陳　剛

常規(guī)及直接藥敏試驗(yàn)在血液細(xì)菌檢驗(yàn)中的應(yīng)用對照分析

陳剛

目的 分析對比常規(guī)及直接藥敏試驗(yàn)在血液細(xì)菌檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果。方法 選擇2014年12月～2015年12月我院收治的發(fā)熱并感染者320例作為標(biāo)本采集對象，以無菌操作方式采集本組患者的血液標(biāo)本，30 ml/人，冷儲樣本，并送至檢驗(yàn)科檢驗(yàn)。結(jié)果 直接藥敏與常規(guī)藥敏試驗(yàn)鑒別革蘭陽性球菌與革蘭陰性桿菌的符合率分別為98.24%、96.67%。兩種方法對革蘭陽性菌與革蘭陰性的鑒定結(jié)果對比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。直接藥敏試驗(yàn)所需要的操作時(shí)間低于常規(guī)藥敏試驗(yàn)（P＜0.05）。結(jié)論 常規(guī)及直接藥敏試驗(yàn)在血液細(xì)菌檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果相當(dāng)，但直接藥敏操作時(shí)間較短，便于盡早指導(dǎo)患者用藥與治療。

常規(guī)藥敏；直接藥敏；血液細(xì)菌檢驗(yàn)

菌血癥與敗血癥是危害人們健康與生命安全的嚴(yán)重疾病之一，死亡率較高。研究發(fā)現(xiàn)[1]，抗生素不合理應(yīng)用是導(dǎo)致抗生素敏感度變異及細(xì)菌耐藥性增長的主要原因，給患者的臨床用藥治療效果造成了阻礙。因此，快速、準(zhǔn)確的藥敏試驗(yàn)與菌種鑒別是合理化用藥的關(guān)鍵。藥敏試驗(yàn)是通過測定血液中細(xì)菌對抗菌藥的靈敏度來達(dá)到鑒定細(xì)菌類型的目的，現(xiàn)最常見的方法有直接藥敏與常規(guī)藥敏試驗(yàn)法[1]。為了進(jìn)一步完善血液細(xì)菌檢驗(yàn)的方案，本研究分析對比常規(guī)與直接藥敏試驗(yàn)在血液細(xì)菌檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1臨床資料

選擇2014年12月～2015年12月我院收治的發(fā)熱并感染者320例作為標(biāo)本采集對象，其中男160例，女160例；年齡18～70歲，平均年齡（40.5±5.3）歲。入組標(biāo)準(zhǔn)：48 h內(nèi)未服用過任何藥物治療，且未采取過其他治療措施；患者對本次研究內(nèi)容知情，已簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重臟器疾?。谎盒约膊〖澳δ苷系K。以無菌操作方式采集本組患者的血液標(biāo)本，30 ml/人，冷儲樣本，并送至檢驗(yàn)科檢驗(yàn)。

2　結(jié)果

2.1兩種方法對革蘭陽性球菌與革蘭陰性桿菌的鑒定結(jié)果對比

320例血液標(biāo)本中，通過常規(guī)藥敏試驗(yàn)測定出細(xì)菌320例，其中革蘭陰性桿菌170例，革蘭陽性球菌150例。直接藥敏與常規(guī)藥敏試驗(yàn)鑒別革蘭陽性球菌與革蘭陰性桿菌的符合率分別為98.24%、96.67%。兩種方法對革蘭陽性菌與革蘭陰性的鑒定結(jié)果對比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1　兩種方法對革蘭陽性球菌與革蘭陰性桿菌的鑒定結(jié)果對比（n）

2.2兩種藥敏試驗(yàn)方法所需要的時(shí)間對比

直接藥敏試驗(yàn)所需要的操作時(shí)間為8～14 h，平均時(shí)間為（9.2±2.2）h；常規(guī)藥敏試驗(yàn)所需要的操作時(shí)間在48～72 h，平均時(shí)間為（60.5±5.8）h。兩種藥敏試驗(yàn)所需要的操作時(shí)間對比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=13.523，P＜0.05）。

3　討論

研究指出[2-3]，菌血癥與敗血癥等疾病與細(xì)菌耐藥性增加具有密切的相關(guān)性，使得血液系統(tǒng)疾病的死亡率遞增。目前，國外許多國家已將抗生素劃入到控制使用藥物的行列中[4]。有學(xué)者指出[5]，抗生素在有效治療細(xì)菌感染的同時(shí)，亦會增強(qiáng)細(xì)菌對藥物的耐藥性，而相關(guān)抗生素藥物應(yīng)用的頻次則決定了細(xì)菌對該藥的耐藥水平?？股貞?yīng)用后若仍有細(xì)菌存活，此類細(xì)菌的衍生物均會具備抗藥性，當(dāng)機(jī)體再次出現(xiàn)感染時(shí)，則會增加抗生素的用量，繼而使細(xì)菌存活率高于原始菌株，最終影響臨床療效。因此，針對細(xì)菌誘發(fā)的相關(guān)疾病，臨床應(yīng)準(zhǔn)確、快速的鑒別細(xì)菌類型，合理選擇抗生素藥物，以此保證整體治療效果。

常規(guī)藥敏試驗(yàn)是傳統(tǒng)的血液細(xì)菌檢驗(yàn)方法，它通過定性措施進(jìn)行試驗(yàn)，以抗菌藥抑菌水平與抑菌環(huán)直徑呈負(fù)相關(guān)來設(shè)計(jì)試驗(yàn)，對環(huán)境要求較高，且檢測時(shí)間較長，應(yīng)用范圍有限。直接藥敏試驗(yàn)始見于上世紀(jì)70年代，隨著近年來的發(fā)展與完善，現(xiàn)已在臨床中得到了廣泛應(yīng)用。有學(xué)者指出[6]，直接藥敏可以高效、快速的達(dá)到血液檢驗(yàn)?zāi)康?，且?zhǔn)確率與常規(guī)藥敏試驗(yàn)相當(dāng)。本文研究結(jié)果與上述結(jié)果相符，直接藥敏與常規(guī)藥敏試驗(yàn)鑒別革蘭陽性球菌與革蘭陰性桿菌的符合率分別為98.24%、96.67%。兩種方法對革蘭陽性菌與革蘭陰性的鑒定結(jié)果對比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。說明直接藥敏試驗(yàn)所直接采取的血培養(yǎng)成份，對革蘭桿菌的鑒別影響不大，可以獲取到較高的準(zhǔn)確率，這與許多結(jié)果一致[7-8]。

此外，由于直接藥敏試驗(yàn)僅根據(jù)最佳的鏡下標(biāo)本涂片結(jié)果來選擇鑒定板型，減化了轉(zhuǎn)種環(huán)節(jié)，直接調(diào)整菌液濃度到特定水平，之后上機(jī)檢驗(yàn)，縮短了操作時(shí)間，為患者盡早用藥治療提供了有效的支持。本文研究結(jié)果顯示，直接藥敏試驗(yàn)所需要的操作時(shí)間低于常規(guī)藥敏試驗(yàn)（P＜0.05）。需要注意的是，直接藥敏試驗(yàn)未采用菌懸液精確調(diào)配，樣本細(xì)菌水平不會影響檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性，且藥敏紙片的片間差、規(guī)格、菌液分布情況也與檢驗(yàn)準(zhǔn)確性相關(guān)。臨床應(yīng)多方向考慮影響直接藥敏結(jié)果的誤差來源與相關(guān)因素，盡可能觀察到無抑菌圈的結(jié)果，以此保證檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性。

總之，常規(guī)及直接藥敏試驗(yàn)在血液細(xì)菌檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果相當(dāng)，但直接藥敏操作時(shí)間較短，便于盡早指導(dǎo)患者用藥與治療。

[1] 施琛.直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)在臨床血液細(xì)菌鑒定與檢驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值研究[J].臨床合理用藥雜志，2013，6（12）：5-6.

[2] 劉玉慶，張懷強(qiáng)，胡明，等.藥敏試驗(yàn)方法的局限性及改進(jìn)的建議[J].山東大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2011，49（3）：124-132.

[3] 李慧.兩種細(xì)菌鑒定法在臨床血液檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2011，38（9）：1705-1706.

[4] 張茂海.兩種細(xì)菌鑒定法在臨床血液檢驗(yàn)中的應(yīng)用研究[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，31（12）：3-5.

[5] 孫捷民.臨床血液檢驗(yàn)中的兩種不同細(xì)菌鑒定法的應(yīng)用[J].山東醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校學(xué)報(bào)，2013，35（6）：456-458.

[6] 李魏林，馬丹冬.直接及常規(guī)藥敏試驗(yàn)在臨床血液細(xì)菌檢驗(yàn)中的應(yīng)用比較[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2014，8（21）：139-140.

[7] 闕志文.兩種不同藥敏實(shí)驗(yàn)在血液細(xì)菌檢驗(yàn)中的對照研究[J].現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué)，2015，27（1）：118-120.

[8] 李麗.直接藥敏試驗(yàn)在臨床血液細(xì)菌檢驗(yàn)中的效果研究[J].中國衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)管理，2015，6（4）：21-22.

Contrast Analysis of Routine and Direct Drug Sensitivity Test in the Detection of Blood Bacteria

CHEN Gang Department of Clinical Laboratory， The Fourth Affiliated Hospital of Zhengzhou University， Zhengzhou He'nan 450003， China

Objective To analyze and compare the effect of routine and direct drug sensitivity test in the detection of blood bacteria. MethodsFrom December 2014 to December 2015， our hospital were fever and infection of 320 cases as specimen collection object， collect blood samples of this group of patients by means of aseptic operation， 30 ml in one cases， cold storage sample and sent to laboratory tests. Results The coincidence rate between the direct drug sensitivity and the conventional drug sensitivity test was 98.24% and 96.67% respectively. There was no signifcant difference between the two methods in the identification of gram positive bacteria and gram negative bacteria （P＞0.05）. The operation time of direct drug sensitivity test was signifcantly lower than that of routine drug sensitivity test （P＜0.05）. Conclusion Conventional and direct drug sensitivity test in the blood bacterial test results are quite， but the direct drug sensitivity operation time is short， easy to guide patients to use drugs and treatment as soon as possible， suitable for clinical promotion.

Routine drug sensitivity， Direct drug sensitivity， Blood bacterial test

R446.1

A

1674-9308（2016）20-0028-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.20.017

鄭州大學(xué)第四附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 鄭州450003

1.2方法

1.2.1直接藥敏試驗(yàn) 將血液樣本放于BACTEC 9240系統(tǒng)內(nèi)培養(yǎng)。通過消毒注射器抽入標(biāo)本10 ml放置到無菌試管內(nèi)，離心6 min，速度為1 600轉(zhuǎn)/min，采集上清液，離心13 min，速度為2 900轉(zhuǎn)/min，清除上清液，應(yīng)用磷酸鹽緩沖液洗滌，沉淀兩次后重懸。革蘭染色采用20 μl懸液，并在顯微鏡下觀察細(xì)菌的形態(tài)。針對鏈狀革蘭陽性菌，以MH+羊血血平板給予初期藥敏試驗(yàn)，并根據(jù)測定結(jié)果選擇適當(dāng)酶，調(diào)整菌液濃度在6.0×105cfu/L后接種到NC 21綜合板給予細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)。一般菌種在平板上直接接種菌懸液1～2滴，并以無菌試紙將其涂勻，貼好藥敏紙片，通過2005 NCCLS指標(biāo)評判其耐藥性與敏感度。

1.2.2常規(guī)藥敏試驗(yàn) 采集血樣標(biāo)準(zhǔn)在巧克力平板、麥康凱平板及血平板接種，在空氣6%CO2、溫度35℃環(huán)境下培養(yǎng)17～24 h后給予革蘭染色。選擇適合的酶，以Walkaway系統(tǒng)行藥敏試驗(yàn)。

1.3觀察指標(biāo)

觀察兩種藥敏試驗(yàn)對革蘭陽性球菌與革蘭陰性桿菌檢測的符合率。觀察對比兩種藥敏試驗(yàn)方法所需要的時(shí)間。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

通過SPSS13.0軟件分析與統(tǒng)計(jì)，計(jì)數(shù)資料以率（%）來表示，采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）表示，采用t檢驗(yàn)，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。