邵禮成，余志輝，王介朱

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·臨床醫(yī)學(xué)·

幽門螺桿菌CagA、VacA基因分型

在2型糖尿病患者中的表達(dá)與分析

邵禮成，余志輝，王介朱

目的：探討幽門螺桿菌(Helicobacterpylori，Hp)不同基因分型在2型糖尿病(T2DM)患者中的表達(dá)及臨床意義。方法：170例T2DM患者納入觀察組，并將同時(shí)期的170例非T2DM患者納入對(duì)照組，比較2組空腹血糖、體質(zhì)量指數(shù)、腰臀比等一般資料；比較2組間Hp感染、Hp細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白、空泡毒素相關(guān)蛋白基因型感染的差異性；同時(shí)比較觀察組中Hp感染患者與非Hp感染患者糖化血紅蛋白、空腹胰島素以及胰島素敏感指數(shù)水平。結(jié)果：觀察組患者空腹血糖、體質(zhì)量指數(shù)、腰臀比、Hp感染率、糖化血紅蛋白以及Hp細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白、空泡毒素相關(guān)蛋白陽性率均顯著高于對(duì)照組(P<0.01)；同時(shí)觀察組中Hp感染組患者的糖化血紅蛋白和空腹胰島素水平顯著高于非感染組，而胰島素敏感指數(shù)則顯著低于非感染組(P<0.01)。結(jié)論：Hp細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白基因和空泡毒素相關(guān)蛋白基因分型在 T2DM的發(fā)生過程中具有重要意義。

幽門螺桿菌；糖尿病，2型；幽門螺桿菌細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白；空泡毒素相關(guān)蛋白；糖化血紅蛋白

隨著社會(huì)的高速發(fā)展以及人民生活水平的顯著提高，糖尿病患者數(shù)也呈現(xiàn)逐年遞增的趨勢(shì)，其中2型糖尿病(T2DM)患者數(shù)量占據(jù)越來越多的比重。我國預(yù)計(jì)到2025年T2DM患者將突破5 000萬，成為全球T2DM患者最多的國家[1-2]。糖尿病的持續(xù)病變能夠?qū)е禄颊甙l(fā)生各種嚴(yán)重的并發(fā)癥，對(duì)患者的生命健康造成了巨大的威脅。近年研究[3]表明，幽門螺桿菌(Helicobacterpylori，Hp)的感染與糖尿病的發(fā)病存在著密切的關(guān)系。與此同時(shí)，細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白(CagA)、空泡細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白(VacA)與Hp毒素的表達(dá)釋放密切相關(guān)，并通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和免疫細(xì)胞釋放細(xì)胞因子來加重機(jī)體的免疫損傷[4]。本研究運(yùn)用多種檢測(cè)手段探討Hp不同基因分型在T2DM發(fā)病機(jī)制的作用，從而為臨床預(yù)防和治療T2DM提供參考依據(jù)?，F(xiàn)作報(bào)道。

1　資料與方法

1.1一般資料將我院2013年1月至2014年4月收治的170例內(nèi)分泌門診及住院的T2DM患者納入觀察組，其中男117例，女53例；年齡45～67歲。所有患者均符合世界衛(wèi)生組織T2DM診斷標(biāo)準(zhǔn)(1999年)；均排除心、肝、腎等臟器疾病。選擇同時(shí)期在我院就診的170例非T2DM患者納入對(duì)照組，其中男112例，女58例；年齡43～63歲。2組患者性別和年齡均具有可比性。

1.2方法當(dāng)日測(cè)定血壓、身高及體質(zhì)量。所有患者禁食12 h以上，采靜脈血測(cè)定空腹血糖(FBG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、空腹胰島素(FINS)以及胰島素敏感指數(shù)(ISI)；采用高效液相層析法通過普萊默斯PDQ型(Premier Hb 9210)糖化血紅蛋白分析儀檢測(cè)2組HbA1c水平。采用14C-尿素酶呼氣實(shí)驗(yàn)確定Hp是否感染，由安徽養(yǎng)和醫(yī)療器械設(shè)備有限公司提供14C-尿素酶呼氣實(shí)驗(yàn)所用膠囊、同位素比值譜分析儀以及Hp檢測(cè)儀呼氣卡，當(dāng)患者14C 尿素呼氣實(shí)驗(yàn)判斷值值在100 dpm時(shí)即為陽性，在100 dpm以下時(shí)為陰性。采集所有患者靜脈血2 mL，按照Hp免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)試劑盒說明書(深圳欣康數(shù)碼科技有限公司)操作，并采用配套的XK2100型生物芯片閱讀儀對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用t(或t′)檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)。

2　結(jié)果

2.12組患者體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、腰臀比和FBG比較觀察組患者BMI、腰臀比和FBG均顯著高于對(duì)照組(P<0.01)(見表1)。

表1　2組患者體質(zhì)量指數(shù)、腰臀比和FBG比較

2.22組患者Hp感染率比較觀察組Hp感染率為62.4%，明顯高于對(duì)照組的13.5%(P<0.01)(見表2)。

表2　2組Hp感染率比較(n)

2.32組患者HpCagA和VacA基因型陽性率比較觀察組患者Hp CagA和VacA陽性率分別為61.2%和57.6%，均明顯高于對(duì)照組的12.4%和11.2%(P<0.01)(見表3)。

表3　2組患者Hp CagA和VacA陽性率比較

2.4觀察組中Hp感染患者和非感染患者HbA1c、FINS及ISI比較Hp感染組患者的HbA1c和FINS水平均顯著高于非感染組，而ISI水平則顯著低于非感染組(P<0.01)(見表4)。

*示t′值

3　討論

糖尿病是一種由環(huán)境因素、遺傳因素以及生活方式等多種因素共同作用所導(dǎo)致的一種全身慢性代謝疾病[5]。同時(shí)隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的高速發(fā)展以及人們生活水平的提高，再加上人們生活方式的改變，社會(huì)老齡化程度的加劇，無論是在發(fā)達(dá)國家還是發(fā)展中國家，糖尿病的患病率都呈現(xiàn)逐年增長(zhǎng)的趨勢(shì)，其中T2DM的比例又占到90%以上[6-7]。隨著近年來醫(yī)學(xué)工作者對(duì)于T2DM的深入研究，發(fā)現(xiàn)T2DM與炎癥的發(fā)展有著密切的關(guān)系，炎癥可能通過誘導(dǎo)胰島B細(xì)胞凋亡和胰島素抵抗導(dǎo)致T2DM。由于T2DM患者糖代謝的紊亂、免疫功能受損等，往往會(huì)出現(xiàn)呼吸道、泌尿道、皮膚等多種形式的急慢性感染。Hp的感染與T2DM有著密切的關(guān)系[8]。本研究顯示，觀察組Hp感染率為62.4%，而對(duì)照組僅為13.5%，Hp感染率顯著高于對(duì)照組(P<0.01)。同時(shí)在T2DM患者中Hp感染組患者的HbA1c和FINS水平均顯著高于非感染組，而ISI水平則顯著低于非感染組(P<0.01)，說明Hp感染與糖尿病的發(fā)生發(fā)展有著密切的關(guān)系。研究[9]表明，Hp能夠破壞成人耐糖量，并且與HbA1c水平呈正相關(guān)，同時(shí)較高的BMI也能夠增強(qiáng)這種作用；同時(shí)Hp能夠顯著影響T2DM患者的血糖波動(dòng)，根除Hp的感染能夠有效地控制患者血糖、減少低血糖事件以及保證患者血糖平穩(wěn)[2]，Hp在成人糖尿病中扮演著重要的角色。本研究中，觀察組BMI、腰臀比以及HbA1c均顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，這種作用可能與患者Hp感染后胃蠕動(dòng)以及胃動(dòng)力下降，同時(shí)糖尿病患者胃腸激素分泌失調(diào)有關(guān)。

自從Hp被人們發(fā)現(xiàn)以來，世界醫(yī)學(xué)界對(duì)其進(jìn)行了深入的研究，發(fā)現(xiàn)Hp是特異性生長(zhǎng)在人胃黏膜以及黏膜下層，能夠產(chǎn)生毒素的一種革蘭陰性菌，同時(shí)還具有基因組的多樣性。CagA與毒素的表達(dá)密切相關(guān)，其主要是通過細(xì)菌的4型分泌裝置將其注入細(xì)胞中，通過磷酸化擾亂細(xì)胞通路信號(hào)的正常轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而導(dǎo)致細(xì)胞的異常增殖，同時(shí)誘導(dǎo)多種炎癥因子的分泌，加重胃黏膜的炎癥反應(yīng)。VacA是一種由Hp分泌的相對(duì)分子質(zhì)量為95 000的常見蛋白質(zhì)毒素，其進(jìn)入宿主細(xì)胞內(nèi)，通過改變細(xì)胞上離子的聚集，增加細(xì)胞膜的通透性，使水分子內(nèi)流，從而在細(xì)胞內(nèi)形成空泡；同時(shí)其還能夠通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，增加炎癥因子的釋放，從而加重患者的免疫損傷，幫助細(xì)菌逃脫機(jī)體的免疫監(jiān)視[10-11]。本研究結(jié)果顯示，觀察組CagA與VacA的陽性率分別為61.2%和57.6%，均顯著高于對(duì)照組(P<0.01)。由此也表明CagA與VacA在檢測(cè)糖尿病的發(fā)生發(fā)展中有著重要的地位，亦與其發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)，值得進(jìn)行進(jìn)一步的研究。

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(本文編輯劉夢(mèng)楠)

Expression and significance of the genotype CagA and VacA of Helicobacter pylori in patients with type 2 diabetes

SHAO Li-cheng,YU Zhi-hui,WANG Jie-zhu

(DepartmentofInternalMedicine,TheFifthPeople′sHospitalofFoshan,FoshanGuangdong528211,China)

Objective:To explore the expressions of the different genotypes ofHelicobacterpylori(Hp) in patients with type 2 diabetes mellitus(T2DM).Methods:One hundred and seventy patients with T2DM and 170 non-T2DM were divided into the observation group and control group,respectively.The fasting blood glucose,body mass index,ratio of waist to hip,Hp infection,genotypes of cytotoxin associated protein and vacuolating cytotoxin associated protein of Hp,and the levels of glycated haemoglobin,fasting insulin and insulin sensitivity index between two groups were compared and analyzed.Results:The fasting blood glucose,body mass index,ratio waist to hip,infection rate of Hp,and the positive rates of cytotoxin associated protein and vacuolating cytotoxin associated protein of Hp in observation group were significantly higher than those in control group(P<0.01).The levels of glycated haemoglobin and fasting insulin in observation group were significantly higher than those in control group,the insulin sensitivity index in observation group was significantly lower than that in control group(P<0.01).Conclusions:The genotypes of cytotoxin associated protein and vacuolating cytotoxin associated protein of Hp play an important role in the occurrence process of T2DM.

Helicobacterpylori;diabetes,type 2;cytotoxin associated protein;vacuolating cytotoxin associated protein;glycoseylated hemoglobin

2014-11-26

佛山市科學(xué)技術(shù)局醫(yī)學(xué)類科技攻關(guān)項(xiàng)目(2014AB00395)

單位] 廣東省佛山市第五人民醫(yī)院 內(nèi)科，528211

[作者簡(jiǎn)介] 邵禮成(1978-)，男，副主任醫(yī)師.

1000-2200(2016)07-0863-03

R 378；R 587.1

A

10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2016.07.007