陳瀛川　周建東（江蘇省如東縣掘港畜牧獸醫(yī)站　226499）

銀黃連翹散可溶性粉在靶動物雞中的安全性研究

陳瀛川周建東
（江蘇省如東縣掘港畜牧獸醫(yī)站226499）

銀黃連翹可溶性粉是用于防治對雞傳染性支氣管炎的新中獸藥，為了考察其對靶動物雞的安全性，選用綠殼蛋雞一日齡雛公雞120只，正常飼喂8天，從9日齡開始時隨機(jī)分成4組，并記錄其體重。4組分別為空白對照（不給藥組）、組銀黃連翹散可溶性粉低劑量組、銀黃連翹散中劑量組和銀黃連翹散高劑量組。試驗(yàn)時，銀黃連翹可溶性粉分別按4、12、20g/L劑量混飲給藥，連續(xù)5d，自由采食及飲水。給藥后每天觀察雛雞的臨床癥狀，即精神、食欲、飲水、排便、運(yùn)動和毒副反映，連續(xù)觀察12天，試驗(yàn)結(jié)束稱重，統(tǒng)計(jì)各組的日均增重、日均采食量、料重比；并采血進(jìn)行紅細(xì)胞數(shù)、白細(xì)胞總數(shù)和白細(xì)胞分類、總蛋白、白蛋白和血清生化指標(biāo)（AST、ALT、ALP、TG、TC、BUN、UA）的檢測；剖檢觀察心、肝、脾、肺、腎、腺胃、腸、睪丸、法氏囊等器官的組織病理變化和分別稱量并統(tǒng)計(jì)臟器指數(shù)。結(jié)果顯示：與空白對照組相比，銀黃連翹散可溶性粉的3個劑量組對靶動物雞的臨床癥狀、血液學(xué)、血液生化學(xué)、增重和臟器系數(shù)等指標(biāo)差異均不顯著（P＞0.05）。表明該藥對靶動物雞具有較高的安全性。

銀黃連翹散可溶性粉雞靶動物安全性

銀黃連翹散對傳染性支氣管炎有很強(qiáng)的預(yù)防作用。由青島農(nóng)業(yè)大學(xué)研發(fā)純中藥新制劑，由金銀花、連翹、黃芩、蒲公英和桔梗提取制成。其作用有清熱解毒，涼血利咽；治療雞傳染性支氣管炎病毒引起的呼吸道疾病。以低劑量組即臨床推薦劑量銀黃連翹散可溶性粉4g/L、中劑量組銀黃連翹散可溶性粉12g/L和高劑量組銀黃連翹散可溶性粉20g/L混飲給藥，連續(xù)給藥5d，連續(xù)觀察12d，以觀察給藥后靶動物雞的臨床癥狀、各臟器系數(shù)、血液學(xué)、血液生化學(xué)和臟器肉眼臨床變化，以提供有關(guān)銀黃連翹散可溶性粉在靶動物雞的臨床血液學(xué)、血液生化學(xué)、臨床臟器病理變化方面的數(shù)據(jù)，為其臨床應(yīng)用的安全性評價(jià)提供數(shù)據(jù)資料。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)藥物銀黃連翹散可溶性粉：由青島農(nóng)業(yè)大學(xué)研發(fā)，山東信得科技股份有限公司2014年4月6號生產(chǎn)，批號20140406。其成分有金銀花、黃芩、連翹、桔梗、蒲公英。

1.2試驗(yàn)動物1日齡綠殼蛋雞公雛，試驗(yàn)前按常規(guī)飼養(yǎng)，喂不含任何藥物的全價(jià)雛雞飼料，自由采食及飲水；5日齡斷喙，7日齡用新城疫LaSota苗滴鼻點(diǎn)眼，1羽份/只，飼養(yǎng)至9日齡用于試驗(yàn)。

1.3試驗(yàn)周期試驗(yàn)從2015年11月15日至12月06日，試驗(yàn)周期為20d。

1.4試驗(yàn)方法（1）分組及給藥：取9日齡健康雛雞120只，稱重后隨機(jī)分成4組（見圖1），每組30只，分別為空白對照組（不給藥組）、銀黃連翹散可溶性粉低劑量組，銀黃連翹散中劑量組和銀黃連翹散高劑量組（見表1）。試驗(yàn)時，銀黃連翹可溶性粉分別按4、12、20g/L劑量混飲給藥，喂藥連續(xù)5d，自由采食及飲水。（2）臨床觀察：每組試驗(yàn)雞還需連續(xù)觀察12d。在試驗(yàn)期內(nèi)，由實(shí)驗(yàn)參與人員進(jìn)行觀察，記錄靶動物雞對藥物不同劑量產(chǎn)生的反應(yīng)，即精神、食欲、飲水、排便、運(yùn)動和毒副反映。試驗(yàn)前和試驗(yàn)結(jié)束后各測定1次體重，據(jù)此計(jì)算日均增重情況等；觀察雞的精神狀況及弄濕墊料及拉稀、飲食欲減退及毒副反應(yīng)。（3）增重及臟器系數(shù)變化：在試驗(yàn)前后對各組試驗(yàn)雞稱重，計(jì)算出日均增重。試驗(yàn)結(jié)束后每組隨機(jī)撲殺10只雞，取其中六6只剖檢觀察心、肝、脾、肺、腎、腺胃、腸、睪丸、法氏囊等臟器組織病理變化和分別稱量心、肝、脾、腺胃、腸、睪丸、法氏囊等臟器重量，統(tǒng)計(jì)臟器指數(shù)（臟器濕重/活體重×100）。（4）血液學(xué)檢查：用負(fù)壓采血管對試驗(yàn)雞采集血樣（全血）適量，用肝素抗凝，采用全自動血液細(xì)胞分析儀進(jìn)行血液學(xué)常規(guī)檢測。檢測的血液學(xué)參數(shù)有：紅細(xì)胞數(shù)量、白細(xì)胞數(shù)量、淋巴細(xì)胞數(shù)量、異嗜性粒細(xì)胞數(shù)量、嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)量、嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)量、單核細(xì)胞數(shù)量、淋巴細(xì)胞百分比、異嗜性粒細(xì)胞百分比、單核細(xì)胞百分比、嗜酸性粒細(xì)胞百分比、嗜堿性粒細(xì)胞百分比、血紅蛋白含量。（5）血液生化學(xué)檢查：在試驗(yàn)結(jié)束，所有試驗(yàn)雞采集血樣（全血）適量，待血液凝固后吸取血清樣品，采用全自動生化分析儀進(jìn)行血液生化學(xué)檢查。檢測的血液生化學(xué)參數(shù)有：谷丙轉(zhuǎn)移酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLO）、白球比（A/G）、尿素（BUN）、尿酸（UA）、總膽固醇（Chol）、甘油三酯（TG）。（6）臟器臨床肉眼檢查：試驗(yàn)結(jié)束時，每組隨機(jī)撲殺10只試驗(yàn)雞進(jìn)行組織學(xué)檢查，對心、肝、脾、肺、腎、腺胃、腸、睪丸、法氏囊等臟器進(jìn)行常規(guī)檢查，根據(jù)出現(xiàn)的毒性情況決定是否對其進(jìn)行進(jìn)一步組織病理學(xué)檢查。（7）數(shù)據(jù)處理：數(shù)據(jù)以±SD表示，用SPSS19.0應(yīng)用軟件進(jìn)行組間數(shù)據(jù)的顯著性檢驗(yàn)。采用t檢驗(yàn)比較試驗(yàn)組與對照組間均增重、料肉比（飼料利用率）、血液學(xué)和血液生化學(xué)等各項(xiàng)指標(biāo)的顯著性差異。

表1　試驗(yàn)雞給藥途徑及分組情況

2　結(jié)果與分析

2.1一般臨床觀察整個試驗(yàn)期間，空白對照組（不給藥組）、銀黃連翹散可溶性粉低劑量組，銀黃連翹散中劑量組和銀黃連翹散高劑量組中所有的靶動物雞健康狀況良好，活動、呼吸、飲水和采食均正常，在試驗(yàn)期間未觀察到任何臨床病理癥狀，試驗(yàn)期間各組試驗(yàn)雞均無死亡記錄。

2.2增重與飼料利用率根據(jù)試驗(yàn)前后各組試驗(yàn)雞的重量計(jì)算出平均值和日均增重，各組之間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析（t檢驗(yàn)），結(jié)果表明各劑量組與對照組平均增重相比（見表2），體重稍有增加，均無顯著差異（P＞0.05）。與對照組相比，各劑量組料重比明顯下降，飼料利用率增加。表明銀黃連翹可溶性粉在一定劑量范圍內(nèi)，隨著劑量的增加，可改善飼料的利用率。

表2　試驗(yàn)期各組雞的日均增重（n=30）　　　　?。╣）

2.3臟器系數(shù)變化情況試驗(yàn)結(jié)束后每組隨機(jī)撲殺10只雞，取心臟等臟器稱重并計(jì)算臟器系數(shù)。對心臟等臟器系數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析（t檢驗(yàn)），結(jié)果顯示與對照組相比，各劑量組試驗(yàn)雞的心臟指數(shù)、肝臟指數(shù)、腸道指數(shù)、腺胃指數(shù)、肺臟指數(shù)、腎臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、法氏囊指數(shù)、睪丸指數(shù)均呈現(xiàn)下降趨勢，但無顯著性差異（P＞0.05）。這可能是因?yàn)楦鹘o藥組試驗(yàn)雞體重相對較大而引起的，詳細(xì)結(jié)果見表3。

表3　各組試驗(yàn)雞的臟器系數(shù)（n=10）

2.4血液常規(guī)指標(biāo)分析靶動物雞在使用銀黃連翹散可溶性粉不同劑量組血液學(xué)檢測結(jié)果見表4。從表4中可以看出，空白對照組和各給藥組的紅細(xì)胞數(shù)、白細(xì)胞數(shù)、淋巴細(xì)胞數(shù)、嗜中性粒細(xì)胞、嗜酸性白細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、血紅蛋白濃度和血紅蛋白百分比均在正常范圍內(nèi)。但與對照組相比，低劑量組的紅細(xì)胞數(shù)顯著升高（P＜0.05）；低劑量組和高劑量組的白細(xì)胞總數(shù)則明顯低于中級中劑量組與對照組（P＜0.05）。其余指標(biāo)則無顯著性差異，表明不同劑量的藥物對血常規(guī)各項(xiàng)指標(biāo)的影響較小。

表4　各組試驗(yàn)雞的血液學(xué)指標(biāo)（n=30）

2.5血液生化學(xué)檢測結(jié)果血液生化學(xué)檢測結(jié)果見表5。由表5可知，與對照組相比各劑量組試驗(yàn)雞的血液生化指標(biāo)均無顯著性差異（P＞0.05），表明銀黃連翹散可溶性粉對靶動物雞的肝功能、腎功能、脂代謝、蛋白代謝均無不良影響。

表5　各組實(shí)驗(yàn)雞的血液生化指標(biāo)（n=10）　　?。╣/L）

2.6臟器臨床肉眼檢查結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將所有把動物雞撲殺。對已經(jīng)剖檢的10只雞進(jìn)行檢查，對各組試驗(yàn)雞的心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、腺胃、腸道（十二指腸至直腸）、睪丸、法氏囊等觀察是否有病變，發(fā)現(xiàn)各個劑量組的臟器大小正常；胸腔、腹腔、心包無積液與粘連；肝脾腎色澤均勻，表面無腫脹及包塊；腺胃及腸道無出血點(diǎn)及其他病變。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明各劑量組對各器官并無毒害用。

3　討論

3.1銀黃連翹散的藥性銀黃連翹散可溶性粉屬于“八法”中的清法，稱為清熱藥，獸醫(yī)臨診最為常用［7］。清熱藥性屬寒涼，具有清熱解毒，涼血利咽等功能，主要用于高熱、熱痢、濕熱黃疸、熱毒瘡腫、熱性出血及暑熱等里熱病證，對于雞傳染性支氣管炎病毒引起的呼吸道疾病也有一定的療效［8］。銀黃連翹散可溶性粉是由金銀花，黃芩，連翹，桔梗，黃花地丁組成。集金銀花的抗病原微生物、抗炎、解熱、保肝、抗生育、止血、免疫調(diào)節(jié)、中樞興奮等功能；黃芩的抗菌、抗病毒、鎮(zhèn)靜、抗炎、抗過敏、抗氧化；連翹的抗腫瘤、抗病毒、抗炎鎮(zhèn)痛、抗菌、保肝護(hù)心、抗內(nèi)毒素、降壓、鎮(zhèn)吐止吐；桔梗的抗炎、祛痰、解熱鎮(zhèn)痛、擴(kuò)張血管、抗過敏；蒲公英的抗菌、抗腫瘤、抗氧化、免疫促進(jìn)等一系列功效集一體，組成的中藥適用于預(yù)防雞的病毒性傳染性支氣管炎［9］。目前預(yù)防IB的主要方法是接種疫苗，但由于疫苗的高強(qiáng)度、大范圍使用，IBV的毒力和抗原性發(fā)生了變異，使得疫苗接種難以取得理想免疫效果，有時甚至誘使該病發(fā)生。因此尋找新的藥物對于IB的防治具有重要的意義。

3.2試驗(yàn)?zāi)康谋驹囼?yàn)的目的是將銀黃連翹散可溶性粉不同劑量加水混合飲用，測試其對靶動物雞的安全性。本試驗(yàn)測定了試驗(yàn)雞的健康、采食狀況；增重、各臟器指數(shù)；血液學(xué)、血液生化學(xué)指標(biāo)。銀黃連翹散可溶性粉低劑量組（4g/L）、銀黃連翹散中劑量組（12g/L）和銀黃連翹散高劑量組（20g/L）試驗(yàn)雞的增重、血液學(xué)、血液生化學(xué)等指標(biāo)參數(shù)與空白對照組（不給藥組）相比無顯著性差異（P＞0.05），剖檢發(fā)現(xiàn)臟器均無異常變化。結(jié)果表明銀黃連翹散可溶性粉的安全適用范圍很大，使用中劑量對預(yù)防傳染性支氣管炎是最安全的。這與劉芳研究用“百呼清”可有效治療自然感染的雞傳染性支氣管炎，病雞治愈率都在99%以上有相似的結(jié)果，對IBV具有一定保護(hù)作用［10］。不同濃度的藥液毒傳染性支氣管炎病毒對感染雛雞均有保護(hù)作用。王永彬等用板黃口服液在靶動物雞中的安全性研究，試驗(yàn)結(jié)果表明，板黃口服液在預(yù)防雞呼吸道疾病、提高機(jī)體免疫力的同時，也證明10倍推薦劑量（10%）的板黃口服液對靶動物雞是安全的［11］。同樣是用于于呼吸道疾病，可見銀黃連翹散可溶性粉相對而言安全范圍廣。

4　總結(jié)

本試驗(yàn)分析了不同濃度的銀黃連翹散對靶動物雞的臨床癥狀、血液學(xué)、血液生化學(xué)、各臟器系數(shù)和組織病理學(xué)指標(biāo)變化的影響，結(jié)果顯示與空白對照組相比，銀黃連翹散可溶性粉的不同劑量組對靶動物雞的臨床癥狀、血液學(xué)、血液生化學(xué)、增重和臟器系數(shù)等指標(biāo)差異均不顯著（P＞0.05）。表明該藥對靶動物雞具有較高的安全性。這對于抵抗IBV有重大意義。

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1007-1733（2016）08-0005-03

2016-05-12）