秦文婧　張雙林河南大學(xué)第一附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科，河南開封　475000

雌激素受體、孕激素受體及原癌基因Her-2在肺腺癌中的表達

秦文婧張雙林
河南大學(xué)第一附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科，河南開封475000

目的 探討雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）及原癌基因Her-2（C-erbB-2）在肺腺癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用。方法 選擇2013年3月～2015年2月在我院手術(shù)治療的肺腺癌患者組織切塊60例為研究對象。分析不同性別、年齡、分化程度、臨床分期患者肺腺癌中ER、PR及C-erbB-2的表達，分析肺腺癌患者組織中C-erbB-2的表達與ER、PR表達的相關(guān)性，分析骨轉(zhuǎn)移患者與無骨轉(zhuǎn)移患者肺腺癌組織中ER、PR、C-erbB-2的表達。結(jié)果 60例患者，14例ER陽性表達，占23.3%，13例PR陽性，占21.7%，6例C-erbB-2陽性，占10.0%。分化程度越低的患者ER陽性率及C-erbB-2陽性率越高（P＜0.05）。不同性別、臨床分期肺腺癌患者組織中ER、PR及C-erbB-2表達無差異（P＞0.05）。相關(guān)性分析：C-erbB-2與ER表達呈顯著正相關(guān)的關(guān)系（r=0.461），C-erbB-2表達與PR呈正相關(guān)（r=0.326）；C-erbB-2與ER及PR均為陽性呈顯著正相關(guān)的關(guān)系（r=0.329），ER與PR表達無相關(guān)性（r=0.081）。骨轉(zhuǎn)移患者與無骨轉(zhuǎn)移患者肺腺癌組織中ER、PR及C-erbB-2表達無差異（P＞0.05）。結(jié)論 肺腺癌中均可表達一定程度的雌激素受體、孕激素受體及原癌基因Her-2水平。

雌激素受體；孕激素受體；原癌基因Her-2；肺腺癌

[Abstract]Objective To discuss expression of ER，PR and C-erbB-2 with lung adenocarcinoma.Methods Diced tissues of 60 cases with lung adenocarcinoma from Mar 2013 to Feb 2015 were selected.ER，PR and C-erbB-2 levels in patients of different sex，age，degree of differentiation，clinical stage were analyzed.Association of C-erbB-2 expression with ER and PR was analyzed.ER，PR and C-erbB-2 levels in patients with bone metastases and non bone metastasis were analyzed.Results In 60 cases，ER positive expression in 14 cases，accounted for 23.3%，13 cases of PR positive，accounted for 21.7%，and 6 cases of C-erbB-2 positive，accounted for 10%.ER and C-erbB-2 positive rates in patients with the lower the degree of differentiation were higher（P＜0.05）.ER，PR and C-erbB-2 positive rates in patients with different sex，there was no significant difference in the clinical stage（P＞0.05）.C-erbB-2 and ER expression was significantly positive correlation relationship（r=0.461），C-erbB-2 expression and PR were positively correlated（r=0.326）;C-erbB-2，ER and PR were positive significant positive correlation relationship（r=0.329），ER and PR expression no correlation（r=0.081）.ER，PR and C-erbB-2 expressions showed no significant difference in patients with bone metastases and non bone metastasis（P＞0.05）.Conclusion ER，PR and C-erbB-2 express in lung adenocarcinoma.

[Key words]ER;PR;C-erbB-2;Lung adenocarcinoma

近年來內(nèi)分泌治療腫瘤取得了較大的進展，相關(guān)研究也越來越多，尤其是前列腺癌、乳腺癌等內(nèi)分泌相關(guān)癌癥。有學(xué)者報道肺癌組織中存在雌激素受體（estrogen receptor，ER）、孕激素受體（progesterone receptor，PR），隨后這種結(jié)論由多種方法證實[1]。肺腺癌容易發(fā)生骨轉(zhuǎn)移，而骨骼中雌激素受體高表達，且兩者之間可能存在一定的相關(guān)性。孕激素是雌激素的調(diào)控基因產(chǎn)物，反映了雌激素的功能及活性，而原癌基因Her-2（Proto-oncogene HER-2，C-erbB-2）是與雌激素受體表達相關(guān)受體，與肺癌的預(yù)后相關(guān)[2，3]。本研究分析肺腺癌患者ER、PR及C-erbB-2表達，現(xiàn)報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選擇2013年3月～2015年2月在我院手術(shù)治療的肺腺癌患者的組織切塊60例為研究對象。納入標準：手術(shù)治療，術(shù)后病理確認，標本石蠟固定；所有患者在手術(shù)前未接受放療或者化療治療；臨床資料及隨訪資料完整。排除標準：合并其他系統(tǒng)腫瘤，合并其他疾病，隨訪過程中因其他原因死亡。60例患者男39例，女21例，年齡37～77歲，平均（56.1±12.7）歲；其中Ⅰ期22例，Ⅱ期29例，Ⅲ期9例。隨訪：28例發(fā)生骨轉(zhuǎn)移，其中男19例，女9例；32例患者未發(fā)生骨轉(zhuǎn)移，其中男20例，女12例。

1.2方法

組織切塊中ER、PR及C-erbB-2的表達檢測采用免疫組化方法，試劑盒由上海撫生實業(yè)有限公司提供。操作嚴格按照說明書進行。石蠟切塊制作為4～5 μm切片，脫蠟，梯度酒精水化，蒸餾水沖洗2次，隨后PBS液沖洗3次，每次沖洗3 min，輕微震蕩。進入濃度為0.01 mol/L，pH 6.0的枸櫞酸鹽內(nèi)煮沸15 min。加53%過氧化氫，室溫下孵育10 min，PBS沖洗，每次3 min，共3次。除去PBS，加1∶100的50 μL一抗，室溫下孵育60 min，PBS沖洗，每次3 min，共3次。除去PBS，加即用型 Max Vision試劑50 μL，室溫下孵育10 min，PBS沖洗，每次3 min，共3次。除去PBS，加DAB溶液100 μL，3~5 min后，自來水沖洗，蘇木素復(fù)染，PBS沖洗，梯度濃度乙醇脫水，風(fēng)干，二甲苯溶液過2 min，樹膠封片。

1.3結(jié)果判斷[4]

在光鏡下隨機選擇10個高倍視野，計1000個細胞。核表達受體判斷細胞核有黃棕色顆粒為陽性。每個高倍鏡視野內(nèi)，陽性細胞占0%~10%為陰性，11% ~33%為（+），34%~66%為（++），67%~100%為（+++）。膜表達受體判斷細胞膜染色：陰性為無染色細胞；超過10%的癌細胞細胞膜染色，染色在細胞膜上間斷分布，為環(huán)繞細胞膜為（+）；癌細胞細胞膜染色超過10%，染色強度為弱到中度，連續(xù)，環(huán)繞整個細胞膜為（++）；癌細胞細胞膜強度染色超過10%，連續(xù)，環(huán)繞整個包膜為（+++）。陰性為0-+；弱陽性為++，強陽性為+++。

1.4觀察指標

分析肺腺癌患者ER、PR及C-erbB-2陽性情況，分析不同性別、分化程度、臨床分期患者ER、PR及C-erbB-2的陽性表達。分析C-erbB-2陽性與ER、PR陽性表達的相關(guān)性。分析患者是否發(fā)生骨轉(zhuǎn)移與ER、PR及C-erbB-2陽性表達的相關(guān)性。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS13.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行分析。計數(shù)資料采用χ2檢驗，計量資料以均數(shù)±標準差表示，采用t檢驗。相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

表1　ER、PR及C-erbB-2在肺腺癌組織中的表達[n（%）]

2　結(jié)果

2.1ER、PR及C-erbB-2在肺腺癌組織中的表達

60例患者，14例ER陽性表達，占23.3%，13例PR陽性，占21.7%，6例C-erbB-2陽性，占10.0%。不同性別、年齡、臨床分型、臨床分期患者ER、PR及C-erbB-2陽性表達比較見表1。分化程度越低的患者ER陽性率及C-erbB-2陽性率越高（P＜0.05）。

2.2C-erbB-2在肺腺癌組織中的表達與ER及PR表達的相關(guān)性

相關(guān)性分析：C-erbB-2與ER表達呈顯著正相關(guān)的關(guān)系 （r=0.461），C-erbB-2表達與PR呈正相關(guān) （r= 0.326）；C-erbB-2與ER及PR均為陽性呈顯著正相關(guān)的關(guān)系（r=0.329），ER與PR表達無相關(guān)性（r=0.081）。

2.3是否發(fā)生骨轉(zhuǎn)移患者肺腺癌組織中ER、PR及C-erbB-2表達比較

見表2。骨轉(zhuǎn)移患者與無骨轉(zhuǎn)移患者肺腺癌組織中ER、PR及C-erbB-2表達無差異（P＞0.05）。

3　討論

越來越多的研究證實，性激素參與了多種惡性腫瘤的發(fā)生及發(fā)展，包括子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌、前列腺癌，性激素具有促癌作用。近來的研究顯示，性激素受體也廣泛存在肺癌組織中。性激素具有調(diào)節(jié)肺細胞分化、成熟的作用，同時肺癌組織中雌激素受體、孕激素受體高表達導(dǎo)致肺癌組織內(nèi)分泌環(huán)境發(fā)生變化。另外肺癌細胞在癌變過程中，可能啟動了雌激素受體及孕激素受體的蛋白合成基因，合成受體蛋白[5，6]。雌激素與雌激素受體結(jié)合發(fā)揮生理效應(yīng)。既往認為ER是一種配體依賴性轉(zhuǎn)錄激活因子，近年來的研究顯示，在沒有配體的情況下，ER也會與其他細胞信號傳導(dǎo)通路發(fā)生作用，即配體非依賴性激活，包括其磷酸化，其與生長因子、孕激素受體、癌基因/抑癌基因蛋白等通路的相互作用，從而參與靶細胞的分化、增生、正常生理功能維持的調(diào)節(jié)，并且雌激素相關(guān)腫瘤發(fā)病以及對雌激素拮抗劑藥物耐藥等與ER的這些作用有關(guān)[7-9]。雌激素是乳腺癌的生物學(xué)標志物，是目前用于比較可靠的治療、判斷乳腺癌預(yù)后的指標[10，11]。研究顯示乳腺癌ER呈陽性的組中，ERαmRNA水平呈高表達，且ERα基因突變率高，這些變化導(dǎo)致雌激素受體對雌激素的敏感性顯著增加，從而促使細胞增殖，誘發(fā)癌癥的發(fā)生[12，13]。也有學(xué)者研究，結(jié)腸癌、直腸癌中ER的表達水平也顯著升高，尤其是進展期的結(jié)腸癌及直腸癌，其水平高于早期，并且同時表達ER及PR的患者生存期縮短，因此認為雌激素受體及孕激素受體的表達與惡性腫瘤的進展具有相關(guān)性[14]。

表2　是否發(fā)生骨轉(zhuǎn)移患者肺腺癌組織中ER、PR及C-erbB-2陽性表達比較[n（%）]

肺腺癌（lung adenocarcinoma）是肺癌的一種，屬于非小細胞癌。不同于鱗狀細胞肺癌，肺腺癌較容易發(fā)生于女性及不抽煙者[15]。起源于支氣管黏膜上皮，少數(shù)起源于大支氣管的黏液腺。發(fā)病率比鱗癌和未分化癌低，發(fā)病年齡較小，女性相對多見。多數(shù)腺癌起源于較小的支氣管，為周圍型肺癌。早期一般沒有明顯的臨床癥狀，往往在胸部X線檢查時被發(fā)現(xiàn)。表現(xiàn)為圓形或橢圓形腫塊，一般生長較慢，但有時早期即發(fā)生血行轉(zhuǎn)移。淋巴轉(zhuǎn)移則發(fā)生較晚。在本次研究中，肺腺癌組織均有不同程度的ER、PR表達，提示肺腺癌為內(nèi)分泌相關(guān)的惡性腫瘤。在不同性別、臨床分期的肺腺癌組織中ER、PR表達沒有顯著差異。但是ER表達與腫瘤細胞的分化程度具有一定的相關(guān)性，對于低分化及中分化的腺癌，ER的表達更高。但是PR的表達與肺腺癌分化程度沒有明顯的相關(guān)性，不同分化程度的肺腺癌PR的表達相似。目前的研究顯示，ER、PR在不同的腫瘤組織中與臨床分期、病理分型、分化程度等的相關(guān)性不同。目前的研究顯示性激素與肺癌的關(guān)系具有兩方面性，一方面具有抑癌的作用，一方面也有致癌的作用。機體內(nèi)的激素環(huán)境失衡，無論過多或者減少，都是導(dǎo)致癌癥發(fā)生的誘因。性激素本身不致癌，但是其能夠促進靶細胞增殖，導(dǎo)致致癌物質(zhì)更容易發(fā)生作用，啟動致癌過程。性激素也有促催化劑作用，促進癌細胞起始階段的增殖，還能夠促使癌細胞的迅速增殖。在本次研究中C-erbB-2在肺腺癌中的陽性表達率為10.0%。研究顯示，C-erbB-2陽性表達提示肺腺癌的惡性程度較高。本研究發(fā)現(xiàn)低分化腺癌的陽性率更高，提示患者預(yù)后較差。另外本研究還提示，發(fā)生骨轉(zhuǎn)移患者與未發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的患者ER、PR及C-erbB-2的陽性率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

綜上所述，肺腺癌組織中ER、PR及C-erbB-2均有一定程度的表達，說明肺腺癌是內(nèi)分泌相關(guān)腫瘤，內(nèi)分泌靶向治療可以作為今后研究的方向之一。

[1]王立平，韓菲，魯亞平.雌激素及其受體與肺癌的研究進展[J].生物學(xué)通報，2015，50（11）：1-4.

[2]李軍川，竺紅宇，陳廷煊，等.非小細胞肺癌BRCA2的表達及其與ER、PR及C-erbB-2的相關(guān)性研究[J].中國組織化學(xué)與細胞化學(xué)雜志，2008，17（4）：306-310.

[3]鄭麗仙，李志鷹，林挺巖，等.肺癌患者血清雌激素水平檢測及其臨床意義探討[J].臨床肺科雜志，2015，20（11）：1999-2001.

[4]劉海榮，于金明，李巖，等.ER、PR、C-erbB-2與肺腺癌骨轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究[J].山東大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2012，50 （4）：91-95.

[5]簡紅，朱雷，邵晉辰，等.ERα、ERβ在非吸煙非小細胞肺癌患者中的表達與生存期和性別的相關(guān)性研究[J].中國癌癥雜志，2013，23（11）：910-916.

[6]楊欣，薛麗燕，劉宇，等.肺癌組織中雌激素受體α和雌激素受體β的表達及臨床意義[J].中華腫瘤雜志，2013，35（9）：678-683.

[7]彭理，趙大春，周易冬，等.雌激素受體、孕激素受體、Cerb-B2、Ki67指數(shù)在乳腺單純型黏液癌中的表達[J].中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報，2015，37（6）：720-723.

[8]董麗儒，彭濤，劉楠，等.ER、PR、Her2/neu在甲狀腺乳頭狀癌中的表達及臨床意義[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2015，23 （24）：3576-3579.

[9]丁堪鑠，盧麗娜，余莉萍，等.C-erbB-2、p53、Ki-67、ER、PR在子宮內(nèi)膜癌中的表達及臨床相關(guān)性[J].實用醫(yī)學(xué)雜志，2015，31（24）：4069-4071.

[10]高仁里，張丹，葉慧英，等.乳腺癌中雄激素受體的表達及與雌激素、孕激素受體表達的關(guān)系[J].標記免疫分析與臨床，2015，22（11）：1073-1076.

[11]王鳳云，張慧娟，謝立平.乳腺癌ER、PR和HER-2與其超聲征象的關(guān)系及臨床意義[J].包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2015，31（11）：27-29.

[12]徐樂，何琳，陳濤.乳腺癌超聲圖像特征與ER、PR、CerbB-2的相關(guān)性研究[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2016，38 （2）：182-186.

[13]陳彬，徐海燕，張玲，等.紫杉醇聯(lián)合白令膠囊對Ⅲ期乳腺癌患者ER、MMP-9、腫瘤標志物及性激素影響研究[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2015，17（12）：115-117.

[14]張玲，朱圣韜.雌激素在結(jié)腸癌發(fā)病過程中的作用[J].中國醫(yī)刊，2015，67（12）：17-20.

[15]連嬌燕，庹必光，文國容，等.雌激素受體在消化系腫瘤中的研究進展[J].世界華人消化雜志，2015，23（26）：4227-4235.

Expression of ER，PR and C-erbB-2 with lung adenocarcinoma

QIN WenjingZHANG Shuanglin
Department of Respiratory Medicine，the First Affiliated Hospital of He'nan University，Kaifeng475000，China

R734.2

A

1673-9701（2016）12-0008-03

河南省教育廳科學(xué)技術(shù)研究重點項目（13A320061）

2016-01-16）