劉　俊　崔　龍

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腎癌患者血清VHL、HIF-1α和HIF-2α的表達及臨床意義

劉俊崔龍

目的探討血清VHL，HIF-1α和HIF-2α的表達水平與腎癌臨床病理特征的關系。方法收集腎癌患者43例(腎癌組)和同期健康查體者40例(對照組)；檢測兩組血清VHL，HIF-1α和HIF-2α水平；測定患者癌灶最大直徑；對所有患者進行6個月隨訪。結果與對照組比較，腎癌患者血清VHL水平明顯降低，而HIF-1α和HIF-2α水平明顯升高(P<0.01)；腎癌患者血清VHL、HIF-1α和HIF-2α表達與患者年齡、性別無明顯相關(P>0.05)，而與病理分級、臨床分期、癌灶大小以及淋巴結轉移顯著相關(P<0.01)；所有腎癌患者隨訪6個月，6例復發(fā)，37例未復發(fā)，復發(fā)組患者術后血清VHL水平明顯低于未復發(fā)組，而HIF-1α和HIF-2α水平明顯高于未復發(fā)組，比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05，P<0.01)。結論 血清VHL，HIF-1α和HIF-2α水平與腎癌病理分級、臨床分期、癌灶大小以及淋巴結轉移顯著相關，提示上述指標可成為判定腎癌發(fā)生、發(fā)展以及復發(fā)的重要指標。

腎癌；VHL基因；缺氧誘導因子-1α；缺氧誘導因子-2α

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:895～898)

腎癌為泌尿系統(tǒng)常見腫瘤，約占所有成人惡性腫瘤的近3%，隨著生活習慣和環(huán)境的改變以及影像等檢測技術的提高，腎癌的發(fā)病率呈逐年升高趨勢[1]。然而，值得注意的是近30%的腎癌患者在確診時即存在遠處轉移，術后患者中復發(fā)和轉移的比率達40%，而傳統(tǒng)的放化療對轉移性腎癌治療不敏感，預后較差，5年的生存率不到10%[2]；因此，腎癌的早期診斷是提高患者生存率的關鍵因素[3]。

VHL基因是在遺傳病性疾病Von Hippel Lindau患者中發(fā)現，位于3號染色體短臂；研究發(fā)現，VHL基因產物VHL蛋白以及缺氧誘導因子(HIF)與腎透明細胞癌的發(fā)生密切相關[4]。本研究采用酶免疫吸附法檢測腎癌患者血清中VHL，HIF-1α和HIF-2α水平，分析三者與腎癌臨床病理特征的關系，以期為腎癌的早診斷及復發(fā)提供更多客觀的臨床參考指標。

1　材料與方法

1.1一般資料

收集本院2011年5月-2012年12月收治的46例腎癌患者，研究期間失聯3例，最后完成43例；其中男性32例，女性11例；年齡25～69歲，平均(51.67±5.39)歲；TMN分期：Ⅰ/Ⅱ期34例，Ⅲ/Ⅳ期9例。同期選擇在我院進行健康查體者40例作為對照組，男性30例，女性10例；年齡35～70歲，平均(50.43±5.17)歲；所有對照組經血液生化、心電圖和頭、腹部影像學等檢查均為正常，排除既往有腫瘤、自身免疫性疾病、心腦血管病以及肝腎功能障礙等病史。兩組年齡、性別一般情況比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。診斷標準：所有腎癌患者均經CT和病理檢查確認。腎癌的臨床分期、病理分級等參照國際抗癌聯盟(UICC)制定標準(2002年)進行[5]。所有患者病理診斷均為腎透明細胞癌，均行腎癌根治術治療。病例入選標準：①符合腎癌診斷標準者；②檢測前均未接受任何放化療、細胞因子治療等；③患者或患者家屬簽署知情協(xié)議。病例排除標準：①伴有糖尿病、高血壓以及既往風濕、類風濕病者；②合并其他系統(tǒng)腫瘤者；③研究期間不配合者；④合并其他系統(tǒng)疾病影響VHL、HIF-1α和HIF-2α升高或降低者。

1.2檢測指標

①血清VHL、HIF-1α和HIF-2α檢測 兩組均在清晨空腹采集靜脈血，腎癌組分別取術前、術后患者的靜脈血，血樣靜置1 h后離心，取血清，分裝-70 ℃保存；均采用Elisa方法進行，試劑盒均由上海遠慕生物科技有限公司提供；所有樣本均在同一批次檢測。②測定患者癌灶最大直徑；③對所有患者進行6個月隨訪，記錄復發(fā)病例。

1.3分析指標

分析血清VHL、HIF-1α和HIF-2α的表達與患者年齡、性別、病理分級、臨床分期、癌灶大小和淋巴結轉移等臨床病理特點的關系。

1.4統(tǒng)計學方法

2　結果

2.1兩組血清VHL、HIF-1α和HIF-2α表達比較

與對照組比較，腎癌患者血清VHL水平明顯降低，而HIF-1α和HIF-2α水平明顯升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，見表1。

表1　兩組血清VHL、HIF-1α和HIF-2α水平比較

2.2血清VHL、HIF-1α和HIF-2α水平與腎癌臨床病理特征的關系

血清VHL、HIF-1α和HIF-2α表達與腎癌患者年齡、性別無明顯相關性(P>0.05)，而與病理分級、臨床分期、癌灶大小以及淋巴結轉移顯著相關(P<0.01)，見表2。

2.3未復發(fā)組和復發(fā)組患者術后血清VHL、HIF-1α和HIF-2α水平比較

所有腎癌患者隨訪6個月，6例復發(fā)，37例未復發(fā)；復發(fā)組患者術后血清VHL水平明顯低于未復發(fā)組，而HIF-1α和HIF-2α水平明顯高于未復發(fā)組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05，P<0.01)，見表3。

3　討論

腎癌的臨床診斷主要依據患者的癥狀、體征結合影響學和病理學檢測，然而這些指標的影響因素較多，加之影像學對腫瘤病灶顯影技術存在一定的滯后等限制，部分患者的病情并不能及時得到確認而貽誤病情[6]。近年來，使用血清生物學標記物來進行早期診斷是臨床檢驗的重要方向。目前，使用不同高通量平臺對腎癌的生物標記物進行研究，然而仍沒有足夠且唯一的生物標記物可以用來對腎癌進行預測[7]。因此，探尋其他較為特異性的血清生物學標志物仍是時下臨床研究的重點。

一般認為，癌細胞的增殖和腫瘤組織的生長、浸潤以及轉移有賴于腫瘤的血管形成。血管內皮生長因子(VEGF)作為糖蛋白二聚體的1種，能夠增加毛細血管壁的通透性，也是當前最強的血管通透劑之一。VEGF還可特異性地刺激使得血管內皮細胞發(fā)生有絲分裂，誘導腫瘤血管的形成，從而有利于腫瘤細胞脫落、浸潤周圍組織血管[8-9]。研究發(fā)現，VHL基因失活引起氣編碼的蛋白失去正常功能，可間接激活VEGF、環(huán)氧合酶-以及血小板源性生長因子，從而促進腎癌組織的浸潤及癌細胞遠處轉移[10]。本組結果顯示，VHL在腎癌患者血清表達水平顯著低于對照組健康者，與臨床分期、病理分級、癌灶大小以及淋巴結轉移均顯著相關，與以往報道基本一致，表明血清VHL的低表達可能與腎癌的發(fā)生發(fā)展相關，其介導的系列反應可能促進腎癌細胞的增殖、浸潤和遠處轉移。

表2　血清VHL，HIF-1α和HIF-2α水平與腎癌臨床病理特征的關系

表3　未復發(fā)組和復發(fā)組患者術后血清VHL、HIF-1α和HIF-2α水平比較

缺氧或VHL基因失活均可阻礙HIF降解，從而HIF在細胞內積聚，通過HIF-1αDNA 上的識別位點結合下游靶基因VEGF等DNA 序列上的相應位點，啟動靶基因VEGF等的轉錄，而VEGF作用于血管內皮細胞表面受體，激活系列缺血傳導通路，刺激新生血管的形成，誘導腫瘤細胞的增殖及其遠處轉移[11]。此外，在低氧下HIF-lα可誘導斯鈣素蛋白-1(STC-1)表達，后者在腎小管上皮細胞高表達，可通過調節(jié)細胞內Ca2+平衡參與腎癌細胞的增殖、浸潤及其轉移[12]。本組結果顯示，腎癌患者血清中HIF-1α水平明顯高于對照組健康者，且其與臨床分期、病理分級、癌灶大小以及淋巴結轉移均明顯相關，與以往研究結果近似，表明血清HIF-1α的高表達可能與腎癌的發(fā)生發(fā)展相關，其介導的靶位反應在促進腎癌細胞的增殖、浸潤和遠處轉移中發(fā)揮重要作用。

HIF-2作為腫瘤耐受低氧環(huán)境的重要標志物，由HIF-2α和HIF-1β兩個亞單位構成；近年證實，腫瘤組織中HIF-2α失活可打斷腫瘤血管的形成，HIF-2α水平與VEGF的表達呈正相關[13]。以往研究表明，HIF-2α的高表達與腫瘤的臨床分期、低分化和不良預后密切相關[14]。本研究中，腎癌患者血清HIF-2α水平明顯高于對照組健康者，且其與臨床分期、病理分級、癌灶大小以及淋巴結轉移均明顯相關，與上述研究報道結果相近，提示HIF-2α基因也可能參與了腎癌的發(fā)生、發(fā)展機制。

綜上，腎癌患者血清VHL水平明顯低于對照組，而HIF-1α和HIF-2α水平明顯高于對照組，血清VHL，HIF-1α和HIF-2α水平與腎癌患者病理分級、臨床分期、癌灶大小以及淋巴轉移顯著相關，對腎癌的復發(fā)具有預測作用；因此，血清VHL，HIF-1α和HIF-2α水平可能是腎癌的早期診斷、病情評估及復發(fā)判斷的重要指標。然而，血清VHL，HIF-1α和HIF-2α檢測并不是腎癌特有的標志物，將上述指標應用于腎癌的早期診斷尚需與其他臨床檢驗結合進行。

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(編輯：吳小紅)

Expression of Serum VHL，HIF-1α and HIF-2α in Renal Carcinoma and Clinical Significance

LIUJun，CUILong.

XiantaoFirstPeople'sHospital，Xiantao,433000

ObjectiveTo investigate relationship between expression of serum VHL，HIF-1α and HIF-2α and the clinicopathological features in renal carcinoma.Methods43 patients with renal cell carcinoma were the renal carcinoma group and 40 healthy examinees were the control group.Levels of serum VHL，HIF-1α and HIF-2α in the 2 groups were detected.The maximum diameters of carcinoma foci were detected.Studies are needed with follow up of 6 months to record relapse cases.Relationship between expression of serum VHL，HIF-1α and HIF-2α and the clinicopathological feature in renal carcinoma were analyzed.ResultsLevel of serum VHL in the renal carcinoma group was obviously lower than the control group，while levels of HIF-1α and HIF-2α were obviously higher(P<0.01).Expression of serum VHL，HIF-1α and HIF-2α was not related to age and sex in renal carcinoma(P>0.05)，while was significantly correlated with pathological grade，clinical stages，size of carcinoma and lymphatic metastasis(P<0.01).All patients of renal carcinoma were followed up by 6 months with 6 recurrent cases and 37 non-recurrent cases.Level of serum VHL in recurrent cases was obviously lower，while levels of HIF-1α and HIF-2α were obviously higher than non-recurrent cases，there had significant differences(P<0.05，P<0.01).ConclusionLevels of serum VHL，HIF-1α and HIF-2α are correlated significantly with pathological grade，clinical stages，size of carcinoma and lymphatic metastasis，which indicates indexes mentioned above could be important indicators of judging occurrence，development and recurrence of renal carcinoma.

Renal carcinoma；VHL；HIF-1α；HIF-2α

433000 湖北省仙桃市第一人民醫(yī)院(劉俊)；441021 湖北省襄陽市中心醫(yī)院(崔龍)

崔龍

10.3969/j.issn.1001-5930.2016.06.008

R737.11

A

1001-5930(2016)06-0895-04

2015-07-21

2016-04-25)