何志剛王金龍， 2伍遠安， 2李傳武， 2李紹明劉文革

（1. 湖南省水產(chǎn)科學研究所， 長沙 410153； 2. 水產(chǎn)高效健康生產(chǎn)湖南省協(xié)同創(chuàng)新中心， 常德 415000）

飼料脂肪水平對芙蓉鯉鯽幼魚血清生化指標、免疫反應及抗氧化能力的影響

何志剛1王金龍1， 2伍遠安1， 2李傳武1， 2李紹明1劉文革1

（1. 湖南省水產(chǎn)科學研究所， 長沙 410153； 2. 水產(chǎn)高效健康生產(chǎn)湖南省協(xié)同創(chuàng)新中心， 常德 415000）

為研究飼料脂肪水平對芙蓉鯉鯽（Furong crucian carp）幼魚［初始體重， （2.04±0.01） g］血清生化指標、免疫指標及抗氧化能力的影響， 以魚油為主要脂肪源， 配制五種脂肪水平分別為2.50%、4.39%、6.61%、8.42%和10.81%的等氮實驗飼料。實驗在室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進行， 每種飼料3個重復， 每個重復隨機放養(yǎng)30尾芙蓉鯉鯽， 養(yǎng)殖周期為60d。結(jié)果顯示： 隨著飼料中脂肪水平的升高， 芙蓉鯉鯽增重率和蛋白質(zhì)效率呈現(xiàn)先顯著升高后顯著降低的趨勢（P＜0.05）， 而飼料系數(shù)呈現(xiàn)相反的趨勢。飼料脂肪水平升高顯著提高了芙蓉鯉鯽血清中總膽固醇（CHO）和球蛋白（GLB）含量， 而顯著降低總蛋白（TP）和白蛋白（ALB）含量。飼料脂肪水平未對魚體血清高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和甘油三酯（TG）含量造成顯著影響（P＞0.05）。芙蓉鯉鯽血清免疫球蛋白M （IgM）含量、血清和肝胰臟超氧化物歧化酶（SOD）活力、肝胰臟總抗氧化能力（T-AOC）隨脂肪水平增加先升高后下降（P＜0.05）。血清中過氧化氫酶（CAT）活力10.81%組顯著高于其他各組（P＜0.05）。肝胰臟CAT和丙二醛（MDA）活力在各處理組組間差異不顯著（P＞0.05）。研究結(jié)果表明， 在飼料中適宜的脂肪添加有助于改善芙蓉鯉鯽健康狀況， 但過高的脂肪水平加重了芙蓉鯉鯽的代謝壓力和氧化速率。增重率與飼料脂肪水平作二次回歸分析顯示， 芙蓉鯉鯽獲得最大增長所需飼料脂肪最佳水平為6.94%。

芙蓉鯉鯽； 飼料脂肪水平； 生化指標； 免疫； 抗氧化

基于飼料工業(yè)迅猛發(fā)展和水產(chǎn)動物營養(yǎng)科研水平提高， 大部分商業(yè)配合飼料都能基本滿足魚類營養(yǎng)需求并實現(xiàn)快速生長［1］。但大量營養(yǎng)素或微量營養(yǎng)素的需求都是以魚類生長指標或營養(yǎng)素缺乏癥狀作為衡量指標［2］， 而較少考慮健康狀況指標， 比如血液生化指標、免疫反應和抗氧化能力等［3］。目前鯽高密度、高集約化養(yǎng)殖方式嚴重受限于疾病感染［4］。一般認為通過營養(yǎng)途徑能有效減輕疾病對養(yǎng)殖水產(chǎn)動物的影響， 而幼魚期飼料營養(yǎng)是否均衡，對魚類生長、疾病抵抗和健康狀況有重要影響［5］。

飼料脂肪為魚類提供能量和必需脂肪酸， 維持生物結(jié)構(gòu)和細胞膜的正常功能［6］， 保障魚體正常生長、繁殖和機體運轉(zhuǎn)［7］； 飼料脂肪作為非蛋白能量來源， 能夠有效減少有機物和氮的損失， 起到蛋白質(zhì)節(jié)約效應［8］。脂肪在魚類營養(yǎng)作用非常重要， 已有的研究主要集中在脂肪水平對魚類生長性能影響［2］， 有關脂肪和免疫的研究則多側(cè)重于飼料脂肪源或必需脂肪酸［9， 10］， 研究飼料脂肪水平對血液生化指標、免疫反應和抗氧化能力的影響， 對于了解魚類健康狀況受脂肪代謝調(diào)控機制具有重要意義。

芙蓉鯉鯽（Furong crucian carp）是由湖南省水產(chǎn)科學研究所運用鯉魚品種間雜交、鯉鯽種間雜交和系統(tǒng)選育等育種技術(shù)， 經(jīng)20年研究培育而成， 屬于大力推廣的國家農(nóng)業(yè)部水產(chǎn)新品種（GS-02-001-2009）［11］。芙蓉鯉鯽具有體型像鯽、生長快、肉質(zhì)好、抗逆性強、性腺敗育等優(yōu)良特性， 深受養(yǎng)殖戶的喜愛。作為優(yōu)質(zhì)鯽養(yǎng)殖品種， 針對芙蓉鯉鯽的人工繁育和養(yǎng)殖技術(shù)有較多研究報道［12， 13］， 而對其營養(yǎng)需求研究較少， 僅見飼料中不同蛋白水平對其生長性能、體組成和消化酶的影響［14］。本研究通過配制不同脂肪含量的飼料考察其對芙蓉鯉鯽幼魚生長性能、血清生化、免疫和抗氧化功能的影響，為其優(yōu)質(zhì)配合飼料開發(fā)提供參考數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗設計與實驗材料

飼料以魚粉、豆粕和菜粕為主要蛋白源， 以優(yōu)質(zhì)魚油為脂肪源， 魚油的添加水平分別為0、2%、4%、6%和8%， 脂肪含量分別為2.50%、4.39%、6.61%、8.42%和10.81%。各組飼料的蛋白含量保持基本一致水平， 共配制5組實驗飼料。各原料粉碎過60目篩， 以F （Ⅱ）-26型雙螺桿擠條機（華南理工大學， 廣州）加工成硬顆粒飼料（1.5 mm×2.0 mm）， 日曬干并保存于冰柜中備用。飼料原料組成和營養(yǎng)成分含量（表 1）。

表 1 實驗飼料配方及常規(guī)營養(yǎng)組成Tab. 1 Formulation and chemical compositions of experimental diets （%）

1.2 實驗用魚

實驗用芙蓉鯉鯽幼魚來自于湖南漁緣生物科技有限公司同一批孵化魚苗， 馴養(yǎng)21d， 馴養(yǎng)結(jié)束后隨機選取體質(zhì)健壯， 外表無傷的芙蓉鯉鯽幼魚450尾， 初始體平均質(zhì)量為（2.04±0.01） g， 分配到15個水泥池， 每個水泥池30尾實驗魚。將水泥池隨機分為5個處理組， 每處理組設置3個重復。

1.3 實驗管理

實驗用魚飼養(yǎng)于湖南省水產(chǎn)科學研究所15個流水循環(huán)的水泥池中（1.5 m×0.8 m×0.5 m）； 日投喂2次（09： 00， 16： 30）， 投餌率3%—4%； 試驗期間水溫為26—32℃， 溶解氧在6 mg/L以上， pH為7.8±0.4。實驗周期60d。

1.4 測定指標與計算方法

樣品采集 在實驗結(jié)束后， 禁食24h， 對各組試驗魚分別進行稱重和計數(shù)。每個池隨機取芙蓉鯉鯽5尾， 用丁香酚（50 mg/L）將魚麻醉處理后， 在預先準備好的冰盤上進行血清和肝胰臟樣品的采集。實驗魚通過尾靜脈取血， 5尾魚血樣合并為一管， 4℃靜置過夜， 于4000 r/min離心15min， 取上清液， 置于-70℃超低溫冰箱中保存?zhèn)溆茫?用于血液生理指標的測定。在冰盤上解剖實驗魚， 迅速分離出肝胰臟， 剔除表面脂肪等附著物， 用濾紙吸取干凈，置于-70℃超低溫冰箱中待測定抗氧化酶活力。

生長性能計算 計算增重率（Weight gain rate， %）、飼料系數(shù)（Feed conversion ratio）和蛋白質(zhì)效率（Protein efficiency ratio）， 計算公式如下：

增重率 WGR （%）=100×（Wf-Wi）/ Wi

飼料系數(shù) FCR=F/（Wf-Wi）

蛋白質(zhì)效率 PER=（Wf-Wi）/P

式中： Wi為試驗初始魚體重量（g）， Wf為試驗結(jié)束魚體重量（g）， F為飼料攝入干重（g）， P為蛋白質(zhì)攝入量干重（g）。

血清生理生化指標的測定 血清中總膽固醇（Total cholesterol， TCHO）、高密度脂蛋白膽固醇（High density lipoprotein cholesterol， HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（Low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、甘油三酯（Triglyceride， TG）、總蛋白（Total protein， TP）、白蛋白（Albumin， ALB）和球蛋白（Globulin， GLB）采用酶法， 試劑盒來源于上海名典生物工程公司， 使用邁瑞B(yǎng)S-400全自動生化分析儀進行測定。

免疫指標及抗氧化酶活力的測定 血清溶菌酶（Lysozyme， LZM）活性和免疫球蛋白M （Immunoglobulin M， Ig M）含量采用南京建成生物工程研究所的試劑盒測定。血清和肝胰臟的過氧化氫酶（Catalase， CAT）活力、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase， SOD）活力、總抗氧化能力（Total antioxidant capacity， T-AOC）活力以及丙二醛（Malondialdehyde， MDA）含量均采用南京建成生物工程研究所的試劑盒測定。測定方法參見試劑盒說明書。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

原始數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2007初步整理后， 采用SPSS11.5中的單因素方差分析（One-Way ANOVA）對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。經(jīng)齊性檢驗確定P值大于0.05， 再采用Duncan檢驗對組間數(shù)據(jù)進行多重比較， P＜0.05認為差異顯著。實驗數(shù)據(jù)以平均值±標準誤（Mean±SE）表示。

表 2 飼料脂肪水平對芙蓉鯉鯽幼魚生長性能的影響（平均值±標準誤， n=3）Tab. 2 The effect of dietary lipids on the growth performance of juvenile Furong crucian carp （Mean±SE， n=3）

2 結(jié)果

2.1 飼料脂肪水平對芙蓉鯉鯽生長性能的影響

由表 2可知， 在養(yǎng)殖60d后， 實驗組芙蓉鯉鯽成活率均在94%以上， 各組間成活率無顯著差異（P＞0.05）。飼料脂肪水平對芙蓉鯉鯽的末均重、增重率、飼料系數(shù)和蛋白質(zhì)效率均有顯著的影響（P＜0.05）。6.61%組魚體的末均重和增重率最高， 顯著高于2.50%組、4.39%組和10.81%組（P＜0.05）， 與8.42%組差異不顯著（P＞0.05）。6.61%組和8.42%組飼料系數(shù)顯著低于2.50%組、4.39%組和10.81%組（P＜0.05），2.50%組飼料系數(shù)顯著高于4.39%組（P＜0.05）， 但與10.81%組差異不顯著（P＞0.05）。2.50%組、4.39%組和10.81%組蛋白質(zhì)效率顯著低于6.61%組和8.42%組（P＜0.05）， 這3組之間的蛋白質(zhì)效率差異不顯著（P＞0.05）。

對飼料脂肪水平和芙蓉鯉鯽增重率進行二次多項式回歸分析， 得到回歸方程為Y=-20.891X2+ 289.76X+21.878 （圖 1）， 得出芙蓉鯉鯽獲得最大增重時飼料中最適宜的脂肪水平為6.94%。

2.2 飼料脂肪水平對芙蓉鯉鯽血清生化指標的影響

由表 3可知， 飼料脂肪水平對芙蓉鯉鯽血清中的TCHO和LDL-C含量有顯著的影響（P＜0.05）。飼料脂肪水平最高10.81%組TCHO值最高， 顯著高于2.50%組和4.39%組（P＜0.05）， 但與6.61%組和8.42%組差異不顯著（P＞0.05）。LDL-C隨著飼料脂肪水平的遞增表現(xiàn)出先上升后下降的趨勢， 脂肪水平在6.61%以上3組實驗組顯著高于2.50%組和4.39%組（P＜0.05）， 但這3組之間差異不顯著（P＞0.05）。HDL-C隨著飼料脂肪水平上升呈現(xiàn)升高的趨勢， 但實驗組間差異不顯著（P＞0.05）。飼料脂肪水平對血清TG含量沒有顯著影響（P＞0.05）。

由表 4可知， 飼料脂肪水平對芙蓉鯉鯽血清TP、ALB和GLB含量有顯著的影響（P＜0.05）。隨著飼料脂肪水平的上升， TP 和ALB呈現(xiàn)下降的趨勢，2.50%組TP含量顯著高于其他各組（P＜0.05），2.50%組ALB含量顯著高于8.42%組和10.81組（P＜0.05）， 但與4.39%組和6.61%組之間差異不顯著（P＞0.05）； GLB隨著飼料脂肪水平的增加呈現(xiàn)升高的趨勢， 2.50%組GLB含量與4.39%組之間差異不顯著（P＞0.05）， 但顯著低于其他3實驗組（P＜0.05）。ALB/GLB隨著飼料脂肪水平的上升呈現(xiàn)下降的趨勢， 但在各組間沒有顯著差異（P＞0.05）。

圖 1 芙蓉鯉鯽增重率與飼料脂肪水平的關系Fig. 1 The effect of dietary lipids on the weight growth rate of juvenile Furong crucian carp

表 3 飼料脂肪水平對芙蓉鯉鯽幼魚血清部分生化指標的影響（平均值±標準誤， n=3）Tab. 3 Effects of dietary lipids on serum biochemical indices of juvenile Furong crucian carp （Mean±SE， n=3）

表 4 芙蓉鯉鯽血清總蛋白、白蛋白、球蛋白含量和白球比（平均值±標準誤， n=3）Tab. 4 The level of serum TP， ALB， GLB and ALB/GLB of juvenile Furong crucian carp （Mean±SE， n=3）

2.3 飼料脂肪水平對芙蓉鯉鯽免疫指標的影響

飼料脂肪水平對芙蓉鯉鯽免疫功能的影響（表 5）。由表 5可見： 隨著飼料脂肪水平的升高， 芙蓉鯉鯽幼魚血清中Ig M含量呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢， 6.61%組和8.42%組顯著高于其他各組（P＜0.05）， 6.61%組Ig M值最高， 與8.42%組之間差異不顯著（P＞0.05）；LZM活力隨著飼料脂肪水平的提高， 呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢， 但在各組間差異不顯著（P＞0.05）。

2.4 飼料脂肪水平對芙蓉鯉鯽抗氧化功能的影響

由表 6可知， 飼料脂肪水平對芙蓉鯉鯽血清中CAT活力和SOD活力以及肝胰臟中SOD活力和TAOC活力有顯著的影響（P＜0.05）。肝胰臟SOD和TAOC活力隨脂肪含量的增加呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢， 6.61%組SOD活力顯著高于2.50%組、8.42%組和10.81%組， 但與4.39%組無顯著性差異（P＜0.05）， 6.61%組T-AOC活力顯著高于2.50%組和10.81%組， 與4.39%組和8.42%組差異不顯著（P＜0.05）； 血清中SOD活力呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢， 2.50%組顯著低于其他4組（P＜0.05）， 這4組之間差異不顯著（P＞0.05）； 10.81%組血清CAT活力顯著高于其他各組， CAT活力隨飼料脂肪水平升高呈現(xiàn)上升趨勢（P＜0.05）； 肝胰臟MDA含量逐漸升高， 但各組間差異不顯著（P＞0.05）； 飼料脂肪對肝胰臟中CAT活力沒有顯著影響（P＞0.05）。

3 討論

3.1 飼料不同脂肪水平對芙蓉鯉鯽幼魚生長性能的影響

本研究結(jié)果顯示， 飼料高脂肪組芙蓉鯉鯽增重率顯著高于低脂肪水平2.50%組（P＜0.05）， 這與Jin等［1］和Watanabe［15］報道的脂肪水平升高能促進魚類生長的研究結(jié)果一致。魚類對脂肪具有較高的吸收利用能力， 適當增加飼料脂肪水平能提高蛋白質(zhì)效率， 同時降低飼料系數(shù)［16］， 本次試驗獲得類似結(jié)果。從表 2可以看出， 芙蓉鯉鯽蛋白質(zhì)效率在飼料脂肪水平6.61%組最高， 在8.42%組保持穩(wěn)定，間接說明適宜的飼料脂肪含量能節(jié)約飼料蛋白質(zhì)［1］。本試驗將芙蓉鯉鯽增重率與飼料脂肪水平作二次多項式回歸方程分析（圖 1）， 得出其獲得最大增重時飼料脂肪水平為6.94%。

表 5 飼料脂肪水平對芙蓉鯉鯽幼魚免疫指標的影響（平均值±標準誤， n=3）Tab. 5 Effects of dietary lipids on immune indices of juvenile Furong crucian carp （Mean±SE， n=3）

表 6 飼料脂肪水平對芙蓉鯉鯽幼魚抗氧化酶活力的影響（平均值±標準誤， n=3）Tab. 6 The effect of dietary lipids on antioxidant enzymes activity of juvenile Furong crucian carp （Mean±SE， n=3）

3.2 飼料不同脂肪水平對芙蓉鯉鯽幼魚血清生化指標的影響

血液生化指標能反映魚類的生理代謝狀態(tài)， 其變化可以闡明營養(yǎng)素在機體代謝變化的作用機制，血清TCHO、HDL-C、LDL-C和TG水平受魚類營養(yǎng)狀況影響［7， 8， 16， 17］。TCHO參與形成細胞膜， 作為合成膽汁酸、維生素D以及甾體激素的原料， 是動物組織細胞所不可缺少的重要物質(zhì)［18］。芙蓉鯉鯽血清TCHO含量隨飼料脂肪水平增加呈現(xiàn)出顯著升高的趨勢， 類似的報道也見于大菱鲆（Psetta maxima）［8］和吉富羅非魚（Oreochromis niloticus）［16］等魚類； 血清TCHO濃度隨飼料脂肪水平增加而上升表明魚體為了響應飼料高水平的脂肪而產(chǎn)生更活躍的內(nèi)源性脂肪轉(zhuǎn)運［19］， 這可能是高脂肪水平飼料加重了芙蓉鯉鯽的代謝壓力所致［1］。大西洋白姑魚（Argyrosomus regius）血清TCHO含量并不受飼料脂肪水平上升影響［17］。但在褐菖（Sebastiscus marmoratus）［18］和厚唇弱棘（Sooty grunter）［20］的研究中發(fā)現(xiàn)， 血清中TCHO與飼料脂肪水平呈現(xiàn)負相關， 原因可能是消化脂肪的膽汁分泌異?；蚋我扰K功能障礙所致。TCHO的升降往往伴隨著TG的升降［16］， 本試驗中芙蓉鯉鯽血液檢測發(fā)現(xiàn)TG活性在各組之間差異不顯著， 有待進一步的研究探討。

研究表明， TCHO大部分由肝胰臟制造， 必須與脂蛋白結(jié)合才能運輸［21］。血清脂蛋白作為動態(tài)系統(tǒng)與餌料攝入、投飼頻率以及攝入脂肪類型密切相關， LDL-C主要將TCHO從肝胰臟運送到全身組織， 而HDL-C作為回收和運輸工具將TCHO送回肝胰臟合成膽汁酸進行重復利用或者生成膽汁清除［18］。本實驗中芙蓉鯉鯽血清中HDL-C含量隨著飼料脂肪水平增加呈現(xiàn)上升的趨勢（P＞0.05）， 研究表明魚類HDL-C在脂蛋白中占主導地位［22］， 其含量上升表明攝食高水平脂肪組魚類可能通過脂類基因表達的直接調(diào)控或減少脂蛋白降解來對載脂蛋白合成進行正調(diào)節(jié)［10］； 而芙蓉鯉鯽血清中LDL-C含量， 隨飼料脂肪水平上升呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢， 與尼羅羅非魚［7］研究結(jié)果相似， LDL-C降低可能預示肝胰臟功能受損或其他代謝問題。

血清TP由ALB和GLB組成， 作為飼料蛋白吸收情況的敏感指標， 能夠反映魚體的健康狀況［16］。本實驗條件下， 飼料脂肪水平最低組TP含量顯著高于其他實驗組， 表明高脂肪組芙蓉鯉鯽健康狀況下降。紅鰭東方（Takifugu rubripes）［23］在投喂不同脂肪水平飼料養(yǎng)殖8周與24周時， 血清中TP含量變化趨勢均與本研究結(jié)果相似， 并且高脂肪組還出現(xiàn)體色和體形異常癥狀， 健康狀況進一步下降。ALB主要由肝臟合成， 起維持血漿膠體滲透壓作用， 而GLB主要在肝細胞外生成， 參與機體免疫反應［24］。隨著飼料脂肪水平上升， 芙蓉鯉鯽血清中ALB含量下降而GLB含量升高， ALB與GLB值在飼料脂肪最低組與飼料水平最高兩組之間均存在顯著差異（P＜0.05）， 說明高脂肪水平飼料組芙蓉鯉鯽肝胰臟可能受到一定損傷。

3.3 飼料不同脂肪水平對芙蓉鯉鯽幼魚血清免疫指標的影響

眾多研究結(jié)果表明飼料營養(yǎng)素不僅能提供營養(yǎng)， 還能刺激魚類免疫系統(tǒng)使其遠離疾?。?］。脂類不僅是魚類生長發(fā)育所必需的物質(zhì)基礎， 同時對維持免疫系統(tǒng)功能起重要作用［18］。飼料脂肪作為重要的營養(yǎng)因子能影響魚類免疫系統(tǒng)， 主要是因為脂肪能參與合成細胞膜， 而細胞膜在魚類免疫系統(tǒng)中占優(yōu)勢地位［5］。免疫球蛋白（IgM）屬于魚類免疫系統(tǒng)中的特異性免疫， 是魚類體液免疫系統(tǒng)的重要組成部分， 其活力高低在一定程度上可以反映出魚體的免疫水平［18］。在本實驗條件下， 隨著脂肪水平的升高， 芙蓉鯉鯽血清IgM含量呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢， 有研究者認為必需脂肪酸不僅可以提高動物機體的體液免疫和細胞免疫， 還增強細胞因子的產(chǎn)生以及對有絲分裂原刺激的淋巴細胞增殖反應產(chǎn)生影響［25］。適宜的脂肪酸含量可能增強了芙蓉鯉鯽細胞的增殖活力， 促進胸腺、脾等免疫器官的生長以及促進血清蛋白的生物合成［18］。

LZM屬于免疫系統(tǒng)中的非特異性免疫， 是魚類最常見的體液免疫指標之一［26］。LZM由白細胞釋放， 在抗菌活動中起著重要作用［1］。對于魚類而言，非特異性免疫系統(tǒng)抵抗疾病的重要性要遠高于特異性免疫系統(tǒng)［27］。本研究發(fā)現(xiàn)， 芙蓉鯉鯽血清中LZM活性與飼料脂肪水平呈正相關關系， 與石斑魚（Epinephelus malabaricus）［26］、草魚（Ctenopharyngodon idella）［1］和波紋短須石首魚（Umbrina cirrosa）［28］研究結(jié)果類似， 說明飼料脂肪對于魚體而言是一種免疫刺激劑， 高水平脂肪應激會產(chǎn)生短暫的人為LZM高活力。Henry等［28］研究指出LZM對于應激非常敏感， 受到急性刺激時LZM活力增加， 而慢性長期應激會抑制LZM活力。適當?shù)闹舅侥芴岣唪~體免疫力， 而脂肪過量則會引起代謝應激和提高肝胰臟代謝率， 從而損害肝胰臟功能并降低魚體免疫力［1， 29］。

3.4 飼料不同脂肪水平對芙蓉鯉鯽幼魚血清和肝胰臟抗氧化功能的影響

目前普遍認為， 魚類抗氧化防御系統(tǒng)依賴于營養(yǎng)因子起作用［30］， 飼料脂肪或不飽和脂肪酸水平升高會加重動物的氧化應激［31］， 而氧化應激常常是由于活性氧的產(chǎn)生與清除不平衡引起［32］。CAT屬于能特異性清除體內(nèi)過多過氧化氫的抗氧化酶， 保護細胞免受過氧化損傷， 其活力一般隨著應激增強而升高［33， 34］。在本實驗中芙蓉鯉鯽血清CAT活力隨著飼料脂肪水平增加顯著升高（P＜0.05）， 與褐菖［18］研究結(jié)果類似。但也有研究表明飼喂不同脂肪水平飼料10周的草魚， 其CAT最高值出現(xiàn)在0%脂肪組， 最低值為5%—7.5%脂肪組， 經(jīng)過嗜水氣單胞菌攻毒后CAT值反而上升， 研究者認為脂肪缺乏組相比高脂肪組可能引發(fā)草魚更嚴重的應激反應［1］。

在本研究中芙蓉鯉鯽肝胰臟MDA活力隨著飼料脂肪水平增加而平穩(wěn)上升， 表明芙蓉鯉鯽對脂肪酸過氧化反應易感性增強。MDA是脂肪酸過氧化的代謝產(chǎn)物， 其含量被認為是肝胰臟損傷程度的指標［35］。在投喂不同脂肪水平飼料的草魚［1， 9］和投喂不同碳水化合物/脂肪水平飼料的團頭魴（Megalobrama amblycephala）［30］中也有類似的結(jié)果報道。

SOD作為抗氧化酶， 能夠清除有危害性的活性氧， 通過催化歧化作用將過氧化物自由基轉(zhuǎn)變成過氧化氫和氧［36］。在本實驗條件下， 芙蓉鯉鯽血清和肝胰臟SOD活力及肝胰臟T-AOC活力隨著飼料中脂肪水平的升高， 均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢， 這可能是一定的脂肪水平提高魚體的抗氧化酶活力，減少脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物， 從而提高芙蓉鯉鯽的抗氧化能力， 但過高的脂肪水平減弱了機體清除自由基的作用， 使體內(nèi)的過氧化物增多， 反而降低了芙蓉鯉鯽抗氧化能力。也有研究報道表明， 隨著飼料脂肪水平的增加， 草魚肝胰臟T-AOC活力顯著下降， 研究者認為草魚抗氧化能力顯著受飼料脂肪水平影響， T-AOC活力可以用來標記草魚對飼料脂肪的免疫反應［1］。由于MDA、SOD和T-AOC等抗氧化酶作為應激指標已普遍應用于毒理學實驗研究， 可以有效衡量魚類肝胰臟氧化和健康狀況， 其變化趨勢說明飼料高脂肪可能加重了芙蓉鯉鯽的代謝壓力和氧化速率［1］。

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EFFECT OF DIETARY LIPID LEVELS ON SERUM BIOCHEMICAL INDICES，IMMUNE RESPONSES AND ANTIOXIDANT CAPABILITY OF JUVENILE FURONG CRUCIAN CARP （FURONG CARP♀× RED CRUCIAN CARP♂）

HE Zhi-Gang1， WANG Jin-Long1， 2， WU Yuan-An1， 2， LI Chuan-Wu1， 2， LI Shao-Ming1and LIU Wen-Ge1
（1. Fisheries Research Institute of Hunan Province， Changsha 410153， China； 2. Collaborative Innovation Center for Efficient and Health Production of Fisheries in Hunan Province， Changde 415000， China）

To investigate effects of dietary lipids on serum biochemical indices， immunity， and antioxidant capability of juvenile Furong crucian carp （Furong carp♀× red crucian carp♂） ［mean initial body weight， （2.04±0.01） g］， five isonitrogenous experimental diets were formulated with increasing lipid levels （2.50%， 4.39%， 6.61%， 8.42% and 10.81% lipid） using fish oil as the lipid source to feed triplicate groups of fish for 60 days. The results showed that with the increase of dietary lipid level， weight gain rate （WGR） and protein efficiency ratio （PER） significantly increased and then decreased， and the maximum of WGR and PER were found in the 6.61% lipid group （P＜0.05）. The feed conversion ratio （FCR） showed the opposite trend. Dietary lipids significantly increased serum total cholesterol （CHO） and globulin （GLB） contents， but significantly decreased total protein （TP） and albumin （ALB） content （P＜0.05）. Dietary lipids have no effect in high density lipoprotein cholesterol （HDL-C） and triglyceride （TG） content （P＞0.05）. The immunoglobulin M （Ig M） content， serum superoxide dismutase （SOD）， hepatic SOD activity and total antioxidant capacity （T-AOC） significantly increased and then decreased with increasing dietary lipid levels （P＜0.05）. The maximum of serum catalase （CAT） activity was found in the 10.81% lipid group， which are significantly higher than other groups （P＜0.05）. There were no significant difference in hepatic CAT activity and malondialdehyde （MDA） content among dietary treatments （P＞0.05）. These results suggest that proper die- tary lipid level can improve the health of Furong crucian carp， but excess dietary lipid may exert adverse effects. Based on the second-order regression analysis of WGR，the optimal dietary lipid level in juvenile furong crucian carp was 6.94%.

Furong crucian carp （Furong carp♀×red crucian carp♂）； Dietary lipid levels； Biochemistry indices；Immune function； Antioxidant capability

S965.1

A

1000-3207（2016）04-0655-08

10.7541/2016.88

2015-05-10；

2015-10-07

國家大宗淡水魚類產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項目（CARS-46-41）； 中央財政農(nóng)業(yè)科技推廣專項資金（2011， 2013）資助 ［Supported by the Earmarked Fund for China Agriculture Research System （CARS-46-41）； the Special Central Finance Funds for the Technology Extension of Agricultural （2011， 2013）］

何志剛（1982—）， 男， 湖南南縣人； 碩士； 研究方向為水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料。E-mail： oceanhzg@163.com

伍遠安， 研究員； E-mail： wuyuanan9259@163.com