向 導(dǎo)田朝霞向成志王 成田 艷　彭 斌覃 昉

（1.湘西自治州動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，湖南吉首 416000；2.湘西自治州獸醫(yī)局，湖南吉首 416000）

湘西自治州2013年至2015年H5亞型禽流感免疫抗體水平的監(jiān)測(cè)與分析

向 導(dǎo)1田朝霞2向成志1王 成1田 艷1彭 斌1覃 昉1

（1.湘西自治州動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，湖南吉首 416000；2.湘西自治州獸醫(yī)局，湖南吉首 416000）

本研究自2013年起至2015年底，對(duì)湘西州8個(gè)縣市的禽類(lèi)進(jìn)行了H5亞型禽流感免疫抗體水平的監(jiān)測(cè)。共采集了規(guī)模禽場(chǎng)和散養(yǎng)戶(hù)的禽血清11216份，其中雞血清9261份、鴨血清1866份、鵝血清89份。并利用血凝-血凝抑制試驗(yàn)對(duì)這些樣品進(jìn)行免疫抗體的檢測(cè)，整體的免疫合格率達(dá)到86.9%。從監(jiān)測(cè)結(jié)果來(lái)看H5亞型禽流感的免疫抗體合格率在逐年上升。為了掌握湘西自治州高致病性禽流感免疫抗體水平的情況、及時(shí)發(fā)現(xiàn)疫苗免疫的漏洞，為湘西州高致病性禽流感的防控提供科學(xué)決策的依據(jù)。

湘西自治州；H5禽流感；免疫抗體；監(jiān)測(cè)

1 前言

禽流感是由A型流感病毒引起的一種禽類(lèi)傳染病，其中H5和H7兩種血清型可以引起高致病性禽流感。高致病性禽流感傳播快、發(fā)病快、死亡率高，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。高致病性禽流感作為A類(lèi)疫病已經(jīng)成為世界養(yǎng)禽業(yè)重要的預(yù)防疫病之一。湘西自治州地處山區(qū)，家禽的養(yǎng)殖點(diǎn)多面廣、方式粗放、規(guī)?；潭炔桓撸o禽流感的防控造成了一定的困難。疫苗免疫仍然是防控禽流感的主要手段，由于免疫效果受多種因素的影響，如不同的品種、不同的免疫次數(shù)、家禽營(yíng)養(yǎng)健康狀態(tài)、欄舍環(huán)境衛(wèi)生狀況、氣候和溫度等都會(huì)對(duì)家禽的免疫效果產(chǎn)生一定的影響；而免疫抗體監(jiān)測(cè)是了解疫苗免疫效果的最有效方法。為掌握湘西州高致病禽流感的抗體水平情況、對(duì)高致病性禽流感的流行情況進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和分析、更好地制定湘西州禽流感的防控措施都提供了科學(xué)的依據(jù)。筆者自2013年初至2015年底在湘西州進(jìn)行了高致病性禽流感的免疫抗體水平監(jiān)測(cè)，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行總結(jié)和分析，

2 試驗(yàn)材料和方法

2.1樣品來(lái)源

2013年初至2015年底所有禽類(lèi)樣品來(lái)源于湘西州8個(gè)縣市的119個(gè)規(guī)模禽場(chǎng)和眾多散養(yǎng)戶(hù)。規(guī)模禽場(chǎng)每場(chǎng)采集30份禽血清樣品，散養(yǎng)戶(hù)在每個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)采集20份禽血清樣品。

2.2主要試劑

①1%雞紅細(xì)胞：采集3只或以上未免疫過(guò)的健康公雞的血液與抗凝劑混合，用PH7.2、0.01mol/L的PBS液洗滌后配成1%的紅細(xì)胞懸液，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

②PBS液：用雙蒸水配制PH7.2、0.01mol/L的PBS液以備用。

③H5亞型禽流感抗原和陽(yáng)性血清：由哈爾濱維科生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司提供的禽流感H5亞型抗原、禽流感H5亞型陽(yáng)性血清

2.3檢測(cè)方法

按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB/T18936-2003）采用血凝抑制方法對(duì)禽血清樣品進(jìn)行H5免疫抗體的檢測(cè)。

2.4結(jié)果判斷

①免疫合格個(gè)體

按照《高致病性禽流感診斷技術(shù)》（GB/T 18936-2003），經(jīng)過(guò)血凝抑制試驗(yàn)（HI）檢測(cè)，對(duì)滅活疫苗免疫的家禽，免疫21天后HI抗體效價(jià)≥24為免疫合格。

②免疫合格群體

對(duì)弱毒疫苗免疫的商品代肉雛雞，第二次免疫14d后免疫抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)≥50%；對(duì)滅活疫苗免疫的家禽，免疫合格個(gè)體數(shù)量占群體總數(shù)的70%（含）以上。

3 結(jié)果

3.1不同年份抗體合格率比較

本研究從2013年起至2015年底對(duì)湘西自治州8個(gè)縣市的家禽監(jiān)測(cè)情況進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)，共采集樣品11216份，采用血凝-血凝抑制試驗(yàn)進(jìn)行H5亞型禽流感免疫抗體檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果為：整體的合格數(shù)9743份，免疫合格率達(dá)到86.9%。從時(shí)間上看，2013年春季、秋季的抗體合格率分別為79.6%、86.8%；2014年春季、秋季的抗體合格率分別為83.8%、92.8%；2015年春季、秋季的抗體合格率分別為89.9%、90.2%。2013年全年的抗體合格率為80%、2014年全年的抗體合格率為85.5%、2015年全年的抗體合格率為90.1%（見(jiàn)表1、表2，圖1、圖2）。

表1　2013年至2015年春秋兩季禽流感免疫抗體水平檢測(cè)結(jié)果

表2　2013年至2015年禽流感免疫抗體水平檢測(cè)結(jié)果

圖1　2013年至2015年春秋季禽流感免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

圖2　2013年至2015年禽流感免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

3.2不同監(jiān)測(cè)場(chǎng)點(diǎn)抗體合體率的比較

湘西州的家禽飼養(yǎng)點(diǎn)多面廣、方式粗放、規(guī)?；潭炔桓?，給疫病防控工作帶來(lái)很大難度，疫情風(fēng)險(xiǎn)比較大，因此散養(yǎng)戶(hù)的監(jiān)測(cè)和規(guī)模禽場(chǎng)的監(jiān)測(cè)同樣重要。從2013年初至2015年底對(duì)湘西州的規(guī)模戶(hù)、散養(yǎng)戶(hù)這兩種不同的監(jiān)測(cè)場(chǎng)點(diǎn)進(jìn)行監(jiān)測(cè)，檢測(cè)結(jié)果為：規(guī)模禽場(chǎng)H5亞型禽流感免疫抗體合格率為86.7%、散養(yǎng)戶(hù)的合格率為86.9%（見(jiàn)表3）。

表3　2013年至2015年不同監(jiān)測(cè)場(chǎng)點(diǎn)禽流感免疫抗體水平檢測(cè)結(jié)果

3.3不同禽類(lèi)抗體水平比較

本研究對(duì)9261份雞血清、1866份鴨血清和89份鵝血清進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果如下：雞的H5免疫抗體合格率為87.9%、鴨為81.6%、鵝為88.8%。

表4　2013年至2015年不同禽類(lèi)禽流感免疫抗體水平檢測(cè)結(jié)果

4 分析與討論

（1）使用滅活疫苗免疫家禽以獲得高致病性禽流感的免疫保護(hù)是我國(guó)目前禽流感防控的主要措施。從本次研究的湘西州H5亞型禽流感抗體結(jié)果來(lái)看，2013年春季、秋季的抗體合格率分別為79.6%、86.8%；2014年春季、秋季的抗體合格率分別為83.8%、92.8%；2015年春季、秋季的抗體合格率分別為89.9%、90.2%。2013年全年的抗體合格率為80%、2014年全年的抗體合格率為85.5%、2015年全年的抗體合格率為90.1%，可以看出H5亞型禽流感的免疫抗體合格率在逐年上升。

（2）湘西自治州地處山區(qū)，家禽的養(yǎng)殖點(diǎn)多面廣、方式粗放、規(guī)模化程度不高，給疫病防控工作帶來(lái)很大難度，疫情風(fēng)險(xiǎn)比較大，因此散養(yǎng)戶(hù)的監(jiān)測(cè)和規(guī)模禽場(chǎng)的監(jiān)測(cè)同樣重要。本次結(jié)果顯示：規(guī)模禽場(chǎng)H5亞型禽流感免疫抗體合格率為86.7%、散養(yǎng)戶(hù)為86.9%。從結(jié)果上看，散養(yǎng)戶(hù)的抗體水平與規(guī)模禽場(chǎng)的抗體水平相當(dāng)，都達(dá)到了國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。同時(shí)也說(shuō)明，散養(yǎng)戶(hù)的免疫意識(shí)較強(qiáng)。

（3）血凝抑制實(shí)驗(yàn)主要是檢測(cè)血清中禽流感的抗體效價(jià)，具有特異性，這種抗體的產(chǎn)生在很大程度上反映了機(jī)體對(duì)病毒感染的抵抗力水平。禽流感免疫抗體的監(jiān)測(cè)工作是科學(xué)的制定防控措施的重要依據(jù)。在做好抗體監(jiān)測(cè)，保障良好的家禽群體抗體水平的同時(shí)，還應(yīng)該重視養(yǎng)禽業(yè)其他環(huán)節(jié)的生物安全，建立一套行之有效的綜合防控體系。

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