謝建華，周　莉，侯亞麗，藺　露，姚　璐，葉潔瑩，梁望旺，楊澤林，熊仲良（重慶市動物疫病預防控制中心，重慶渝北　401120）

重慶市畜禽產(chǎn)品中沙門氏菌污染狀況調(diào)查分析

謝建華，周莉，侯亞麗，藺露，姚璐，葉潔瑩，梁望旺，楊澤林，熊仲良
（重慶市動物疫病預防控制中心，重慶渝北401120）

為有效控制畜禽產(chǎn)品中沙門氏菌的污染，以便對污染源和污染途徑進行針對性監(jiān)控，對重慶市屠宰場、農(nóng)貿(mào)市場和超市供應鏈的畜禽產(chǎn)品中沙門氏菌污染狀況進行初步調(diào)查分析，同時對從供應鏈中分離的沙門氏茵進行18種抗生素的藥敏試驗。結(jié)果表明：屠宰環(huán)節(jié)豬肉的沙門氏菌污染程度較低，為7.27%；經(jīng)過運輸?shù)竭_銷售環(huán)節(jié)，其污染程度明顯上升，最高的是超市環(huán)節(jié)，高達64.52%。對其所處的環(huán)境進行調(diào)查分析，發(fā)現(xiàn)屠宰場和超市的沙門氏菌污染較嚴重，尤其是屠宰場容器（88.89%）、臺面（55.56%）和超市刀具（50.00%）、地面（46.67%）；中型規(guī)模屠宰場的沙門氏菌污染風險最大。分離菌株對頭孢類藥物敏感，對磺胺類藥物耐藥嚴重，其次為四環(huán)素類和β-內(nèi)酰胺類，多重耐藥情況普遍。

沙門氏菌；畜禽產(chǎn)品；耐藥性

食源性致病菌是食物中毒和食源性疾病暴發(fā)的重要因素，畜禽肉中的沙門氏菌是人類食物中毒的重要原因之一［1］。我國每年約3億人因沙門氏菌感染而患病，約占病原菌食源性疾病總數(shù)的70%～80%［2-3］，而引起沙門氏菌中毒的食品90%以上是動物源性食品［4］。在國內(nèi)，畜禽肉中沙門氏菌污染的來源極其復雜，畜禽的飼養(yǎng)、屠宰加工、儲存、銷售等眾多環(huán)節(jié)均可能受污染，其污染源和污染途徑多種多樣［5-6］。本研究通過對重慶市畜禽產(chǎn)品供應鏈各個環(huán)節(jié)中沙門氏菌的污染狀況進行調(diào)查，初步摸清了重慶市畜禽產(chǎn)品中沙門氏菌的污染水平，為引導消費、規(guī)避風險和政府決策提供了科學依據(jù)。

1　材料與方法

1.1 取樣環(huán)節(jié)與數(shù)量

全年取樣1 247份。其中，在9個屠宰場共取豬肉樣品110份和環(huán)境拭子樣品330份；在4個農(nóng)貿(mào)市場共取豬肉樣品27份、雞肉樣品23份和環(huán)境拭子樣品140份；在17個超市共取豬肉樣品31份、雞肉樣品71份和環(huán)境拭子樣品515份。

1.2 取樣方法

參照國家標準《食品衛(wèi)生微生物學檢驗 肉與肉制品檢驗》（GB/T 4789.17-2003）進行［7］。

1.3 檢測方法

參照食品安全國家標準《食品微生物學檢驗沙門氏菌檢驗》（GB 4789.4-2010）［8］和《食品中多種致病菌快速檢測方法》（SN/T 1869-2007）［9］進行。

1.4 檢測數(shù)據(jù)分析

采用t檢驗方法對樣品檢測數(shù)據(jù)進行生物學統(tǒng)計分析。

1.5 藥敏試驗

采用世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦的K-B紙片擴散法測定。用接種環(huán)挑取經(jīng)純化、傳代的沙門氏菌，接種于3～5 mL TSB肉湯中，35 ℃培養(yǎng)24 h；用生理鹽水校正菌液濃度至0.5麥氏比濁標準，用無菌棉簽蘸取已準備好的菌液，均勻涂布接種于MHA瓊脂平板表面，置室溫干燥3～5 min后，用紙片分配器將含藥紙片貼于含菌MHA瓊脂平板表面。平板經(jīng)室溫放置15 min。再倒放于35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，測量抑菌環(huán)直徑并記錄結(jié)果。每次實驗均用大腸桿菌ATCC 25922、金黃色葡萄球菌ATCC 25923作質(zhì)控菌株，判定標準按美國NCCLS操作標準（2003版）。

2　結(jié)果

2.1 不同環(huán)節(jié)樣品中沙門氏菌驗證結(jié)果

不同環(huán)節(jié)樣品中以超市中豬肉沙門氏菌的污染最為嚴重，與其他相比差異顯著（p≤0.05），其次是屠宰和超市環(huán)節(jié)的環(huán)境拭子（表1）。

表1　不同環(huán)節(jié)樣品中沙門氏菌驗證結(jié)果

2.2 不同環(huán)節(jié)中環(huán)境拭子沙門氏菌驗證結(jié)果

不同環(huán)節(jié)環(huán)境拭子中，以屠宰場容器的沙門氏菌污染最為嚴重，與其他環(huán)節(jié)相比差異均顯著（p≤0.05），其次是屠宰場臺面、超市刀具和超市地面（表2）。

表2　不同環(huán)節(jié)中環(huán)境拭子沙門氏菌驗證結(jié)果

2.3 不同規(guī)模屠宰場沙門氏菌驗證結(jié)果

對2個大型屠宰場、3個中型屠宰場和4個小型屠宰環(huán)境拭子進行取樣調(diào)查結(jié)果顯示，中型屠宰場沙門氏菌污染最嚴重，檢出率為50.00%，與大型和小型屠宰場相比差異極顯著（p≤0.01）；從樣品類型來看，中型屠宰場環(huán)境拭子中沙門氏菌的污染最為嚴重，與其他環(huán)節(jié)相比差異均顯著（p≤0.05），其次是大型屠宰場的環(huán)境拭子與小型屠宰場的環(huán)境拭子和豬肉（表3）。

2.4 藥敏試驗結(jié)果

從分離出的371株沙門氏菌中，隨機抽取65株（其中超市28株、農(nóng)貿(mào)市場9株、屠宰場28株）進行藥物敏感試驗。試驗共使用了18種抗生素，以金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸桿菌ATCC25922作質(zhì)控菌株，結(jié)果見表4。不同環(huán)節(jié)三類樣品的耐藥趨勢基本相似，對頭孢噻肟、頭孢曲松、頭孢哌酮、亞胺培南、環(huán)丙沙星全部敏感；對甲氧芐啶、磺胺異亞唑、四環(huán)素等有不同程度的耐藥。從不同環(huán)節(jié)來看。屠宰場和超市對頭孢噻吩和阿莫西林存在一定的耐藥性；不同樣品類型來看，豬肉對阿米卡星和慶大霉素也存在較高的耐藥性，雞肉對卡那霉素和呋喃妥因存在較高的耐藥性。

表3　不同規(guī)模屠宰場沙門氏菌驗證結(jié)果

表4　不同環(huán)節(jié)樣品的藥物敏感試驗結(jié)果

絕大多數(shù)沙門氏菌同時對3種以上抗生素耐藥，占81.25%（表5）。

3　討論

對不同環(huán)節(jié)樣品中沙門氏菌的污染狀況調(diào)查可見，在屠宰環(huán)節(jié)，剛宰殺分割出來的豬肉的沙門氏菌污染率為7.27%；經(jīng)過運輸?shù)竭_銷售環(huán)節(jié)，其污染率明顯上升，最高的是超市環(huán)節(jié)，高達64.52%；同時對其所處的環(huán)境調(diào)查分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)屠宰場和超市受沙門氏菌污染比較嚴重，尤其是屠宰場容器、臺面和超市的刀具、地面。探其原因主要在于畜禽肉產(chǎn)品到餐桌前，在流轉(zhuǎn)環(huán)節(jié)，對沙門氏菌的污染途徑不能有效控制，尤其在農(nóng)貿(mào)市場和超市銷售過程中，畜禽肉產(chǎn)品往往堆放在一起銷售，極易引起二次污染，同時銷售過程中畜禽肉產(chǎn)品的保存溫度和銷售時間不能有效控制。這也提示在對致病菌監(jiān)測的同時，應該提高畜禽產(chǎn)品中致病菌污染的防控技術(shù)，從而減少疾病的暴發(fā)。

表5　沙門氏菌多重耐藥性

對于不同規(guī)模的屠宰場來說，中型屠宰場的沙門氏菌污染最為嚴重，其中以中型屠宰場環(huán)境拭子污染最為嚴重（59.09%）。結(jié)合問卷調(diào)查分析發(fā)現(xiàn)，中型屠宰場環(huán)境、容器、用具等消毒不規(guī)范，有的甚至不消毒，導致細菌污染嚴重。而大型屠宰場管理較規(guī)范，小型屠宰場較容易充分清洗，故大型和小型屠宰場檢出率相對較低。

從對18種抗生素藥物敏感試驗可見，所分離的沙門氏菌對頭孢類藥物敏感，這跟大多數(shù)的研究結(jié)果相似［10-12］。對其余8類抗生素中常用藥物的耐藥性分析來看，沙門氏菌對磺胺類藥物的耐藥性最高，其次是對四環(huán)素類和β-內(nèi)酰胺類。這與王娟等［13］2009年報道相似。雖然從不同環(huán)節(jié)和樣品類型來看，它們的耐藥趨勢相似，但豬肉中的沙門氏菌對阿米卡星和氯霉素還存在較高的耐藥性，雞肉中的對卡那霉素和呋喃妥因存在較高的耐藥性。而阿米卡星、慶大霉素、卡那霉素和呋喃妥因是臨床上用于治療細菌性腹瀉的常用藥物。這些菌株絕大多數(shù)存在多重耐藥性，對三種以上抗生素耐藥的占81.25%。為了降低病原菌的耐性率，應規(guī)范養(yǎng)殖環(huán)節(jié)抗生素的使用，嚴禁使用人用抗生素，同時加強對細菌耐藥機理的研究，并提出相應的防控措施，為畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全的監(jiān)管提供科學依據(jù)。

［1］ 張秀麗，廖興廣，郝宗宇，等.2006-2007年河南省生肉食品中沙門菌的主動監(jiān)測及其DNA指紋圖譜庫的建立［J］.中國衛(wèi)生檢驗，2009（7）：1545-1548.

［2］ World Health Organization.Overcoming antimicrobial re-sistance，World Health Organization Report on Infectious Diseases：WHO/CDS/2000.2［R］.Geneva：WHO，2000.

［3］ 趙貴，張華.畜產(chǎn)品中沙門氏菌的危害及檢測方法概述［J］.貴州畜牧獸醫(yī)，2004，28（3）：21-22.

［4］ 曾艷兵，張莉，孫吉昌，等.利用熒光定量PCR檢測方法對畜禽肉中沙門氏菌的污染調(diào)查［J］.農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與安全，2012（1）：21-24.

［5］ 莊榮玉.禽肉中沙門氏菌的污染及其控制方法［J］.中國家禽，2005，27（2）：41-43.

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［7］ 衛(wèi)生部.國家標準化管理委員會.食品衛(wèi)生微生物學檢驗肉與肉制品檢驗：GB/T 4789.17-2003［S］.北京：中國標準出版社，2003.

［8］ 衛(wèi)生部.食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗：GB 4789.4-2010［S］.北京：中國標準出版社，2010.

［9］ 國家質(zhì)檢總局.食品中多種致病菌快速檢測方法：SN/T 1869-2007［S］.北京：中國標準出版社，2007.

［10］ 關(guān)文英，申志新，張淑紅，等.河北省食品中沙門氏菌的耐藥性研究［J］.現(xiàn)代預防醫(yī)學，2006，33（10）：1761-1763.

［11］ 王曉泉，焦新安，劉曉文，等.江蘇部分地區(qū)食源性和人源沙門氏菌的多重耐藥性研究［J］.微生物學報，2007，47（2）：221-227.

［12］ 張莉，曾艷兵，尹德風，等.一株分離自凍雞肉沙門氏菌的耐藥性分析［J］.農(nóng)業(yè)質(zhì)量標準，2013（1）：36-40.

［13］ 王娟，王玉東，鄭增忍，等.禽源大腸桿菌和沙門氏菌耐藥性研究［J］.家禽科學，2009（6）：8-10.

（責任編輯：杜憲）

Analysis on Salmonella Contamination Status of Livestock and Poultry Products in Chongqing City

Xie Jianhua，Zhou Li，Hou Yali，Lin Lu，Yao Lu，Ye Jieying，Liang Wangwang，Yang Zelin，Xiong Zhongliang
（Chongqing Animal Disease Prevention and Control Center，Yubei，Chongqing 401120）

This paper investigated Salmonella contamination situation in animal products at different sectors such as slaughterhouses and market. In the study， the antimicrobial susceptibility of Salmonella strains isolated from the supply chain to 18 kinds of antibiotics was tested. The results showed that the Salmonella contamination level of pork at slaughterhouse was relatively low， being 7.27%，and this figure significantly increased following the supply chain from the transportation to the marketing stage，with the peak witnessed at the stage of supermarket of 64.52%. Investigation and analysis of environment revealed that slaughterhouses and supermarkets were most heavily contaminated with Salmonella，especially the slaughterhouse container （88.89%），table（55.56%） and the supermarket cutter （50.00%） and ground （46.67%），and the highest risk for Salmonella contamination was observed at medium-sized slaughterhouse. In addition，the isolated strains were sensitive to cephalosporins，but demonstrated highly resistance to Sulphonamides，then to Tetracyclines，and β- lactam，which indicated the existence of serious multi-drug resistance.

Salmonella；animalproducts；drug resistance

S851.3

B

1005-944X（2016）08-0027-04

10.3969/j.issn.1005-944X.2016.08.007

2015年農(nóng)業(yè)部畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全風險評估項目（GJFP2016008）