李園園　韋麗華

(廣西科技大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)與病理生理學(xué)教研室，廣西 柳州 545005)

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HSP60及S100A9在結(jié)腸癌中的表達及意義

李園園韋麗華

(廣西科技大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)與病理生理學(xué)教研室，廣西 柳州 545005)

摘要目的探討HSP60及S100A9蛋白在人結(jié)腸癌與癌旁正常結(jié)腸組織的差異表達及其與人結(jié)腸癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系。 方法采用免疫組織化學(xué)染色法檢測結(jié)腸癌40例及正常結(jié)腸組織30例中HSP60及S100A9蛋白的表達。 結(jié)果結(jié)腸癌中HSP60及S100A9陽性表達率分別為82.5%及77.5%，均顯著高于正常組。結(jié)腸癌中HSP60與S100A9的表達呈正相關(guān)。 結(jié)論HSP60及S100A9的高表達可能與結(jié)腸癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，二者聯(lián)合檢測可以作為診斷結(jié)腸癌的潛在標志物。

關(guān)鍵詞結(jié)腸癌；HSP60；S100A9；免疫組織化學(xué)

文章編碼：1001-8131(2016)02-0140-02

結(jié)腸癌是世界上最常見的惡性腫瘤之一，近年來隨著人們飲食結(jié)構(gòu)的改變和生活水平的提高，其發(fā)病率呈不斷上升的趨勢[1]。在中國，結(jié)腸癌患者呈現(xiàn)年輕化的趨勢，在近年調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，平均每年有數(shù)十萬患者死于結(jié)腸癌，因此對于結(jié)腸癌的研究具有重要的臨床意義[2]。腫瘤標記物是診斷結(jié)腸癌的常用方法之一，目前應(yīng)用較為廣泛的是癌胚抗原(CEA)，但是單項檢測敏感度低，陽性率差，因此選擇恰當(dāng)?shù)哪[瘤標記物進行聯(lián)合檢測有利于結(jié)腸癌的早期診斷[3]。HSP60是熱休克蛋白家族的一份子，與細胞的生長、分化、凋亡及蛋白的折疊、運輸、降解有關(guān)[4]。已有研究證實在許多腫瘤中HSP60的表達水平都升高[5]。S100A9與生長調(diào)控、信號傳導(dǎo)等多種生物學(xué)功能有關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)在早期結(jié)腸癌的血清中S100A9的表達水平顯著升高[6]。HSP60和S100A9表達異常均與細胞惡性轉(zhuǎn)化相關(guān)，目前國內(nèi)尚無在結(jié)腸癌中聯(lián)合檢測HSP60和S100A9的報道，二者在結(jié)腸癌中表達的相互關(guān)系有待進一步研究。本文主要采用免疫組化法檢測結(jié)腸癌及癌旁正常結(jié)腸組織中HSP60和S100A9的表達，著重闡述了二者的表達與結(jié)腸癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系。

1資料與方法

1.1一般資料：實驗標本隨機取自廣西科技大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院2013年7月至2015年2月期間外科手術(shù)切除的結(jié)腸癌手術(shù)標本40例，另外取癌旁正常結(jié)腸組織30例作為對照組。40例結(jié)腸癌組織來源患者中女12例，男18例，年齡 21～68歲，均無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。以上患者術(shù)前均未接受過放療、化療及免疫治療，并經(jīng)病理專家確診。

1.2試劑及方法：兔抗人HSP60多克隆抗體、兔抗人S100A9單克隆抗體、辣根過氧化物酶標記的羊抗鼠和羊抗兔二抗及即用型兔免疫組織化學(xué)超敏S-P試劑盒均購自北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司。按照試劑盒說明書進行SP法免疫組化技術(shù)及染色操作。用PBS液代替一抗作陰性對照，用已知乳腺癌HSP60及S100A9陽性切片作陽性對照。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理：采用SPSS 16.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析。免疫組化結(jié)果采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。采用典型相關(guān)分析HSPD1及S100A9蛋白之間的內(nèi)在聯(lián)系及二者與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。

2結(jié)果

2.1結(jié)腸癌組織中HSP60及S100A9蛋白的表達：結(jié)腸癌中HSP60蛋白的陽性表達率為82.5%(33/40)、S100A9蛋白的陽性表達率為77.5%(31/40)，兩者均顯著高于正常組(P均<0.01)。見圖1，圖2。

圖1　結(jié)腸癌中HSP60蛋白的陽性

圖2　結(jié)腸癌中S100A9蛋白的陽性

2.2 結(jié)腸癌中HSP60、S100A9蛋白表達的相互關(guān)系及其與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系：結(jié)腸癌中HSP60與S100A9蛋白的表達呈正相關(guān)(r=0.881，P<0.01)。結(jié)腸癌中HSP60及S100A9與患者的年齡、性別均無相關(guān)性(P>0.05)。

3討論

本次研究免疫組化結(jié)果顯示，在結(jié)腸癌組織中HSP60及S100A9蛋白的陽性率都明顯高于癌旁正常結(jié)腸組織。蛋白表達的相關(guān)性分析結(jié)果顯示，HSP60與S100A9蛋白的表達呈正相關(guān)。說明兩者的高表達可能與結(jié)腸癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。

HSP60具有維持細胞蛋白的穩(wěn)定以及促進細胞生存的功能，在正常細胞中僅少量表達，受到嚴格的細胞周期調(diào)控，其過表達與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[7]。

Ghosh等[8]研究發(fā)現(xiàn)在乳腺癌及結(jié)腸腺癌中HSP60通過抑制細胞凋亡從而促進腫瘤細胞的持續(xù)生長增殖，HSP60抑制劑可以選擇性的誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡，推測HSP60抑制劑可以作為潛在的抗癌藥物。有報道指出HSP60高表達可以促進結(jié)腸癌的侵襲轉(zhuǎn)移能力，HSP60可以作為判斷結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移及預(yù)后的有效臨床指標[9]。

S100A9屬于鈣粘蛋白S100家族的成員，參與到炎癥反應(yīng)、細胞生長調(diào)控、信號傳導(dǎo)以及誘導(dǎo)細胞凋亡等過程中。Arai等[10]研究發(fā)現(xiàn)在乳腺癌、肝癌以及肺腺癌等腺細胞來源的腫瘤中S100A9蛋白的表達水平明顯升高，說明S100A9可能與腺組織癌變的發(fā)病機制有關(guān)。而在食管鱗癌、頭頸部鱗癌等上皮來源的腫瘤組織中發(fā)現(xiàn)S100A9蛋白的表達水平顯著下調(diào)，提示S100A9與鱗狀上皮細胞癌變機制有關(guān)[11]。由此推測，S100A9在不同組織來源的腫瘤發(fā)病過程中發(fā)揮不同的生物學(xué)功能。

本實驗研究表明在結(jié)腸癌中HSPD1、S100A9蛋白高表達，癌旁正常結(jié)腸組織中則相反。HSPD1與S100A9蛋白高表達可能與結(jié)腸癌的發(fā)生、發(fā)展機制有關(guān)，二者聯(lián)合檢測可以作為臨床診斷結(jié)腸癌的潛在參考指標，有助于臨床制定合理的治療方案。

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[中圖分類號]R730.2

[文獻標識碼]A學(xué)科分類代碼：31044

收稿日期：2015-09-14

The Expression and Significance of HSP60 and S100A9 in Colon Cancer

Li YuanyuanWei Lihua

(Guangxi University of Technology School of Medicine, Pathology and Pathophysiology Teaching and Research Section，Guangxi Liuzhou，545005,China)

AbstractObjectiveTo investigate the differential expression of HSP60 and S100A9 protein in colon cancer and normal colon tissues and the relationship with the occurrence and development of colon cancer. MethodsThe expression of HSP60 and S100A9 protein in 40 cases of colon cancer and 30 cases of normal colon tissues were detected by immunohistochemical staining. ResultsThe positive expression rates of HSP60 and S100A9 were 82.5% and 77.5%, respectively, which were significantly higher than those in normal group. The expression of HSP60 was positively correlated with the expression of S100A9 in colon cancer. ConclusionThe high expression of HSP60 and S100A9 may be related to the occurrence and development of colon cancer. The combination of the two can be used as a potential marker for the diagnosis of colon cancer.

Key wordsColon cancer；HSP60；S100A9；immunohistochemistry