P＜0.05），對(duì)前腸、后腸淀粉酶活性影響均不顯著（P＞0.05）。飼料糖水平和投喂頻率對(duì)前腸、中腸、后腸淀粉酶活性的交互作用均不顯著（P＞0.05）。

表5　飼料糖水平和投喂頻率對(duì)鯉腸道中淀粉酶活性的影響

在各飼料糖水平下，4次/d投喂組的前腸、中腸及后腸淀粉酶活性均高于2次/d投喂組，但并無顯著差異（P＞0.05）。在兩個(gè)投喂組中，隨飼料糖水平提高，前腸、中腸及后腸淀粉酶活性均呈先升高后下降的趨勢，但各組之間并無顯著差異（P＞0.05）。

2.3.3飼料糖水平和投喂頻率對(duì)鯉腸道中脂肪酶活性的影響由表6可見，投喂頻率對(duì)中腸脂肪酶活性的影響顯著（P＜0.05），對(duì)前腸、后腸脂肪酶活性的影響均不顯著（P＞0.05）。飼料糖水平對(duì)前腸、中腸及后腸脂肪酶活性影響均不顯著 （P＞0.05）。飼料糖水平和投喂頻率對(duì)前腸、中腸及后腸脂肪酶活性的交互作用均不顯著（P＞0.05）。

表6　飼料糖水平和投喂頻率對(duì)鯉腸道中脂肪酶活性的影響

在5%糖水平組中，4次/d投喂組的中腸脂肪酶活性顯著高于2次/d投喂組 （P＜0.05），而在10%和20%糖水平組中，4次/d投喂組的中腸脂肪酶活性與2次/d投喂組的差異不顯著（P＞0.05）。在每個(gè)飼料糖水平下，4次/d投喂組的前腸及后腸脂肪酶活性均高于2次/d投喂組，但無顯著差異（P＞0.05）。在兩個(gè)投喂組中，隨飼料糖水平提高，前腸、中腸及后腸脂肪酶活性均呈先升高后下降的趨勢，但各組之間并無顯著差異（P＞0.05）。

2.4飼料糖水平和投喂頻率對(duì)鯉血清和肝臟中轉(zhuǎn)氨酶活性的影響由表7可見，飼料糖水平與投喂頻率對(duì)血清及肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性的影響均不顯著（P＞0.05），兩者也無交互作用。

在各飼料糖水平下，4次/d投喂組的血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均低于2次/d投喂組，但并無顯著差異（P＞0.05），而4次/d投喂組的肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均高于2次/d投喂組，但并無顯著差異（P＞0.05）。在兩個(gè)投喂組中，隨飼料糖水平提高，血清及肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均呈下降趨勢，但各組之間并無顯著差異（P＞0.05）。

表7　飼料糖水平和投喂頻率對(duì)鯉血清及肝臟中轉(zhuǎn)氨酶活力的影響

3　討論

3.1飼料糖水平和投喂頻率對(duì)鯉生長及飼料利用的影響無論在飽食投喂或者固定日投喂率的條件下，均有研究證明適宜的增加投喂頻率可以促進(jìn)魚體生長及飼料利用能力 （Silva等，2007）。但在本試驗(yàn)條件下，飽食投喂法無法確定是投喂頻率還是投喂率與糖水平產(chǎn)生交互作用而影響魚體生長及飼料利用能力，而固定日投喂率可以解決這一問題。本研究顯示，在固定日投喂率的條件下，投喂頻率對(duì)鯉增重率、特定增重率及蛋白質(zhì)效率均有顯著影響，除20%糖水平組外，4次/d投喂組鯉的增重率與蛋白質(zhì)效率均顯著高于2次/d投喂組。蛋白質(zhì)效率的顯著升高說明糖水平一定時(shí)，投喂頻率的增加能夠促進(jìn)魚體對(duì)飼料中蛋白質(zhì)的吸收利用，這也從側(cè)面證實(shí)了適宜的投喂頻率利于糖類發(fā)揮對(duì)蛋白質(zhì)的節(jié)約作用。與之相反，餌料系數(shù)并未受到投喂頻率的顯著影響，但從研究結(jié)果可以看出，隨投喂頻率增加餌料系數(shù)呈下降趨勢，說明投喂頻率可以提高鯉的飼料轉(zhuǎn)化率，這與孫瑞?。?013）對(duì)大黃魚、Grayton和Beamish （1977）對(duì)虹鱒的研究并不一致，這種差異可能是由于試驗(yàn)魚不同造成的。與前兩者不同，鯉屬于無胃魚類（Omar和Gunther，1987），其消化吸收主要通過腸道，食物在體內(nèi)停留時(shí)間較短，較高投喂頻率相對(duì)增加了食物在體內(nèi)停留時(shí)間，增加了魚體對(duì)食物的消化吸收，進(jìn)而提高了食物的利用率。

本研究發(fā)現(xiàn)，一方面，在三個(gè)飼料糖水平組中，4次/d投喂組鯉增重率、特定增重率及蛋白質(zhì)效率均高于2次/d投喂組。魚類對(duì)于飼料糖吸收利用的關(guān)鍵就在于2 h內(nèi)的吸收百分率（Hung等，1989）。本試驗(yàn)在固定日投喂率的前提下，適宜增加投喂頻率，有效控制攝食速度而延緩飼料糖的吸收速度，提升鯉充分吸收利用高糖飼料的能力，進(jìn)而促進(jìn)鯉的生長及飼料利用能力，實(shí)現(xiàn)在低蛋白水平下飼料糖對(duì)蛋白質(zhì)的節(jié)約效應(yīng)。但另一方面，在兩個(gè)投喂組中，隨糖水平提高鯉的生長與飼料利用率均呈下降趨勢，但差異并不顯著，這說明鯉對(duì)高糖飼料與低糖飼料的利用能力雖不存在顯著差異，但飼料中糖水平的升高還是會(huì)在一定程度上阻礙鯉魚的生長及飼料利用能力。此結(jié)果與崔超（2014）在投飼頻率和糖水平對(duì)俄羅斯鱘幼魚生長、肝臟糖代謝及血液生理生化指標(biāo)影響的研究中得出的結(jié)果一致。如何在適宜的投喂頻率下提高魚體對(duì)飼料糖的利用能力有待于進(jìn)一步深入研究。

3.2飼料糖水平和投喂頻率對(duì)鯉形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響魚類肝體比（HSI）被視為對(duì)長期和短期營養(yǎng)方式均很敏感的指標(biāo)，一般作為肝臟或者內(nèi)臟中脂肪或者糖原蓄積的表觀指標(biāo)（Peres和Oliva-Teles，1999）。本研究發(fā)現(xiàn)，飼料糖水平和投喂頻率及其交互作用均對(duì)鯉的肝體比產(chǎn)生了顯著影響。一方面，除20%糖水平組外的兩組，4次/d投喂組鯉肝體比均顯著低于2次/d投喂組。另一方面，在兩個(gè)投喂組中，鯉肝體比整體呈上升趨勢，其中在4次/d投喂組中，5%糖水平組鯉肝體比顯著低于20%糖水平組。方魏（2010）在黃顙魚的研究中也發(fā)現(xiàn)，黃顙魚肝體比隨投喂頻率增加而降低。肥滿度被視為魚類生物學(xué)研究中衡量生長和攝食強(qiáng)度等健康狀況的指標(biāo)，其變化也預(yù)示著魚體對(duì)飼料營養(yǎng)的利用情況（Froese，2006）。本研究發(fā)現(xiàn)，投喂頻率對(duì)鯉的肥滿度產(chǎn)生了顯著影響。在三個(gè)飼料糖水平組中，4次/d投喂組鯉肥滿度均高于2次/d投喂組，其中4次/d投喂組中的10%糖水平組和20%糖水平組肥滿度顯著高于2次/d投喂組中的5%糖水平組和10%糖水平組。在兩個(gè)投喂組中，鯉肥滿度均呈上升趨勢，這與崔超等（2014）對(duì)俄羅斯鱘幼魚的研究結(jié)果一致。綜合分析肝體比與肥滿度變化情況可以看出，在固定日投喂率的前提下，適宜增加投喂頻率可降低機(jī)體內(nèi)臟的比例，促進(jìn)魚體體長的增長，這說明從表觀來看魚體獲得良好的肥滿度并不是因?yàn)檩^高的投喂頻率使飼料蛋白質(zhì)或糖轉(zhuǎn)變?yōu)橹净蛘咛窃罘e在肝臟或內(nèi)臟中，而是因?yàn)橥段诡l率的增加提升了鯉充分吸收利用高糖飼料的能力，進(jìn)而提高飼料轉(zhuǎn)化率（Omar和Gunther，1987），也從側(cè)面印證了增加投喂頻率有利于飼料糖發(fā)揮對(duì)蛋白質(zhì)的節(jié)約作用。但在固定投喂頻率及投喂率的條件下，隨糖水平升高鯉肝體比及肥滿度呈升高趨勢，說明較多的飼料蛋白質(zhì)或糖轉(zhuǎn)變?yōu)樾罘e在肝臟或內(nèi)臟中的脂肪或者糖原。

3.3飼料糖水平和投喂頻率對(duì)鯉腸道消化能力的影響鯉屬于典型的無胃魚類，其消化系統(tǒng)主要為肝胰腺和腸道，且其對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收主要在腸道中進(jìn)行（畢冰等，2011），所以本研究對(duì)試驗(yàn)鯉腸道中主要消化酶的活性變化進(jìn)行了探討。魚類消化酶主要包含蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等，這些酶的活性反映了魚類的消化能力，影響魚類對(duì)三大營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用和對(duì)能量的獲得效率（李希國等，2005）。本研究發(fā)現(xiàn)，飼料糖水平和投喂頻率均對(duì)消化酶在一定程度上產(chǎn)生了顯著影響，但兩者對(duì)鯉的腸道消化能力無顯著的交互作用。一方面，在各飼料糖水平下，4次/d投喂組的前腸、中腸及后腸的蛋白酶活性均高于2次/d投喂組，而淀粉酶及脂肪酶活性則呈相反的趨勢，其中投喂頻率的改變顯著影響了前腸蛋白酶、中腸淀粉酶及中腸脂肪酶的活性。上述研究表明，在固定投喂率的條件下，投喂頻率的適宜增加會(huì)產(chǎn)生一定的限食作用，在此條件下魚體會(huì)通過促進(jìn)消化酶的分泌或提升消化酶活力等方式，以實(shí)現(xiàn)在有限食物條件下對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的充分吸收。本研究中腸道蛋白酶活性隨投喂頻率的增加而增強(qiáng)的結(jié)果佐證了這一結(jié)論，也從側(cè)面印證了增加投喂頻率有利于飼料糖發(fā)揮對(duì)蛋白質(zhì)的節(jié)約作用。上述結(jié)論與崔超等（2014）在投飼頻率對(duì)俄羅斯鱘幼魚消化酶活力影響的研究中得出的結(jié)論存在相似之處，而不同之處就在于俄羅斯鱘幼魚肝臟淀粉酶及消化酶活性隨投喂頻率的增加呈上升趨勢，本研究與之相反，所選試驗(yàn)魚種的食性差異可能是造成上述不同的主要原因。另一方面，在兩個(gè)投喂組中，隨飼料糖水平的提高，前腸、中腸及后腸的蛋白酶、淀粉酶及脂肪酶活性均呈先升高后降低的趨勢，其中飼料糖水平對(duì)中腸蛋白酶與淀粉酶活性產(chǎn)生了顯著影響，均以10%糖水平組顯著高于20%糖水平組。上述結(jié)論與王猛強(qiáng)等（2015）在對(duì)大黃魚及高梅等（2006）在對(duì)南方鲇的研究中發(fā)現(xiàn)的淀粉酶對(duì)飼料糖水平改變存在相對(duì)保守性的結(jié)論并不一致，上述差異可能是由于試驗(yàn)魚種的食性、生長階段、飼料中糖的來源等差異造成的。

3.4飼料糖水平和投喂頻率對(duì)鯉血清和肝臟中轉(zhuǎn)氨酶活性的影響本研究發(fā)現(xiàn)，飼料糖水平與投喂頻率對(duì)血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均未產(chǎn)生顯著影響，兩者也無交互作用，這說明飼料糖水平及投喂頻率的改變并未使魚體受到營養(yǎng)不良或者脅迫作用，肝臟受損程度并未加劇。一方面，在各飼料糖水平下，4次/d投喂組的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均低于2次/d投喂組，但差異并不顯著；另一方面，在兩個(gè)投喂組中，隨飼料糖水平的提高，血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均呈降低趨勢，但各組之間差異并不顯著，上述結(jié)果與孫瑞健等（2013）對(duì)大黃魚的研究結(jié)果并不一致，原因可能是由于典型雜食性魚類鯉與肉食性魚類大黃魚對(duì)于飼料糖的利用能力存在差異。在正常情況下血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性較低，其主要功能是參與肝臟組織中的氨基酸代謝，負(fù)責(zé)將特定氨基酸的一個(gè)氨基轉(zhuǎn)移到另外一個(gè)氨基酸上（Barcellos等，2004）。本研究發(fā)現(xiàn)，在各飼料糖水平下，4次/d投喂組的肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均高于2次/d投喂組，但差異并不顯著，這說明投喂頻率的適宜增加可以在一定程度上提升魚體對(duì)于飼料中蛋白質(zhì)的利用能力，從側(cè)面也證實(shí)了增加投喂頻率能夠促進(jìn)糖對(duì)蛋白質(zhì)的節(jié)約效應(yīng)；在兩個(gè)投喂組中，隨飼料糖水平的提高，肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均呈降低趨勢，但各組之間差異并不顯著，這說明魚體肝臟的氨基酸代謝會(huì)根據(jù)飼料中蛋白質(zhì)水平或飼料中蛋白質(zhì)糖比例作出適應(yīng)性調(diào)整，這與孫瑞健等（2013）對(duì)大黃魚、Stone等（2003）對(duì)銀鱸魚的研究結(jié)果一致。

4　結(jié)論

綜合分析得出，鯉的飼料糖水平應(yīng)隨著投喂頻率的變化而做出適應(yīng)性調(diào)整?？紤]到降低飼料成本，改善魚體生長性能、消化能力及肝功能的角度出發(fā)，在固定日投喂率的條件下，投喂頻率為4次，飼料糖水平為10%時(shí)為最佳選擇。

［1］畢冰，孫中武，肖曉文，等.鯉、鰱、鳙、草魚消化道消化酶種類和活性的比較研究［J］.水產(chǎn)學(xué)雜志，2011，2：17～20.

［2］崔超.光照、飼料糖水平和投喂策略對(duì)俄羅斯鱘生長影響的研究：［碩士學(xué)位論文］［D］.上海：華東師范大學(xué)，2014.

［3］崔超，禹娜，龍麗娜，等.投飼頻率對(duì)俄羅斯鱘幼魚生長、消化酶活力和氨氮排泄的影響［J］.海洋漁業(yè)，2014，01：35～43.

［4］鄧志武.投喂頻率對(duì)福瑞鯉幼魚攝食與生長的影響［J］.福建水產(chǎn)，2015.37 （1）：68～72.

［5］高梅，羅毅平，曹振東.飼料碳水化合物對(duì)南方鲇（Silurus meridionalis Chen）幼魚消化酶活性的影響［J］.西南師范大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2006，31 （2）：119～123

［6］何吉祥，崔凱，徐曉英，等.投喂頻率對(duì)異育銀鯽高糖、高脂飼料利用的影響［J］.動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，2014，6：1698～1705.

［7］方巍.黃顆魚攝食和投喂策略的研究：［碩士學(xué)位論文］［D］.武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2010.

［8］李希國，李加兒，區(qū)又君.黃鰭鯛主要消化酶活性在消化道不同部位的比較研究［J］.海洋水產(chǎn)研究，2005，26（5）：34～41.

［9］李晉南，徐奇友，王常安，等.不同糖及糖水平對(duì)松浦鏡鯉GH/IGF～I(xiàn)基因表達(dá)和魚體組成的影響［J］.上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，4：489～495.

［10］孫瑞健，張文兵，徐瑋，等.飼料蛋白質(zhì)水平與投喂頻率對(duì)大黃魚生長、體組成及蛋白質(zhì)代謝的影響［J］.水生生物學(xué)報(bào)，2013，2：281～289.

［11］王猛強(qiáng)，黃文文，周飄蘋，等.不同蛋白質(zhì)和小麥淀粉水平對(duì)大黃魚生長性能、糖酵解和糖異生關(guān)鍵酶活性的影響 ［J］.水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2015，39（11）：1690～1700.

［12］Barcellos L J G，Kreutz L C，de Souza C，et al.Hemato-logical changes in jundiá（Rhamida quelen Quoy and Gai-mard Pimelodidae）after acute and chronic stress caused by usual aquacultural management，with emphasis on immuno-suppressive effects［J］.Aquaculture，2004，237（1-4）：229～236.

［13］Froese R.Cube law condition factor and weight-length relationships：history，meta-analysisandrecommendations［J］.JournalofApplied Ichthyology，2006，22（4）：241～253.

［14］Grayton B D，Beamish F W H.Effects of feeding frequency on food intake，growth and body composition of rainbow trout（Salmo galrdnera）［J］. Aquaculture，1977，11（2）：159～172.

［15］Hung S S O，F(xiàn)ynn-Aikins K F，Lutes P B，et al.Ability of juvenile white sturgeon（Acipenser transmontanus）to utilize different carbohy-drate source［J］. J.Nutrition.，1989，119：727～733.

［16］Omar E.A.Gunther K.D..Studies on feeding of mirror carp（Cyprinus carpio L）in intensive aquaculture［J］.J Animal Nutrition，1987，57：80～172.

［17］PeresH，Oliva-TelesA.Effectofdietarylipidlevelongrowth performance and feed utilization by European seabass juveniles Dicentrarchus labrax［J］Aquaculture，1999，179（1）：325～334

［18］Silva C R，Gomes L C，Brandao F R.Effect of feeding rate and frequency on tarnbaqui（Colossoma macropomum）growth，production and feeding costs during the first growth phase in cages［J］.Aquaculture，2007，264（1-4）：135～139.

［19］Stone D A，Allan G L，Anderson A J.Carbohydrate utilization by juvenile silver perch，Bidyanus bidyanus（Mitchell）.III.The protein-sparing effect of wheat starch based carbohydrates［J］.Aquaculture Research，2003，34（2）：123～134.■

S963

A

1004-3314（2016）11-0029-07

10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.20161108

國家自然科學(xué)基金（31402313）；天津市科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目（13ZCZDNC00900）

△與第一作者同等貢獻(xiàn)