王芮　滕麗微　劉振生

(國家林業(yè)局野生動物保護學(xué)重點開放實驗室(東北林業(yè)大學(xué))，哈爾濱，150040)

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賀蘭山巖羊冬夏季的上毛顯微形態(tài)特征比較1)

王芮滕麗微劉振生

(國家林業(yè)局野生動物保護學(xué)重點開放實驗室(東北林業(yè)大學(xué))，哈爾濱，150040)

摘要應(yīng)用光學(xué)顯微鏡和掃描電鏡技術(shù)，對賀蘭山巖羊(Pseudois nayaur)頸部、背部、腹側(cè)部、腹下部、臀部、腿部、蹄部7個部位冬毛及夏毛形態(tài)特征進行觀察與比較。結(jié)果表明：除過鱗片花紋類型及排列順序表現(xiàn)出一致性外，賀蘭山巖羊7個部位冬毛和夏毛在毛長度、毛伸直長度、卷曲度、毛細度、髓質(zhì)細度、毛髓質(zhì)指數(shù)上均存在一定差異。賀蘭山巖羊上毛髓質(zhì)指數(shù)較高，除蹄部外，其它6個部位保持在90%以上。軀干部毛長度和毛髓質(zhì)指數(shù)顯著高于腿部和蹄部(P<0.05)，主要起到保溫功能。腿部和蹄部雜波型鱗片比例最大，皮質(zhì)發(fā)達，主要起到保護功能。這將為賀蘭山巖羊的形態(tài)學(xué)及物種鑒定研究提供一些基礎(chǔ)資料。

關(guān)鍵詞巖羊；羊毛；毛顯微形態(tài)；賀蘭山

毛是哺乳動物所特有的皮膚衍生物，由內(nèi)向外一般分為3層，包括髓質(zhì)層、皮質(zhì)層、鱗片層[1]。動物毛與外界環(huán)境直接接觸，是高度進化與高度適應(yīng)的結(jié)果[2]。毛的微觀結(jié)構(gòu)由基因控制，具有物種特異性。從1853年開始，毛發(fā)研究至今已有160多年的歷史[3]，由于以毛為材料對動物傷害小且易獲取，所以其在物證鑒定、食性、適應(yīng)性評價和毛制品品質(zhì)研究方面具有獨特的優(yōu)勢。

巖羊(Pseudois nayaur)屬偶蹄目?？蒲騺喛茙r羊?qū)?。在我國被列為國家Ⅱ級重點保護野生動物，是青藏高原分布較廣、數(shù)量較多的有蹄類之一[4]，對維持生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性和多樣性具有重要意義[5]。目前，國內(nèi)外對巖羊的研究已有很多，如巖羊分類學(xué)[6]、種群生態(tài)學(xué)[7]、種群遺傳學(xué)[8]等方面的研究。但有關(guān)巖羊毛顯微形態(tài)研究方面的報道較少。本文以賀蘭山巖羊上毛作為研究對象，分別測量了冬季、夏季的巖羊(雌性和雄性)7個部位毛顯微形態(tài)數(shù)據(jù)，并對其季節(jié)性差異和部位差異進行比較，以期擴大動物毛發(fā)數(shù)據(jù)庫，為巖羊這一物種的形態(tài)學(xué)研究、野外鑒定及相關(guān)保護措施制定提供一定的生物學(xué)基礎(chǔ)資料。

1研究地概況

賀蘭山坐落在寧夏回族自治區(qū)和內(nèi)蒙古自治區(qū)交界處，位于銀川平原與阿拉善高原之間，地理坐標為N38°21′～39°22′、E105°49′～106°42′。屬陰山山系，山勢呈西南-東北走向。南北長約250km，東西寬20～40km，海拔一般為2 000～3 000m。賀蘭山深居內(nèi)陸，是典型的大陸性氣候，具有冬長夏短、春寒秋涼的特點。冬季受蒙古冷高壓控制，長達5個月，寒冷而干燥。年平均氣溫為-0.9 ℃，極端最高氣溫為35.2 ℃，極端最低氣溫為-31 ℃。該地區(qū)年降水量180～200mm，無霜期約185d。由于海拔較高，植被垂直分異明顯且?guī)ёV復(fù)雜。按植被型，可劃分成4個植被垂直帶：荒漠草原帶→低山草原、灌叢帶→中山針葉林帶→高山灌叢、草甸帶。

2材料與方法

2015年7月5—13日、12月20—26日，在寧夏銀川中山公園動物園、保定園內(nèi)于賀蘭山救助的野生巖羊(♂4♀6)成體，采集頸部、背部、腹側(cè)、腹下、臀部、腿部、蹄部7個部位夏季和冬季上毛。在實驗室按照性別和季節(jié)分類，每個部位選取完整的毛(具有毛根、毛干、毛尖)50根。

光學(xué)顯微鏡樣本的制備：將毛樣置于小燒杯中，用脫脂夜(乙醚和95%乙醇按體積1∶1組成)脫脂10min，置于無水乙醇中脫水2min；將脫水后毛樣置于二甲苯中透明15min；最后用無水乙醇清洗并自然晾干。將晾干的毛樣本放到清潔的無機玻璃片上，用樹膠加蓋玻片封固，貼標簽，等待樹膠晾干。

掃描電鏡樣本制備：將毛樣放置于KQ5200DB超聲波清洗器中清洗4h，自然干燥后，粘附在日新0.5mm雙面碳導(dǎo)電膠帶上，放置于IB25離子濺射儀中鍍金30s。將鍍金后的毛樣本再粘附到JCM-5000掃描電鏡載物臺上觀察并拍照。

數(shù)據(jù)測量：毛長度指自然狀態(tài)下由毛根到毛尖的距離；毛的伸直長度指將毛伸直后由毛根到毛尖的距離。毛長度及毛伸直長度，均采用德國美耐特數(shù)顯游標卡尺直接讀數(shù)。每個樣本的毛細度、髓質(zhì)細度，通過裝有線形顯微測微尺的Olympus顯微鏡下測量(均在毛的最粗段測量)。此外，毛卷曲度=((毛伸直長度-毛長度)/毛伸直長度)×100%，毛髓質(zhì)指數(shù)=(毛髓質(zhì)細度/毛細度)×100%。利用JCM-5000掃描電鏡自帶軟件對鱗片類型所占比例進行測算。

用Excel與SPSS22.0對實驗數(shù)據(jù)進行分析；利用單因素方差分析中的最小顯著差數(shù)法(LSD)進行差異顯著性檢驗。

3結(jié)果與分析

由表1可見：賀蘭山巖羊7個部位毛的伸直長度的趨勢，總體保持以腹側(cè)、腹下和臀部最長(冬毛32.54～86.53mm，夏毛23.91～67.12mm)，背部、頸部次之(冬毛32.48～63.21mm，夏毛38.95～58.49mm)，腿部(冬毛29.41～45.57mm，夏毛28.67～43.11mm)和蹄部(冬毛17.68～23.72mm，夏毛14.28～23.50mm)最短；并且軀干部(腹側(cè)、腹下、臀部)毛長度和伸直長度，均顯著高于腿部和蹄部(P<0.05)。除蹄部外，其他6個部位冬季毛長度和毛伸直長度，都顯著高于夏季(P<0.05)。比較同一季節(jié)的雌性和雄性7個部位毛伸直長度平均值發(fā)現(xiàn)，冬季巖羊雄性毛伸直長度((52.94±12.77)mm)顯著大于雌性((46.67±11.68)mm)，而夏季差異不顯著。

表1　冬夏兩季賀蘭山巖羊7個部位毛的指標數(shù)值統(tǒng)計

部位卷曲度/%冬季♂♀夏季♂♀髓質(zhì)細度/μm冬季♂♀夏季♂♀頸部(6.41±5.30)b(5.96±6.36)ab(3.20±0.98)bc(6.56±2.49)ab(158.04±13.30)c(174.41±15.95)b(145.04±14.34)cd(155.32±12.81)c背部(7.03±3.68)b(6.25±2.03)ab(2.63±0.84)c(3.09±1.69)d(176.51±11.73)b(180.71±9.33)b(154.47±19.72)bc(154.87±23.79)bc腹側(cè)部(7.05±2.46)b(4.33±2.61)ab(4.36±2.61)bc(3.61±1.78)cd(182.06±16.06)b(197.95±38.16)a(160.21±20.48)b(167.98±7.90)ab腹下部(8.63±8.77)b(6.63±5.74)a(4.71±2.62)ab(8.88±4.88)a(225.60±30.28)a(189.98±19.80)a(185.53±15.32)a(170.67±22.39)a臀部(19.10±7.59)a(6.83±4.22)a(6.66±2.79)a(5.99±2.98)bc(178.57±11.38)b(188.99±18.84)a(162.52±13.70)b(177.79±23.52)a腿部(8.57±4.50)b(7.52±3.43)a(6.57±2.13)a(6.79±3.34)ab(147.62±19.08)d(135.62±34.74)c(138.89±13.51)d(104.99±21.16)d蹄部(3.34±2.16)b(2.86±2.09)b(4.76±3.91)ab(3.63±1.92)cd(90.96±5.70)e(86.52±13.85)d(78.30±17.70)e(72.99±20.98)e

部位毛細度/μm冬季♂♀夏季♂♀髓質(zhì)指數(shù)/%冬季♂♀夏季♂♀頸部(166.60±13.49)c(182.21±17.56)c(154.58±14.89)c(165.30±12.58)bc(94.84±1.07)c(95.77±1.26)b(93.81±0.96)b(93.93±1.04)a背部(181.88±11.20)b(186.47±9.21)b(162.16±19.77)bc(161.70±22.95)c(97.02±0.93)a(96.91±0.72)a(95.20±1.13)ab(95.59±2.18)a腹側(cè)部(188.48±15.83)b(206.38±36.82)a(168.97±20.80)b(177.58±8.26)ab(96.56±0.66)ab(95.83±0.76)b(94.77±0.94)ab(94.59±0.79)a腹下部(235.11±30.65)a(200.13±19.93)a(196.03±16.32)a(180.56±20.89)a(95.90±0.80)b(94.88±1.07)b(94.66±1.09)ab(94.37±2.03)a臀部(184.70±11.42)b(194.98±20.70)ab(169.98±14.07)b(185.69±24.59)a(96.67±0.71)ab(96.99±0.88)a(95.61±0.74)a(95.75±1.09)a腿部(160.90±15.57)c(148.13±35.54)d(154.29±16.90)c(116.40±22.61)d(91.44±3.75)d(91.27±2.61)c(90.13±1.81)c(90.08±2.66)b蹄部(109.98±4.45)d(111.07±15.97)e(100.99±20.04)e(96.79±22.71)e(82.68±3.02)e(77.81±11.26)d(77.29±5.55)d(74.98±10.71)c

注：表中數(shù)據(jù)為“平均值±標準差”；同列不同字母表示兩組數(shù)統(tǒng)計學(xué)上具有顯著性差異(P<0.05)。

上毛的卷曲度，沒有表現(xiàn)出明顯的規(guī)律性差異。雄性冬毛，以臀部卷曲度最大，其他6個部位無顯著性差異；雌性冬毛，以腿部、臀部、腹下部最大，蹄部最小。雄性夏毛，臀部和腿部卷曲度最大，且卷曲度顯著大于頸部和背部(P<0.05)；雌性夏毛，卷曲度以腹下部最大，且顯著大于背部(P<0.05)。

由表1可見：冬夏兩季7個部位毛細度和毛髓質(zhì)細度均有差異。其中：雌性巖羊，冬毛毛細度為56.12～356.24μm、毛髓質(zhì)細度為59.88～339.16μm，夏毛毛細度為57.88～229.54μm、毛髓質(zhì)細度為41.92～219.60μm；雄性巖羊，冬毛毛細度為104.71～307.44μm、毛髓質(zhì)細度為81.84～292.80μm，夏毛毛細度為64.87～219.60μm、毛髓質(zhì)細度為44.91～209.41μm；冬毛的平均毛細度和毛髓質(zhì)細度大于夏毛，并且雄性上毛平均毛細度和毛髓質(zhì)細度大于雌性。

冬毛7個部位平均毛髓質(zhì)細度，從大到小依次為為腹下、腹側(cè)、臀部、背部、頸部、腿部、蹄部；腹下部顯著高于腿部和蹄部(P<0.05)，臀部和腹側(cè)部無顯著差異(P>0.05)。夏毛平均毛細度，從大到小依次為腹下、臀部、腹側(cè)、背部、頸部、腿部、蹄部。其中，頸部和背部無顯著差異(P>0.05)。經(jīng)過統(tǒng)計學(xué)檢驗，賀蘭山巖羊的毛細度變化與毛髓質(zhì)細度變化趨勢一致，毛細度由臀部向頭部遞減。

毛髓質(zhì)指數(shù)是衡量動物髓腔大小的重要指標。賀蘭山巖羊髓質(zhì)指數(shù)較高，除蹄部外，其它部位髓質(zhì)指數(shù)均在90%以上。臀部和背部髓質(zhì)指數(shù)無顯著差異(P>0.05)，顯著高于腿部和蹄部(P<0.05)。臀部、背部、腹側(cè)部、腹下部這4個部位髓質(zhì)指數(shù)為本次所測7個部位中最高部位，頸部和腿部次之，蹄部髓質(zhì)指數(shù)最小。

結(jié)合掃描電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，雌性與雄性的鱗片花紋類型及排列順序，無論冬季還是夏季均是相同的(見表2)；上毛主要包含冠狀型、雜波型、鑲嵌型、扁平型4種鱗片類型(見圖1)。

表2　賀蘭山巖羊上毛鱗片花紋類型及排列方式

A為冠狀型；B為扁平型；C為鑲嵌型；D為雜波型。

4結(jié)論與討論

為了適應(yīng)冬季寒冷的氣候，賀蘭山巖羊毛長度整體增大，尤其以軀干部毛長度最大。與此同時，賀蘭山巖羊冬季上毛毛細度和髓質(zhì)細度由軀干部向身體兩端相應(yīng)加大。毛細度和髓質(zhì)細度的增大，使得單位體積毛髓腔內(nèi)部容納了更多靜止空氣，從而在動物體表形成一個體積更大的相對靜止空氣層[9]，為動物體適應(yīng)寒冷氣候奠定了基礎(chǔ)。賀蘭山具有獨特的山地氣候特征，冬季嚴寒，夏季溫涼。巖羊為了在氣候多變的賀蘭山地區(qū)長期生存，除蹄部外，無論夏季還是冬季髓質(zhì)指數(shù)都保持在90%以上，處于較高水平。

野生賀蘭山巖羊，常在高密度的灌木叢以及陡峭的巖間取食和活動。圈養(yǎng)條件下，有38.65%的時間都用于臥息，四肢位于腹下直接著地，最后臀部著地。雄性的運動行為高于雌性，而臥息、取食等行為低于雌性[10]。本次實驗中，毛卷曲度最大的部位主要集中在臀部、四肢與腹部，我們猜測毛卷曲度與動物的行為節(jié)律有關(guān)，遺憾的是本次并沒有在雌性和雄性巖羊間獲得規(guī)律性結(jié)果。巖羊的不同行為活動，使得身體不同部位的毛受外界環(huán)境的磨損強度也有所差異。通過掃描電鏡拍得照片可以看出，背部、臀部、蹄部、腿部都出現(xiàn)了雜波型鱗片，雜波型鱗片的復(fù)雜程度與摩擦方式和強度有關(guān)[11]。賀蘭山巖羊腿部、蹄部雜波型鱗片比例最大，說明其磨損的程度大，最需要保護。與此同時我們發(fā)現(xiàn)，相對于其他部位而言，腿部、蹄部毛的髓質(zhì)指數(shù)最低，發(fā)達的皮質(zhì)層使得毛不容易折斷，以此來行使保護功能。

本次實驗主要以賀蘭山巖羊上毛為研究對象，采樣過程中發(fā)現(xiàn)巖羊7個部位絨毛的分布比例也有所差異，本次尚未討論。今后還需要進行補充說明，為巖羊這一物種的鑒定積累更加豐富、詳盡的資料。

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第一作者簡介：王芮，女，1991年12月生，國家林業(yè)局野生動物保護學(xué)重點開放實驗室(東北林業(yè)大學(xué))，碩士研究生。E-mail：471366077@qq.com。 通信作者：劉振生，國家林業(yè)局野生動物保護學(xué)重點開放實驗室(東北林業(yè)大學(xué))，教授。E-mail：zhenshengliu@163.net。

收稿日期：2016年3月22日。

分類號Q954

HairMicro-morphologyCharacteristicsbetweenSummerandWinterinBlueSheepfromHelanMountains//

WangRui,TengLiwei,LiuZhensheng

(KeyLaboratoryofConservationBiology,StateForestryAdministration,NortheastForestryUniversity,Harbin150040,P.R.China)//JournalofNortheastForestryUniversity，2016,44(8)：97-100.

Weobservedthehairofbluesheep(Pseudois nayaur)inHelanMountainsusingopticalmicroscopyandscanningelectronmicroscopytocomparemorphologycharacteristicsamongneck,back,veutro,abdomen,hip,legandhoofbothinwinterandsummer.Sevendifferentpartshadsimilarityandconsistencyinscaletypesandtheorderofscaletypearrangement.Whiletherewasdifferenceinhaircurledlength,hairuncurledlength,crimpratio,medullarydiameterofhair,diameterofhair,andmedullaryindexofhair.Themedullaryindexofhairinbluesheepwashigh,inadditiontothehoof,theothersixpartsremainedabove90%.Thehairlengthandhairmedullaindexofthetrunkweresignificantlyhigherthanthoseofthelegsandhooves(P<0.05),andthehairoftrunkhadmainfunctioninheatpreservation.Legsandhooves,owningthelargestproportionofirregularwavescaleandcortex,hadmainfunctioninprotection.

KeywordsBlue sheep (Pseudois nayaur); Sheep hair; Hair micro-morphology; Helan Mountains

1)中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費項目(2572014CA03)；國家自然科學(xué)基金項目(31372221)。

責任編輯：張玉。