關(guān)婧竹（鐵嶺市林業(yè)局，遼寧鐵嶺 112000）

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漆酶在石油污染土壤中生物修復的研究

關(guān)婧竹
（鐵嶺市林業(yè)局，遼寧鐵嶺 112000）

摘 要：文章通過研究不同油濃度污染土壤，經(jīng)過生物修復后土壤中的漆酶活性變化。結(jié)果表明：隨著油濃度的增加，土壤中漆酶的活性下降，土壤漆酶活性變化受油濃度影響顯著，不同濃度油污染土壤的修復，對漆酶都是呈上升趨勢。

關(guān)鍵詞：漆酶 土壤酶活性 生物修復 石油 污染土壤

土壤是人類賴以生存的自然資源，土壤環(huán)境一旦受到污染，其治理和恢復比大氣及水困難得多。生物修復是利用生物技術(shù)治理污染土壤的一種新方法。近年來，國際上對生物修復的研究十分活躍，有些國家已將此技術(shù)用于污染土壤的實際修復，并取得了顯著的成果［1］。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試品：20#重柴油。

供試土壤：試驗田0～20 cm表層草甸棕壤（表1、2）。

供試植物：草木樨狀黃耆，多年生草本。

1.2 試驗方法

試驗用Ф15 cm×20 cm陶瓷盆，每盆3 kg土。水分25%（80 ml水），細菌按60%的水分，稱重。周期125 d。進行預試驗，選擇水土比，溫度，pH值，反應(yīng)的時間最佳的試驗條件。

表1 土壤理化性質(zhì)測定結(jié)果

表2 土壤理化性質(zhì)測定結(jié)果 　?。╩g/100 g）

表3 不同油濃度污染土壤實施方案

表4 在不同油濃度下每個周期漆酶的活性

表5 漆酶活性與油濃度的相關(guān)分析

步驟1.取10 g土樣，加入25 ml蒸餾水，空氣震蕩浴150轉(zhuǎn)/min，25℃振蕩24 h取出。

步驟2.將混合溶液置于離心機中，8000轉(zhuǎn)/min離心5 min。

步驟3.將上清液過中速濾紙。

步驟4.取3 ml用0.2 mmol的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液配置的0.05 mmol的ABTS。

步驟5.將步驟3液體置于30℃水浴10 min，取3 ml該液體與3 mlABTS在旋渦混勻器中混勻5秒鐘，倒入比色杯中，置于420 nm的分光光度計中，記錄：初始吸光度值、1分鐘、2分鐘、3分鐘吸光度值。

2 結(jié)果與分析

由表4可知，在沒有修復前，各個油濃度的土壤漆酶活性普遍不高，只有2 g/kg油濃度時，漆酶活性較高；修復的第1個周期，漆酶在低油濃度有活性，在20 g/kg和50 g/kg漆酶無活性；第2個周期，各油濃度漆酶都有一定的活性；第3個周期，各油濃度漆酶活性都有提高，只有5 g/kg因其他因素測不到漆酶活性。

在未污染土壤中，3個周期漆酶活性變化不大；在2 g/kg油濃度本底值較高在第1周期下降，第2、第3周期有明顯上升；在5 g/kg油濃度漆酶活性變化不大，在10 g/kg、30 g/kg、50 g/kg漆酶活性，都是后一個比前一個周期有明顯提高，從整體看，低油濃度的土壤比高油濃度的土壤漆酶活性高。

由表5可知，土壤中漆酶活性變化很大，最大均值達到6.42，其中2 k/kg油濃度時，活性達到36.85，而最小的時候，測不到酶活。雙因素方差分析表明，漆酶活性變化受油濃度影響顯著。

3 結(jié)論

在植物修復前，隨著土壤中污染物油濃度的增加，土壤中漆酶活性下降。經(jīng)過生物修復后，土壤中的漆酶活性在第2周期要比第1周期高。土壤漆酶活性變化，受油濃度影響顯著，但不同濃度油污染土壤的漆酶活性是呈上升趨勢的。

參考文獻

［1］ 呂桂芬，趙吉，趙利，廖仰南.應(yīng)用土壤酶活性評價草原石油污染的初步研究.內(nèi)蒙古大學學報（自然科學版），1997，28（05）：687～691

［2］ 康從寶，劉巧，李清心，曲音波，高培基.中國生物化學與分子.生物學報，200 2，18（05）：638～642

［3］ 何為，詹懷宇，王習文，伍紅.一種改進的漆酶酶活檢測方法.華南理工大學學報（自然科學版），2003，（12）：46～49