鄭紅星，相輝，張志健，祁珊珊，劉晶，楊星（.陜西理工學(xué)院生物科學(xué)與工程學(xué)院，陜西漢中723000；2.陜西省黑色有機食品工程技術(shù)研究中心，陜西漢中723000）

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杜仲葉提取物減肥功能評價

鄭紅星1，2，相輝1，張志健1，2，祁珊珊1，劉晶1，楊星1
（1.陜西理工學(xué)院生物科學(xué)與工程學(xué)院，陜西漢中723000；2.陜西省黑色有機食品工程技術(shù)研究中心，陜西漢中723000）

為開發(fā)杜仲葉提取物的保健食品，本文對其進行了減肥功能研究。以杜仲葉乙醇提取物為受試樣品，50只昆明小鼠隨機分成5組：空白對照組，模型對照組，以及高劑量組（600 mg/kg·BW）、中劑量組（300 mg/kg·BW），低劑量組（150 mg/kg·BW），每組10只，模型對照組和劑量組飼喂營養(yǎng)飼料，空白對照組給予基礎(chǔ)飼料，飼養(yǎng)30 d，試驗期間分別測定每只動物的攝食量、飲水量及體重。試驗結(jié)束時稱體重，解剖取體脂并稱重，計算脂/體比，食物利用率、Lee's指數(shù)。結(jié)果：各劑量組的體重和脂/體比明顯低于模型對照組，并且其攝食量不顯著低于模型對照組。該研究表明杜仲葉乙醇提取物具有減肥功能。

杜仲葉；乙醇提取物；營養(yǎng)性肥胖；減肥；功能；評價

隨著社會、經(jīng)濟的快速發(fā)展，我們的飲食和身體活動模式發(fā)生了巨大的變化。高脂、高能量食品攝入量持續(xù)增加；同時工作形式、交通方式的變化以及城市化加劇，造成身體活動的缺乏。據(jù)WHO報道，超重和肥胖在全球流行，2013年，全世界約有4200萬5歲以下兒童超重或肥胖。2014年，逾19億成年人超重，其中有6億多人肥胖。全世界約有13%的成年人肥胖。身體質(zhì)量指數(shù)升高是患非傳染性疾病的重大風(fēng)險因素，如：心血管疾?。?］、糖尿?。?］、肌肉骨骼疾患［3］、某些癌癥［4］。因此研究開發(fā)安全有效的減肥藥物與功能食品，已成為世界關(guān)注的研究領(lǐng)域。

杜仲是中國名貴滋補藥材，也是中國特有的樹種，主要分布于陜西、甘肅、河南、湖北、四川、云南、貴州、湖南、安徽、江西、廣西及浙江等省區(qū)，2015年我國杜仲栽培面積35萬公頃，占世界總量約90%以上，被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥保健、工業(yè)、農(nóng)業(yè)、林業(yè)等領(lǐng)域。目前，除傳統(tǒng)藥材杜仲皮外，杜仲葉、花、果等也具有很高的食用和藥用價值，杜仲皮和杜仲葉已被列入《中華人民共和國藥典》和《可用于保健食品的物品名單》，而杜仲籽油、杜仲雄花分別于2009年、2014年已被列入《國家新食品原料名單》。在《中華人民共和國藥典》中記載杜仲功能主治：“補肝腎，強筋骨，安胎功效。可用于治療肝腎不足，腰膝酸痛，筋骨無力，頭暈?zāi)垦?，妊娠漏血，胎動不安?］”。另外，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，杜仲具有降血壓、抗氧化、抗疲勞、增強免疫力、抗骨質(zhì)疏松、抗腫瘤、保肝護肝、降血糖和抗衰老等多種功效［6-7］，而在減肥功能上很少有報道。本研究旨在評價杜仲葉乙醇提取物的減肥功能，為其減肥功能食品開發(fā)提供參考。

1　材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1試驗動物

KM小鼠（SPF級，18 g～22 g，雌性）：由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部實驗動物中心提供，實驗動物生產(chǎn)許可證號SCXK（陜）2012-003。

1.1.2受試樣品、試劑與儀器

杜仲葉乙醇提取物：陜西昊辰生物科技有限公司；蒸餾水：實驗室自制；JA2002電子天平：上海浦春計量儀器有限公司；常規(guī)解剖器械等。

1.2方法

1.2.1劑量分組及受試樣品給予時間

ERP是以建立企業(yè)的內(nèi)部資源信息以及完善管理系統(tǒng)為目標，目前，我國很多企業(yè)大多數(shù)都是選取其中的一部分模塊來實施，并且在使用中很多的功效還沒能發(fā)揮出來，企業(yè)仍處于一個探索的初級階段，主要存在以下主要問題：

試驗設(shè)3個劑量組、1個模型對照組和1個空白對照組，每組10只，高、中、低劑量組給藥劑量分別為600、300、150 mg/kg·BW，受試樣品經(jīng)口灌胃給藥，受試樣品給予時間30 d。

1.2.2飼料配方

基礎(chǔ)飼料：由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部實驗動物中心提供。

營養(yǎng)飼料：基礎(chǔ)飼料80%（西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部實驗動物中心）、豬油10%（市場購買）、蛋黃粉10%（安徽亳州紅日蛋制品有限責(zé)任公司），按上述比例自行配制獲得。

1.2.3試驗步驟

將動物隨機分為空白對照組、肥胖模型對照組和3個受試樣品劑量組，自試驗開始，模型對照組、劑量組動物給予等量的營養(yǎng)飼料，空白對照組以相同方式給予等量的基礎(chǔ)飼料，劑量組給不同劑量的杜仲葉乙醇提取物，模型對照組和空白對照組給予相應(yīng)溶劑。試驗時間為30 d，試驗期間定期記錄每組動物的給食量、剩食量及飲水量，并稱體重。試驗結(jié)束時將小鼠頸椎脫臼處死，對每只動物稱體重，剖腹取體脂并稱重，計算食物利用率、脂/體比與Lee's指數(shù)［8］。

Lee's指數(shù)=BW1/3×103/BL，式中：BW為體重，g；BL為體長，cm，即小鼠鼻尖到肛門的長度［9-10］。

體重、飲水量、攝食量、食物利用率、體內(nèi)脂肪重量（腎周圍脂肪墊）、脂/體比、Lee's指數(shù)。

1.3數(shù)據(jù)處理和結(jié)果判定

采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS19.0進行方差分析，采用t檢驗，試驗數(shù)據(jù)以平均值±標準差（）表示。差異顯著水平為P＜0.05，差異極顯著水平為P＜0.01。依據(jù)《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》，若模型對照組的體重和體內(nèi)脂肪重量，或體重和脂/體比高于空白對照組，差異有顯著性，則說明營養(yǎng)性肥胖模型建立成功；若劑量組的體重和體內(nèi)脂肪重量，或體重和脂/體比低于模型對照組，差異有顯著性，并且攝食量不顯著低于模型對照組，則判定杜仲葉乙醇提取物對營養(yǎng)性肥胖小鼠具有減肥功能。

2　結(jié)果與分析

2.1杜仲葉乙醇提取物對肥胖小鼠體重的影響

杜仲葉乙醇提取物對肥胖小鼠體重的影響見表1。

表1　杜仲葉乙醇提取物對肥胖小鼠體重的影響（，n=10）Table 1　Effect of ethanol extract of Eucommia ulmoides leaves on body weight levels in obese mice（，n=10）

表1　杜仲葉乙醇提取物對肥胖小鼠體重的影響（，n=10）Table 1　Effect of ethanol extract of Eucommia ulmoides leaves on body weight levels in obese mice（，n=10）

注：△表示模型對照組與空白對照組比較，有顯著性差異（P＜0.05）；*表示劑量組與模型對照組比較，有顯著性差異（P＜0.05）。

分組　給藥前體重/g　給藥1周體重/g　給藥2周體重/g　給藥3周體重/g　給藥4周體重/g空白對照組　18.83±1.72　19.50±1.45　20.52±1.14　23.47±1.02　24.98±1.55模型對照組　18.92±1.61　20.41±1.57　23.21±1.57△　25.81±1.01△　27.41±1.75△低劑量組　18.51±1.44　19.30±1.42　20.81±1.31*　23.20±2.28*　23.99±2.76*中劑量組　18.70±1.61　19.65±1.49　20.90±1.08*　23.63±1.62*　25.33±2.23*高劑量組　18.62±1.40　19.65±1.06　20.63±1.31*　23.04±0.95*　24.18±1.08*

如表1所示，模型對照組與空白對照組比較，從給藥第2周開始，小鼠體重顯著高于空白對照組，說明營養(yǎng)飼料具有顯著增重作用。各劑量組與模型對照組比較，低劑量、中劑量組與高劑量組給藥前體重均無差異顯著性（P＞0.05）；從給藥第2周開始，杜仲葉乙醇提取物各劑量組均可以降低肥胖小鼠的體重，與模型對照組比較，有顯著性差異（P＜0.05）。

2.2杜仲葉乙醇提取物對肥胖小鼠飲水量、攝食量、食物利用率的影響

杜仲葉乙醇提取物對肥胖小鼠飲水量、攝食量、食物利用率的影響見表2。

表2　杜仲葉乙醇提取物對肥胖小鼠飲水量、攝食量、食物利用率的影響（，n=10）Table 2　Effect of ethanol extract of Eucommia ulmoides leaves on water intake，food intake and food utilization in obese mice（，n=10）

表2　杜仲葉乙醇提取物對肥胖小鼠飲水量、攝食量、食物利用率的影響（，n=10）Table 2　Effect of ethanol extract of Eucommia ulmoides leaves on water intake，food intake and food utilization in obese mice（，n=10）

注：△△表示模型對照組與空白對照組比較，有極顯著性差異（P＜0.01）；**表示劑量組與模型對照組比較，有極顯著性差異（P＜0.01）。

食物利用率/%空白對照組　10　4.54±0.23　4.41±0.41　5.12±2.13模型對照組　10　4.78±0.96　4.13±0.09　7.21±3.01△△低劑量組　10　4.78±0.51　4.17±0.42　5.33±1.09**中劑量組　10　3.83±0.17　3.90±0.79　5.19±2.02**高劑量組　10　4.33±0.34　3.83±0.66　4.31±1.89**分組　試驗動物數(shù)/只飲水量/（mL/d）攝食量/（g/d）

如表2所示，模型對照組與空白對照組比較，每日平均飲水量與攝食量均無顯著性差異（P＞0.05），而食物利用率顯著高于空白對照組（P＜0.01）。另外，杜仲葉乙醇提取物高、中、低劑量組分別與模型對照組比較，每日平均飲水量與攝食量均無顯著性差異（P＞0.05）；而杜仲葉乙醇提取物高、中、低劑量組的食物利用率均低于模型對照組，有極顯著性差異（P＜0.01）。

2.3杜仲葉乙醇提取物對肥胖小鼠體脂重量、脂/體比、Lee's指數(shù)的影響

杜仲葉乙醇提取物對肥胖小鼠體脂重量、脂/體比、Lee's指數(shù)的影響見表3。

如表3所示，模型對照組與空白對照組比較，模型對照組的體脂重量、脂/體比和Lee's指數(shù)均顯著高于空白對照組（P＜0.05），表明營養(yǎng)性肥胖模型建立成功；另外，杜仲葉乙醇提取物高、中、低劑量組分別與模型對照組比較，杜仲葉乙醇提取物均可降低體脂重量、脂/體比和Lee's指數(shù)，均有顯著性差異（P＜0.05）。

表3　杜仲葉乙醇提取物對肥胖小鼠體脂重量、脂/體比、Lee's指數(shù)的影響（，n=10）Table 3　Effect of ethanol extract of Eucommia ulmoides leaves on fat tissue weight，fat tissue index and Lee's index in obese mice（，n=10）

表3　杜仲葉乙醇提取物對肥胖小鼠體脂重量、脂/體比、Lee's指數(shù)的影響（，n=10）Table 3　Effect of ethanol extract of Eucommia ulmoides leaves on fat tissue weight，fat tissue index and Lee's index in obese mice（，n=10）

注：△表示模型對照組與空白對照組比較，有顯著性差異（P＜0.05）；*表示劑量組與模型對照組比較，有顯著性差異（P＜0.05）。

分組　實驗動物數(shù)/只　體脂重量/g　脂/體比/%　Lee's指數(shù)空白對照組　10　0.17±0.029　0.71±0.32　344.12±14.01模型對照組　10　0.25±0.013△　0.83±0.26△　362.87±11.98△低劑量組　10　0.18±0.020*　0.78±0.31*　347.33±13.30*中劑量組　10　0.17±0.027*　0.68±0.12*　346.21±12.32*高劑量組　10　0.17±0.009*　0.67±0.12*　330.57±10.23*

3　結(jié)論

本文利用杜仲葉乙醇提取物對營養(yǎng)性肥胖小鼠進行了減肥功能的研究，結(jié)果表明，試驗組的體重和脂/體比低于模型對照組，差異有顯著性，并且攝食量不顯著低于模型對照組，依據(jù)《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》可判定該杜仲葉乙醇提取物具有減肥功能作用。另外，研究人員利用杜仲葉提取物對肥胖性倉鼠、大鼠進行了減肥降脂功能的試驗，結(jié)果均表明，杜仲葉提取物具有良好的減肥功能［11-12］。本研究與Hirata T，Choi M S等的研究結(jié)論基本一致。

超重和肥胖通常采用的治療措施較多，但是飲食療法、運動療法、行為療法經(jīng)常發(fā)生效果不佳或復(fù)發(fā)率高，另外，目前許多減肥功能食品和藥物毒副作用較大，如奧利司他是目前全球唯一的OTC減肥藥，雖然是一種相對較安全的減肥藥物，但是使用后經(jīng)常引起胃腸排氣增多，大便緊急感，脂肪性大便，脂肪瀉，大便次數(shù)增多和大便失禁等不良反應(yīng)［13-14］。在中藥減肥藥物及功能食品中常以瀉下藥如決明子、番瀉葉、大黃等為主要原料，由于含有蒽醌及其苷類化合物，服用后經(jīng)常出現(xiàn)腹瀉，長期或大劑量使用對胃腸、肝臟、腎臟等臟器有毒性，甚至有三致作用［15-18］。而杜仲與杜仲葉提取物屬無毒級，安全性極高［19-20］。因此，杜仲葉提取物可作為功能食品的功效成分生產(chǎn)制備安全、有效減肥功能類保健食品，為杜仲葉有關(guān)的功能食品開發(fā)提供重要參考。另外，目前，有關(guān)杜仲葉提取物減肥的物質(zhì)基礎(chǔ)的研究報道很少，可能與其主要活性成分綠原酸有關(guān)［21］，杜仲葉提取物減肥的物質(zhì)基礎(chǔ)與其減肥作用機制有待后續(xù)進一步研究。

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Assessment of Extract of Eucommia ulmoides Leaves on Weight Loss Function

ZHENG Hong-xing1，2，XIANG Hui1，ZHANG Zhi-jian1，2，QI Shan-shan1，LIU Jing1，YANG Xing1
（1.School of Biological Science and Engineering，Shaanxi University of Technology，Hanzhong 723000，Shaanxi，China；2.Shaanxi Province Black Organic Food Engineering Technology Research Center，Hanzhong 723000，Shaanxi，China）

To develop health food of Eucommia leaf extract，the weight loss function was studied.Taking ethanol extracts of Eucommia ulmoides leaves as tested drug，50 kunming mice were randomly divided into five groupsfor 10 animalsin each group：blank control group，model group，and high dose group（600 mg/kg·BW），middle dose group（300 mg/kg·BW）and low dose group（150 mg/kg·BW）.Three dose group and model group were fed with high fat food，and the blank control group was given basal food.Water intake，food intake and body weight of every animal was measured during the feeding period for 30 days.Body weight and body fat of mices were weighted at the end of experiment，and fat/body weight ratio，food utilization and Lee's index.The weight and fat/body ratio of every dose group was significantly lower than the model group，and food intake wasn't significantly lower than the model control group.This experiment showed that ethanol extract of Eucommia ulmoides leaves has a weight loss function.

Eucommia ulmoides leaves；ethanol extract；alimentary obesity；weight loss；function；assessment

10.3969/j.issn.1005-6521.2016.13.040

陜西理工學(xué)院人才啟動項目（SLGQD14-01）；陜西省教育廳項目（2013JK0721）

鄭紅星（1981—），男（漢），講師，博士，研究方向：功能食品的研究與開發(fā)。

2015-06-12