高麗麗，吳成翰，呂　劍

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腦出血閉脫證病人血漿胰島素樣生長因子-1及其結(jié)合蛋白3表達(dá)的臨床觀察

高麗麗1，吳成翰1，呂劍2

1.福建省第二人民醫(yī)院(福州350003)，E-mail：gaolilidexingfu@163.com；2.泰山醫(yī)學(xué)院附屬萊蕪鋼鐵集團(tuán)有限公司醫(yī)院

摘要：目的觀察急性腦出血(ICH)病人血漿中胰島素樣生長因子-1(IGF-1)及其結(jié)合蛋白3(IGFBP3)的表達(dá)與出血中風(fēng)閉脫證的關(guān)系。方法180例急性腦出血病人根據(jù)中醫(yī)辨證分為3組：陰閉組、陽閉組、脫證組。同期180名健康體檢者作為對照組。取觀察者空腹靜脈血檢測IGF-1及IGFBP3的表達(dá)，研究IGF-1及IGFBP3的表達(dá)與中醫(yī)閉、脫證的關(guān)系。結(jié)果ICH病人血漿中IGF-1及IGFBP3的表達(dá)明顯低于正常對照組(P<0.01)。ICH病人中陽閉、陰閉、脫證3組之間血漿IGF-1及IGFBP3表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，按IGF-1及IGFBP3表達(dá)大小順序排列為：陽閉組>陰閉組>脫證組。結(jié)論急性腦出血后血漿中IGF-1及IGFBP3表達(dá)量的高低反映了病情的輕重。

關(guān)鍵詞：腦出血；胰島素樣生長因子-1；閉證；脫證；中風(fēng)

胰島素樣生長因子-1(insulin-like growth factor-1，IGF-1)是一種重要的調(diào)節(jié)神經(jīng)生長的生物活性物質(zhì)，在腦損傷后等病理狀態(tài)下對機(jī)體發(fā)揮重要保護(hù)作用。IGF-1有抑制細(xì)胞凋亡的作用[1-2]。腦損傷后IGF-1系統(tǒng)被激活，外周血中IGF-1通過血腦屏障轉(zhuǎn)運至腦內(nèi)，對受累神經(jīng)細(xì)胞起保護(hù)作用。同時還激活其他保護(hù)因子[3]，發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)是血液中數(shù)量最多、作用最強(qiáng)的結(jié)合蛋白，對IGF-1的生物活性起著決定性的作用。只有與IGFBP3結(jié)合的IGF-1才能透過血腦屏障。本研究檢測腦出血(intracerebral hemorrhage，ICH)后病人血漿IGF-1及其結(jié)合蛋白3的表達(dá)，觀察ICH病人血漿IGF-1及其結(jié)合蛋白3的表達(dá)情況與中風(fēng)閉脫證的關(guān)系。

1資料與方法

1.1臨床資料收集180例2013年7月—2015年7月在福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的腦出血病人。所有病人均在入組前由病人及/或家屬簽署了知情同意書，同意參加本研究。其中男性92例，女性88例，年齡55歲(45歲～70歲)，病程4.5 h(2 h～10)h。將180例病人采用隨機(jī)數(shù)字表法依辨證分為陽閉證(60例)、陰閉證(62例)和脫證(58例)3組。陽閉證組男性31例，女性29例；平均年齡52歲(45歲～67歲)：平均病程4 h(3 h～9 h)。陰閉證組男性31例，女性31例；平均年齡61歲(50歲～66歲)，平均病程5 h(3．25 h～10 h)。脫證男性29例，女性29例；平均年齡60歲(48歲～70歲)，平均病程5 h(3 h～10 h)。3組在病情程度、性別及年齡分布上差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2病例納入標(biāo)準(zhǔn)所選病例均需符合腦出血的診斷要點，參照1994年全國第四屆腦血管病學(xué)術(shù)會議《各類腦血管疾病診斷要點》。所有病例均須經(jīng)CT(或MRI)確診。入組均需符合中風(fēng)中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)癥狀體征，結(jié)合舌象、脈象，按《中風(fēng)閉證和脫證標(biāo)準(zhǔn)》進(jìn)行辨證，歸類閉證(陽閉、陰閉)、脫證，分為陽閉組、陰閉組、脫證組，診斷標(biāo)準(zhǔn)詳見文獻(xiàn)[4-5]。

1.3病例排除標(biāo)準(zhǔn)其他腦血管疾??；合并有心、肝、腎、造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病、精神病者；嚴(yán)重感染、惡性腫瘤、結(jié)締組織性疾病以及1年內(nèi)患組織損傷性疾病如心肌梗死、長期接受免疫抑制劑治療者；合并糖尿病等代謝性疾病。

1.4對照組來源選取健康對照者180名，無心、肝、腎、造血系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)等相關(guān)病變，無糖尿病等代謝性疾病。入組前由本人簽署知情同意書，均經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審查并批準(zhǔn)。

1.5觀察指標(biāo)及方法

1.5.1美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)評分按參考文獻(xiàn)進(jìn)行評分[6]。

1.5.2GCS評分按參考文獻(xiàn)進(jìn)行評分[7]。

1.5.3IGF-1及IGFBP3檢測方法入組病例于入院后第2天空腹抽取靜脈血4 mL進(jìn)行血漿IGF-1及IGFBP3的檢測，健康對照組空腹抽取靜脈血4 mL進(jìn)行血漿IGF-1及IGFBP3的檢測。IGF-1及IGFBP3的檢測均采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)方法，試劑購自美國Diagnostic System Laboratories(DSL)公司，嚴(yán)格按試劑說明書進(jìn)行操作。

2結(jié)果

2.1ICH病人血漿IGF-1、IGFBP3表達(dá)水平與對照組比較：ICH病人血漿IGF-1、IGFBP3表達(dá)均明顯低于正常對照組(P<0.01)。ICH病人的IGF-1表達(dá)按表達(dá)大小順序排列為：陽閉組>陰閉組>脫證組。陽閉組IGF-1表達(dá)最高，脫證組表達(dá)最低。3組經(jīng)單因素方差分析后，兩兩對比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。詳見表1。

nmol/L

2.2ICH病人各組間GCS、NIHSS評分比較ICH病人GCS評分大小順序排列為：陽閉組>陰閉組>脫證組，經(jīng)單因素方差分析后，兩兩對比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。3組NIHSS評分大小順序排列為：脫證組>陰閉組>陽閉組，經(jīng)單因素方差分析后，兩兩對比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。詳見表2。

表2　ICH病人3組間GCS、NIHSS評分比較(±s)　分

2.3ICH病人IGF-1、IGFBP3表達(dá)與NIHSS評分及GCS評分之間的相關(guān)性分析經(jīng)Spearman相關(guān)性統(tǒng)計，IGF-1及IGFBP3表達(dá)量與GCS評分呈正相關(guān)(P<0.01)。IGF-1及 IGFBP3表達(dá)量與NIHSS評分呈負(fù)相關(guān)(P<0.01)。詳見表3。

表3　ICH病人IGF-1與出血量、NIHSS評分及GCS

3討論

腦出血屬祖國醫(yī)學(xué)“中風(fēng)”范疇，中風(fēng)依據(jù)神志情況分為中經(jīng)絡(luò)和中臟腑。有神志障礙者為中臟腑，屬中風(fēng)重癥。中臟腑根據(jù)正邪的盛衰情況又有閉證和脫證之別?！督饏T要略》根據(jù)病情輕重緩急的差別，將中風(fēng)分為中經(jīng)絡(luò)、中臟腑兩大類，中經(jīng)絡(luò)無神志改變，病位較淺，病情較輕；中臟腑常有神志不清，病位較深，病情較重[5]。

細(xì)胞凋亡是腦出血后血腫周邊細(xì)胞死亡的主要形式[8]。細(xì)胞凋亡是參與腦出血后繼發(fā)性損傷的主要因素[9]。腦出血后血腫周圍存在一個半暗帶，若在一定時間窗內(nèi)給予抑制細(xì)胞凋亡的干預(yù)，可明顯改善神經(jīng)功能恢復(fù)[10]，提高病人生活質(zhì)量。IGF-1有抑制細(xì)胞凋亡的作用[1-2]。另外，IGF-1還能阻止N-甲基-D-天冬氨酸(N-Methyl-D-aspartic acid，NMDA)受體介導(dǎo)的遲發(fā)性細(xì)胞死亡[11]。IGF-1能誘導(dǎo)膠質(zhì)細(xì)胞的增殖。增殖的膠質(zhì)細(xì)胞本身具有支持和保護(hù)作用，并可表達(dá)IGF-1及IGF結(jié)合蛋白(IGFBP)，進(jìn)而發(fā)揮其營養(yǎng)和保護(hù)作用[12]。IGF-1為大分子物質(zhì)，不易通過血腦屏障，主要通過與IGFBP3結(jié)合發(fā)揮作用，IGFBP3能直接調(diào)節(jié)IGF-1與其受體的作用，從而控制IGF-1的生物效應(yīng)，使其更有效地發(fā)揮作用。

本結(jié)果顯示，腦出血病人血漿IGF-1、IGFBP3表達(dá)下調(diào)，與正常對照組比較有統(tǒng)計學(xué)意義，相關(guān)性分析顯示IGF-1、IGFBP3表達(dá)與NIHSS評分呈負(fù)相關(guān)(r =-0.72、-0.73，P<0.01)，與GCS評分呈正相關(guān)(r =0.71、0.72，P<0.01)，反映了IGF-1及IGFBP3參與了腦出血后的神經(jīng)保護(hù)，且其表達(dá)與病情的輕重有關(guān)。同時，發(fā)現(xiàn)中風(fēng)脫證組血漿中IGF-1及IGFBP3的表達(dá)明顯低于閉證組，表達(dá)情況由低到高順序為脫證>陰閉>陽閉，符合脫證組病變范圍大和病勢嚴(yán)重的病理形態(tài)學(xué)表現(xiàn)?？梢姡獫{中IGF-1及IGFBP3的表達(dá)程度可反映腦出血后損傷的程度，故可較為便捷地觀察病人病情的輕重及預(yù)后。

綜上所述，對腦出血后IGF-1及IGFBP3的表達(dá)研究有望為腦出血治療找到新的途徑，對其與GCS、NIHSS量表評分及中風(fēng)閉脫證的關(guān)系研究，有望為祖國醫(yī)學(xué)出血中風(fēng)的辨證提供量化依據(jù)，且為腦出血病人病情的輕重與預(yù)后的判斷提供較為簡便的檢測方法。

參考文獻(xiàn)：

[1]Zheng WH，Kar S，Quirion R.Insulin-like growth factor-1 induced phosphorylation of transcription factor FKHRL1 is mediated by phosphatidylinositol 3-kinase/Akt kinase and role of this pathway in insulin-like growth factor-1 induced survival of cultured hippocampal neurons[J].Molecular Pharmacology，2002，62：225-233.

[2]Zhang J，Popken GJ，Ye P，et al.Down-regulation of 14-3-3 eta gene expression by IGF-1 in mouse cerebellum during postnatal development[J].Brain Research Developmental Brain Research，2003，143(2)：199-206.

[3]Chavez JC，Lamanna JC.Activation of hypoxia-inducible factor-1 in the rat cerebral cortex after transient global ischemia：potential role of insulin-like growth factor-1[J].Journal of NeuroScience，2002，22(20)：8922-8931.

[4]中華人民共和國衛(wèi)生部.中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則[S].1993：32-33.

[5]王永炎.中醫(yī)內(nèi)科學(xué)[M].第6版.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1997：124.

[6]王忠誠.王忠誠神經(jīng)外科學(xué)[M].武漢：湖北科學(xué)技術(shù)出版社，2005：380-381.

[7]王新，王擁軍，劉崢，等.四個腦卒中量表信度與效度的對比研究[J].中華物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)雜志，1999，21(3)：140-143.

[8]Cotteril AM.The tberapeutic potential of recombinant human insulin-like growth factor-1[J]．The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism，1992，37(1)：11．

[9]Rincon F，Mayer SA.Novel therapies for intracerebral hemorrhage[J].Current Opinion in Critical Care，2004，10(2)：94-100.

[10]Siddique MS，Mendelow AD．Surgical treatment of intracerebra hemorrhage[J]．Brain Research Bulletin，2000，56(2)：444-456．

[11]Tagami M，Ikeda K，Nara Y ，et al.Insulin-like growth factor-1 attenuates apoptosis in hippocampal neurons caused by cerebral ischemia and reperfusion in stroke[J].Laboratory Investigation，1997，76(5)：613-617.

[12]Guan J，Miller OT ，Waugh KM，et al.Insulin-like growth factor-1 improves somatosensory function and reduces the extent of cortical infarction and ongoing neuronal loss after hypoxia-ischemia in rats[J].Neuroscience，2001，105 (2)：299-306.

(本文編輯王雅潔)

基金項目：國家自然基金(No.81503431)；福建省衛(wèi)計委青年課題(No.2015-1-85)；福建中醫(yī)藥大學(xué)校管課題(No.XB2014037)；福建省自然科學(xué)基金項目(No.2016J01558)

中圖分類號：R743.34R255.2

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

doi：10.3969/j.issn.1672-1349.2016.13.011

文章編號：1672-1349(2016)13-1475-03

(收稿日期：2015-12-07)

Analysis of the Expression of Serum IGF-1 and IGFBP3 in Acute Intracerebral Hemorrhage Patients with Shutting Syndrome and Collapse Syndrome

Gao Lili，Wu Chenghan，Lü Jian

Second People’s Hospital of Fujian Province，F(xiàn)uzhou 350003， Fujian，China Corresponding Author：Gao Lili

Abstract：ObjectiveTo observe the expression of serum insulin-like growth factor-1(IGF-1) and IGFBP3 in acute intracerebral hemorrhage(ICH) patients，to investigate the relationship between IGF-1，IGFBP3 and excess syndrome，depletion syndrome.Methods One hundred and eighty patients were divided into 3 groups：yin excess syndrome(n=60)， yang excess syndrome (n=60)and depletion syndrome group(n=60).Serum IGF-1 and IGFBP3 levels were determined in 180 patients with ICH as well as in 180 controls．The correlation between the expression of IGF-1，IGFBP3 and excess syndrome，depletion syndrome was observed.Results The expression of serum IGF-1 and IGFBP3 in ICH patients significantly reduced in comparison with the normal control groups (P<0.01).The expression of IGF-1 and IGFBP3 was significantly different among yang excess syndrome，yin excess syndrome and the depletion syndrome (P<0.01).The expression of IGF-1 and IGFBP3 of depletion syndrome was the lowest，yin excess syndrome second，yang excess syndrome last.Conclusion The expression of IGF-1 and IGFBP3 can reflect the degree of brain impairment.

Key words：cerebral hemorrhage；insulin-like growth factor-1；excess syndrome； depletion syndrome；stroke