白變霞　陳艷彬　任嘉紅

（1.長治學(xué)院生物科學(xué)與技術(shù)系，山西長治046011；2.太行山生態(tài)與環(huán)境研究所，山西長治046011）

蠟狀芽孢桿菌CLY07菌株的解有機(jī)磷特性研究

白變霞1，2陳艷彬1，2任嘉紅1，2

（1.長治學(xué)院生物科學(xué)與技術(shù)系，山西長治046011；2.太行山生態(tài)與環(huán)境研究所，山西長治046011）

通過改良的NBRIP培養(yǎng)基，研究從南方紅豆杉根際分離篩選得到的解有機(jī)磷蠟狀芽孢桿菌CLY07的解磷能力，同時(shí)探究培養(yǎng)基中卵磷脂添加量、碳源、氮源、碳氮比及環(huán)境條件（培養(yǎng)基PH、溫度、裝液量及鹽度等）對該菌株解磷能力的影響。結(jié)果表明：蠟狀芽孢桿菌CLY07的解磷效果在改良NBRIP培養(yǎng)基中明顯優(yōu)于蒙金娜有機(jī)磷培養(yǎng)基。改良NBRIP培養(yǎng)基以葡萄糖為碳源，硫酸銨為氮源，碳氮比為60∶1，卵磷脂添加量為0.20 g，在其余組分不變條件下，該菌株顯示出較高的解磷能力。該菌株最佳的解磷環(huán)境條件為培養(yǎng)基PH 7.0，溫度30℃，不含NaC1，裝液量為1/5。研究顯示與蒙金娜有機(jī)磷培養(yǎng)基相比，改良的NBRIP培養(yǎng)基在一定程度上更適合于蠟狀芽孢桿菌CLY07解磷特性的研究。此外，培養(yǎng)環(huán)境能夠影響蠟狀芽孢桿菌CLY07的解磷能力。

蠟狀芽孢桿菌CLY07；NBRIP培養(yǎng)基；解磷能力；有機(jī)磷

磷元素被認(rèn)為是植物在生長和發(fā)育過程中所需的第二大關(guān)鍵礦物質(zhì)元素，可直接參與到相關(guān)的代謝中，從而對植物產(chǎn)生一系列影響［1］。土壤作為植物營養(yǎng)成分的主要來源，其中所含的磷元素很豐富，但是95%以上是以不能被植物直接利用的無效磷形式而存在，如穩(wěn)定的磷灰石形式，鋁硅酸鹽的形式，及有機(jī)態(tài)磷形式［2-3］。我國耕地土壤中約59%是處于缺磷狀態(tài)，有效磷的含量不足，不能滿足作物對磷元素的生長需求，對作物的產(chǎn)量產(chǎn)生一定的影響［4］。

為了滿足植物對磷元素的需求量，化學(xué)肥料被用來提高作物的產(chǎn)量，其生產(chǎn)過程是在高溫條件下利用硫酸酸解不溶性的磷酸礦物鹽，該過程既耗費(fèi)高也不利于環(huán)保，此外長期使用還會(huì)使得土壤理化性質(zhì)發(fā)生改變［5］。目前，大量研究表明，土壤中有一類溶磷微生物能夠?qū)⑼寥乐袩o效形式的磷轉(zhuǎn)化為有效形式的磷，改善土壤的結(jié)構(gòu)，提高植物對磷元素的利用率，同時(shí)植物也能夠?yàn)槿芰准?xì)菌提供生長所需的碳源。以該類微生物作為生物肥料，與傳統(tǒng)的化學(xué)肥料相比，生產(chǎn)成本低，對環(huán)境無污染，效果明顯［6-7］。

因此，本研究以前期本實(shí)驗(yàn)室從南方紅豆杉（Taχus chinensis var.mairei）根際分離篩選獲得的一株解有機(jī)磷細(xì)菌蠟狀芽孢桿菌CLY07為試驗(yàn)材料，采用液體培養(yǎng)，通過測定培養(yǎng)基中卵磷脂的不同添加量、不同碳源、氮源、碳氮比（C/N）及培養(yǎng)環(huán)境條件 （溫度、初始PH、溶氧量、鹽度）等因素的變化對蠟狀芽孢桿菌CLY07解磷能力的影響，確定該菌株的最佳解磷條件，為將來開發(fā)該菌株作為微生物肥料提供理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1供試菌株及培養(yǎng)基

1.1.1供試菌株

供試解有機(jī)磷菌株蠟狀芽孢桿菌CLY07由本實(shí)驗(yàn)室從南方紅豆杉根際土壤中分離獲得并完成鑒定。現(xiàn)已保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心CCTCC，保藏編號(hào)：CCTCC NO：M 2010157。

1.1.2培養(yǎng)基

1）修改的國際植物研究所磷酸鹽生長培養(yǎng)基（NBRIP）：葡萄糖10 g，MgC120.25 g，MgSO4·7H2O 0.25 g，KC1 0.20 g，（NH4）2SO40.10 g，卵磷脂0.20 g（卵磷脂在其他成分滅菌冷卻后加入），蒸餾水1 000 mL，PH 7.0。

2）蒙金娜基礎(chǔ)培養(yǎng)基：葡萄糖10 g，（NH4）2SO40.50 g，MgSO4·7H2O 0.30 g，NaC1 0.30 g，KC1 0.30 g，F(xiàn)eSO4·7H2O 0.36 g，MnSO4·H2O 0.03 g，CaCO35.0 g，卵磷脂0.20 g（卵磷脂在其他成分滅菌冷卻后加入），蒸餾水1 000 mL，PH 7.0～7.5。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1蠟狀芽孢桿菌CLY07解有機(jī)磷能力試驗(yàn)

將蠟狀芽孢桿菌CLY07接種在牛肉膏蛋白胨斜面培養(yǎng)基上，于30℃，培養(yǎng)24 h，活化后，加入10 mL生理鹽水，振蕩制成菌懸液。

將制備好的菌懸液按照2%的接種量，分別接種于含30 mL改良的NBRIP培養(yǎng)液和蒙金娜有機(jī)磷液體培養(yǎng)基的100 mL三角瓶中，以接種等量121℃，15～20 min滅活的菌懸液作為對照，各處理均設(shè)置3個(gè)重復(fù)，在30℃ ，200 r/min下培養(yǎng)96 h后，用超聲波細(xì)胞破碎儀處理發(fā)酵液15 min，所得處理液中加入活性炭離心20 min（4℃，4 000 r/min），除去活性炭雜質(zhì)，所得濾液再次離心20 min （4℃，10 000 r/min），取6.0 mL離心所得上清液，采用鉬銻抗比色法測定其中可溶性磷含量［8］。

1.2.2不同卵磷脂加入量蠟狀芽孢桿菌CLY07解磷能力試驗(yàn)

向改良的NBRIP培養(yǎng)基中加入卵磷脂，加入量分別為0.04、0.08、0.12、0.16、0.20、0.24、0.28、0.32和0.40 g/L，按照1.2.1中所述方法測定培養(yǎng)液中有機(jī)磷的含量，每組試驗(yàn)設(shè)置3個(gè)重復(fù)。

1.2.3不同碳源、氮源及碳氮比蠟狀芽孢桿菌CLY07解磷能力試驗(yàn)

將改良的NBRIP培養(yǎng)基的碳源分別用等量的可溶性淀粉、蔗糖、麥芽糖、甘露醇和果糖所替代；將氮源分別用等量的蛋白胨、酵母膏、牛肉膏、硝酸鉀和硝酸銨所替代；隨后采用最適的碳源和氮源，將培養(yǎng)基的碳氮比調(diào)為100/1、80/1、60/1、40/1和20/1。按照1.2.1中所述方法測定培養(yǎng)液中有機(jī)磷的含量，每組試驗(yàn)設(shè)置3個(gè)重復(fù)。

1.2.4不同環(huán)境條件下蠟狀芽孢桿菌CLY07解磷能力試驗(yàn)

按照2%（V/V）接種量向含有30 mL改良的NBRIP培養(yǎng)基的100 mL三角瓶中，接入制備好的蠟狀芽孢桿菌CLY07菌懸液，以接種等量死菌菌懸液作為對照，設(shè)定培養(yǎng)溫度分別為20、25、30、35、40℃，200 r/min下培養(yǎng)96 h，按照1.2.1中所述方法測定培養(yǎng)液中有機(jī)磷的含量，每組試驗(yàn)設(shè)置3個(gè)重復(fù)。

按照2%（V/V）接種量向含有30 mL改良的NBRIP培養(yǎng)基的100 mL三角瓶中，接入制備好的蠟狀芽孢桿菌CLY07菌懸液，以接種等量死菌菌懸液作為對照，用1 mo1/L HCL或NaOH溶液調(diào)節(jié)培養(yǎng)基PH分別為4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0 和10.0，將培養(yǎng)溫度設(shè)定為篩選得到的最佳溫度，200 r/min下培養(yǎng)96 h，按照1.2.1中所述方法測定培養(yǎng)液中有機(jī)磷的含量，每組試驗(yàn)設(shè)置3個(gè)重復(fù)。

用100 mL三角瓶中分別裝入20、40、50、60 和80 mL改良的NBRIP培養(yǎng)基使其裝液體積比分別為1/5、2/5、1/2、3/5和4/5，按照2%（V/V）接種量向培養(yǎng)基中接入制備好的蠟狀芽孢桿菌CLY07菌懸液，以接種等量死菌菌懸液作為對照，用1 mo1/L HC1或NaOH溶液調(diào)節(jié)培養(yǎng)基PH為篩選到的最佳PH，將培養(yǎng)溫度設(shè)定為篩選得到的最佳溫度，200 r/min下培養(yǎng)96 h，按照1.2.1中所述方法測定培養(yǎng)液中有機(jī)磷的含量，每組實(shí)驗(yàn)設(shè)置3個(gè)重復(fù)。

按照2%（V/V）接種量向篩選得到的最佳裝液量培養(yǎng)基中，接入制備好的蠟狀芽孢桿菌CLY07菌懸液，以接種等量死菌菌懸液作為對照，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的 NaC1濃度分別為 0、0.25%、0.50%、1.0%和2.0%，用1 mo1/L HC1或NaOH溶液調(diào)節(jié)培養(yǎng)基PH為篩選到的最佳PH，將培養(yǎng)溫度設(shè)定為篩選得到的最佳溫度，200 r/min下培養(yǎng)96 h，按照1.2.1中所述方法測定培養(yǎng)液中有機(jī)磷的含量，每組試驗(yàn)設(shè)置3個(gè)重復(fù)。

1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

采用 Exce1 2010進(jìn)行數(shù)據(jù)初步處理，利用SPSS 16.0和Origin 8.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2　結(jié)果與分析

2.1改良的NBRIP培養(yǎng)基和蒙金娜有機(jī)磷培養(yǎng)基的解磷能力比較

蠟狀芽孢桿菌CLY07在蒙金娜有機(jī)磷培養(yǎng)基和改良的NBRIP培養(yǎng)基上的解磷情況見圖1。在蒙金娜有機(jī)磷培養(yǎng)基上，接種有菌株的處理組的有機(jī)磷含量為26.65 mg/L，顯著高于對照組（P＜0.05）。在改良的NBRIP培養(yǎng)基上，處理組的有機(jī)磷含量為96.77 mg/L，極顯著高于對照組 （P＜0.01）。與蒙金娜有機(jī)磷培養(yǎng)基相比，蠟狀芽孢桿菌CLY07在改良的NBRIP培養(yǎng)基上的解磷能力更強(qiáng)。因此本試驗(yàn)的后續(xù)研究均選用改良的NBRIP培養(yǎng)基對該菌株進(jìn)行培養(yǎng)。這暗示改良的NBRIP培養(yǎng)基更利于CLY07菌株解磷能力的發(fā)揮。

圖1　2種不同培養(yǎng)基對菌株解磷能力的影響Fig.1　Effect of the two different cu1ture media on the PhosPhate so1ubi1izing caPacity

2.2不同卵磷脂添加量對蠟狀芽孢桿菌CLY07解磷能力的影響

本試驗(yàn)采用液體培養(yǎng)法測定蠟狀芽孢桿菌CLY07的解有機(jī)磷能力，卵磷脂是改良的NBRIP培養(yǎng)基中的唯一磷元素來源。不同卵磷脂添加量對菌株解磷能力的影響見圖2。

圖2　不同卵磷脂添加量對菌株解磷能力的影響Fig.2　Effect of the addition of 1ecithin on the PhosPhate so1ubi1izing caPacity

由圖2可以看出，培養(yǎng)基中卵磷脂的添加量不同對該菌株的解磷能力有影響，總體呈現(xiàn)出隨著卵磷脂添加量的增加，菌株解磷能力呈先增加后減少的趨勢，當(dāng)卵磷脂的添加量在0.20 g時(shí)，該菌株的解磷能力最大，顯著高于其他組（P＜0.05），可溶性磷含量達(dá)113.37 mg/L，因此確定培養(yǎng)基中卵磷脂添加量為0.20 g。

2.3培養(yǎng)基優(yōu)化對蠟狀芽孢桿菌CLY007解磷能力的影響

培養(yǎng)基是微生物生長代謝過程中所需碳源、氮源以及其他營養(yǎng)成分的主要來源。由于微生物對不同種類的碳源、氮源等營養(yǎng)物質(zhì)的利用情況有差異，因此這些物質(zhì)會(huì)對微生物的生長代謝產(chǎn)生一定影響，培養(yǎng)基優(yōu)化對菌株解磷能力的影響見圖3。

圖3　培養(yǎng)基優(yōu)化對菌株解磷能力的影響Fig.3　Effect of the oPtimization of cu1ture medium on the PhosPhate so1ubi1izing caPacity

分別選用硫酸銨、牛肉膏、酵母膏、蛋白胨、硝酸鉀和硝酸銨為氮源時(shí)，蠟狀芽孢桿菌CLY07的解磷能力表現(xiàn)出一定的差異。由圖3（a）可以看出，當(dāng)硫酸銨為氮源時(shí)，該菌株的解磷能力顯著高于其他5種氮源（P＜0.05），其次是硝酸銨，解磷能力最小的是硝酸鉀。由此推測銨態(tài)氮可能較容易被蠟狀芽孢桿菌CLY07所利用。因此選用硫酸銨作為蠟狀芽孢桿菌CLY07的最適氮源。

由圖3（b）可以看出，當(dāng)分別選用蔗糖、甘露糖、果糖、可溶性淀粉、麥芽糖和葡萄糖作為改良的NBRIP培養(yǎng)基的碳源時(shí)，蠟狀芽孢桿菌CLY07的解磷能力出現(xiàn)差異。葡萄糖作為碳源時(shí)，該菌株的解磷能力顯著高于其他5種碳源 （P＜0.05），其次為甘露糖、麥芽糖和果糖，最后是蔗糖和可溶性淀粉。由此可以得出葡萄糖為蠟狀芽孢桿菌CLY07的最適碳源。

蠟狀芽孢桿菌CLY07的解磷能力不僅受到培養(yǎng)基中碳源和氮源種類的影響，從圖3（c）可看出，碳氮比對該菌株的溶磷能力也有明顯的影響。隨著碳氮比的增加，該菌株的解磷能力呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢。當(dāng)碳氮比為20/1時(shí)，該菌株的解磷能力達(dá)到最小；當(dāng)碳氮比增加到60/1時(shí)解磷能力達(dá)到最大，均高于其他處理，但與80/1差異不顯著，與其他3組差異顯著（P＜0.05）。培養(yǎng)基的碳氮比偏小時(shí)更利于細(xì)菌菌株細(xì)胞的生長，而且硫酸銨相對葡萄糖價(jià)格低廉，綜合考慮選取60/1作為最適碳氮比。

2.4發(fā)酵條件對蠟狀芽孢桿菌CLY07解磷能力的影響

溫度對于微生物的生長代謝發(fā)揮重要作用，當(dāng)微生物處于最適溫度范圍內(nèi)，其生長代謝活動(dòng)較為旺盛，一旦超出這個(gè)范圍，生長代謝就會(huì)下降乃至停止。由圖4（a）所示，培養(yǎng)溫度變化對蠟狀芽孢桿菌CLY07的解磷能力有明顯影響。當(dāng)培養(yǎng)溫度為30℃時(shí)，該菌株的解磷能力最大，顯著高于其他4組溫度（P＜0.05），培養(yǎng)基中的可溶性磷含量達(dá)85.43 mg/L。培養(yǎng)溫度低于25℃時(shí)，該菌株的解磷能力較弱；培養(yǎng)溫度由25℃升高至30℃時(shí)，從圖中可以看出菌株的解磷能力處于不斷增長的過程；溫度超過30℃以后，菌株的解磷能力開始下降。

在微生物培養(yǎng)的過程中，PH值對微生物的生長代謝也有很大影響，由圖4（b）可以看出，培養(yǎng)基的PH值為7.0時(shí)，蠟狀芽孢桿菌CLY07的解磷能力最大，且顯著高于其他PH值（P＜0.05），培養(yǎng)基中的有機(jī)磷含量為66.70 mg/L。當(dāng)PH值低于5.0和高于9.0時(shí)，該菌株的解磷能力較低，說明培養(yǎng)基的PH值過酸或者過堿都會(huì)明顯的抑制該菌株的解磷能力。該菌株對培養(yǎng)環(huán)境的PH適應(yīng)范圍較窄，最適解磷PH為7.0。

圖4　溫度和pH對菌株解磷能力的影響Fig.4　Effect of the temPerature and PH on the PhosPhate so1ubi1izing caPacity

不同種類的微生物在培養(yǎng)過程中對氧氣有不同的需求量，因此培養(yǎng)基中的溶氧量會(huì)對微生物的生長代謝產(chǎn)生一定的影響。由圖5（a）可以看出，當(dāng)選用100 mL三角瓶對蠟狀芽孢桿菌CLY07進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，隨著培養(yǎng)基裝液量的增加，蠟狀芽孢桿菌CLY07的解磷能力呈現(xiàn)下降趨勢。當(dāng)100 mL三角瓶的裝液量為20 mL時(shí)，該菌株的解磷能力最大，顯著高于其他組 （P＜0.05）。以上結(jié)果表明CLY07菌株屬于好氧型細(xì)菌，其生長代謝過程對氧氣的需求量較大。當(dāng)培養(yǎng)環(huán)境中氧氣不足時(shí)，CLY07菌株的生長會(huì)受到影響，從而對解磷能力起到一定抑制作用。

本試驗(yàn)所選用的蠟狀芽孢桿菌CLY07菌株分離自南方紅豆杉根際，在復(fù)雜的土壤環(huán)境中，土壤的鹽度在一定程度上也會(huì)對菌株的生長代謝產(chǎn)生影響。基于此本試驗(yàn)分別向培養(yǎng)基中加入了不同百分比的NaC1，研究了不同鹽度對蠟狀芽孢桿菌CLY07解磷能力的影響。由圖5（b）可以看出，當(dāng)培養(yǎng)基中不加入NaC1時(shí)，該菌株的解磷能力最大，顯著高于其他組 （P＜0.05）。隨著所加NaC1百分比的增加，該菌株的解磷能力在不斷下降。該結(jié)果與2.1中蠟狀芽孢桿菌CLY07在兩種培養(yǎng)基（蒙金娜有機(jī)磷培養(yǎng)基和改良的NBRIP培養(yǎng)基）上解磷效果的差異剛好相符，該菌株在蒙金娜有機(jī)磷培養(yǎng)基上的解磷能力低于改良的NBRIP培養(yǎng)基，前者培養(yǎng)基組分中含有NaC1，而后者則不含NaC1。由此可以推測土壤中的鹽度越低越有利于蠟狀芽孢桿菌CLY07的解磷代謝過程。

圖5　溶氧量和鹽度對菌株溶磷能力的影響Fig.5　Effect of the disso1ving oxygen amount and sa1inity on the PhosPhate so1ubi1izing caPacity

3　結(jié)論與討論

本試驗(yàn)嘗試采用改良的NBRIP培養(yǎng)基對蠟狀芽孢桿菌CLY07的解有機(jī)磷能力進(jìn)行研究，但該培養(yǎng)基是否適用于其他解有機(jī)磷微生物還有待進(jìn)一步研究。微生物的解磷能力主要是由其先天的遺傳信息所決定，但是也會(huì)受到后期培養(yǎng)環(huán)境（溫度、PH、鹽度、溶氧量等）和培養(yǎng)基中主要營養(yǎng)物質(zhì)（碳源、氮源、碳氮比等）的影響。不同的解磷微生物其解磷特性存在著較大的差異［9］。

1）異養(yǎng)微生物的主要能量來源是培養(yǎng)基中的碳水化合物，所以碳源的種類對微生物的生長和代謝會(huì)產(chǎn)生影響。張偉偉等［10］的結(jié)果表明以葡萄糖作為碳源時(shí)，其所研究的一株膠質(zhì)芽孢桿菌的解磷能力最大；陳令等［11］的研究也表明選用葡萄糖作為碳源，枯草芽孢桿菌 HL-1的解磷能力最大。本試驗(yàn)的結(jié)果與這些報(bào)道是相一致的。當(dāng)葡萄糖作為蠟狀芽孢桿菌CLY07的碳源時(shí)，其解磷能力最大，當(dāng)其他幾種物質(zhì)作為碳源時(shí)，其解磷能力明顯降低，可能原因是葡萄糖作為一種簡單單糖，容易被蠟狀芽孢桿菌CLY07所代謝利用。因此葡萄糖是該菌株的最適碳源。

2）大量試驗(yàn)結(jié)果表明不同微生物解磷時(shí)所需的氮源存在差異，氮源的種類會(huì)影響微生物的解磷能力。本試驗(yàn)中蠟狀芽孢桿菌CLY07的最適氮源為硫酸銨，與閆小梅等［12］的研究結(jié)果一致。劉輝等［13］在對一株熒光假單胞菌溶磷特性的研究中也表明硫酸銨為最適氮源。目前，解磷微生物氮源的研究主要是集中在銨態(tài)氮和硝態(tài)氮兩大類上，有研究表明解磷微生物主要是通過與外界進(jìn)行銨態(tài)氮與質(zhì)子之間的交換來完成解磷這一代謝過程［14］。但是也有試驗(yàn)表明解磷微生物在以硝態(tài)氮為氮源時(shí)解磷能力更強(qiáng)［15］。據(jù)報(bào)道，碳源和氮源還對解磷微生物產(chǎn)生有機(jī)酸的種類和濃度有影響［16-17］。趙小蓉等［18］的試驗(yàn)結(jié)果表明有些微生物的解磷效果與其代謝過程產(chǎn)生的某些特定酸性物質(zhì)有關(guān)系。本試驗(yàn)中供試菌株的最適氮源為硫酸銨，屬于銨態(tài)氮，推測其可能在解磷過程中與外界進(jìn)行質(zhì)子交換，從而改變培養(yǎng)基的PH，因此在后續(xù)的解磷機(jī)理研究中應(yīng)開展培養(yǎng)基PH的動(dòng)態(tài)監(jiān)測。

3）微生物的解磷能力不僅與碳源和氮源的種類有關(guān)，還與兩者之間的比例有關(guān)系。I11mer等［19］的研究表明培養(yǎng)基中氮的濃度與解磷微生物釋放磷的含量存在一定關(guān)系，在一定程度上通過改變培養(yǎng)基中氮的濃度，有可能會(huì)使解磷菌釋放較多的有效態(tài)磷。一方面可能是碳氮比不合適影響了微生物對磷元素的吸收，另一方面也可能是銨態(tài)氮替代K+，從而影響了解磷菌株對磷的吸收。本試驗(yàn)中的蠟狀芽孢桿菌CLY07的解磷能力隨著碳氮比的增加而不斷增加，碳氮比60/1時(shí)解磷能力最大；當(dāng)碳氮比增加到一定程度時(shí)（80/1），CLY07菌株解磷能力隨著碳氮比的增加而減少。結(jié)果說明碳氮比60/1最有利于CLY07菌株解磷能力的發(fā)揮。

4）生長環(huán)境條件的變化能夠影響解磷微生物的解磷能力。本試驗(yàn)中的蠟狀芽孢桿菌CLY07在30℃，PH為7.0，裝液量為1/5，不含NaC1的條件下解磷能力最大。由于培養(yǎng)溫度過高和過低都會(huì)影響菌株的生長代謝，從而影響該菌株的解磷效果。相關(guān)研究表明解有機(jī)磷菌是通過體內(nèi)產(chǎn)生一些降解酶來溶解周圍環(huán)境中的難溶性有機(jī)磷，當(dāng)培養(yǎng)環(huán)境的PH值適宜時(shí)能夠提高解有機(jī)磷菌株的解磷能力［20］。本試驗(yàn)中的蠟狀芽孢桿菌CLY07在過酸和過堿的條件下，其解磷能力都會(huì)有明顯下降，在實(shí)際推廣中應(yīng)注意考察土壤的酸堿性。

微生物的解磷這一代謝過程較為復(fù)雜，本試驗(yàn)僅是對蠟狀芽孢桿菌CLY07解有機(jī)磷能力受培養(yǎng)基條件和培養(yǎng)環(huán)境兩大方面的影響進(jìn)行了研究，對該菌株具體的解磷機(jī)理及實(shí)際在南方紅豆杉根際土壤環(huán)境中的相關(guān)調(diào)控機(jī)制還有待進(jìn)一步研究，以期為開發(fā)相關(guān)的微生物肥料提供充分的理論基礎(chǔ)。

［1］Yadav H，Gothwa1 R K，Nigam V K，et a1.OPtimization of cu1ture conditions for PhosPhate so1ubi1ization by a thermo-to1erant PhosPhate-so1ubi1izing bacterium Brevibaci11us sP.BISR-HY65 iso1ated from PhosPhate mines ［J］.Biocata1ysis and Agricu1tura1 Biotechno1ogy，2013，2（3）：217-225.

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（責(zé)任編輯張坤）

Study on OrganoPhosPhate-so1ubi1izing Characteristics of Bacillus cereus CLY07

Bai Bianxia1，2，Chen Yanbin1，2，Ren Jiahong1，2

（1.DePartment of Bio1ogica1 Sciences and Techno1ogy，Changzhi University，Changzhi Shanxi 046011，China；2.Eco1ogica1 and Environmenta1 Research Institute of Taihang Mountain，Changzhi Shanxi 046011，China）

The characteristics of organoPhosPhate-so1ubi1izing by Bacillus cereus CLY07 iso1ating from the rhizosPhere of Taχus chinensis var.mairei were studied and the modified NBRIP cu1ture medium was used.Moreover，the effects of 1ecithin content in cu1ture medium，carbon source，nitrogen source，carbon nitrogen ratio and environmenta1 conditions（cu1ture medium PH，temPerature，1iquid vo1ume and sa1inity，etc.）on the PhosPhate so1ubi-1izing caPacity of Bacillus cereus CLY07 were exP1ored.The resu1t was that the PhosPhate so1ubi1izing caPacity of Bacillus cereus CLY07 was better in the modified NBRIP cu1ture medium than in the Mengjinna organic cu1ture medium.The PhosPhate so1ubi1izing caPacity of Bacillus cereus CLY07 reached the Peak when the cu1ture was suPP1ied with g1ucose as carbon source，ammonium su1fate as nitrogen source and 60/1 as the carbon nitrogen ratio.The oP-tima1 cu1ture condition was the PH va1ue of 7.0，the temPerature of 30℃，without NaC1 and 20 mL f1uid cu1ture in 100 mL conica1 f1ask.The study showed that comPared with Mengjinna organic cu1ture medium，the modified NBRIP cu1ture medium was more suitab1e for the research of the PhosPhate so1ubi1izing caPacity of Bacillus cereus CLY07.In addition，cu1tivation environment affected the PhosPhate so1ubi1izing caPacity of Bacillus cereus CLY07.

Bacillus cereus CLY07，NBRIP cu1ture medium，PhosPhate so1ubi1izing caPacity，organoPhosPhate

S718.83

A

2095-1914（2016）04-0075-07

10.11929/j.issn.2095-1914.2016.04.013

2016-01-04

國家自然科學(xué)基金（31100471）資助；山西省高校重點(diǎn)學(xué)科建設(shè)專項(xiàng)資金項(xiàng)目（20111051，20131008）資助；山西省大學(xué)生創(chuàng)新項(xiàng)目（2013365）資助。
第1作者：白變霞（1987—），女，碩士生，助教。研究方向：森林微生物。Emai1：baibianxia08@126.com。

任嘉紅（1976—），女，博士后，教授。研究方向：森林微生物。Emai1：renjiahong@163.com。