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        自擬催乳湯對(duì)溴隱亭致大鼠產(chǎn)后缺乳的治療效果觀察

        2016-09-09 07:40:40董世起李歡歡卞藝斐范迎賽NawrasHamdan王婷婷高宗勤范開(kāi)劉鐘杰
        中國(guó)獸醫(yī)雜志 2016年2期
        關(guān)鍵詞:母鼠催乳缺乳

        董世起,李歡歡,卞藝斐,范迎賽,Naw rasHamdan,王婷婷,高宗勤,范開(kāi),劉鐘杰

        (中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,北京海淀100193)

        自擬催乳湯對(duì)溴隱亭致大鼠產(chǎn)后缺乳的治療效果觀察

        董世起,李歡歡,卞藝斐,范迎賽,Naw rasHamdan,王婷婷,高宗勤,范開(kāi),劉鐘杰

        (中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,北京海淀100193)

        本試驗(yàn)旨在觀察自擬催乳湯對(duì)大鼠產(chǎn)后缺乳模型的效果.采用溴隱亭灌胃SD大鼠方法建立缺乳模型,同時(shí)用自擬的催乳湯灌胃進(jìn)行治療,通過(guò)觀察母鼠每小時(shí)泌乳量、仔鼠每窩凈增重、母鼠乳腺濕重等方面的變化,評(píng)價(jià)自擬催乳湯對(duì)產(chǎn)后缺乳的治療效果.結(jié)果發(fā)現(xiàn),自擬催乳湯能極顯著提高母鼠每小時(shí)泌乳量(P<0.01)、顯著提高仔鼠每窩凈增重(P<0.05),顯著提高母鼠乳腺濕重(P<0.05),同時(shí)方劑治療組和空白對(duì)照組相關(guān)數(shù)據(jù)也具有顯著差異性.證明自擬催乳湯可以顯著提高泌乳量,維持產(chǎn)后缺乳母鼠乳腺的結(jié)構(gòu),對(duì)產(chǎn)后缺乳具有治療作用,但其治療效果還需進(jìn)一步的觀察和優(yōu)化改進(jìn).

        產(chǎn)后缺乳;溴隱亭;方劑;催乳湯

        如果在母畜分娩后出現(xiàn)乳汁不足或無(wú)乳,仔畜因吃不到乳汁而表現(xiàn)饑餓、逐漸消瘦,如不及時(shí)采取治療措施,往往導(dǎo)致仔畜最終死亡[1-2].因此本病的防治可以提高仔畜的存活率,而對(duì)產(chǎn)后缺乳癥開(kāi)發(fā)新的治療藥物,具有巨大的應(yīng)用前景和經(jīng)濟(jì)效益[3].本研究嘗試根據(jù)傳統(tǒng)中醫(yī)理論[4],以調(diào)理氣血,通絡(luò)下乳為主要原則自主擬定方劑[5],嘗試探索治療產(chǎn)后缺乳的新藥.

        1 材料與方法

        1.1試驗(yàn)材料

        1.1.1試驗(yàn)藥品甲磺酸溴隱亭片,由匈牙利吉瑞大藥廠生產(chǎn),生產(chǎn)批號(hào):T33129A;方劑所需中藥藥材均購(gòu)自北京同仁堂大藥房馬連洼店;實(shí)驗(yàn)用SD大鼠由北京軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,合格證號(hào):SCXK(軍)2012-0004,所有SD大鼠均為SPF級(jí),體重范圍為215 g~235 g.

        1.1.2催乳湯制備本研究自擬的催乳湯由黃芪、黨參、當(dāng)歸、王不留行、白術(shù)、甘草等組成.用電子天平分別稱(chēng)取所需中藥藥材放于陶瓷煎藥罐中,加入藥重量10倍體積的蒸餾水,浸泡30 min后大火煮沸再調(diào)至小火煎煮30 min,將藥液用8層脫脂細(xì)紗布過(guò)濾到大燒杯中后第2次加入8倍藥量體積的蒸餾水,直接大火煮沸后再調(diào)至小火煎煮20 min后,將藥液用8層脫脂細(xì)紗布過(guò)濾倒出,合并兩次過(guò)濾藥液,用24層脫脂細(xì)紗布過(guò)濾,過(guò)濾后用雙層分析濾紙加壓過(guò)濾,最后收集藥液的過(guò)濾液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮至生藥濃度1 g/m L,4℃保存待用.

        1.1.3溴隱亭溶液配制取甲磺酸溴隱亭片(2.5 mg)32片置于棕色試劑瓶中,量取100 mL燒開(kāi)后冷卻至室溫的蒸餾水,充分溶解即制得0.8 mg/mL的溴隱亭藥液,4℃避光保存?zhèn)溆?

        1.2試驗(yàn)方法

        1.2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及給藥將未經(jīng)產(chǎn)SD母鼠和公鼠按照3∶1比例自然配種,分娩后隨機(jī)將母鼠分成3組,每組母鼠10只,調(diào)整每只母鼠帶仔鼠12只.3組分別做為空白對(duì)照組、缺乳對(duì)照組和湯劑治療組.每天早晚對(duì)各組母鼠按以下藥量灌胃:空白對(duì)照組:2 mL蒸餾水,分兩次1 mL進(jìn)行灌胃;湯劑治療組:1 mL溴隱亭溶液+1 mL催乳湯;缺乳對(duì)照組:1 mL溴隱亭溶液+1 mL蒸餾水.

        1.2.2試驗(yàn)結(jié)果記錄每天早晨灌胃給藥2 h后,將母鼠和仔鼠進(jìn)行分離,稱(chēng)量每窩仔鼠的總重,記為W1;仔鼠和母鼠隔離4 h后,再次稱(chēng)量每窩小鼠的總重,記為W2;哺乳1 h后第3次稱(chēng)量每窩仔鼠的總重,記為W 3.連續(xù)7 d稱(chēng)量仔鼠的重量,第7天稱(chēng)重結(jié)束后將母鼠處死,稱(chēng)量并記錄母鼠腹部?jī)蓚?cè)乳腺的總重量.母鼠每天每小時(shí)泌乳量為:W3-W2+(W1-W2)/4;仔鼠每窩凈增重為:W3(Ⅹ)-W 1(Ⅰ),其中,W3(Ⅹ)是最后1天的仔鼠窩總重W 3,W1(Ⅰ)是第1天的仔鼠窩總重W 1.缺乳對(duì)照組在試驗(yàn)后期有母鼠出現(xiàn)仔鼠全窩死亡,記該母鼠每小時(shí)泌乳量為0,窩凈增重為0.

        1.3結(jié)果處理對(duì)獲得的各組數(shù)據(jù),使用IBM SPSS Statistics 20版軟件進(jìn)行單因素方差分析,多重比較時(shí),如果方差齊則采用LSD法,如果方差不齊則采用Tamhane法,以P<0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[6].試驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(X±s)表示(小數(shù)點(diǎn)后保留兩位有效數(shù)字).

        2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

        2.1母鼠每小時(shí)泌乳量比較如表1、圖1所示,湯劑治療組的每小時(shí)泌乳量比缺乳對(duì)照組高,但低于空白對(duì)照組.對(duì)于各組間比較的統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示,與空白對(duì)照組相比,缺乳對(duì)照組和湯劑治療組在前兩日的每小時(shí)泌乳量均不具有差異性,缺乳對(duì)照組的每小時(shí)泌乳量在第3天極顯著性降低(P<0.01),而湯劑治療組的每小時(shí)泌乳量在第3天出現(xiàn)顯著性降低(P<0.05),到第5天才出現(xiàn)極顯著性降低(P<0.01);與缺乳對(duì)照組相比,湯劑治療組的每小時(shí)泌乳量在第5天出現(xiàn)了顯著性升高(P<0.05),在第6天就出現(xiàn)極顯著性升高(P<0.01).而對(duì)于各組內(nèi),空白組自第3天起每小時(shí)泌乳量不再線性增加,而是保持穩(wěn)定,略有增加;缺乳對(duì)照組的每小時(shí)泌乳量自第3天起急劇下降,到第7天的時(shí)候每小時(shí)泌乳量極小,母鼠泌乳幾乎停止;湯劑治療組的母鼠每小時(shí)泌乳量在第3天略有下降,此后保持穩(wěn)定,略有下降后呈上升趨勢(shì).由于溴隱亭的作用是抑制催乳素的分泌,而催乳素的作用則是啟動(dòng)和維持泌乳,因此,本試驗(yàn)的自擬催乳湯可以促進(jìn)催乳素的分泌,對(duì)抗溴隱亭的抑制作用,并且其促進(jìn)作用具有穩(wěn)定性.

        表1 母鼠每小時(shí)泌乳量

        2.2仔鼠每窩凈增重比較對(duì)各組母鼠的仔鼠每窩凈增重分析如表2,湯劑治療組的仔鼠每窩凈增重比缺乳對(duì)照組高,但低于空白對(duì)照組.統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示,與空白對(duì)照組相比,湯劑治療組和缺乳對(duì)照組的仔鼠每窩凈增重均極顯著性的降低(P<0.01);與缺乳對(duì)照組相比,湯劑治療組的仔鼠每窩凈增重具有顯著性增高(P<0.05).

        圖1 母鼠每小時(shí)泌乳量C:空白對(duì)照組;T:湯劑治療組;M:缺乳對(duì)照組

        2.3母鼠乳腺(腹部)重量對(duì)各組母鼠的乳腺(腹部)重量分析,如表3,湯劑治療組的母鼠乳腺(腹部)重量比缺乳對(duì)照組高,但低于空白對(duì)照組.統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示,與空白對(duì)照組相比,湯劑治療組和缺乳對(duì)照組的乳腺(腹部)重量均極顯著性降低(P<0.01);與缺乳對(duì)照組相比,湯劑治療組的母鼠乳腺(腹部)重量具有顯著性增加(P< 0.05).

        表2 仔鼠每窩凈增重

        表3 母鼠乳腺(腹部)重量

        3 討論

        母鼠泌乳的調(diào)節(jié)是催乳素依存型調(diào)節(jié),乳腺組織在催乳素的作用下分泌乳汁并排入乳腺管內(nèi)[7].溴隱亭可以降低催乳素的分泌,阻止和減少乳汁的分泌[8],因此單純灌服溴隱亭的缺乳對(duì)照組,其每小時(shí)泌乳量在第3天與空白對(duì)照組出現(xiàn)了顯著性差異,并且從第3天起每小時(shí)泌乳量持續(xù)急劇降低,缺乳對(duì)照組的仔鼠也由于母鼠乳汁分泌不足而生長(zhǎng)嚴(yán)重不足,每窩凈增重與空白對(duì)照組相比極顯著性降低,說(shuō)明用甲磺酸溴隱亭片制備溴隱亭藥液經(jīng)口灌服獲得了差異性極顯著的產(chǎn)后缺乳大鼠模型.催乳素在哺乳期能夠維持乳腺的發(fā)育結(jié)構(gòu),催乳素分泌不足會(huì)導(dǎo)致母鼠在孕期發(fā)育成熟的乳腺結(jié)構(gòu)退化.缺乳對(duì)照組母鼠的泌乳量隨給藥天數(shù)急劇降低,第7天的乳腺重量也和空白對(duì)照組有了顯著性差異,有效證明了溴隱亭抑制母鼠催乳素分泌的作用,引起了缺乳對(duì)照組的乳腺退化.具體的乳腺結(jié)構(gòu)和乳腺中的催乳素分布變化,還需要通過(guò)免疫組化等研究方法進(jìn)一步研究.

        中醫(yī)認(rèn)為乳汁是由氣血津液化生,資于沖任,乳汁減少或不足是由于氣血虧虛、津液不足或因乳脈不行而致[1].而分娩則會(huì)導(dǎo)致母畜氣血虧損,津液丟失,而應(yīng)激或者環(huán)境的影響又往往導(dǎo)致母畜經(jīng)脈淤壅,乳血滯行,所以產(chǎn)后缺乳的治療臨床上以調(diào)理氣血,通絡(luò)下乳為主.本研究中擬定的湯劑中黃芪、黨參、當(dāng)歸等是補(bǔ)益氣血的藥物,王不留行是疏經(jīng)解郁,通絡(luò)下乳的常用藥物,因此在方劑中各味藥物的綜合作用下,湯劑治療組母鼠的每小時(shí)泌乳量在第3天略有下降后保持穩(wěn)定,并逐漸呈上升趨勢(shì),出現(xiàn)此種情況可能是由于溴隱亭的抑制泌乳作用直接作用于垂體,見(jiàn)效快,而中藥的調(diào)理和通絡(luò)下乳治療則在于綜合調(diào)整機(jī)體的生理狀態(tài),因此產(chǎn)生臨床可見(jiàn)效果的時(shí)間會(huì)比溴隱亭較長(zhǎng),因此出現(xiàn)了湯劑治療組的母鼠每小時(shí)泌乳量先降后升的變化情況.而湯劑治療組的每小時(shí)泌乳量在第3天和空白對(duì)照組相比出現(xiàn)顯著性降低,到第5天才出現(xiàn)極顯著性降低,隨后的差異性開(kāi)始呈下降趨勢(shì),也說(shuō)明了本研究中的催乳湯劑可以增加乳汁的分泌,但由于中藥的藥效顯現(xiàn)需要時(shí)間,本研究是在7 d內(nèi)進(jìn)行,所以更多天數(shù)的作用效果和影響還需要進(jìn)一步的研究論證.

        溴隱亭的化學(xué)名稱(chēng)為2-溴-α麥角環(huán)肽,是一種單成分化學(xué)合成物,可以直接激活多巴胺受體而產(chǎn)生作用[8],而中藥湯劑的治療作用則多是通過(guò)多組分調(diào)整恢復(fù)機(jī)體平衡,增強(qiáng)機(jī)體部分器官或者組織的機(jī)能來(lái)達(dá)到治療恢復(fù),因此湯劑治療組和空白對(duì)照組的差異性提醒我們要關(guān)注中藥方劑治療的藥效時(shí)間問(wèn)題,并提醒我們應(yīng)參考現(xiàn)代化學(xué)藥的研究思路對(duì)傳統(tǒng)中藥治療進(jìn)行成分研究和現(xiàn)代化研究.

        4 結(jié)論

        本試驗(yàn)中自擬的催乳湯具有顯著促進(jìn)乳汁的分泌和排泄,提高缺乳母鼠泌乳量的功能,能夠用于產(chǎn)后缺乳證的治療;但其用于產(chǎn)后缺乳證的治療效果還需要進(jìn)一步觀察.

        [1]花麗茹.中草藥在治療母豬產(chǎn)后疾病的應(yīng)用[J].養(yǎng)殖技術(shù)顧問(wèn),2010(7):113-114.

        [2]萬(wàn)鵬,聶慧,鄧時(shí)貴.歸芪通乳合劑對(duì)溴隱亭誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)后缺乳的催乳作用[J].中藥新藥與臨床藥理,2013(1):42-44.

        [3]張明海,張虹虹.母豬產(chǎn)后缺乳癥的防治辦法[J].今日養(yǎng)豬業(yè),2012(1):22-24.

        [4]楊小紅,杜靜,王玉強(qiáng),等.缺乳的中醫(yī)藥治療現(xiàn)狀[J].中國(guó)中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育,2010(6):175-176.

        [5]毛成榮.辯證施治母豬產(chǎn)后缺乳[J].山東畜牧獸醫(yī),2011 (1):69-70.

        [6]黃波.尼古丁對(duì)敲除小鼠調(diào)節(jié)性細(xì)胞及對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響[D].廣州:南方醫(yī)科大學(xué),2012.

        [7]唐立剛.激動(dòng)素對(duì)大鼠乳腺的作用及相關(guān)機(jī)制研究[D].楊凌:西北農(nóng)林科技大學(xué),2012.

        [8]馬愛(ài)團(tuán),鐘秀會(huì),孟立根,等.溴隱亭對(duì)小鼠生育的影響及其作用機(jī)理[J].動(dòng)物學(xué),2006(3):536-541.

        Observation on the Effect of self-made lactogenic decoction on Postpartum Hypogalactia Rats Induced by Bromocriptine

        DONG Shi-qi,LI Huan-huan,BIAN Yi-fei,FAN Ying-sai,Nawras Hamdan, WANG Ting-ting,GAO Zong-qin,FAN Kai,LIU Zhong-jie
        (College Of Veterinary Medicine,China Agricultural University,Beijing 100193,China)

        The object is to observe the effect of self-made lactogenic decoction on model rats with postpartum hypogalactia. SD rats were given bromocriptine by gavage to establish the hypogalactia model,and were treated with self-made lactogenic decoc?tion.And then,the changes of maternal milk production per hour,weight increment of rat pups per nest,maternal galactophore(ab?domen)weight were observed to evaluate the effect of self-made lactogenic decoction on postpartum hypogalactia.It was found that Self-made lactogenic decoction could significantly increase the amount of maternal milk production per hour(P<0.01),improve weight increment of rat pups per nest(P<0.05),increased maternal galactophore(abdomen)weight(P<0.05),at the same time the related data between treatment group and blank control group also has significant difference.Conclusion was that Self-made lacto?genic Decoction can significantly improve maternal milk production,reduce the degradation of galactophore in mothers with hypo?galactia,and has a therapeutic effect on postpartum hypogalactia,but the effect still needs further observation and improvement with optim ization.

        Postpartum hypogalactia;Bromocriptine;Prescription;Lactogenic decoction

        LIU Zhong-jie

        R 271.44

        A

        0529-6005(2016)02-0053-03

        2014-05-28

        "十二五"國(guó)家科技支撐計(jì)劃重點(diǎn)課題"防治母豬胎產(chǎn)病與提高免疫力中獸藥創(chuàng)制"(2011BAD34B02-02)

        董世起(1986-),男,博士,從事中獸藥方劑研究, E-mail:dsq@cau.edu.cn

        李歡歡(1988-),女,碩士,從事中獸藥方劑研究,E-mail: 1HH198861@163.com

        注:李歡歡與董世起對(duì)本文具有同等貢獻(xiàn)

        劉鐘杰,E-mai:liuzhongjiecau@163.com

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