廖 艷，吳育廉，吳曉萍，章超樺（.廣東海洋大學(xué)現(xiàn)代生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中心，廣東湛江54088；.廣東省水產(chǎn)品加工與安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東普通高等學(xué)校水產(chǎn)品深加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/國(guó)家貝類加工技術(shù)研發(fā)分中心（湛江），廣東海洋大學(xué)食品科技學(xué)院，廣東湛江54088）

鎘在企鵝珍珠貝組織器官中的分布及其存在形態(tài)研究

廖 艷1，吳育廉1，吳曉萍2，章超樺2
（1.廣東海洋大學(xué)現(xiàn)代生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中心，廣東湛江524088；2.廣東省水產(chǎn)品加工與安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東普通高等學(xué)校水產(chǎn)品深加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/國(guó)家貝類加工技術(shù)研發(fā)分中心（湛江），廣東海洋大學(xué)食品科技學(xué)院，廣東湛江524088）

為研究企鵝珍珠貝組織器官中鎘的分布及形態(tài)，實(shí)驗(yàn)采用石墨爐原子吸收光譜法和凝膠層析技術(shù)分析了鎘在貝體不同組織器官中的分布、存在形態(tài)和相對(duì)分子質(zhì)量分布。結(jié)果表明，企鵝珍珠貝各組織器官中鎘的含量分別為：全臟器2.33 mg/kg，外套膜2.50 mg/kg，閉殼肌2.40 mg/kg，內(nèi)臟團(tuán)2.38 mg/kg，斧足2.24 mg/kg，鰓1.42 mg/kg。全貝中83.3%的鎘蓄積在企鵝珍珠貝的內(nèi)臟團(tuán)、閉殼肌和外套膜中。企鵝珍珠貝各組織器官中只有不到40%的鎘以可溶性蛋白結(jié)合態(tài)的形式存在。各組織器官的可溶性熱穩(wěn)定蛋白經(jīng)Sephadex G-50凝膠過濾柱層析分離后，均得到相對(duì)分子質(zhì)量＞26000 u和＜16000 u的兩個(gè)蛋白質(zhì)的紫外吸收峰。內(nèi)臟團(tuán)、外套膜和腮中的鎘在兩種分子質(zhì)量段的蛋白質(zhì)中均有分布；閉殼肌中少量鎘與大分子蛋白質(zhì)結(jié)合，其余近90%的鎘分布在非蛋白組分中；斧足中鎘幾乎完全與大分子蛋白質(zhì)結(jié)合。研究表明，鎘在企鵝珍珠貝組織器官中的分布及形態(tài)存在差異性。

企鵝珍珠貝，鎘，分子量分布，形態(tài)

雙殼貝類具有非選擇性濾食習(xí)性，在受污染的海域中生長(zhǎng)的貝類極易富集環(huán)境中的有害物質(zhì)，如致病菌、貝類毒素［1］、農(nóng)獸藥殘［2］和重金屬［3］等。水體中呈游離態(tài)的重金屬離子進(jìn)入生物體內(nèi)，將與生物大分子（如特定蛋白質(zhì)）或金屬硫蛋白（metallothionein）相結(jié)合，或以離子或低分子絡(luò)合離子的形式積累［4］。由于重金屬在生物體內(nèi)的形態(tài)不同，其產(chǎn)生的毒性效應(yīng)也有所不同。相關(guān)研究顯示重金屬鎘（Cd）在水生生物尤其是雙殼貝類體內(nèi)的污染情況不容樂觀［5-6］。由于鎘在水生生態(tài)系統(tǒng)中呈現(xiàn)較為復(fù)雜的形態(tài)，且不同生物對(duì)鎘的吸收和排出規(guī)律不同，因此，本文以企鵝珍珠貝為研究對(duì)象，對(duì)其全臟器及各組織器官中的鎘含量進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)鎘在各器官中的存在形態(tài)和結(jié)合態(tài)鎘在不同分子質(zhì)量段蛋白質(zhì)中的分布情況進(jìn)行分析，探索鎘在貝類體內(nèi)的存在形態(tài)，以期為企鵝珍珠貝蛋白質(zhì)資源的合理利用提供數(shù)據(jù)和理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

企鵝珍珠貝 采集于廣東省徐聞縣芳華珍珠養(yǎng)殖場(chǎng)，貝齡2.5年；鎘標(biāo)準(zhǔn)貯備液GBW08612（1.0 mg/mL）國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心；貽貝標(biāo)準(zhǔn)GBW08571 中國(guó)科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究所國(guó)家海洋局第二海洋研究所；葡聚糖凝膠Sephedex G-50（中粒度） 北京鼎國(guó)昌盛生物技術(shù)有限公司；標(biāo)準(zhǔn)分子質(zhì)量物質(zhì) 磷酸異構(gòu)酶triosephosphate-isomerase（26625 u）、肌球蛋白myoglobin（16950 u）、抑肽酶aprotinin（6512 u）、胰島素B insulin-B（3496 u）、桿菌肽bacitracin（1423 u）

美國(guó)Bio-Rad公司；馬尿酰-組氨酰-亮氨酸NHippuryl-His-Leu hydrate（433 u） 北京華美生物技術(shù)有限公司；鹽酸、硝酸、高氯酸 均為優(yōu)級(jí)純；其他試劑 均為分析純；實(shí)驗(yàn)用水 超純水。

LC-20AT高效液相色譜儀 日本島津公司；Z-5000塞曼原子吸收光譜儀、CR-22高速冷凍離心機(jī)、U-3310紫外分光光度計(jì) 均為日本日立公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 樣品預(yù)處理 企鵝珍珠貝去殼、除雜，取全臟器依次用蒸餾水、超純水迅速洗凈，瀝干，于冰上按器官分解為內(nèi)臟團(tuán)、閉殼肌、外套膜、腮和斧足五部分，分別稱重后用高速組織勻漿機(jī)勻漿，于-18℃下凍藏備用。

1.2.2 樣品制備 參考文獻(xiàn)方法［7］，企鵝珍珠貝各臟器經(jīng)解凍后，與經(jīng)4℃預(yù)冷的0.01 mol/L Tris-HCl緩沖液（pH8.6，含0.5 mmol/L苯甲基磺酰氟（PMSF）和1 mmol/L 2-巰基乙醇按1∶2（W/V）的比例在高速勻漿機(jī)中勻漿5 min，均質(zhì)物于4℃冰箱靜置過夜。均質(zhì)物于4℃下離心（10000 r/min）30 min，除去沉淀（Tris-HCl不溶物），上清液（可溶性蛋白）經(jīng)80℃水浴加熱5 min除熱變性蛋白，冰浴冷卻5 min，再次于4℃下離心（10000 r/min）30 min，取上清（熱穩(wěn)定蛋白）供凝膠層析分離使用。Tris-HCl不溶物、可溶性熱穩(wěn)定蛋白和熱變性蛋白均留樣進(jìn)行鎘元素測(cè)定。

1.2.3 可溶性熱穩(wěn)定蛋白的層析分離 取5 mL可溶性熱穩(wěn)定蛋白用Sephadex G-50進(jìn)行凝膠層析（層析柱為2.6 cm×40 cm），以0.01 mol/L Tris-HCl（pH8.6）緩沖液在1 mL/min的流速下洗脫，每管收集8 mL，分別對(duì)各管層析液進(jìn)行紫外檢測(cè)和鎘元素測(cè)定。

1.2.4 鎘元素的測(cè)定 凝膠層析液直接用石墨爐原子吸收光譜法測(cè)定鎘含量（ng/mL）；其他樣品處理參照國(guó)標(biāo)（GB/T 5009.15.2003）方法［8］，經(jīng)濕式消化后同上測(cè)定鎘含量。按同樣消解方法做空白實(shí)驗(yàn)，并采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)貽貝（GBW08571）驗(yàn)證方法的準(zhǔn)確度。消化液中鎘含量（ng/mL）經(jīng)質(zhì)量換算得到試樣中鎘含量（mg/kg）。

1.2.5 鎘含量的計(jì)算

式（1）中：X：凝膠層析洗脫峰中鎘相對(duì)含量（%）；N1：洗脫峰含鎘量（ng）；N0：總鎘量，即各洗脫峰含鎘量之和（ng）。

式（2）中：Y：器官（組分）中鎘相對(duì)含量（%）；M1：器官（組分）含鎘量（mg）；M0：總鎘量，即各器官（組分）含鎘量之和（mg）。

1.2.6 蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的測(cè)定 可溶性蛋白的熱穩(wěn)定組分經(jīng)凝膠層析分離，紫外光譜檢測(cè)，取各洗脫峰在280 nm波長(zhǎng)處有最大吸收值處的餾分，采用高效空間排阻色譜法（HPSEC）進(jìn)行相對(duì)分子質(zhì)量的測(cè)定。分析柱為PROTEIN-PAK 60（WAT085250），流動(dòng)相為0.05 mol/L Tris-HCl（pH7.2），流速0.7 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)214 nm，溫度25℃。

2 結(jié)果與分析

2.1 鎘在企鵝珍珠貝組織器官中的分布

企鵝珍珠貝全臟器及不同組織器官中鎘的含量測(cè)定結(jié)果見表1。由表1可知，企鵝珍珠貝的腮中鎘含量稍低（1.42 mg/kg），其他器官中鎘的含量都比較接近（2.24～2.50 mg/kg）。從鎘的相對(duì)含量分布上看，企鵝珍珠貝的內(nèi)臟團(tuán)、閉殼肌和外套膜中的鎘占總鎘量的83.3%，為主要蓄積鎘的器官。鎘在不同貝類體內(nèi)分布規(guī)律并不一致，除了受生長(zhǎng)環(huán)境的水質(zhì)影響外，這可能與貝類種間差異對(duì)重金屬的吸收、累積途

徑不同有關(guān)。

表1 鎘在企鵝珍珠貝各組織器官中的分布（濕基，n=3）Table1 Distribution of Cd in different organs of Pteria penguin（wet basis，n=3）

2.2 鎘在企鵝珍珠貝組織器官中的存在形態(tài)

企鵝珍珠貝各組織器官不同提取組分中鎘的分布情況見圖1。由圖1可知，鎘在企鵝珍珠貝體內(nèi)分別以Tris-HCl不溶態(tài)、熱穩(wěn)定蛋白結(jié)合態(tài)和熱變性蛋白結(jié)合態(tài)存在，這三種形態(tài)的鎘在各組織器官中的比例各不相同。其中，各組織器官均有超過60%的鎘以Tris-HCl不溶態(tài)存在。可溶性蛋白中鎘的含量分布依次為：內(nèi)臟團(tuán)＞閉殼?。救靖悖就馓啄?；可溶性蛋白經(jīng)熱處理后鎘損失最多的為外套膜，接近三分之二，內(nèi)臟團(tuán)和斧足約損失一半左右，閉殼肌和腮則較少。這可能是因?yàn)闃?gòu)成各組織器官的蛋白質(zhì)組成和熱敏蛋白含量不同而導(dǎo)致。

圖1 鎘在企鵝珍珠貝各組織器官不同提取組分中的分布Fig.1 The distribution of Cd in the different fractions of organs from Pteria penguin

2.3 鎘在企鵝珍珠貝組織器官可溶性熱穩(wěn)定蛋白中的相對(duì)分子質(zhì)量分布

企鵝珍珠貝各組織器官的可溶性熱穩(wěn)定蛋白經(jīng)Sephadex G-50凝膠過濾柱層析，測(cè)定每管洗脫液在280 nm處的紫外吸收值及相應(yīng)的鎘含量，并繪制柱層析洗脫曲線（圖2）。從圖2中可以看出，各組織可溶性熱穩(wěn)定蛋白組分經(jīng)Sephadex G-50凝膠過濾柱層析分離后均得到兩個(gè)蛋白質(zhì)的紫外吸收峰。內(nèi)臟團(tuán)、外套膜和腮的洗脫液中，鎘的吸收峰與兩處蛋白質(zhì)吸收峰基本重合，且鎘含量與蛋白含量的變化趨勢(shì)一致，由此可推斷在這三種器官中鎘可能與這兩種蛋白質(zhì)相結(jié)合而存在；在閉殼肌的洗脫液中，少量鎘在第一峰處，而絕大部分鎘出現(xiàn)在兩個(gè)蛋白質(zhì)吸收峰間，表明小部分鎘與大分子蛋白質(zhì)相結(jié)合，大部分鎘可能與其他物質(zhì)結(jié)合；在斧足中，幾乎全部鎘出現(xiàn)在第一峰處，表明斧足中的鎘基本都存在于大分子蛋白中。

經(jīng)換算可得洗脫液中鎘的含量分布，見圖3。由圖3可以看出，閉殼肌中少量鎘與大分子蛋白質(zhì)結(jié)合，其余89.83%的鎘分布在非蛋白組分中；內(nèi)臟團(tuán)的兩個(gè)蛋白質(zhì)吸收峰中的鎘總量相差不大（47.82%，52.18%）；而外套膜和腮均為第一個(gè)峰中的鎘含量較大（61.62%，77.79%），說明大分子蛋白質(zhì)結(jié)合了較多的鎘；斧足的熱穩(wěn)定組分中鎘幾乎完全與大分子蛋白質(zhì)結(jié)合（99.26%）。各組織器官可溶性蛋白質(zhì)熱穩(wěn)定組分大分子蛋白中鎘所占的百分比順序依次為：斧足＞腮＞外套膜＞內(nèi)臟團(tuán)＞閉殼肌，在小分子蛋白中

所占的百分比順序?yàn)椋簝?nèi)臟團(tuán)＞外套膜＞腮＞斧足＞閉殼肌。鎘在企鵝珍珠貝不同組織器官中與不同相對(duì)分子質(zhì)量蛋白質(zhì)的結(jié)合情況差異很大，說明鎘與蛋白質(zhì)的結(jié)合是具有選擇性的，可能是由于不同組織器官的功能蛋白質(zhì)組成不同造成。

圖2 各組織器官可溶性熱穩(wěn)定蛋白組分的Sephadex G-50凝膠層析圖譜Fig.2 Sephadex G-50 gel chromatography of heat stable components of soluble protein from organs

圖3 鎘在各組織器官Sephadex G-50凝膠層析洗脫液中的分布Fig.3 The distribution of Cd in eluate of Seph adex G-50 gel chromatography from organs

用已知相對(duì)分子質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對(duì)HPSEC柱進(jìn)行標(biāo)定，將各分子質(zhì)量的對(duì)數(shù)值（logMr）與相應(yīng)的保留時(shí)間（tR，min）作圖，其線性方程為logMr=6.4972-0.2261tR，相關(guān)系數(shù)r=0.9877。在相同實(shí)驗(yàn)條件下對(duì)樣品進(jìn)行分離分析，通過該線性方程，可估算出色譜圖上各分離組分的分子量大小。取各個(gè)組織器官的可溶性熱穩(wěn)定蛋白層析液第一峰和第二峰A280 nm最大處的餾分，用HPSEC進(jìn)行分離測(cè)定。圖4為內(nèi)臟團(tuán)熱穩(wěn)定組分層析液的HPSEC圖譜，其他組織器官與該圖譜近似（略）。根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量校正曲線，各個(gè)組織器官第一洗脫峰主要是相對(duì)分子質(zhì)量遠(yuǎn)大于26000 u的組分，第二洗脫峰蛋白質(zhì)組成較雜，由相對(duì)分子質(zhì)量小于16000 u的多組分組成。

圖4 柱層析兩處洗脫峰的HPSEC圖譜Fig.4 HPSEC chromatogram of two elution peaks by column chromatography

3 討論

從中國(guó)人的傳統(tǒng)食用習(xí)慣來看，腹足類的貝類，一般選食其肌肉部分（腹足），如海螺、鮑魚等；雙殼類的貝類，很多是食用整個(gè)軟體部，如牡蠣、蛤、貽貝等；有的貝類只食其閉殼肌，如常見的干貝、江瑤柱，分別為扇貝和江瑤的閉殼肌干制品。從已有的研究報(bào)道來看，無論是雙殼類，還是腹足類，均是肌肉中的重金屬含量最低，而內(nèi)臟團(tuán)（含消化系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)等）的重金屬含量高，因此有觀點(diǎn)認(rèn)為，食用貝類海鮮時(shí)，最好去除貝類內(nèi)臟團(tuán)，食用剩下的貝類肌肉部分會(huì)更安全［10］。而根據(jù)筆者對(duì)鎘在企鵝珍珠貝的不同化學(xué)組分及各種蛋白質(zhì)組分中的分布情況的研究［11-12］，并結(jié)合本研究的結(jié)果，可以發(fā)現(xiàn)，鎘在企鵝珍珠貝的內(nèi)臟團(tuán)中蓄積量最高，其次是閉殼肌和外套膜，無論是食用整個(gè)軟組織或其肌肉，都可能存在攝入過量重金屬的風(fēng)險(xiǎn)。因此，直接食用或?qū)ω愵愡M(jìn)行加工利用時(shí)，應(yīng)選擇清潔的原料，或進(jìn)行相應(yīng)的重金屬脫除工藝。

重金屬在生物體內(nèi)的存在形態(tài)與生物體的種類、重金屬進(jìn)入體內(nèi)的形態(tài)、吸收途徑、在體內(nèi)的積累方式等都有很大的關(guān)系。目前，有關(guān)生物體中鎘的存在形態(tài)研究主要關(guān)注的熱點(diǎn)是鎘金屬硫蛋白（MT）。也有一些研究發(fā)現(xiàn)，不同生物體內(nèi)的鎘會(huì)與不同分子量段的蛋白質(zhì)相結(jié)合，這些鎘結(jié)合蛋白并不一定都是金屬硫蛋白。如High等［13］用凝膠層析法對(duì)污染地區(qū)貽貝中的鎘結(jié)合蛋白進(jìn)行分離時(shí)，除發(fā)現(xiàn)分子量約6000～7000 u的類似哺乳動(dòng)物體內(nèi)的金屬硫蛋白類物質(zhì)外，還得到了分子量約60000 u的鎘-蛋白質(zhì)結(jié)合物。在帽貝中也有類似物質(zhì)存在，凝膠層析得到分子量分別為10800 u和22000 u的Cd-SH配合物。在牡蠣中的鎘，則與分子量為50000 u以上和3000 u以下的蛋白質(zhì)相結(jié)合。廖琳［14］在對(duì)海豚肝臟的研究中發(fā)現(xiàn)，可溶性含鎘物質(zhì)以兩種不同分子量的形態(tài)存在，其分子量大部分都在3000～70000 u范圍內(nèi)，一部分分子量小于3000 u，這些含鎘蛋白質(zhì)均不是鎘金屬硫蛋白。Bin Li等［15］采用分子排阻色譜-電感耦合等離子質(zhì)譜（SEC-ICP-MS）分析了南極鱗蝦水提物中不同分子量金屬?gòu)?fù)合物的元素分布，發(fā)現(xiàn)鎘主要分布在相對(duì)分子質(zhì)量大于20000 u的物質(zhì)中。趙艷芳等［16］在扇貝中檢測(cè)到3種Cd形態(tài)：MT-Cd、谷胱甘肽（GSH）-Cd和半胱氨酸（Cys）-Cd，在菲律賓蛤仔中檢測(cè)到2種Cd形態(tài)：MT-Cd和GSH-Cd。文獻(xiàn)中報(bào)道的不同生物體內(nèi)鎘結(jié)合蛋白的分子量分布并不一致，本研究中，企鵝珍珠貝體內(nèi)鎘與不同分子量蛋白質(zhì)結(jié)合的情況也與其他貝類不同，這些都體現(xiàn)了生物的多樣性。

4 結(jié)論

本研究表明，企鵝珍珠貝的內(nèi)臟團(tuán)、閉殼肌和外套膜中的鎘含量占總量的83.3%，可以推測(cè)這三個(gè)器官為蓄積鎘的主要器官。在體內(nèi)各器官中，鎘的存在狀態(tài)有Tris-HCl不溶態(tài)、熱穩(wěn)定蛋白結(jié)合態(tài)和熱變性蛋白結(jié)合態(tài)，且在不同器官中的比例亦不相同。各器官中分離得到的可溶性熱穩(wěn)定蛋白經(jīng)凝膠層析分離后，均可得到相對(duì)分子質(zhì)量＞26000 u和＜16000 u的兩個(gè)蛋白質(zhì)的紫外吸收峰，其中，內(nèi)臟團(tuán)、外套膜和腮中鎘的分布與上述兩種分子質(zhì)量段的蛋白質(zhì)分布情況基本重合，其他器官中的重合情況不明顯，進(jìn)一步說明不同器官中鎘的結(jié)合情況可能不同。這是否能暗示二者在不同器官中的結(jié)合狀態(tài)特點(diǎn)，有待進(jìn)一步的研究。此外，企鵝珍珠貝體內(nèi)超過62%的鎘存在于Tris-HCl不溶物中，且在不同器官不溶物中鎘的百分含量不同，這部分鎘的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和性質(zhì)也有待更深入的研究。

［1］Jen H C，Nguyen T A T，Wu Y J，et al.Tetrodotoxin and paralytic shellfish poisons in gastropod species from Vietnam analyzed by high-performance liquid chromatography and liquid chromatography-tandem mass spectrometry［J］.Journal of Food and Drug Analysis，2014，22（2）：178-188.

［2］Ju L G，Xiao P J，Ting J，et al.Enormous PCB sincrease in oysters from the coast of Guangdong，China［J］.Marine Pollution Bulletin，2011，62：1333-1336.

［3］Parent-Massin D，Nguyen A，Tran T L，et al.Risk assessment of shellfish contaminated by heavy metals and paralytic shellfish poison（PSP）in Vietnam［J］.Toxicology Letters，2010，196（S）：339-340.

［4］李學(xué)鵬，段青源，勵(lì)建榮.我國(guó)貝類產(chǎn)品中重金屬鎘的危害及污染分析［J］.食品科學(xué)，2010，31（17）：457-461.

［5］Gil F，Olmedo P，Pla A，et al.Determination of toxic elements （Hg，Cd，Pb，Sn and As）in fish and shellfish samples［J］.Toxicology Letters，2013，221（S）：64.

［6］Li X P，Li J R，Wang Y B，et al.Kinetic study of the bioaccumulation of heave metals（Cu，Pb and Cd）in Chinese domestic oyster Ostrea pl icatula［J］.Journal of Environmental Science and Health，Part A，2010，45（7）：836-845.

［7］吳曉萍，廖愛琳，章超樺，等.企鵝珍珠貝鎘金屬硫蛋白的分離純化及其多克隆抗體的制備［J］.水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2011，35（6）：816-823.

［8］中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.GB/T 5009.15—2003食品中鎘的測(cè)定［S］.北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2003.

［9］Choi H J，Ji J，Chung K H，et al.Cadmium bioaccumulation and detoxification in the gill and digestive gland of the Antarctic bivalve Laternula elliptica［J］.Comparative Biochemistry and Physiology Part C：Toxicology&Pharmacology，2007，145（2）：227-235.

［10］陳清香，楊文，初慶柱.湛江硇洲島海域19種貝類食用部位的重金屬含量及評(píng)價(jià)［J］.生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào)，2011，20（1）：175-180.

［11］廖艷，蔣志紅，吳曉萍，等.企鵝珍珠貝蛋白質(zhì)組成及重金屬鎘的分布［J］.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，32（6）：132-137.

［12］廖艷，蔣志紅，吳曉萍，等.企鵝珍珠貝肉的一般化學(xué)組成及鎘的分布［J］.食品科學(xué)，2014，35（2）：193-196.

［13］High K A，Barthet V J，Mclaren J W，et al.Characterization of metallothionein-like proteins from zebra mussels［J］.Environ Toxieol Chem，1997，16（6）：1111-1118.

［14］廖琳.海豚肝臟中元素含量及銅、鎘化學(xué)形態(tài)的研究［D］.成都：四川大學(xué)，2002.

［15］Li B，Bergmann J，Lassen S，et al.Distribution of elements binding to molecules with different molecular weights in aqueous extract of Antarctickrill by size-exclusion chromatography coupled with inductively coupled plasma mass spectrometry［J］.Journal of Chromatography B，2005，814（1）：83-91.

［16］趙艷芳，尚德榮，寧勁松，等.體積排阻高效液相色譜－電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定海產(chǎn)貝類中鎘的形態(tài)［J］.分析化學(xué)，2012，40（5）：681-686.

Distribution and speciation studies of cadmium in the Pteria penguin tissues and organs

LIAO Yan1，WU Yu-lian1，WU Xiao-ping2，ZHANG Chao-hua2
（1.Modern Bio-Chemical Laboratory Center，Guangdong Ocean University，Zhanjiang 524088，China；2.Guangdong Provincial Key Laboratory of Aquatic Products Processing and Safety，Key Laboratory of Advanced Processing of Aquatic Products of Guangdong Higher Education Institution，National Research and Development Branch Center for Shellfish Processing（Zhanjiang），College of Food Science and Technology，Guangdong Ocean University，Zhanjiang 524088，China）

The distribution，speciation and molecular weight distribution of cadmium（Cd）in the Pteria penguin tissues and organs were studied by graphite furnace atomic absorption spectrometry and gel filtration chromatography technology.The results showed that the contents of Cd in the various tissues and organs of the Pteria penguin were 2.33 mg/kg the whole viscera，2.50 mg/kg mantle，2.40 mg/kg adductor muscle，2.38 mg/kg visceral mass，2.24 mg/kg foot，1.42 mg/kg gill.83.3%of the full shell Cd accumulation in visceral mass，adductor muscle and mantle in Pteria penguin.Less than 40%of the Cd in different tissues and organs of the Pteria penguin bound in the form of water soluble protein.Two ultraviolet absorption peaks of proteins，which had a relative molecular weight of more than 26000 u and less than 16000 u，were got after the isolation of soluble thermally stable protein of water soluble protein from every organ by Sephadex G-50 gel filtration column chromatography.The Cd in visceral mass，mantle and gill were distributed in two molecular weight proteins.About 90%Cd in adductor was distributed in nonprotein compounds while a small quantity of it was combined with proteins of high molecular weight.Nearly all the Cd of soluble thermally stable protein in foot were combined with proteins of high molecular weight.This research revealed that distribution and molecular weight distribution of Cd in the Pteria penguin tissues and organs differences.

Pteria penguin；cadmium；molecular weight distribution；speciation

TS201

A

1002-0306（2016）08-0176-05

10.13386/j.issn1002-0306.2016.08.028

2015-09-10

廖艷（1977-），女，碩士，實(shí)驗(yàn)師，研究方向：食品安全檢測(cè)技術(shù)，E-mail：liaoyan39@163.com。

現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系（CARS-48-07B）；廣東省科技廳農(nóng)業(yè)攻關(guān)項(xiàng)目（2010B 020313005）。