張雪梅，覃福寧，孫　奇

(廣西醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院病理科，廣西柳州 545005)

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·經(jīng)驗(yàn)交流·

宮頸DNA倍體分析及TCT在宮頸病變?cè)缙诤Y查中的臨床意義

張雪梅，覃福寧，孫奇

(廣西醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院病理科，廣西柳州 545005)

目的探討DNA倍體分析和液基細(xì)胞學(xué)檢查在宮頸病變?cè)缙诤Y查中的作用。方法對(duì)13 144例患者進(jìn)行DNA倍體分析和宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查，對(duì)其中554例行病理活檢，以病理活檢結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，分析兩種方法在宮頸病變篩查中的臨床意義。結(jié)果DNA倍體分析與液基細(xì)胞學(xué)的陽性率分別為7.33%和5.36%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；分別以出現(xiàn)1～2個(gè)DNA倍體異常細(xì)胞及出現(xiàn)3個(gè)及以上DNA倍體異常細(xì)胞作為活檢標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)宮頸病變的靈敏度為98.67%和89.36%，特異度為22.47%和58.99%，陽性預(yù)測(cè)值為72.89%和82.15%，與病理活檢診斷符合率為74.19%和79.60%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；分別以出現(xiàn)意義不明確的非典型鱗狀細(xì)胞(ASCUS)及低度鱗狀上皮內(nèi)病變(LSIL)作為活檢標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)宮頸病變的靈敏度為73.87%和62.90%，特異度為49.18%和79.92%，陽性預(yù)測(cè)值為64.87%和79.92%，與病理活檢診斷符合率為63.00%和70.40%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；109例TCT檢查為ASCUS的患者中，活檢宮頸病變檢出率為40.37%。其中DNA倍體正常組、出現(xiàn)1～2個(gè)DNA倍體異常細(xì)胞組、出現(xiàn)3個(gè)及以上DNA倍體異常細(xì)胞組宮頸病變檢出率分別為30.30%、25.00%、53.85%，前兩組檢出率顯著低于最后一組(P<0.05)。結(jié)論以出現(xiàn)3個(gè)以上DNA倍體異常細(xì)胞或LSIL為活檢標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)早期宮頸病變的篩查具有較高的診斷價(jià)值，ASCUS伴3個(gè)及以上DNA倍體異常細(xì)胞者活檢更容易發(fā)現(xiàn)宮頸病變。

DNA；宮頸腫瘤；活組織檢查；女性；宮頸病變；細(xì)胞學(xué)；DNA倍體分析

宮頸癌是婦科常見的惡性腫瘤，對(duì)宮頸早期病變的篩查較多采用宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查。近年來，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，DNA倍體分析也逐漸應(yīng)用于宮頸早期病變篩查。本資料回顧性分析了2011年以來本院婦產(chǎn)科行宮頸DNA倍體分析及液基細(xì)胞學(xué)檢查的患者，通過比較兩種方法的敏感性、特異性、陽性預(yù)測(cè)值及與活檢診斷符合率，探討兩種方法在宮頸早期病變篩查中的臨床意義，并為合理分流患者、指導(dǎo)隨訪及治療提供幫助。

1　資料與方法

1.1一般資料回顧性分析本院婦產(chǎn)科2011年4月至2014年6月就診行早期宮頸病變篩查的13 144例患者，年齡18～77歲，均進(jìn)行宮頸細(xì)胞DNA倍體分析及液基細(xì)胞學(xué)檢查，其中554例在陰道鏡下行活組織病理檢查。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集與處理在陰道窺器直視下用特制的宮頸刷收集宮頸口和頸管的脫落上皮細(xì)胞，固定，離心，棄上清液，取細(xì)胞懸液制成薄層細(xì)胞學(xué)涂片2張，用95%的乙醇固定。其中1張涂片行Feulgen 染色做DNA倍體分析，另一張涂片采用巴氏染色行液基細(xì)胞學(xué)檢查。

1.2.2細(xì)胞DNA倍體分析采用廈門麥克奧迪公司生產(chǎn)的全自動(dòng)圖像分析系統(tǒng)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行掃描分析，判讀標(biāo)準(zhǔn)：(1)DNA指數(shù)(DI)=1為正常細(xì)胞；(2)DI≥2.5為DNA倍體異常細(xì)胞，其中1～2個(gè)DNA倍體異常細(xì)胞為少量DNA倍體異常細(xì)胞，≥3個(gè)DNA倍體異常細(xì)胞為多量DNA倍體異常細(xì)胞。

1.2.3液基薄層細(xì)胞學(xué)(TCT)檢查采用TBS分級(jí)系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)胞學(xué)診斷，判讀標(biāo)準(zhǔn)：(1)正?；蜓装Y；(2)未明確診斷意義的非典型鱗狀上皮細(xì)胞(ASCUS)和不排除高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變的ASCUS(ASC-H)；(3)低度鱗狀上皮內(nèi)病變(LSIL)和高度鱗狀上皮內(nèi)病變(HSIL)；(4)鱗狀細(xì)胞癌(SCC)；(5)未明確診斷意義的非典型腺細(xì)胞(AGUS)和腺癌。其中ASCUS 及以上的病變?yōu)橐夯?xì)胞學(xué)陽性。

1.2.4陰道鏡下活組織檢查病理診斷標(biāo)準(zhǔn)(1)正?；蜓装Y；(2)宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)，按病變輕中重程度分為CINⅠ級(jí)、CINⅡ級(jí)、CINⅢ級(jí)或原位癌；(3)浸潤癌。發(fā)現(xiàn)CIN病變或浸潤癌為活檢陽性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)數(shù)資料用率表示，組間采用χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)　　果

2.1兩種方法的檢出率早期宮頸病變篩查的13 144例中，DNA倍體分析陽性率為7.33%(964/13 144)，TCT檢查陽性率為5.36%(705/13 144)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=42.92，P<0.01)。

2.2DNA倍體分析與活組織病理檢查結(jié)果DNA倍體檢測(cè)陽性患者中，以出現(xiàn)1～2個(gè)DNA倍體異常細(xì)胞為活檢標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)宮頸病變的靈敏度為98.67%(371/376)，特異度為22.47%(40/178)，陽性預(yù)測(cè)值為72.89%(371/509)，與病理活檢診斷的符合率為74.19%(411/554)。以出現(xiàn)3個(gè)及以上DNA倍體異常細(xì)胞為活檢標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)宮頸病變的靈敏度為89.36%(336/376)，特異度為58.99%(105/178)，陽性預(yù)測(cè)值為82.15%(336/409)，與病理活檢診斷的符合率為79.60%(441/554)，見表1。

表1　　DNA倍體分析與活組織病理檢查結(jié)果對(duì)比(n)

2.3TCT檢查與活組織病理檢查結(jié)果TCT檢查陽性患者中，以ASCUS為活檢標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)宮頸病變的靈敏度為73.87%(229/310)，特異度為49.18%(120/244)，陽性預(yù)測(cè)值為64.87%(229/353)，與病理活檢診斷的符合率為63.00%(349/678)。以LSIL為活檢標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)宮頸病變的靈敏度為62.90%(195/310)，特異度為79.92%(195/244)，陽性預(yù)測(cè)值為79.92%(195/244)，與病理活檢診斷的符合率為70.40%(390/554)，見表2。

表2　　TCT檢查與活組織病理檢查結(jié)果對(duì)比(n)

2.4ASCUS患者的DNA倍體分析及活組織病理檢查結(jié)果109例TCT檢查為ASCUS的患者中，活檢宮頸病變檢出率為40.37%(44/109)。其中DNA倍體正常組、出現(xiàn)1～2個(gè)DNA倍體異常細(xì)胞組、出現(xiàn)3個(gè)及以上DNA倍體異常細(xì)胞組宮頸病變檢出率分別為30.30%(10/33)、25.00%(6/24)、53.85%(28/52)，后一組較前兩組檢出率均高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.53、4.53，P<0.05)，而前兩組宮頸病變的檢出率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.19，P>0.05)，見表3。

表3　　109例ASCUS伴DNA倍體分析的

3　討　　論

近年來宮頸癌發(fā)病率居高不下，我國是宮頸癌的高發(fā)地區(qū)[1]。隨著液基細(xì)胞學(xué)的應(yīng)用，宮頸癌的發(fā)病率及病死率都有了下降的趨勢(shì)[2]，但受主觀診斷水平的影響，液基細(xì)胞學(xué)在宮頸病變的早期診斷中仍存在較高的漏診率和誤診率[3]。分子遺傳學(xué)的發(fā)展讓人們認(rèn)識(shí)到，癌的發(fā)生實(shí)質(zhì)上是腫瘤細(xì)胞的無限增殖，而細(xì)胞增殖的本質(zhì)是染色體的復(fù)制，表現(xiàn)為DNA合成的加速及含量的增加，過度的合成會(huì)造成DNA倍體異常[4-5]，因此細(xì)胞核DNA的變化直接反映腫瘤細(xì)胞的增殖能力。DNA倍體分析在國外已作為一種常規(guī)的臨床檢測(cè)方法應(yīng)用于宮頸癌的早期篩查[6-8]。近年來國內(nèi)也有相關(guān)研究和報(bào)道，研究表明DNA倍體分析可以彌補(bǔ)以往TCT篩查中主觀因素的不足，二者聯(lián)合可提高宮頸病變的檢出率。

本研究結(jié)果顯示，早期宮頸病變篩查的13 144例中，DNA倍體分析陽性率為7.33%，TCT陽性率為5.36%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。宋志琴等[9]對(duì)12 630例患者進(jìn)行了DNA定量分析及TCT檢測(cè)，二者陽性率分別為13.68%和8.97%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與本研究結(jié)果一致。本研究結(jié)果提示DNA倍體分析與TCT均可應(yīng)用于宮頸病變的早期篩查，DNA倍體分析陽性率較高。而分別以DNA倍體分析陽性及TCT陽性作為活檢標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)宮頸病變的靈敏度為98.67%和73.87%、陽性預(yù)測(cè)值為72.89%和64.87%，與病理診斷符合率為74.19%和63.00%，二者特異度分別為22.47%和49.18%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。提示二者比較，DNA倍體分析在宮頸病變檢出的靈敏度、陽性預(yù)測(cè)值及與病理診斷符合率方面均較TCT高，而特異度稍低,二者結(jié)合能提高宮頸病變篩查的準(zhǔn)確性，與國內(nèi)外研究結(jié)果一致[9-14]。

本研究中，分別以出現(xiàn)1～2個(gè)DNA倍體異常細(xì)胞及出現(xiàn)3個(gè)及以上DNA倍體異常細(xì)胞作為活檢標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)宮頸病變的靈敏度為98.67%和89.36%，特異度為22.47%和58.79%，陽性預(yù)測(cè)值為72.89%和82.15%，與病理活檢診斷符合率為74.19%和79.60%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。分別以ASCUS及LSIL作為活檢標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)宮頸病變的靈敏度為73.87%和62.90%，特異度為49.18%和79.92%，陽性預(yù)測(cè)值為64.87%和79.92%，與病理活檢診斷符合率為63.00%和70.40%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)果提示以出現(xiàn)3個(gè)及以上DNA倍體異常細(xì)胞或LSIL作為活檢標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)宮頸病變的篩查將具有較高的診斷價(jià)值。出現(xiàn)1～2個(gè)DNA倍體異常細(xì)胞或ASCUS可定期隨訪。在臨床工作中，合理分流此類患者能更準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)宮頸病變的發(fā)生，避免不必要的創(chuàng)傷性活檢。

本研究中值得注意的是109例TCT檢查為ASCUS的患者中，宮頸病變檢出率為40.37%。ASCUS一直以來診斷標(biāo)準(zhǔn)模糊，可重復(fù)性差，炎癥、HPV感染、萎縮、修復(fù)、或CIN都可引起ASCUS。本研究109例ASCUS患者中，DNA倍體正常組、出現(xiàn)1～2個(gè)DNA倍體異常細(xì)胞組、出現(xiàn)3個(gè)及以上DNA倍體異常細(xì)胞組宮頸病變檢出率分別為30.30%、25.00%、53.85%，最后一組宮頸病變的檢出率顯著高于前兩組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，結(jié)果提示，ASCUS伴3個(gè)及以上DNA倍體異常細(xì)胞者更容易發(fā)生宮頸病變。臨床工作中，對(duì)此類患者分流，立即行陰道鏡活檢，有可能早期發(fā)現(xiàn)宮頸病變。孔麗華等[15]研究認(rèn)為，ASCUS伴DNA倍體異常者均需行陰道鏡下活檢，而本研究中前兩組宮頸病變的檢出率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，提示如ASCUS不伴DNA倍體異?；虬?～2個(gè)DNA倍體異常者，均可定期隨訪，不必進(jìn)行活檢，研究結(jié)果與梅金紅等[16]一致。臨床工作中對(duì)ASCUS患者進(jìn)行合理分流，能更加準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)宮頸病變的嚴(yán)重程度及發(fā)展趨勢(shì)，避免不必要的創(chuàng)傷性活檢。DNA倍體分析聯(lián)合液基細(xì)胞學(xué)檢查能提高宮頸病變?cè)缙诤Y查的準(zhǔn)確性，為合理分流患者、指導(dǎo)臨床隨訪和治療提供了幫助。

[1]曹澤毅.中華婦產(chǎn)科學(xué)：下冊(cè)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2003:1746.

[2]夏大云.液基薄層法與細(xì)胞DNA倍體分析在宮頸癌篩查中的應(yīng)用[J].臨床輸血與檢驗(yàn)，2014,16(1):44-46.

[3]Canda MT,Demir N,Sezer O,et al.Clinical results of the liquidbased cervical cytology tool,Liqui-PREP,in comparison with conventional smears for detection of squamous cell abnorm alities[J].Asian Pac J Cancer Prev,2009,10(3):399-402.

[4]Duesberg P.Does aneuploidy or mutation start cancer? [J].Science,2005,307(5706):41.

[5]金日男，夏潮涌，許紅雁，等.DNA倍體分析對(duì)宮頸低度鱗狀上皮內(nèi)病變的診斷價(jià)值[J].中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志,2011,13(10):12-14.

[6]Liu Y,Heilman SA,Illanes D,et al.p53-independent abrogation of a postmitotic checkpoint contributes to human papillomavirus E6-induced polyploidy[J].Cancer Res,2007,67(6):2603-2610.

[7]Lorenzato M,Caudroy S,Nou JM,et al.Contribution of DNA ploidy image cytometry to the management of ASC cervical lesions [J].Cancer,2008,114(4):263-269.

[8]Heilman SA,Nordberg JJ,Liu Y,et al.Abrogation of the postmitotic checkpoint contributes to polyploidization in human papillomavirus E7-expressing cells[J].J Virol,2009,83(6):2756-2764.

[9]宋志琴，王藹明.宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析聯(lián)合液基細(xì)胞學(xué)在宮頸癌早期篩查中的應(yīng)用價(jià)值[J].中華臨床醫(yī)師雜志,2014,8(8):1437-1440.

[10]孟芝蘭，程雪梅，朱晨雁,等.全自動(dòng)DNA定量分析系統(tǒng)在宮頸癌及癌前病變篩查中的應(yīng)用價(jià)值[J].診斷病理學(xué)雜志,2012,19(1):15-18.

[11]陳嬡，徐友娣.DNA定量分析和宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查在宮頸病變中的診斷價(jià)值[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志,2011,26(11):845-848.

[12]Guillaud M,Benedet JL,Cantor SB,et al.DNA ploidy compared with human papilloma virus testing(Hybrid Capture Ⅱ) and conventional cervical cytology as a primary screening test for cervical high-grade lesions and cancer in 1 555 patients with biopsy confirmation[J].Cancer,2006,107(3):309-318.

[13]Tong H,Shen R,Wang ZM,et al.DNA ploidy cytometry testing for cervical cancer screening in China(DNACIC Trial);a prospective randomized,controlled trial[J].Clin Cancer Res,2009,15(23):6438-6445.

[14]徐珊，梅金紅，韓永良,等.宮頸脫落細(xì)胞DNA定量分析與薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查在宮頸早期病變篩查中的應(yīng)用比較[J].廣東醫(yī)學(xué),2013,34(9):1387-1390.

[15]孔麗華，李春東，呂佳慧,等.未明確診斷意義的不典型子宮頸鱗狀細(xì)胞伴DNA倍體異常的臨床意義[J].中國婦產(chǎn)科臨床雜志，2012,13(4)：271-273.

[16]梅金紅，徐珊，韓永良,等.不能明確意義的不典型鱗狀細(xì)胞伴DNA倍體異常在宮頸早期病變篩查中的意義[J].中華病理學(xué)雜志，2013,42(12):829-832.

張雪梅(1983-)，主治醫(yī)師，碩士，主要從事腫瘤病理診斷研究。

10.3969/j.issn.1671-8348.2016.14.035

R365

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1671-8348(2016)14-1974-03

2015-11-08

2016-02-18)