周文平 張輝 張金盈

臨床研究

急性冠脈綜合征患者MEF2A與MMP-8血清水平的相關(guān)性分析

周文平 張輝 張金盈

目的 檢測急性冠狀動脈綜合征（ACS）患者和健康對照組血清肌細胞增強因子2A（MEF2A）及基質(zhì)金屬蛋白酶-8（MMP-8）水平，探討MEF2A與MMP-8變化及其對ACS患者的影響。方法 選擇60例 ACS患者，男性 37例，平均年齡（67.42±10.36）歲，女性 23例，平均年齡（61.42±12.26）歲；30例健康受試者，男性18例，平均年齡（65.25±13.74）歲，女性12例，平均年齡（67.45±11.63）歲。通過病史采集和血樣采集，采用ELISA法檢測觀察ACS患者及健康對照組血液MEF2A及MMP-8水平的變化。結(jié)果 ①ACS組患者 MEF2A 血液水平為（88.70±4.38）ng/L，與對照組 MEF2A（640.42±46.66）ng/L 相比明顯降低（P<0.05）。②ACS組患者 MMP-8血液水平為（74.96±6.78）μg/L，與對照組 MMP-8（2.16±0.87）μg/L 相比明顯升高（P<0.05）。③在ACS組中，MEF2A水平與MMP-8水平變化呈負相關(guān)（r=-0.853，P<0.01）。結(jié)論 ACS患者血液MEF2A水平明顯降低，MEF2A與MMP-8水平變化呈明顯負相關(guān)。血液MEF2A、MMP-8水平變化對ACS動脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)和斑塊的穩(wěn)定程度評價具有重要的臨床意義。

肌細胞增強因子2A； 急性冠脈綜合征； 基質(zhì)金屬蛋白酶-8

急性冠脈綜合征（ACS）病變形成始動因素是內(nèi)皮損傷，血管內(nèi)皮出現(xiàn)結(jié)構(gòu)和功能紊亂、損害，血液中單核細胞通過內(nèi)皮細胞間隙沉積于內(nèi)膜下，引起一系列血管炎性改變?nèi)缰|(zhì)沉積、內(nèi)膜增厚、血栓形成[1]。本研究通過檢測急性冠脈綜合征患者和健康對照者血清肌細胞增強因子2A（MEF2A）及基質(zhì)金屬蛋白酶-8（MMP-8）水平的變化，觀察MEF-2A與MMP-8之間的相關(guān)性及其與冠狀動脈病變嚴重程度的關(guān)系，對其深層機制進行研究。

1 對象與方法

1.1 研究對象 本院心內(nèi)科2013年6月至2015年1月住院的60例ACS患者，男性37例，年齡43～82（67.42±10.36）歲；女性 23 例，年齡 52～79（61.42±12.26）歲。正常對照組為30例健康受試者，男性18例，平均年齡（65.25±13.74）歲；女性12例，平均年齡（67.45±11.63）歲。兩組間性別、年齡、血壓、血糖、血脂等比較均未見統(tǒng)計學(xué)差異，具有可比性。本研究經(jīng)鄭州大學(xué)倫理委員會批準并事先由患者簽署知情同意書后進行。

1.2 ACS診斷標(biāo)準 ACS診斷按照葛均波、徐永健主編《內(nèi)科學(xué)》（人民衛(wèi)生出版社，第8版）中有關(guān)ACS 的標(biāo)準[2]。

1.3 試驗方法

1.3.1 病史采集 詳細的患者調(diào)查問卷包括高血壓病史、糖尿病病史、高脂血癥病史、吸煙史及其他疾病史等信息。血壓、心率等信息在入院時由醫(yī)生采集。

1.3.2 血樣采集 入選者均空腹8 h以上，清晨空腹抽取靜脈血5 ml，3000 r/min離心15 min，分離血清，密封封管，-20℃保存，應(yīng)用雙抗體夾心ELISA法測定血清高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、總膽固醇、甘油三酯和高敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）水平等。

1.3.3 血清MEF2A、MMP-8水平檢測 血樣經(jīng)3000 r/min離心15 min后取上層血清，采用ELISA法測定血清MEF2A、MMP-8水平。所有步驟均按試劑盒說明書進行操作。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 15.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以±s表示，多樣本均數(shù)間的兩兩比較采用least significant difference（LSD）檢驗和 Student-Newman-Keuls（SNK）檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究對象一般臨床資料比較 對ACS組、對照組研究對象的一般臨床資料進行統(tǒng)計學(xué)分析，兩組性別、年齡、吸煙史、高血壓病史、高脂血癥史等一般情況比較未見統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05），見表1。

2.2 MEF2A與MMP-8血清水平變化情況比較與對照組相比，ACS組MEF2A血清濃度明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。與對照組相比，ACS組MMP-8血清濃度明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表 2。

表1 兩組研究對象的一般臨床資料比較（±s）

表1 兩組研究對象的一般臨床資料比較（±s）

組別 例數(shù) 年齡（歲） 男/女 吸煙史（有/無） 高血壓史（有/無） 高脂血癥史（有/無）對照組 30 61.43±8.60 18/12 12/18 18/12 17/13 ACS 組 60 63.40±7.44 37/23 36/24 42/18 44/16 χ2值 0.99 0.32 3.26 1.06 2.55 P值 0.38 0.85 0.19 0.59 0.46

表2 兩組MEF2A和MMP-8血清水平變化情況比較（±s）

表2 兩組MEF2A和MMP-8血清水平變化情況比較（±s）

組別 例數(shù) MEF2A（ng/L） MMP-8（μg/L）對照組 30 640.42±46.66 2.16±0.87 ACS 組 60 88.70±4.38 74.96±6.78 F值 8170.2 1499.04 P值 0.001 0.001

2.3 血漿MEF2A水平與MMP-8水平的相關(guān)性分析 對MEF2A與MMP-8間的相互關(guān)系，進一步進行Pearson相關(guān)性分析，結(jié)果見圖1。

圖1 ACS組MEF2A水平與MMP-8水平相關(guān)性散點圖

ACS組患者血清MEF2A水平與血清MMP-8水平存在明顯相關(guān)性，血清MEF2A水平與血清MMP-8水平呈負相關(guān)（r=-0.853，P<0.01）。

3 討論

血管內(nèi)皮功能障礙、血管壁炎癥及增生結(jié)構(gòu)的損傷性改變是動脈粥樣硬化血管結(jié)構(gòu)損傷的發(fā)病基礎(chǔ)。在動脈粥樣硬化的形成及斑塊破裂中，巨噬細胞能夠產(chǎn)生多種細胞因子發(fā)揮作用，可促進單核細胞趨化、聚集、黏附，遷至受損的內(nèi)皮細胞，巨噬細胞可吞噬類脂質(zhì)、泡沫細胞和脂質(zhì)池形成，構(gòu)成動脈粥樣硬化早期的脂質(zhì)病變[3]。

MMP-8最早在中性粒細胞中發(fā)現(xiàn)，隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞、巨噬細胞等均表達MMP-8。血液MMP-8水平升高與動脈粥樣硬化、血管狹窄及心肌梗死等心血管病變的形成密切相關(guān)[4]。肌細胞增強因子2A（MEF2A）具有多種調(diào)節(jié)方式，其結(jié)合位點廣泛存在于肌肉、內(nèi)皮的特異性基因調(diào)控區(qū)，在心血管系統(tǒng)和內(nèi)皮組織中都有表達[5]，最突出功能是控制肌細胞分化過程中的基因轉(zhuǎn)錄，在骨骼肌、心肌和平滑肌的發(fā)育過程中介導(dǎo)細胞的分化，并參與血管的發(fā)育[6]。細胞原癌基因c-jun參與細胞的生長、分化、信息傳遞等生理功能，是血管平滑肌細胞增殖和遷移的重要因素之一。激活的c-jun可促進單核細胞趨化蛋白-1基因的表達，促使單核細胞轉(zhuǎn)化為巨噬細胞，巨噬細胞釋放炎癥因子，使MMP-8的表達增加，減少細胞外的基質(zhì)，進而降解纖維帽內(nèi)的膠原，增加斑塊的不穩(wěn)定性，從而促使斑塊的破裂，擴大炎癥進程[7]。MEF2A蛋白的表達發(fā)生在增殖的血管平滑肌細胞核中，可抑制c-jun基因表達，減少血管平滑肌細胞的增殖和遷移。MEF2A基因通過調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞的生存、維持血管完整性、調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細胞炎癥反應(yīng)和調(diào)節(jié)細胞凋亡參與血管平滑肌及血管內(nèi)膜的維護[8]。因此，MEF2A的突變，會促進c-jun的轉(zhuǎn)錄活性增加，單核細胞趨化作用增強，促進單核細胞遷移內(nèi)皮下，活化生成巨噬細胞，進而加速血管平滑肌細胞的增殖，促進血管平滑肌細胞遷移，形成動脈粥樣硬化的典型病理變化。MMP-8在人動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)高表達，在快速進展的動脈粥樣斑塊中表達增加，MMP-8參與了動脈粥樣硬化的進展過程[9]。

在本研究中，我們檢測了ACS患者血液中MEF2A和MMP-8水平的變化，并與健康對照組進行了對比研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，ACS患者血液中MEF2A水平與對照組相比明顯降低，MMP-8水平與對照組相比明顯升高，MEF2A水平與MMP-8水平呈明顯負相關(guān)。因此，血液中MEF2A水平與MMP-8水平可用來評價動脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)程度和斑塊的穩(wěn)定性，并對ACS患者冠脈病變嚴重程度具有較好的預(yù)測判斷作用。

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The relative analysis on the serum levels of MEF2A and MMP-8 in patients with acute coronary syndrome

ZHOU Wen-ping＊，ZHANG Hui，ZHANG Jin-ying.＊Department of Cardiovascular Medicine，the Third Affiliated Hospital of Zhengzhou University，Zhengzhou 450052，China

Objective To test the level changes of Serum myocyte enhancer factor 2A（MEF2A）and matrix metalloproteinase-8（MMP-8）in patients with acute coronary syndrome（ACS），and discuss the change and impact of MEF2A and MMP-8 on patients with ACS.Methods 60 patients with ACS［37 males，average age（67.42±10.36）years old，23 females，average age（61.42±12.26）years old］and 30 cases of healthy subjects［18 males，average age（65.25±13.74）years old，12 females，average age（67.45±11.63）years old］were analyzed and the changes of MEF2A and MMP-8 in ACS patients and healthy controls were observed by ELISA method through history collection and blood samples.Results ⑴The Serum level of MEF2A was（88.70±4.38）ng/L in ACS patients，compared with normal control group （640.42±46.66）ng/L，a dramatic decrease of serum concentration of MEF2A was displayed in ACS patients（P<0.05）.⑵The Serum level of MMP-8 was（74.96±6.78）μg/L in ACS patients，compared with normal control（2.16±0.87）μg/L，the ACS patients showed considerable higher serum concentrations of MMP-8（P<0.05）.⑶The negative correlations between MEF2A and MMP-8 were found in ACS（r=-0.853，P<0.01）.Conclusion The serum level of MEF2A was lower significantly in ACS patients，and the serum concentration of MEF2A was negative correlation with MMP-8.These results suggested that the changes of serum concentrations of MEF2A and MMP-8 on the ACS atherosclerosis degree of inflammation and plaque stability evaluation have important clinical significance.

Myocyte enhancer factor 2A； Acute coronary syndrome； Matrix metalloproteinase-8

河南省高校科技創(chuàng)新團隊支持項目（項目編號：14IRTSTHN018）

450052 河南省鄭州市，鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院心內(nèi)科（周文平）；鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院心內(nèi)科（張輝、張金盈）

10．3969/j．issn．1672－5301．2016．07．011

R543.3

A

1672-5301（2016）07-0617-03

2016-01-31）