田鵬飛，楊勇衛(wèi)，陳錫蓮，李彩東，段正軍

(甘肅省蘭州市第二人民醫(yī)院肝病研究所　730046)

?

·臨床研究·

慢性乙型肝炎患者外周血MIF、IL-17和IL-10水平變化及臨床相關(guān)性*

田鵬飛，楊勇衛(wèi)，陳錫蓮，李彩東，段正軍

(甘肅省蘭州市第二人民醫(yī)院肝病研究所730046)

目的探討慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)、白細(xì)胞介素(IL)-17和IL-10水平變化及與臨床的相關(guān)性。方法收集2012年2月至2013年12月住院及門診診治的慢性乙型肝炎患者60例，以及同期進(jìn)行健康體檢的50例健康對照者空腹血清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清MIF、IL-17和IL-10水平，采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測血清HBV DNA載量，應(yīng)用全自動生化分析儀檢測血清肝功能[丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)及天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)]，比較各組上述指標(biāo)水平的差異。根據(jù)血清HBV DNA載量結(jié)果又分為高病毒載量組、中病毒載量組、低病毒載量組，比較各組MIF、IL-17、IL-10水平差異。探討慢性乙型肝炎患者外周血MIF、IL-17、IL-10水平與血清HBV DNA、ALT及AST水平的相關(guān)性。結(jié)果與健康對照組比較，慢性乙型肝炎患者外周血MIF、IL-17和IL-10水平均明顯升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。慢性乙型肝炎組不同HBV DNA水平患者外周血各細(xì)胞因子水平存在一定的差異，其中高病毒載量組患者外周血細(xì)胞因子MIF、IL-17和IL-10水平高于其他兩組，中病毒載量組的細(xì)胞因子水平最低；與中病毒載量組相比，高病毒載量組患者M(jìn)IF和IL-10水平顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.11、2.08，P<0.05)。慢性乙型肝炎患者外周血MIF水平與ALT水平呈正相關(guān)(r=0.26，P=0.046)，其余均無相關(guān)性。結(jié)論MIF、IL-17和IL-10在慢性乙型肝炎發(fā)生、發(fā)展過程中可能起重要作用，檢測其血清水平可作為評估慢性乙型肝炎病情嚴(yán)重程度的重要指標(biāo)。

慢性乙型肝炎；巨噬細(xì)胞移動抑制因子；白細(xì)胞介素-17；白細(xì)胞介素-10

慢性乙型肝炎(CHB)的發(fā)病機(jī)制與治療一直是醫(yī)學(xué)工作者研究的難點和熱點，研究顯示乙型肝炎病毒(HBV)感染肝細(xì)胞后并不直接引起細(xì)胞破壞，而是通過誘導(dǎo)機(jī)體免疫反應(yīng)導(dǎo)致肝臟炎癥損傷，在機(jī)體的免疫反應(yīng)中細(xì)胞因子起重要作用。巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)、白細(xì)胞介素(IL)-17和IL-10是常見的幾種免疫影響因子，將三者聯(lián)合起來研究其在慢性乙型肝炎的發(fā)病機(jī)制和病情進(jìn)展中所扮演角色的報道尚不多見。本研究通過探討60例慢性乙型肝炎患者外周血MIF、IL-17和IL-10水平的變化及與血清HBV DNA、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)及天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)水平的相關(guān)性，為三者在慢性乙型肝炎發(fā)病過程中的作用提供實驗和理論依據(jù)。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇2012年2月至2013年12月在本院住院及門診診治的慢性乙型肝炎患者60例，其中男43例，女17例；年齡28～63歲，平均(41.45±13.17)歲。肝炎診斷符合2010年12月中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)會和感染病學(xué)會聯(lián)合修訂的《慢性乙型肝炎防治指南》[1]的標(biāo)準(zhǔn)。選擇同期在本院進(jìn)行健康體檢的健康者50例，其中男25例，女25例；年齡23～58歲，平均(32.15±8.46)歲，排除各型肝炎病毒感染及疾病。

1.2方法采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測所有研究對象的血清HBV DNA載量，判定102～104IU/mL為低病毒載量組，105～106IU/mL為中病毒載量組，≥107IU/mL為高病毒載量組；采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清MIF、IL-17和IL-10水平；應(yīng)用全自動生化分析儀檢測血清ALT、AST水平。

2　結(jié)　果

2.1慢性乙型肝炎患者和健康對照組血清HBV DNA、AST、ALT水平與健康對照組相比，慢性乙型肝炎患者血清ALT和AST水平明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=3.28、3.43，P<0.01)。見表1。

表1　慢性乙型肝炎患者及健康對照組HBVDNA、AST、ALT水平比較

注：與健康對照組相比，aP<0.01。-表示無數(shù)據(jù)。

2.2慢性乙型肝炎患者和健康對照組外周血MIF、IL-17和IL-10水平與健康對照組相比，慢性乙型肝炎患者外周血MIF、IL-17和IL-10水平均顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=3.544、2.074、7.889，P<0.01)。見表2。

表2　慢性乙型肝炎患者和健康對照組外周血MIF、IL-17、IL-10檢測結(jié)果

注：與健康對照組相比，aP<0.01。

2.3慢性乙型肝炎組不同HBV DNA水平細(xì)胞因子檢測結(jié)果慢性乙型肝炎組不同HBV DNA水平患者外周血各細(xì)胞因子水平存在一定的差異，其中高病毒載量組外周血細(xì)胞因子MIF、IL-17和IL-10水平高于其他兩組；中病毒載量組的細(xì)胞因子水平最低；與中病毒載量組相比，高病毒載量組MIF和IL-10水平顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.11，2.08；P<0.05)。見表3。

表3　慢性乙型肝炎組不同HBV DNA水平細(xì)胞因子檢測結(jié)果±s)

注：與中病毒載量組相比，aP<0.05。

2.4慢性乙型肝炎患者外周血MIF、IL-17及IL-10的臨床相關(guān)性分析慢性乙型肝炎患者外周血MIF水平與ALT水平呈正相關(guān)(r=0.26，P=0.046)，其余均無相關(guān)性。見表4。

表4　慢性乙型肝炎患者外周血MIF、IL-17及IL-10的臨床相關(guān)性

3　討　論

MIF是巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的一個細(xì)胞因子，巨噬細(xì)胞的移動可以被其抑制。近年的研究認(rèn)為，MIF是一種重要的前炎性因子，在肝纖維化的過程中，MIF可以誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞分泌IL-8。IL-8可通過趨化炎癥細(xì)胞，刺激釋放大量的肌酸激酶而間接激活肝星狀細(xì)胞，影響肝纖維化的病理過程[2-4]。IL-17在自身免疫性肝病、脂肪肝及肝臟腫瘤中發(fā)揮重要作用，參與了肝臟損傷及再生過程[4-6]。IL-10是一種強(qiáng)有力的免疫和炎癥抑制因子，能下調(diào)Th1型細(xì)胞因子的表達(dá)，同時也是導(dǎo)致慢性乙型肝炎的重要因素[7-8]。

本研究結(jié)果顯示：(1)與健康人比較，慢性乙型肝炎患者外周血MIF、IL-17和IL-10水平均顯著升高，提示3種細(xì)胞因子均直接或間接參與慢性乙型肝炎的發(fā)病過程。(2)慢性乙型肝炎組不同HBV DNA水平患者外周血各細(xì)胞因子水平存在一定的差異，其中高病毒載量組外周血細(xì)胞因子MIF、IL-17和IL-10水平高于其他兩組，中病毒載量組的細(xì)胞因子水平最低；與中病毒載量組相比，高病毒載量患者M(jìn)IF和IL-10水平顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，提示高病毒載量患者體內(nèi)存在更嚴(yán)重的炎性反應(yīng)，且中病毒載量患者可能存在更高的慢性化進(jìn)展的風(fēng)險，對此類患者應(yīng)擴(kuò)大樣本量做進(jìn)一步研究。(3)本研究分析慢性乙型肝炎患者外周血MIF、IL-17及IL-10水平與HBV DNA載量、ALT和AST的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)MIF水平與ALT水平呈正相關(guān)，提示慢性乙型肝炎患者M(jìn)IF水平的變化與肝臟組織損害程度相關(guān)，亦與肝病的嚴(yán)重程度有關(guān)。

綜上所述，在慢性乙型肝炎的發(fā)生和發(fā)展過程中細(xì)胞因子MIF、IL-17和IL-10可能起重要作用，檢測外周血MIF、IL-17和IL-10水平可作為評估慢性乙型肝炎病情嚴(yán)重程度的重要指標(biāo)，并有望成為慢性肝病治療的新靶點。

[1]中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會.慢性乙型肝炎防治指南：2010年版[J].中華內(nèi)科雜志,2011,50(2):168-179.

[2]Sad LM,Younis SG,Nagi HM.Significance of Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF) and Anti P53 Antibodies in Prognosis of Hepatocellular Carcinoma [J].J Mol Biomark Diagn,2014,5(5):1-6.

[3]Heinrichs D,Knauel M,Offermanns C,et al.Macrophage migration inhibitory factor(MIF) exerts antifibrotic effects in experimental liver fibrosis via CD74[J].Proc Natl Acad Sci USA,2011,18,108(42):17444 -17449.

[4]You J,Zhuang L,Chen HY,et al.Increased serum levels of MIF,TGF-β and IL-17 correlate with severity of liver disease and viral replication in chronic HBV infection [J].Int J Infect Dis,2014,21(S1):319-320.

[5]Ge J,Wang K,Meng QH,et al.Implication of Th17 and Th1 cells in patients with chronic active hepatitis B [J].J Clin Immunol,2010,30(1):60-67.

[6]Du WJ,Zhen JH,Zeng ZQ,et al.Expression of interleukin-17 associated with disease progression and liver fibrosis with hepatitis B virus infection:IL-17 in HBV infection [J].Diagn Pathol,2013,8:40-42.

[7]Talaat RM,Dondeti MF,El-Shenawy SZ,et al.Association Between IL-10 Gene Promoter Polymorphism and Hepatitis B Viral Infection in an Egyptian Population[J].Biochemical Genetics,2014,52(9/10):387-402.

[8]李晨,邢少軍,段學(xué)章,等.乙型肝炎肝硬化患者外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞頻率及血清IL-1β、IL-6和IL-10水平的變化[J].實用肝臟病雜志,2012,15(3):244-246.

2015-12-28修回日期：2016-05-26)

甘肅省蘭州市科技發(fā)展指導(dǎo)性計劃項目(2013-ZD-07)。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.15.038

A

1673-4130(2016)15-2150-02