魏　軍，程萬輝，孫容非，王建明，李紅艷（甘肅省莊浪縣畜牧獸醫(yī)局，744699）

豬瘟活疫苗、豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗最佳免疫程序確定試驗

魏軍，程萬輝，孫容非，王建明，李紅艷
（甘肅省莊浪縣畜牧獸醫(yī)局，744699）

豬瘟（CSF）、豬口蹄疫（FM D）、豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）是目前危害養(yǎng)豬生產的主要傳染病，屬于國家強制免疫動物疫病。我縣對以上三種疫病預防主要采用分期免疫法，除增加了防疫人員工作量，浪費人力、物力外，免疫效果也不確定，如何制定合理的免疫程序，提高免疫效果，減少工作量，節(jié)省人力、物力，成為目前畜牧技術部門急需解決的實際問題。2011年設立并完成的《豬瘟等四種政府采購動物常規(guī)防疫專用疫苗免疫抗體效價測定試驗》表明豬瘟、豬O型口蹄疫兩種疫苗雙側注射具有協(xié)同效應，2012——2014年設立并完成的《豬瘟、豬O型口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合征三種疫苗同時免疫抗體效價測定試驗》表明豬瘟、豬O型口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合征三種疫苗同時免疫，豬繁殖與呼吸綜合征疫苗不論采用滅活疫苗還是活疫苗，豬瘟疫苗不論采用肌注還是皮下注射，疫苗免疫合格率不能全部達到農業(yè)部規(guī)定免疫合格率標準（≥70%），三種疫苗不能同時免疫。設立本試驗，旨在確定豬瘟活疫苗、豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗最佳免疫程序，為提高免疫抗體水平，確保三種疫苗免疫均達農業(yè)部規(guī)定免疫合格率標準和無設防動物疫病發(fā)生提供科學依據。

1　試驗材料

1.1疫苗 豬瘟活疫苗（細胞源）（批號：1507045A，規(guī)格：20頭份/瓶，廠家：成都天邦生物制品有限公司），豬疫苗專用稀釋液（批號：1503061，規(guī)格：20m l/瓶，廠家：普萊柯生物工程股份有限公司），豬O型口蹄疫滅活疫苗（批號：H 150417J，規(guī)格：100m l/瓶，廠家：中農威特生物科技股份有限公司），豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗（NVDC-JXAI株）（批號：1505002，規(guī)格：20m l/瓶，廠家：中牧實業(yè)有限公司成都藥械廠），系政府采購動物防疫常用疫苗，由莊浪縣疫控中心提供。

1.2試驗動物選柳梁鄉(xiāng)唐拴德豬場品種相同、出生日齡相差不超過5天、出生重基本均勻的健康仔豬10窩共92頭，試驗前（50日齡內）未使用CSF、FM D、PRRS疫苗免疫，隔離飼養(yǎng)。

1.3試劑 豬瘟正向間接血凝抗體檢測試劑盒（批號：20150916201，有效期：20151213，廠家：中國農業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所），豬口蹄疫正向間接血凝抗體檢測試劑盒（批號：20150916201，有效期：20151215，廠家：中國農業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所），豬繁殖與呼吸綜合征病毒ELISA抗體檢測試劑盒（批號：150302，有效期：160101，廠家：武漢科前動物生物有限公司），由莊浪縣畜牧獸醫(yī)局購買。

1.4試驗器械及消毒用品75%酒精、碘酊、注射器、針頭、脫脂棉、采血器、耳標、耳標鉗、捕豬器等由柳梁鄉(xiāng)畜牧工作站準備。

2　試驗方法

2.1基礎抗體效價測定飼養(yǎng)至50日齡，對試驗豬按10%比例采血分離血清，測定基礎抗體效價，CSF、FM D采用IH A法，PRRS采用ELISA法（基礎抗體效價記錄見附表1）。

附表1　基礎抗體效價檢測統(tǒng)計表

2.2免疫方法CSF、FM D基礎抗體效價經測定均＜1l og2，PRRS檢測均為陰性時，選試驗豬84頭，隨機分為6組，每組14頭，第1-3組為試驗組，4-6組為對照組，試驗1組第1d頸部雙側注射規(guī)定劑量的豬瘟活疫苗（細胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗，第7d頸部分點肌注規(guī)定劑量的豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗；試驗2組第1d頸部雙側肌注規(guī)定劑量的豬瘟活疫苗（細胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗，第14d頸部分點注射規(guī)定劑量的豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗；試驗3組第1d頸部雙側注射規(guī)定劑量的豬瘟活疫苗（細胞源）、豬O型口蹄滅活疫苗，第21d頸部分點注射規(guī)定劑量的豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗，4-6組第1d分別注射規(guī)定劑量的豬瘟活疫苗（細胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗，注射后臨床觀察3～5d，作好記錄。

附表2　免疫抗體效價檢測統(tǒng)計

2.3免疫抗體效價測定對試驗豬分別于最后一次注射疫苗免疫28d采血測定免疫抗體效價，并做詳細記錄（免疫抗體效價記錄見附表2），檢測方法同2.1。

3　試驗結果

3.1試驗1組豬瘟活疫苗（細胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗免疫合格率分別為100%、14.3%、42.9%，豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗免疫合格率均未達農業(yè)部規(guī)定免疫合格率標準；

3.2試驗2組豬瘟活疫苗（細胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗免疫合格率分別為100%、57.1%、57.1%，豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗免疫合格率均未達農業(yè)部規(guī)定免疫合格率標準；

3.3試驗3組豬瘟活疫苗（細胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗免疫合格率分別為100%、85.7%、85.7%，三種疫苗免疫合格率均達農業(yè)部規(guī)定免疫合格率標準；

3.4豬瘟活疫苗（細胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗對照組免疫合格率分別為92.9%、78.6%、85.7%，免疫合格率均達農業(yè)部規(guī)定免疫合格率標準。

4　分析討論

4.1試驗結果表明：第1d頸部雙側肌注規(guī)定劑量豬瘟活疫苗（細胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗，第21d頸部分點肌注規(guī)定劑量的豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗，三種疫苗免疫合格率均高于農業(yè)部要求免疫合格率標準，為此，上述程序為注射規(guī)定劑量的豬瘟活疫苗（細胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗達到農業(yè)部規(guī)定免疫合格率標準的最佳免疫程序。

4.2因不同疫苗免疫相互影響因素主要取決于疫苗相互組合和注射間隔時間的長短，本次最佳免疫程序確定試驗只選用了育肥豬做試驗樣本。4.3豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗目前臨床應用安全性較差，不宜用于無發(fā)病史的規(guī)模豬場和懷孕母豬，故本次未設試驗。

4.4豬瘟活疫苗（脾淋源）與豬瘟活疫苗（細胞源）性能和免疫抗體效價一致，本次未做單項試驗。

4.5通過試驗數(shù)據分析，豬瘟活疫苗（細胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗免疫，豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗免疫間隔時間越短，豬O型口蹄疫滅活疫苗與豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗免疫合格率越低，而對豬瘟活疫苗（細胞源）免疫合格率影響不大，為此，豬瘟活疫苗（細胞源）和豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗能否同時免疫后再進行豬O型口蹄疫滅活疫苗免疫，有待今后進一步探討。

S858.28文獻標識碼：B

1003-8655（2016）03-0008-02