閆 峰,熊小燕
(吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院,吉林吉林132101)
刺五加添加劑對鵪鶉免疫功能的影響
閆峰,熊小燕
(吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院,吉林吉林132101)
選用鵪鶉作為試驗(yàn)動(dòng)物,探索研究刺五加對鵪鶉免疫功能的影響.方法是1日齡的健康鵪鶉共120只,隨機(jī)分成4組,其中每組設(shè)立3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)組隨機(jī)抽取10只鵪鶉,第Ⅰ組設(shè)置為空白對照組,飼喂正常飼料;第Ⅱ-Ⅳ組設(shè)為處理組,分別喂添加了0.2%、0.4%、0.6%刺五加濃度的日糧;喂養(yǎng)結(jié)束后測定血細(xì)胞和免疫器官指數(shù).結(jié)果表明,第Ⅲ組(0.4%刺五加)可顯著提高白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的數(shù)量(P<0.05);第Ⅲ、Ⅳ處理組的胸腺指數(shù)顯著(P<0.05)提高了,第Ⅱ、Ⅲ處理組腔上囊指數(shù)的提高效果顯著(P<0.05).Ⅱ~Ⅳ各處理組的脾臟指數(shù)都有所增加,但增加的效果不顯著(P>0.05).結(jié)論是0.4%刺五加添加劑可以有效的促進(jìn)鵪鶉免疫器官發(fā)育,增強(qiáng)機(jī)體的免疫能力.
鵪鶉;刺五加;免疫器官;血細(xì)胞
藥理研究表明,刺五加和其活性成分的提取物能夠增加機(jī)體抗氧化酶活性、延緩衰老、提高機(jī)體本身的免疫力和維持健康等作用.盧廣林等在其研究中提出,在動(dòng)物飼養(yǎng)中把刺五加作為添加劑應(yīng)用于飼料,很有可能起到控制疾病發(fā)生、減緩氧化應(yīng)激等作用來提高經(jīng)濟(jì)效益、減少疾病的傳播[1].刺五加屬于五加科五加屬多年生的落葉灌木,在我國華北、東北、四川、陜西以及廣西等地均有生長,資源十分豐富[2],分布廣闊,抗旱抗寒能力強(qiáng),易栽種.在飼料添加劑產(chǎn)業(yè)中刺五加及活性成分提取物的應(yīng)用前景非常廣闊.
有研究表明,刺五加對雞和鼠免疫器官的發(fā)育和機(jī)體免疫能力都有促進(jìn)作用[3-6,8-9],高營養(yǎng)價(jià)值的鵪鶉肉深受廣大人民的喜愛,具有很好的研究、發(fā)展前景.迄今為止刺五加在鵪鶉免疫器官發(fā)育方面的研究報(bào)道很少.所以,本試驗(yàn)選用鵪鶉為試驗(yàn)動(dòng)物,來研究不同濃度刺五加對鵪鶉免疫器官和血細(xì)胞有何影響.
1.1試驗(yàn)材料選取1日齡體重相近的健康中國白羽鵪鶉120只,隨機(jī)分為4組,每組設(shè)3個(gè)重復(fù).本試驗(yàn)在本校的珍禽養(yǎng)殖場進(jìn)行.刺五加,購自吉林大藥房,粉碎成粉末,備用.
1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理根據(jù)中國白羽鵪鶉營養(yǎng)需要建議量標(biāo)準(zhǔn)配制本次試驗(yàn)的基礎(chǔ)日糧,如表1.
表1 日糧組成及營養(yǎng)水平
將120只1日齡體重相近的鵪鶉,隨機(jī)分成4組,每組30只,每組3個(gè)重復(fù).第Ⅰ組為空白對照組,飼喂基礎(chǔ)日糧,第Ⅱ~Ⅳ組為處理組,分別飼喂添加了刺五加濃度為0.2%、0.4%、0.6%的日糧.
試驗(yàn)期設(shè)為35 d,1~3 d時(shí)溫度控制在38℃~40℃;4~6 d時(shí)控制在36℃~37℃;7~ 12 d時(shí)控制在32℃~35℃;13~15 d時(shí)控制在29℃~31℃;15 d以后都控制在28℃~20℃.試驗(yàn)過程中的具體溫度應(yīng)根據(jù)雛鵪鶉飲食、行為、睡眠等不同的生長狀態(tài)作相應(yīng)的調(diào)整.濕度1周時(shí)控制在65%~70%,以后都控制在50%~60%. 0~1周的光照時(shí)間為24 h;1~2周為22~20 h,以后每周依次減少2 h;逐漸過渡到16~18 h.在傍晚時(shí)要注意把飼料加充足,飲水不能中斷,舍內(nèi)要進(jìn)行合理通風(fēng)保持空氣清新,采用自由采食的飼養(yǎng)方法和網(wǎng)上平養(yǎng)的方式,按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)的分組進(jìn)行飼喂,在喂養(yǎng)過程中要密切關(guān)注生長狀況,記錄各組鵪鶉的生長情況.
1.3檢測項(xiàng)目與方法
1.3.1血細(xì)胞的測定在試驗(yàn)結(jié)束時(shí),隨機(jī)從每組中取3只,頸靜脈采血,然后進(jìn)行血細(xì)胞檢測.用顯微鏡計(jì)數(shù)法對血液紅細(xì)胞(RBC)和白細(xì)胞(WBC)進(jìn)行計(jì)數(shù);用瑞氏染色油鏡鏡檢法對淋巴細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù).
1.3.2免疫器官指數(shù)的測定試驗(yàn)結(jié)束后,隨機(jī)從每個(gè)重復(fù)中取3只鵪鶉,空腹稱取活體重并記錄,按常規(guī)方法屠宰后剖檢分離器官及組織并稱量免疫器官(脾臟、腔上囊和胸腺去包圍物)的重量,根據(jù)公式(免疫器官重g/活體重g)X%,計(jì)算出免疫器官指數(shù).
1.4數(shù)據(jù)處理與分析采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析和多重比較,以P<0.05為顯著水平.
2.1刺五加對鵪鶉血細(xì)胞的影響從表2可以看出,紅細(xì)胞數(shù)量各試驗(yàn)組的紅細(xì)胞和空白對照組均無顯著差異(P>0.05);第Ⅱ、Ⅲ組的白細(xì)胞數(shù)量分別比第Ⅰ組提高了21.16%、23.03%,達(dá)到顯著差異(P<0.05);從淋巴細(xì)胞數(shù)量百分比可以看出,第Ⅲ(37.785%)、Ⅳ(37.545%)組比第Ⅰ組(33.160%)、第Ⅱ組(34.02%)有顯著差異(P<0.05),其他各組間差異不顯著(P>0.05).綜合以上3個(gè)指標(biāo)得出的結(jié)論是第Ⅲ組(0.4%刺五加)對血細(xì)胞影響的效果較明顯,有一定提高免疫能力的作用.
表2 不同濃度刺五加對鵪鶉血細(xì)胞的影響
2.2對免疫器官指數(shù)的影響從表3可以看出,胸腺指數(shù)第Ⅲ(0.210%)、Ⅳ(0.237%)組與第Ⅰ組(0.128%)第Ⅱ相比明顯增加了,差異顯著(P< 0.05);各組脾臟指數(shù)均無顯著差異(P>0.05);腔上囊指數(shù)結(jié)果,第Ⅱ組(0.160%)、Ⅲ組(0.167%)與第Ⅰ組(0.097%)相比分別提高64%、72%差異也顯著(P<0.05),第Ⅱ組、Ⅲ組比第Ⅳ組提高差異水平也顯著(P<0.05);綜合以上3個(gè)指標(biāo)得出結(jié)論,第Ⅲ組(0.4%刺五加)較好地增強(qiáng)鵪鶉免疫器官指數(shù),對提高免疫力的效果最好.
表3 不同濃度刺五加對免疫器官指數(shù)的影響
3.1刺五加對鵪鶉血細(xì)胞的影響試驗(yàn)表明,第Ⅲ組即日糧中添加0.4%刺五加可顯著(P<0.05)提高白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的數(shù)量,其他各處理組對鵪鶉血細(xì)胞的數(shù)量也有提高,但是提高的并不顯著.因此,第Ⅲ組(0.4%刺五加)對鵪鶉血細(xì)胞的影響效果是最顯著最好的.陳海寧等[4]報(bào)道了中草藥能明顯提高鵪鶉血細(xì)胞的數(shù)量,劉桂芹等[7]研究了刺五加中藥復(fù)合劑對雛雞血常規(guī)有顯著提高,本試驗(yàn)與其試驗(yàn)結(jié)果一致.所以,刺五加添加劑可以促進(jìn)鵪鶉血細(xì)胞數(shù)提高.
3.2刺五加對免疫器官指數(shù)的影響免疫器官是動(dòng)物機(jī)體免疫力的物質(zhì)基礎(chǔ),研究者們普遍把免疫器官發(fā)育狀況的好壞用來當(dāng)做判斷動(dòng)物機(jī)體免疫力強(qiáng)弱的方法之一.把免疫器官的重量、免疫器官指數(shù)當(dāng)作判定動(dòng)物機(jī)體免疫力強(qiáng)弱的重要指標(biāo).本試驗(yàn)結(jié)果表明,第Ⅲ組(添加0.4%刺五加的日糧)可顯著提高胸腺指數(shù)、腔上囊指數(shù),增強(qiáng)免疫功能.第Ⅲ、Ⅳ組顯著(P<0.05)提高了胸腺指數(shù),第Ⅱ、Ⅲ組顯著(P<0.05)提高了腔上囊指數(shù),各試驗(yàn)組脾臟指數(shù)均有所提高,但是并不顯著(P>0.05).因此,第Ⅲ組(0.4%刺五加)才具有最好的增強(qiáng)免疫力的效果.程遠(yuǎn)芳[10]和李榮譽(yù)等[11]的研究報(bào)道了中草藥的免疫增強(qiáng)劑可以顯著的提高雛雞脾臟、胸腺和腔上囊的指數(shù)和重量;李諾等[12]的結(jié)果報(bào)道,用黃芪提取物溶液給7日齡的蛋用雛雞喂養(yǎng)6周以后,在35 d時(shí),添加精致黃芪多糖的蛋雞處理組的胸腺指數(shù)比對照組要低,但是,在49 d時(shí)此處理組的胸腺指數(shù)又比對照組高出了2倍多.本試驗(yàn)結(jié)果顯示,0.4%刺五加添加劑處理組的鵪鶉腔上囊指數(shù)及胸腺指數(shù)與對照組相比顯著提高,說明增強(qiáng)了鵪鶉機(jī)體的免疫力.本試驗(yàn)結(jié)果也表明了不同濃度刺五加添加的日糧處理組的鵪鶉免疫指數(shù)明顯高于對照組.所以,刺五加添加劑可以有效地促進(jìn)鵪鶉免疫功能的提高,但在生產(chǎn)中應(yīng)用推廣需要進(jìn)一步研究確定.
綜合血細(xì)胞計(jì)數(shù)和免疫器官指數(shù)結(jié)果,可以得出第Ⅲ組(0.4%刺五加)的作用優(yōu)于其他處理組,更加優(yōu)于對照組,第Ⅲ組具有最好的增強(qiáng)免疫功能的作用.同時(shí)第Ⅱ、Ⅳ組在增強(qiáng)鵪鶉免疫功能上也有一定的作用.這就表明了刺五加對增強(qiáng)鵪鶉免疫功能是有效的.所以我們認(rèn)為刺五加作為飼料添加劑添加到飼料中,有免疫增強(qiáng)劑的作用,并且安全、無副作用,具有廣闊的應(yīng)用前景.
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長白山動(dòng)植物資源利用與保護(hù),吉林省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目(2013X067);吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院重點(diǎn)學(xué)科培育項(xiàng)目(2013S032)
閆峰(1977-),女,講師,碩士,從事動(dòng)物科學(xué)方面的教學(xué)和研究工作,E-mail:jilinyanfeng@aliyun.com