陳　群，黃　華，吳愿如，李立波，鄧寶佳

(廣東省深圳市龍崗區(qū)第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科　518112)

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常規(guī)劑量肝素鋰和氟化鈉抗凝對毛細(xì)管電泳法檢測HbA1c的影響*

陳群，黃華，吳愿如，李立波，鄧寶佳

(廣東省深圳市龍崗區(qū)第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科518112)

摘要:目的探討常規(guī)劑量的肝素鋰、氟化鈉抗凝劑對毛細(xì)管電泳法檢測糖化血紅蛋白(HbA1c)的影響。方法應(yīng)用Capillarys 2 Flex Piercing毛細(xì)管電泳儀檢測全血標(biāo)本HbA1c濃度，以EDTA-K2抗凝標(biāo)本的檢測結(jié)果為對照，分別比較肝素鋰和氟化鈉抗凝標(biāo)本檢測結(jié)果的差異性。結(jié)果肝素鋰、氟化鈉抗凝標(biāo)本分別與EDTA-K2抗凝標(biāo)本比較，毛細(xì)管電泳法測定HbA1c濃度差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，且肝素鋰、氟化鈉抗凝標(biāo)本HbA1c檢測結(jié)果與EDTA-K2抗凝標(biāo)本結(jié)果具有相關(guān)性(P<0.001)。結(jié)論使用常規(guī)劑量的肝素鋰、氟化鈉抗凝均未對毛細(xì)管電泳法檢測HbA1c產(chǎn)生影響，常規(guī)劑量的肝素鋰、氟化鈉抗凝標(biāo)本均適用于毛細(xì)管電泳法檢測HbA1c。

關(guān)鍵詞:肝素鋰；氟化鈉；抗凝；毛細(xì)管電泳；HbA1c

眾所周知，糖化血紅蛋白(HbA1c)是評價(jià)糖尿病血糖控制水平的首選指標(biāo)。近年來，許多國家糖尿病學(xué)會和WHO推薦將其作為糖尿病的首選診斷標(biāo)準(zhǔn)，拓寬HbA1c的應(yīng)用范圍，更顯其重要性。2012年，毛細(xì)管電泳法作為一種新的HbA1c檢測方法被首次推出利用[1]。在方法學(xué)性能評價(jià)方面已有相關(guān)報(bào)道[2-4]。一些研究表明，該法對常見的異常血紅蛋白抗干擾能力較好并可提示地中海貧血，有較理想性能，逐漸被臨床應(yīng)用。然而目前對該法所使用的全血標(biāo)本在不同抗凝類型、貯存條件等方面影響因素研究尚未有報(bào)道。因此，本實(shí)驗(yàn)使用常規(guī)劑量肝素鋰、氟化鈉抗凝劑處理的標(biāo)本對該法檢測HbA1c是否產(chǎn)生影響進(jìn)行初步探討，以評價(jià)肝素鋰、氟化鈉抗凝標(biāo)本的適用性。

1資料與方法

1.1一般資料收集2015年6～12月來自深圳市龍崗區(qū)第二人民醫(yī)院門診就診糖尿病患者42例及非糖尿病健康體檢者34例，共76例納入研究者的EDTA-K2、肝素鋰和氟化鈉3種抗凝劑抗凝的全血標(biāo)本；所有納入研究者均被提前告知并征得本人同意。納入研究者年齡28～71歲，平均(42.6±10.3)歲；糖尿病患者病程5～13年，平均(7.8±2.3)年；糖尿病患者中合并腎病者17例。

1.2方法采用毛細(xì)管電泳法檢測全血標(biāo)本HbA1c濃度，以EDTA-K2抗凝標(biāo)本HbA1c檢測結(jié)果為對照，分別比較肝素鋰和氟化鈉抗凝標(biāo)本HbA1c檢測結(jié)果的差異性，初步分析使用肝素鋰、氟化鈉抗凝對毛細(xì)管電泳法檢測全血標(biāo)本HbA1c濃度的適用性。

1.2.1標(biāo)本采集深圳市保安醫(yī)療用品有限公司生產(chǎn)EDTA-K2抗凝2 mL真空采血管(抗凝劑濃度1.5 mg/mL)、肝素鋰抗凝5 mL真空采血管(抗凝劑濃度15.0 U/mL)、氟化鈉抗凝2 mL真空采血管(抗凝劑濃度1.5 mg/mL)；遵守采血操作規(guī)程，嚴(yán)格按照抗凝劑比例采集一定量的全血，要求無凝固。

1.2.2檢測系統(tǒng)法國Sebia公司Capillarys 2 Flex Piercing毛細(xì)管電泳儀及配套的試劑(緩沖液批號22074、溶血素批號02094)、校準(zhǔn)品(批號18034、19034)、質(zhì)控品(批號27063、28063)。

1.2.3操作要求嚴(yán)格遵守各項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作進(jìn)行；確保儀器處于良好狀態(tài)，經(jīng)過校準(zhǔn)并確認(rèn)質(zhì)控在控；標(biāo)本采集后1～2 h內(nèi)完成檢測，并且每份標(biāo)本均進(jìn)行重復(fù)測定2次取均值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。

2結(jié)果

2.13種抗凝標(biāo)本HbA1c濃度檢測結(jié)果分布情況本次研究所納入評價(jià)標(biāo)本的HbA1c濃度范圍4.6%～11.5%，均有分布于正常和異常值各區(qū)間段范圍，見表1。

表1　　毛細(xì)管電泳法重復(fù)2次測定3種抗凝各76份標(biāo)本HbA1c均值結(jié)果

2.2肝素鋰抗凝對HbA1c濃度檢測的影響毛細(xì)管電泳法測定EDTA-K2和肝素鋰2種抗凝標(biāo)本HbA1c濃度分別為(6.112±1.734)%、(6.109±1.700)%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；2種抗凝標(biāo)本HbA1c濃度有相關(guān)性(r=0.997，P<0.001)。

2.3氟化鈉抗凝對HbA1c濃度檢測的影響毛細(xì)管電泳法測定EDTA-K2和氟化鈉2種抗凝標(biāo)本HbA1c濃度分別為(6.112±1.734)%、(6.135±1.712)%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；2種抗凝標(biāo)本HbA1c濃度有相關(guān)性(r=0.997，P<0.001)。

3討論

Capillarys 2 Flex Piercing毛細(xì)管電泳儀檢測原理是讓帶電的分子在特定pH值的堿性緩沖液中根據(jù)它們的電泳移動性進(jìn)行高壓分離，該方法具有很高的分辨率，通過使用堿性pH緩沖液，正常和異常(或變異體)血紅蛋白按下列順序檢測出來，從陰極到陽極依次為：A2/C、E、S/D、F、A0、其他Hb(包括次要HbA1)及A1c，在血紅蛋白所特有的吸收波長415 nm下，在毛細(xì)管的陰極端可以直接準(zhǔn)確地檢測，從而對HbA1c組分進(jìn)行相對定量分析。

本研究從日常工作實(shí)際情況出發(fā)，分析常規(guī)肝素鋰和氟化鈉抗凝采血管采集標(biāo)本對毛細(xì)管電泳法檢測HbA1c的影響，從而發(fā)掘這項(xiàng)檢測方法更多實(shí)用性特點(diǎn)。對所納入的研究對象均經(jīng)過篩選，選取各種糖尿病患者(考慮納入研究者年齡構(gòu)成、病程長短及兼顧是否并發(fā)其他疾病)的標(biāo)本，HbA1c濃度在各正常和異常值區(qū)間段范圍均有分布，同時(shí)不超出Capillarys 2 Flex Piercing毛細(xì)管電泳儀檢測線性，在一定程度上滿足用于干擾評價(jià)的標(biāo)本濃度取值合理性[5-9]。

本次研究發(fā)現(xiàn)，與廠家建議使用抗凝劑EDTA-K2抗凝標(biāo)本比較，使用常規(guī)劑量的肝素鋰和氟化鈉抗凝時(shí)，毛細(xì)管電泳法檢測HbA1c結(jié)果與EDTA-K2抗凝標(biāo)本檢測結(jié)果差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，且與EDTA-K2抗凝標(biāo)本檢測結(jié)果具有相關(guān)性(P<0.001)，表明肝素鋰和氟化鈉對毛細(xì)管電泳法檢測HbA1c未造成干擾，這2種抗凝劑抗凝標(biāo)本可適用于毛細(xì)管電泳法檢測HbA1c。

在日常工作中，肝素鋰、氟化鈉是日常主要抗凝劑用于臨床生物化學(xué)項(xiàng)目檢測標(biāo)本的抗凝，本次研究發(fā)現(xiàn)肝素鋰、氟化鈉抗凝適用于毛細(xì)管電泳法檢測HbA1c，對于糖尿病患者需要同時(shí)檢查臨床生物化學(xué)項(xiàng)目和HbA1c濃度時(shí)均可避免多采血，特別是對于老年患容易接受，也便于采血。這也表明毛細(xì)管電泳法檢測HbA1c在一定程度上較傳統(tǒng)方法更便于臨床應(yīng)用，更具優(yōu)勢。

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* 基金項(xiàng)目：廣東省深圳市龍崗區(qū)科技發(fā)展資金項(xiàng)目(YLWSF20150513163211044)。

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.14.049

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)14-2013-02

(收稿日期：2016-01-22修回日期：2016-04-15)