王　超，張宿義，董　異，敖宗華，稅梁揚(yáng)，李德林，，秦　輝，羅　明，王小軍，曹振華，蘇占元，張　方

（1.四川理工學(xué)院生物工程學(xué)院，四川自貢643000； 2.瀘州老窖股份有限公司，四川瀘州646000； 3.國家固態(tài)釀造工程技術(shù)研究中心，四川瀘州646000； 4.瀘州科源生物科技有限公司，四川瀘州646606；5.國家酒類及加工食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心瀘州實(shí)驗(yàn)室，四川瀘州646000）

丟糟制大曲應(yīng)用于釀酒生產(chǎn)的研究

王超1，張宿義2，3，董異2，敖宗華2，3，稅梁揚(yáng)4，李德林2，4，秦輝2，羅明4，王小軍2，3，曹振華1，蘇占元5，張方1

（1.四川理工學(xué)院生物工程學(xué)院，四川自貢643000； 2.瀘州老窖股份有限公司，四川瀘州646000； 3.國家固態(tài)釀造工程技術(shù)研究中心，四川瀘州646000； 4.瀘州科源生物科技有限公司，四川瀘州646606；5.國家酒類及加工食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心瀘州實(shí)驗(yàn)室，四川瀘州646000）

以濃香型白酒生產(chǎn)工藝為基礎(chǔ)，中溫大曲為對照，定期取糟醅綜合樣測定各項(xiàng)理化指標(biāo)，結(jié)合基酒的色譜分析及感官評定進(jìn)行釀酒對比實(shí)驗(yàn)，探討丟糟制大曲的釀酒效果。研究結(jié)果表明：（1）實(shí)驗(yàn)窖和對比窖的溫度變化規(guī)律均符合“前緩、中挺、后緩落”的變化趨勢；（2）實(shí)驗(yàn)窖和對比窖的酸度、淀粉、水分、還原糖、酒精度等理化指標(biāo)的變化趨勢基本保持了一致性；（3）丟糟制大曲的生產(chǎn)應(yīng)用，顯著提高大曲酒產(chǎn)量的同時還能一定程度上提高大曲酒酒質(zhì)。

濃香型白酒； 淀粉； 丟糟制大曲

白酒丟糟是以高粱、小麥、玉米等谷物為原料經(jīng)固態(tài)發(fā)酵、蒸餾取酒后的殘留物，是白酒生產(chǎn)過程中最大的副產(chǎn)物［1］。據(jù)統(tǒng)計(jì)，每年白酒行業(yè)產(chǎn)生大約2500萬t的丟糟［2］。由于白酒釀造工藝的特殊性，丟糟中含有多種氨基酸、礦物質(zhì)和有機(jī)酸等豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，若能夠充分合理利用丟糟中的有效成分，不僅能解決環(huán)境污染問題，也能節(jié)約糧食、降低生產(chǎn)成本，具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益。目前，我國關(guān)于白酒丟糟的資源化綜合利用方面做了許多研究，主要包括生產(chǎn)飼料、肥料、食品、板材、燃料酒精、燃料棒等方面［3］。盡管現(xiàn)在已有利用丟糟代替部分小麥制曲、釀酒的研究［4-6］，但將丟糟與淀粉混合使用生產(chǎn)濃香型大曲，至今尚無相關(guān)報(bào)道。

大曲作為白酒釀造的糖化發(fā)酵劑，其本質(zhì)為釀酒微生物的窖外培養(yǎng)基。從理論上講，只要溫度、濕度、pH值、含氧量適宜，微生物便能在其介質(zhì)上迅速生長繁殖，進(jìn)行物質(zhì)的分解與合成代謝。丟糟中含有9%～13%的熟淀粉，比較豐富的醇、醛、酸、酯等多種有機(jī)物和以磷為主的多種礦物質(zhì)［7］。直接添加淀粉可以保證大曲原料營養(yǎng)成分的完整性，確保大曲微生物的正常生長繁殖，提高大曲“提漿”效果，利于大曲“穿衣”，促進(jìn)有益微生物的富集、生長繁殖；丟糟中的營養(yǎng)成分與小麥主成分相似，在現(xiàn)有制曲工藝條件下，丟糟、淀粉的添加在不改變大曲原有風(fēng)格特征的同時還有利于釀酒有益微生物的生長繁殖，極大程度的降低大曲生產(chǎn)成本，減少環(huán)境污染。故本實(shí)驗(yàn)在濃香型白酒生產(chǎn)工藝的基礎(chǔ)上，將添加丟糟和淀粉制成的丟糟大曲用于釀酒生產(chǎn)實(shí)驗(yàn)，探討丟糟制大曲對釀酒生產(chǎn)的影響及其應(yīng)用價值，以期為白酒生產(chǎn)企業(yè)對丟糟的資源化利用提供理論和實(shí)踐依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料

實(shí)驗(yàn)曲：以傳統(tǒng)濃香型大曲生產(chǎn)工藝為基礎(chǔ)，在制曲拌料過程中分別加入A kg鮮丟糟和B kg淀粉制成的丟糟大曲。

對照曲：按傳統(tǒng)濃香型大曲生產(chǎn)工藝生產(chǎn)的中溫大曲。

糟醅：濃香型白酒正常發(fā)酵的糧食糟醅。

1.2藥品及儀器

氫氧化鈉，四川西隴化工有限公司；鹽酸，四川西隴化工有限公司；五水合硫酸銅，廣東省化學(xué)試劑工程技術(shù)研究開發(fā)中心；四水合酒石酸鉀鈉，廣東省化學(xué)試劑工程技術(shù)研究開發(fā)中心；酚酞，四川西隴化工有限公司；次甲基藍(lán)，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所；葡萄糖（一水）：成都市科龍化工試劑廠；LRH.250生化培養(yǎng)箱，上海一恒科技有限公司；窖池?cái)?shù)顯溫度計(jì)，濟(jì)南雪納斯儀表有限公司；DT1002電子天平，常熟市佳衡天平儀器有限公司；DL-1萬用電爐，北京市永光明醫(yī)療儀器有限公司；SHHW21.420恒溫水浴鍋，北京市永光明醫(yī)療儀器有限公司；500 mL全玻璃蒸餾器；DMA5000密度儀；酸堿滴定儀器等；Agilent 7890 B氣相色譜，美國安捷倫公司等。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

選擇窖齡相同、母糟基礎(chǔ)相當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)窖池。以傳統(tǒng)中溫大曲和丟糟制大曲為實(shí)驗(yàn)用曲，在確保其他工藝參數(shù)一致的條件下，分別按20%（投糧量計(jì)）的曲藥用量組織釀酒生產(chǎn)實(shí)驗(yàn)。

1.3.1糟醅理化數(shù)據(jù)的影響研究。

入窖后，定期取窖池5個點(diǎn)的糟醅綜合樣，測定其理化指標(biāo)，分析比較理化數(shù)據(jù)的變化。

1.3.2原料出酒率的影響研究。

發(fā)酵結(jié)束后，按照“量質(zhì)摘酒”工藝要求蒸餾取酒，并統(tǒng)計(jì)每個窖池產(chǎn)酒重量，根據(jù)投入糧食的重量計(jì)算出原料的出酒率。

1.3.3基酒品質(zhì)的影響研究。

按照“量質(zhì)摘酒”工藝要求，分別摘取每個窖池中層糟醅二段酒綜合酒樣，采用氣相色譜分析法測定酒中的總酸、總酯和四大酯等香味成分。

1.4指標(biāo)測定方法

溫度：采用數(shù)顯溫度計(jì)對窖內(nèi)糟醅中的溫度進(jìn)行測定；水分：常壓干燥法［1］；酸度：酸堿中和滴定［1］；淀粉：斐林氏法［1］；還原糖：斐林氏法［1］；酒精含量：蒸餾法［1］；香味物質(zhì)成分分析：采用Agilent 7890 B氣相色譜儀［8］。

2　結(jié)果與分析

2.1溫度變化

發(fā)酵過程中的溫度變化反映了窖池中糟醅的發(fā)酵情況，用窖池?cái)?shù)顯溫度計(jì)對實(shí)驗(yàn)窖和對比窖進(jìn)行定點(diǎn)測溫，糟醅的溫度變化見圖1。

圖1　糟醅發(fā)酵過程中溫度變化

從圖1可知，實(shí)驗(yàn)窖與對比窖的溫度變化曲線均符合“前緩、中挺、后緩落”的規(guī)律。發(fā)酵過程中窖池溫度的升降變化與窖池中微生物的生長繁殖代謝程度有關(guān)［9］，實(shí)驗(yàn)窖與對比窖在前期和中期的溫度變化較為吻合，均緩慢上升至21 d時達(dá)到頂溫，“中挺”時間接近，均為10 d左右。隨著發(fā)酵進(jìn)行，營養(yǎng)物質(zhì)減少，微生物的生長代謝逐漸受到抑制以及酸、醇的酯化反應(yīng)，熱量生成低于窖池?zé)崃康纳⑹?，從而?dǎo)致窖池溫度的緩慢下降。其中實(shí)驗(yàn)窖相比對比窖更為“緩落”。

2.2酸度變化

酸是構(gòu)成大曲酒香味成分的前體物質(zhì)，也是酒中的一種重要的呈香呈味物質(zhì)［10］。糟醅的酸度變化見圖2。

圖2　糟醅發(fā)酵過程中酸度變化

從圖2可以看出，實(shí)驗(yàn)窖和對比窖酸度變化趨勢基本保持了一致性，在整個發(fā)酵過程中酸度都呈現(xiàn)出增加的趨勢。發(fā)酵前期，由于細(xì)菌和芽孢桿菌的生長繁殖產(chǎn)生一定的有機(jī)酸，且生酸量大于酯化減少量，使得糟醅酸度緩慢上升；隨著發(fā)酵的進(jìn)行，酵母菌的衰亡，細(xì)菌和芽孢菌的生長占優(yōu)勢，糟醅發(fā)酵進(jìn)入產(chǎn)酸期而產(chǎn)生大量的有機(jī)酸，主要有乙酸、己酸、丁酸和乳酸等；至40 d時，糟醅酸度達(dá)到峰值，且實(shí)驗(yàn)窖明顯低于對比窖，而后黃水的生成、沉淀和酸、醇的酯化反應(yīng)作用的加強(qiáng)［11］及部分有機(jī)酸被微生物作為碳源和能源消耗掉［12］，酸的消耗量大于生成量，故酸度有明顯的下降。出窖時，實(shí)驗(yàn)窖酸度明顯低于對比窖。乳酸作為糟醅整個發(fā)酵過程中的主體酸，其變化趨勢與糟醅的酸度變化是基本一致的［13］。小麥粉中添加丟糟制曲，丟糟中富含的有機(jī)酸發(fā)揮了“以酸抑酸”作用，抑制了產(chǎn)酸菌（主要為醋酸菌、乳酸菌）的過度生長繁殖，從而降低了糟醅中的乳酸含量。

2.3淀粉變化

淀粉作為糟醅微生物發(fā)酵代謝的最重要而非能直接加以利用的營養(yǎng)物質(zhì)，必須先將淀粉酶解成小分子糖類才能被利用。發(fā)酵糟醅中淀粉的動態(tài)變化間接反映窖池發(fā)酵和乙醇的生成情況，還可以特征性反映窖池中微生物的生命活動狀況［14］，淀粉含量變化見圖3。

天津臨港海洋經(jīng)濟(jì)發(fā)展示范區(qū)的主要任務(wù)是發(fā)展海水淡化與綜合利用技術(shù)，推動海水淡化產(chǎn)業(yè)規(guī)?；瘧?yīng)用創(chuàng)新示范。

圖3　糟醅發(fā)酵過程中淀粉含量變化

由圖3可知，實(shí)驗(yàn)窖淀粉在發(fā)酵前期的下降速率明顯大于對比窖，這主要是由于丟糟大曲中酶類物質(zhì)的代入和發(fā)酵初期霉菌等好氧微生物的生長繁殖代謝產(chǎn)生了大量的糖化酶、淀粉酶，其高效的酶解作用將淀粉降解為了小分子糖類物質(zhì)，使得淀粉含量急劇下降。發(fā)酵后期代謝產(chǎn)物的不斷積累，酶活性受到抑制，微生物的生長受到限制，逐漸衰亡，淀粉含量下降減緩。其中實(shí)驗(yàn)窖消耗了9.49%，對比窖消耗了8.58%，由此說明添加丟糟、淀粉制曲使得大曲更為疏松，且提高了大曲的“提漿”效果，益于大曲的“穿衣”，富集更多的釀酒有益微生物，提高大曲糖化酶、淀粉酶等酶類活性，進(jìn)而提高糟醅中淀粉利用率。

2.4水分變化

在發(fā)酵過程中定期從實(shí)驗(yàn)窖和對比窖池中取糟醅綜合樣測定水分含量，水分含量變化見圖4。

圖4　糟醅發(fā)酵過程中水分變化

由圖4可知，實(shí)驗(yàn)窖與對比窖水分隨著發(fā)酵時間的延長而逐漸的增大，在發(fā)酵10 d時，微生物生長繁殖代謝和有氧呼吸作用，產(chǎn)生一部分水分的同時也要消耗一部分水分，而繁殖代謝產(chǎn)生的水分是大于消耗的，故水分呈緩慢上升；10 d之后水分開始急劇增加，這主要是因?yàn)閮?yōu)勢菌——酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵作用產(chǎn)生大量水分及其他微生物代謝產(chǎn)生酸、醇等一些易揮發(fā)性香味物質(zhì)成分。至40 d達(dá)到最大值，而后黃水的下沉、滴窖、舀黃水等使得糟醅的水分下降，達(dá)到出窖要求。從圖4還可以看出，實(shí)驗(yàn)窖與對比窖水分增長的速度基本保持了一致性，且實(shí)驗(yàn)窖在各時期的水分均高于對比窖，故實(shí)驗(yàn)窖中微生物的生長繁殖更為旺盛，代謝活動更強(qiáng)，為其他的生化反應(yīng)提供了良好的介質(zhì)條件，添加有丟糟、淀粉的大曲中富集、馴化了更多的有益微生物，為糟醅的正常發(fā)酵提供前提保證。

2.5還原糖變化

在發(fā)酵周期中定期取糟醅綜合樣測定還原糖含量的變化，還原糖變化見圖5。

由圖5可知，隨著發(fā)酵時間的延長，實(shí)驗(yàn)窖與對比窖糟醅中還原糖含量均呈現(xiàn)出先上升后下降，最后逐漸趨于穩(wěn)定的趨勢。在發(fā)酵初期，大曲和霉菌生長繁殖代謝的糖化酶、淀粉酶等酶類物質(zhì)將大量的淀粉酶解成小分子糖類物質(zhì)，使得糟醅中還原糖含量急劇增加，與此同時微生物的生長繁殖代謝也會消耗一部分的糖類物質(zhì)，如酵母菌將糖類物質(zhì)轉(zhuǎn)化為酒精。若淀粉轉(zhuǎn)化速度快于還原糖利用速度，還原糖含量上升，反之則下降，后期還原糖含量的急劇下降也從側(cè)面反應(yīng)了轉(zhuǎn)化和利用的相對速度［15］。從圖5還可以看出，實(shí)驗(yàn)窖和對比窖糟醅中還原糖含量的變化趨勢基本保持了一致性，且實(shí)驗(yàn)窖在各時期均低于對比窖，說明實(shí)驗(yàn)窖中微生物生長繁殖代謝更為旺盛。

圖5　糟醅發(fā)酵過程中還原糖含量變化

2.6酒精度變化

糟醅中酒精生成量是判斷發(fā)酵正常與否的重要依據(jù)［16］，窖池發(fā)酵生成的酒精中除乙醇以外還含有少量的一元醇、多元醇和芳香醇等，各種醇類物質(zhì)大多是由霉菌、酵母和細(xì)菌等微生物利用糖、氨基酸和脂肪等代謝生成。在發(fā)酵期間定期取糟醅綜合樣測定酒精含量變化，酒精含量變化見圖6。

圖6　糟醅發(fā)酵過程中酒精度變化

由圖6可以看出，實(shí)驗(yàn)窖與對比窖糟醅中酒精度均隨著發(fā)酵時間的進(jìn)行呈先上升后下降的趨勢，30 d后增大速率逐漸減緩，50 d達(dá)到峰值，且實(shí)驗(yàn)窖略高于對比窖，而后急劇下降，這主要是因?yàn)榘l(fā)酵后期酵母的逐漸衰亡，酸、醇的酯化反應(yīng)以及糖類物質(zhì)供應(yīng)不足，導(dǎo)致部分酒精被作為碳源物質(zhì)消耗掉。同時從圖6還可看出，實(shí)驗(yàn)窖與對比窖糟醅中酒精度的變化是基本一致的。故實(shí)驗(yàn)曲中微生物的數(shù)量和理化指標(biāo)是可以滿足濃香型白酒正常發(fā)酵的要求。

2.7原料出酒率分析

發(fā)酵結(jié)束后，按照“量質(zhì)摘酒”工藝要求蒸餾取酒，并統(tǒng)計(jì)每個窖池產(chǎn)酒重量，根據(jù)投入糧食的質(zhì)量計(jì)算出原料的出酒率。結(jié)果見表1。

表1　出酒率對比

由表1結(jié)果分析可知，實(shí)驗(yàn)窖的原料出酒率為39.51%，相比對比窖高出了4.84%，這與淀粉的利用情況是一致的，出酒率是考察大曲質(zhì)量的重要指標(biāo)之一。

丟糟添加入小麥粉中制曲，其富含的各種有機(jī)酸可以起到調(diào)整曲坯的起始酸度，有利于有益微生物的生長繁殖代謝和提高各種酶類物質(zhì)的活性。與此同時，丟糟中含有大量的糠殼，糠殼在一般發(fā)酵條件下難以被微生物分解利用，可起到疏松骨架的作用，從而有利于霉菌、酵母等好氧微生物的生長繁殖；淀粉的直接添加，不僅及時補(bǔ)充了由于丟糟添加而帶來的部分營養(yǎng)物質(zhì)的缺失，還發(fā)揮了其溶于水后的增稠作用，確保曲塊的成型。同時也提高了曲塊的“提漿”效果，有益于霉菌等微生物的生長繁殖，提高了曲塊的“穿衣”。故添加適量的丟糟和淀粉，有利于提高大曲的糖化力、液化力、發(fā)酵力，從而在釀酒發(fā)酵過程中有利于提高淀粉的分解，提高出酒率。

2.8基酒品質(zhì)分析

按照“量質(zhì)摘酒”工藝要求，分別摘取每個窖池中層糟醅二段酒綜合酒樣，對基酒酒質(zhì)進(jìn)行分析、對比及感官評定，結(jié)果見表2、表3。

表2　酒樣色譜分析及總酸總酯

表3　樣酒的感官品評結(jié)果

由表2、表3可知，實(shí)驗(yàn)窖所產(chǎn)基酒中四大酯、四大酸比例協(xié)調(diào)，口感更佳。己酸乙酯是濃香型白酒的主體香味成分，其含量的多少對濃香型白酒的香和味起著舉足輕重的作用，實(shí)驗(yàn)窖的含量為1.9237 g/L，比對比窖提高了22%；乳酸乙酯是濃香型白酒風(fēng)格形成的重要物質(zhì)基礎(chǔ)，它們與其他成分按適當(dāng)比例存在，能夠增強(qiáng)酒體的濃厚感，實(shí)驗(yàn)窖含量為1.3948 g/L，比對比窖降低了20%，同時影響感官品評的乳己比（乳酸乙酯與己酸乙酯的比例）為0.73，比對比窖降低了0.38，使得酒體濃郁、豐滿。

實(shí)驗(yàn)曲在提高原料出酒率的同時可以提高基酒品質(zhì)的主要原因有：丟糟是經(jīng)過長期窖池發(fā)酵而來的副產(chǎn)物，含有大量濃香型白酒的香味成分及其前體物質(zhì)；丟糟添加入小麥粉中制曲有利于馴化釀酒有益微生物，在濃香型白酒的釀造過程中使得大曲微生物能盡快適應(yīng)窖池發(fā)酵環(huán)境，有益于產(chǎn)酒產(chǎn)香微生物的生長繁殖代謝和香味物質(zhì)的形成與積累。進(jìn)而實(shí)驗(yàn)曲促進(jìn)了濃香型白酒香味成分的形成，適當(dāng)?shù)奶岣吡嘶破焚|(zhì)。

3　結(jié)論

以濃香型白酒生產(chǎn)工藝為基礎(chǔ)，在實(shí)驗(yàn)條件下，對糟醅的各項(xiàng)理化指標(biāo)進(jìn)行了跟蹤比較分析，結(jié)合基酒的色譜分析及感官評定比較，可以得出以下結(jié)論：實(shí)驗(yàn)窖和對比窖的溫度變化規(guī)律均符合“前緩、中挺、后緩落”的變化趨勢；同時實(shí)驗(yàn)窖和對比窖的酸度、淀粉、水分、還原糖、酒精度等理化指標(biāo)的變化趨勢基本保持了一致性，其變化曲線吻合度較好；添加丟糟、淀粉制曲，有利于提高大曲的液化力、糖化力和發(fā)酵力，提高釀酒過程中的糖化、發(fā)酵程度，在顯著提高濃香型白酒產(chǎn)量的同時還能一定程度上提高基酒品質(zhì)。

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Application of Daqu Produced by Waste Distillers Grains in the Production of Nongxiang Baijiu

WANG Chao1，ZHANG Suyi2，3，DONG Yi2，AO Zonghua2，3，SHUI Liangyang4，LI Delin2，4，QIN Hui2，LUO Ming4，WANG Xiaojun2，3，CAO Zhenghua1，SU Zhanyuan5and ZHANG Fang1
（1.College of Bioengineering，Sichuan University of Science and Engineering，Zigong，Sichuan 643000；2.Luzhou Laojiao Co.Ltd.，Luzhou，Sichuan 646000；3.National Engineering Technology Research Center of Solid-state Brewing，Luzhou，Sichuan 646000；4.Luzhou Keyuan Biological Technology Co.Ltd.，Luzhou，Sichuan 646606；5.Luzhou Lab of National Quality Inspection &Supervision Center forAlcoholic Drinks&Processed Food，Luzhou，Sichuan 646000，China）

In this study，we explored the effects of producing Nongxiang Baijiu with Daqu produced by waste distillers grains.The comprehensive samples of fermented grains were collected at regular intervals and their physiochemical indexes were measured.Then the produced liquor （experiment group）was compared with that produced by medium-temperature Daqu（contrast group）through sensory evaluation and chromatographic analysis.The results showed that，（1）temperature change of both the experiment group and the contrast group were consistent with the rule of“slow rise in prior stage，keep stable in medium stage，and slow decrease in late stage”；（2）the changes of the physiochemical indexes including acidity，starch content，moisture content，reducing sugar content，and alcoholicity etc.in both the experiment group and the contrast group were almost the same；（3）the application of Daqu produced by waste distillers grains in the production of Nongxiang Baijiu could evidently increase liquor yield and improve liquor quality.

Nongxiang Baijiu；starch；Daqu produced by waste distillers grains

TS262.3；TS261.4

A

1001-9286（2016）08-0108-05

10.13746/j.njkj.2016105

科技部科技支撐項(xiàng)目《農(nóng)工社一體化區(qū)域循環(huán)經(jīng)濟(jì)技術(shù)模式及示范》（項(xiàng)目編號2012BAC03B05）。

2016-04-01；

2016-06-22

王超（1990-），男，四川自貢人，在讀碩士研究生，研究方向：釀酒生物技術(shù)。

張宿義（1971-），男，博士，碩士生導(dǎo)師，國家級白酒評委，中國釀酒大師，享受國務(wù)院特殊津貼專家，發(fā)表論文100余篇，獲授權(quán)專利78項(xiàng)。

優(yōu)先數(shù)字出版時間：2016-06-29；地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20160629.1327.004.html。