陳　裕范曉飛鄭忠青　王邦茂

天津醫(yī)科大學總醫(yī)院消化科(300052)

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薄荷素油對家兔Oddi括約肌收縮性的影響

陳裕*范曉飛*鄭忠青王邦茂#

天津醫(yī)科大學總醫(yī)院消化科(300052)

背景：薄荷素油具有直接松弛消化道平滑肌、利膽等作用。Oddi括約肌作為消化道平滑肌的一部分，具有自主收縮和舒張運動功能，對膽汁排出具有重要意義。目的：探討薄荷素油對家兔Oddi括約肌收縮性的影響。方法：20只家兔隨機分為實驗組和對照組，分別向Oddi括約肌處噴灑5 mL薄荷素油溶液或0.9% NaCl溶液，動態(tài)監(jiān)測Oddi括約肌收縮和壓力變化。結果：實驗組噴灑薄荷素油溶液后，Oddi括約肌基礎壓[(10.600±1.712) mm Hg對(17.500±1.581) mm Hg，P<0.01]、收縮頻率[(6.700±0.823)次/min對(9.000±1.247)次/min，P<0.01]和運動指數(shù)[(50.400±10.068) mm Hg·次/min對(67.500±19.021) mm Hg·次/min，P<0.01]較基線值顯著降低，收縮幅度則無明顯變化[(7.500±1.080) mm Hg對(7.400±1.264) mm Hg，P>0.05]；對照組噴灑0.9% NaCl溶液前后上述各項指標差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。結論：薄荷素油可能通過抑制Oddi括約肌收縮、降低Oddi括約肌基礎壓而降低膽汁排出阻力，從而發(fā)揮利膽、預防膽固醇結石形成的作用。

薄荷素油；奧狄括約??；測壓法；利膽

Correspondence to:WANG Bangmao,Email:gi.tmuh@sohu.com

Background:Peppermint oil can inhibit directly the gastrointestinal smooth muscle contraction and facilitating the bile discharge.As a part of digestive tract smooth muscles,sphincter of Oddi is important for gallbladder emptying by its spontaneous systolic and diastolic motor function.Aims:To investigate the effect of peppermint oil on contractility of sphincter of Oddi in rabbits.Methods:Twenty rabbits were randomly divided into experimental group and control group,and received the spraying of 5 mL peppermint oil or normal saline at sphincter of Oddi,respectively.Alterations in contraction of sphincter of Oddi and its basal pressure were monitored dynamically.Results:In experimental group,the basal pressure [(10.600±1.712) mm Hg vs.(17.500±1.581) mm Hg,P<0.01],contraction frequency [(6.700±0.823) times/min vs.(9.000±1.247) times/min,P<0.01] and motor index of sphincter of Oddi [(50.400±10.068) mm Hg·times/min vs.(67.500±19.021) mm Hg·times/min,P<0.01] were significantly decreased after spraying of peppermint oil,but no significant change in contraction amplitude was found [(7.500±1.080) mm Hg vs.(7.400±1.264) mm Hg，P>0.05].While in control group,all the above-mentioned parameters were stable after spraying of normal saline (P>0.05).Conclusions:Peppermint oil may facilitate the discharge of bile from gallbladder and prevent cholesterol calculus formation by reducing the contraction of sphincter of Oddi and its basal pressure and subsequently decreasing the resistance of bile discharge.

膽囊的張力和運動依賴于膽囊平滑肌的收縮，Oddi括約肌是控制膽汁排出膽道的惟一門戶，對膽囊充盈、膽汁排出以及膽道系統(tǒng)正常壓力的維持等具有重要意義。作為膽道動力學研究的熱點，Oddi括約肌功能的研究方法眾多，包括B超、MRCP、放射性核素掃描、電生理學檢查、Oddi括約肌測壓等，其中Oddi括約肌測壓是公認的研究Oddi括約肌功能的金標準。薄荷素油(peppermint oil)為薄荷的揮發(fā)油，主要成分有薄荷醇、薄荷酮、異薄荷酮等。作為一種傳統(tǒng)中草藥，薄荷素油具有清涼止癢、解痙、抗炎、鎮(zhèn)痛等作用，常被用于治療惡心、腸易激綜合征以及作為結腸鏡檢查的解痙劑。近年國內學者發(fā)現(xiàn)薄荷素油具有明顯的利膽作用、一定的解痙作用和較弱的抗炎、鎮(zhèn)痛作用[1]。本研究通過檢測薄荷素油對家兔Oddi括約肌收縮性的影響，探討其是否能通過抑制Oddi括約肌而利于膽汁排出。

材料與方法

一、實驗動物、藥物和儀器

家兔20只，雌雄不限，4月齡，體質量2～3 kg，由北京沙河通利實驗動物養(yǎng)殖場提供，許可證號：SCXK(京)2013-0007。

薄荷素油溶液配制[2]：8 mL薄荷素油原液(成都康弘藥業(yè)集團)、0.2 mL Tween-80與100 mL蒸餾水混合，室溫過夜，吸棄不溶解的上層液體，下層液體密封后4 ℃保存，保存時間不超過1周，使用時恢復至室溫。

PC Polygraf HR高分辨率多通道胃腸功能測定儀和相應軟件、低順應性水灌注系統(tǒng)(Medical Measurement Systems)；單通道導管由美國IL公司的導管改制而成，尖端封閉，距尖端1.5 cm處開一直徑為0.6 mm的小孔，導管內徑為0.71 mm，外徑為 1.0 mm。

二、實驗方法

20只家兔隨機分為2組，每組10只。實驗前禁食1 d，不禁水。10%水合氯醛5 mL/kg腹腔注射麻醉實驗動物，沿腹正中線切開腹腔，找到十二指腸乳頭開口位置，在其正對側點的遠心端約1 cm處剪開腸管，暴露乳頭開口，經乳頭開口逆行插入一單通道導管，使其開口位于Oddi括約肌處，固定導管，用于Oddi括約肌測壓，測壓導管在十二指腸水平清零(以十二指腸壓為零點)。

待PC Polygraf HR高分辨率多通道胃腸功能測定儀顯示壓力曲線穩(wěn)定后，實驗組向Oddi括約肌處緩慢噴灑薄荷素油溶液5 mL(于30 s內噴灑完畢，防止噴灑速度過快產生的沖擊力影響實驗結果)，同時記錄Oddi括約肌收縮和壓力變化。對照組以同樣方法向Oddi括約肌處緩慢噴灑0.9% NaCl溶液 5 mL，同時記錄Oddi括約肌收縮和壓力變化。

三、觀察指標

①Oddi括約肌基礎壓：兩次基礎收縮間平坦期的平均壓力。②Oddi括約肌收縮幅度：基礎收縮起點至最高峰的壓力差值。③Oddi括約肌收縮頻率：Oddi括約肌每分鐘基礎收縮次數(shù)。④Oddi括約肌運動指數(shù)：基礎收縮幅度×基礎收縮頻率。

四、統(tǒng)計學分析

結　　果

實驗組與對照組間各項指標給藥前基線值差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。實驗組噴灑薄荷素油溶液后，Oddi括約肌基礎壓、收縮頻率和運動指數(shù)較基線值顯著降低(P<0.01)，收縮幅度則無明顯變化(P>0.05)；對照組噴灑0.9% NaCl溶液前后的Oddi括約肌基礎壓、收縮幅度、收縮頻率和運動指數(shù)差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)(表1)。

表1　實驗組和對照組給藥前后Oddi括約肌收縮性變化±s)

*與同組給藥前比較，P<0.01

討　　論

隨著內鏡、測壓技術以及放射性核素顯像等技術的發(fā)展，近年來關于膽道動力學的研究不斷深入，對膽道疾病尤其是功能性膽道疾病的認識不斷加強，關于Oddi括約肌功能的研究亦逐漸增多。Oddi括約肌是指圍繞在膽總管壺腹部和膽胰管末端的環(huán)行平滑肌，各部分肌肉有各自不同的受體，受不同神經、體液信號調控。Oddi括約肌和膽囊平滑肌在激素和神經機制的作用下，產生協(xié)調的自主收縮和舒張運動，并通過此種舒縮運動保持膽管內低壓、低流量的內環(huán)境穩(wěn)態(tài)，對調節(jié)膽囊充盈、控制膽汁排出、維持膽道系統(tǒng)正常壓力等具有重要作用[3-5]。目前認為Oddi括約肌功能異?？捎啥喾N疾病引起，如膽道炎癥、膽管結石等[6]，同時Oddi括約肌功能障礙亦可能是膽系感染、膽石癥的病因[7]，兩者相互作用，互為因果。Oddi括約肌測壓是目前公認的評價Oddi括約肌功能的金標準，對于膽道動力學研究具有重要意義。

薄荷素油是一種可直接使消化道平滑肌松弛的特殊油劑，其作用機制與二氫吡啶鈣通道拮抗劑相似，可直接減少鈣離子內流。對不同動物模型的研究證實薄荷素油和(或)薄荷醇能有效松弛全胃、延遲胃排空[8]，松弛小腸和結腸平滑肌[9-12]，發(fā)揮胃腸道解痙作用。人體研究[13]亦發(fā)現(xiàn)薄荷素油能誘導結腸平滑肌松弛。本研究采用Oddi括約肌測壓技術分析薄荷素油對家兔Oddi括約肌收縮和壓力的影響，結果顯示與0.9% NaCl溶液相比，薄荷素油能顯著降低Oddi括約肌基礎壓和收縮頻率，與Micklefield等[14]發(fā)現(xiàn)薄荷素油-葛縷子油膠囊在健康志愿者中能降低十二指腸移行性運動復合波的收縮頻率和收縮幅度相一致。Oddi括約肌運動指數(shù)為其基礎收縮幅度與基礎收縮頻率的乘積，較單項指標更能客觀反映Oddi括約肌運動情況。盡管本研究結果顯示薄荷素油對家兔Oddi括約肌的收縮幅度無明顯影響，但綜合收縮幅度與收縮頻率兩個因素后，薄荷素油對Oddi括約肌收縮運動仍顯現(xiàn)出明顯抑制作用。

本課題組前期實驗同時檢測了4 mL薄荷素油原液+0.1 mL Tween-80、8 mL薄荷素油原液+0.2 mL Tween-80、16 mL薄荷素油原液+0.4 mL Tween-80與100 mL蒸餾水混合，室溫過夜后獲得的下層液體(分別為溶液①、②、③)對家兔Oddi括約肌收縮性的影響，發(fā)現(xiàn)溶液①對Oddi括約肌基礎壓、收縮幅度、收縮頻率幾乎無影響，溶液②、③對Oddi括約肌各項運動功能指標的影響相近。Asao等[2]的研究發(fā)現(xiàn)溶液②能安全、有效地緩解結腸痙攣，本課題組相關研究對行胃鏡檢查者噴灑適量溶液②，亦發(fā)現(xiàn)其能明顯抑制胃平滑肌蠕動，故最終選擇溶液②進行實驗。

薄荷素油松弛消化道平滑肌的機制主要與其鈣通道拮抗劑特性有關，可抑制神經元去極化，有效阻止鈣離子進入細胞。Amato等[15]關于薄荷醇對人結腸平滑肌解痙作用的機制研究證實，薄荷醇系通過阻斷平滑肌細胞膜上的電壓依賴L型鈣通道鈣離子內流而直接抑制消化道平滑肌的自主收縮。Oddi括約肌作為消化道平滑肌的一部分，同樣具有自主收縮和舒張運動功能。因此推測本實驗中薄荷素油的作用機制亦為阻斷細胞膜L型鈣通道鈣離子內流，從而抑制Oddi括約肌收縮，降低其基礎壓力。

膽固醇結石的形成與膽囊中膽固醇過飽和、膽道動力學異常以及膽汁中促、抑成核因子失衡有關[16]。Oddi括約肌壓力降低使膽道阻力下降，利于膽汁排出，可防止膽固醇淤積形成結石。關于肝外膽道動力學因素在膽囊結石形成中作用的研究[17]顯示，膽囊收縮力下降、膽囊管阻力增加、膽總管壓力(Oddi括約肌“阻抗”)增高等肝外膽道動力學因素通過促進膽囊淤滯這一中心環(huán)節(jié)而促進膽囊結石形成。本實驗發(fā)現(xiàn)薄荷素油能顯著降低家兔Oddi括約肌基礎壓，即降低Oddi括約肌“阻抗”，從而利于膽汁排出，因此能有效預防膽固醇在膽囊內淤積而出現(xiàn)過飽和，在一定程度上防止膽固醇結石形成。董桂芬[18]的研究證實，以薄荷素油為主要成分的膽舒膠囊可有效治療膽囊切除術后膽道功能障礙，考慮與薄荷素油降低Oddi括約肌張力、利于膽汁排出有關。

綜上所述，薄荷素油可能通過抑制Oddi括約肌收縮、降低Oddi括約肌基礎壓而降低膽汁排出阻力，從而發(fā)揮利膽作用，預防膽囊中膽汁淤積、膽固醇過飽和而形成膽固醇結石。此外，膽汁排出后膽囊張力降低，可在一定程度上緩解膽結石引起的膽絞痛癥狀。上述發(fā)現(xiàn)為Oddi括約肌功能障礙的治療、膽絞痛的緩解、膽結石形成的預防等相關研究提供了新思路。

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(2015-09-28收稿；2015-12-02修回)

Effect of Peppermint Oil on Contractility of Sphincter of Oddi in Rabbits

CHEN Yu,FAN Xiaofei,ZHENG Zhongqing,WANG Bangmao.

Department of Gastroenterology,Tianjin Medical University General Hospital,Tianjin (300052)

Peppermint Oil;Sphincter of Oddi;Manometry;Cholaneresis

DOI:10.3969/j.issn.1008-7125.2016.07.009

*共同第一作者，陳裕，Email:qingshuicy@163.com；范曉飛，Email:fanxiaofei77@163.com

#本文通信作者，Email:gi.tmuh@sohu.com