丁良，原現(xiàn)軍，聞愛友,2，王堅,3，郭剛,4，李君風，王思然，白晰，邵濤*

(1.南京農業(yè)大學飼草調制加工與貯藏研究所，江蘇 南京210095；2.安徽科技學院動物科學學院，安徽 鳳陽233100；3.海南大學農學院，海南 ?？?70228； 4.山西農業(yè)大學動物科學技術學院，山西 太谷030801)

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添加劑對西藏啤酒糟全混合日糧青貯發(fā)酵品質及有氧穩(wěn)定性的影響

丁良1，原現(xiàn)軍1，聞愛友1,2，王堅1,3，郭剛1,4，李君風1，王思然1，白晰1，邵濤1*

(1.南京農業(yè)大學飼草調制加工與貯藏研究所，江蘇 南京210095；2.安徽科技學院動物科學學院，安徽 鳳陽233100；3.海南大學農學院，海南 ?？?70228； 4.山西農業(yè)大學動物科學技術學院，山西 太谷030801)

摘要：本試驗旨在評價布氏乳桿菌和雙乙酸鈉對西藏啤酒糟全混合日糧發(fā)酵品質和有氧穩(wěn)定性的影響。試驗設對照組(C)、布氏乳桿菌組(LB，106 cfu/g)和雙乙酸鈉組(SDA，0.5%)3個處理。青貯70 d后全部開窖，取樣分析發(fā)酵品質、營養(yǎng)和微生物成分，同時將剩余的發(fā)酵全混合日糧(TMR)暴露到空氣中，用多通道溫度記錄儀記錄溫度變化，并分別在有氧暴露第6，9和14天取樣分析，評定其有氧穩(wěn)定性。結果表明，各組具有較高的乳酸含量，較低的氨態(tài)氮/總氮和微量的丁酸含量，發(fā)酵品質良好，添加雙乙酸鈉提高了乳酸含量，顯著(P<0.05)降低了pH、氨態(tài)氮/總氮和丁酸含量，同時顯著(P<0.05)提高了干物質回收率，但粗蛋白、粗灰分、粗脂肪、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量各組無顯著差異；布氏乳桿菌處理組顯著(P<0.05)降低了乳酸、粗蛋白含量和干物質回收率，顯著(P<0.05)提高了pH和氨態(tài)氮/總氮值。在有氧暴露14 d內，各組pH緩慢上升，且溫度未超過環(huán)境溫度2 ℃，顯示有較高的有氧穩(wěn)定性。添加布氏乳桿菌和雙乙酸鈉均在不同程度上降低了霉菌和酵母菌數(shù)量，對啤酒糟TMR有氧穩(wěn)定性有積極的改善效果，其中雙乙酸鈉的效果優(yōu)于布氏乳桿菌。綜合考慮，在西藏地區(qū)生產(chǎn)啤酒糟發(fā)酵TMR時可添加0.5%的雙乙酸鈉，既能改善發(fā)酵品質，又能提高其有氧穩(wěn)定性。

關鍵詞：布氏乳桿菌；雙乙酸鈉；全混合日糧；發(fā)酵品質；有氧穩(wěn)定性

發(fā)酵全混合日糧(fermented total mixed ration, FTMR)，又稱TMR青貯飼料，是TMR在厭氧條件下發(fā)酵而成的飼料，可為奶牛提供營養(yǎng)均衡的日糧，維護瘤胃健康，減少奶牛的發(fā)病率，提高其生產(chǎn)性能。目前，國內外有許多研究者將食品副產(chǎn)物如啤酒糟、豆腐渣、蘑菇渣、綠茶渣等用于發(fā)酵TMR生產(chǎn)中，獲得了發(fā)酵品質好、有氧穩(wěn)定性高的發(fā)酵TMR[1-2]。奶牛養(yǎng)殖業(yè)是西藏畜牧業(yè)的重要組成部分，在西藏畜牧業(yè)經(jīng)濟中有著不可替代的作用[3]。近年來，隨著西藏人口的增加，奶牛養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴大，單純依賴于天然和人工草地的生產(chǎn)力已經(jīng)不能滿足奶牛養(yǎng)殖業(yè)的需求，因此充分高效地利用西藏當?shù)氐拇诛暳腺Y源，推廣示范發(fā)酵全混合日糧的生產(chǎn)技術，對促進西藏奶牛業(yè)的進一步發(fā)展具有重要的現(xiàn)實意義。西藏地區(qū)由于人口分布稀疏，交通運輸不便，加上農牧民不懂得科學的飼喂方式，發(fā)酵TMR在分裝、運輸以及飼喂過程中易引起腐敗變質[4]，因此如何提高發(fā)酵TMR的有氧穩(wěn)定性，防止發(fā)酵TMR的有氧腐敗，直接影響著西藏地區(qū)發(fā)酵TMR技術的推廣。

啤酒是西藏人民最喜愛的飲品之一，在生產(chǎn)過程中伴隨著大量的啤酒糟生成，資源豐富，啤酒糟營養(yǎng)價值高，含有豐富的粗蛋白和B族維生素，但水分含量高，難以長期保存，利用其作為發(fā)酵TMR原料的一部分，既可以提高發(fā)酵TMR的營養(yǎng)價值，又擴大了飼料來源，并達到長期保存的目的。布氏乳桿菌(Lactobacillusbuchneri，LB)作為一種異型乳酸菌，在發(fā)酵過程中能產(chǎn)生具有抗真菌作用的乙酸，抑制酵母菌的活性，從而提高青貯飼料的有氧穩(wěn)定性。Filya[5]指出在青貯玉米(Zeamays)中添加布氏乳桿菌能夠產(chǎn)生高水平的乙酸，抑制酵母菌的生長繁殖，延遲有氧腐敗時間。雙乙酸鈉(sodium diacetate，SDA)是乙酸的衍生物，具有與乙酸相似的生物學功效，因其具有較強的殺菌能力，添加到青貯飼料中可以有效地抑制酵母和霉菌的生長，提高青貯飼料的有氧穩(wěn)定性。張新慧等[6]在青貯玉米時添加0.4%的雙乙酸鈉，顯著提高了玉米青貯飼料的有氧穩(wěn)定性。

本試驗旨在研究添加布氏乳桿菌和雙乙酸鈉對啤酒糟TMR發(fā)酵品質和有氧穩(wěn)定性的影響，為西藏地區(qū)優(yōu)質發(fā)酵TMR的生產(chǎn)提供理論依據(jù)和技術支撐，促進當?shù)啬膛ｐB(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

1材料與方法

1.1試驗材料

TMR由箭筈豌豆(Viciasativa)、全株燕麥(Avenasativa)、青稞(Hordeumvulgare)秸稈、啤酒糟和精料配制而成。箭筈豌豆、燕麥和青稞種植于西藏日喀則地區(qū)草原工作站試驗地(29.27° N, 88.88° E)，該地區(qū)年平均降水量為420 mm，年平均氣溫為6.3 ℃，每年平均有207個霜凍日。材料草于2014年9月24日刈割，箭筈豌豆處于結莢期，全株燕麥處于乳熟期，青稞秸稈為青稞(含葉片)去除籽實后的秸稈；啤酒糟來自拉薩啤酒廠；精料[主要包括玉米粉、菜籽粕、全棉籽、玉米酒糟(DDGS)、小麥麩等]由西藏拉薩新希望飼料有限公司提供。

布氏乳桿菌添加劑，由南京農業(yè)大學飼草調制加工與貯藏研究所研制；雙乙酸鈉為食品級添加劑，含量99%，由晉州冀容氨基酸有限公司生產(chǎn)。

1.2試驗設計

試驗采用完全隨機設計，設對照組(C)，布氏乳桿菌組(LB，106cfu/g)和雙乙酸鈉組(SDA，0.5%)，所有添加劑都用水稀釋，對照組加入與添加劑組等量的水，添加量以鮮重為基礎。青貯70 d后打開全部實驗室青貯窖，一部分用于測定發(fā)酵品質，另一部分用于評定有氧穩(wěn)定性，分別在有氧暴露第6，9和14天取樣分析。每個處理各個時間點5個重復，共計60個實驗室青貯窖。

1.3試驗方法

1.3.1發(fā)酵TMR的調制箭筈豌豆、燕麥和青稞秸稈均用鍘刀切成1～2 cm后，按照試驗設計與精料充分混合均勻后，分別將布氏乳桿菌和雙乙酸鈉均勻噴灑在TMR飼料上，并裝填滿實驗室青貯窖，壓實后蓋上內外蓋，并用膠帶密封，置于室溫下保存。實驗室青貯窖為容積10 L的圓柱狀、有內外蓋、密封性能良好的特制塑料桶。

1.3.2樣品處理青貯70 d后打開實驗室青貯窖，取出全部發(fā)酵TMR充分混勻，采用四分法稱取350 g放入1 L的廣口三角瓶中，加入700 g的去離子水，4 ℃浸提24 h，然后通過2層紗布和定性濾紙過濾，并將浸提液置于-20 ℃冷凍保存待測。浸提液用來測定pH、乳酸、氨態(tài)氮、揮發(fā)性脂肪酸和乙醇。稱取300 g混合均勻后的發(fā)酵TMR烘干，用于測定干物質、粗蛋白、水溶性碳水化合物、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、粗脂肪和粗灰分等化學成分[7]。

1.3.3測定項目及分析方法干物質(dry matter，DM)、粗蛋白(crude protein，CP)、粗脂肪(ether extract，EE)和粗灰分(crude ash，Ash)采用AOAC方法測定[8]；干物質回收率(dry matter recovery，DMR)按TMR發(fā)酵前后重量和干物質含量計算；中性洗滌纖維(neutral detergent fiber，NDF)和酸性洗滌纖維(acid detergent fiber，ADF)采用范氏纖維測定法[9]，其中NDF需加入耐高溫α淀粉酶和亞硫酸鈉；非結構性碳水化合物(NFC)依據(jù)NRC(2001)公式計算(100-CP-NDF-EE-Ash)[10]；pH用HANNA pH 211型pH計測定；緩沖能(buffer capacity，BC)用鹽酸、氫氧化鈉滴定法測定[9]；水溶性碳水化合物(water soluble carbohydrate，WSC)采用蒽酮-硫酸比色法測定[9]；氨態(tài)氮(ammonia nitrogen，AN)采用苯酚-次氯酸鈉比色法測定[9]；乳酸(lactic acid，LA)、揮發(fā)性脂肪酸(volatile fatty acids，VFAs)和乙醇(alcohol)采用安捷倫1260高效液相檢測系統(tǒng)，配備示差檢測器(Carbomix?H-NP5，55 ℃，2.5 mmol/L H2SO4，0.5 mL/min)。乳酸菌、好氧性微生物、酵母菌和霉菌分別采用乳酸細菌培養(yǎng)基(MRS)(de Man，Rogosa，Sharpe)、瓊脂培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂(nutrient agar，國藥集團化學試劑有限公司)和馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(potato dextrose agar，上海盛思生化科技有限公司)。乳酸菌用厭氧培養(yǎng)箱，30 ℃培養(yǎng)3 d；好氧性微生物、酵母菌和霉菌用生化培養(yǎng)箱，30 ℃培養(yǎng)3 d[9]。

1.3.4有氧穩(wěn)定性分析青貯70 d后打開全部實驗室青貯窖，將每個青貯窖中所有發(fā)酵TMR取出無壓實裝填至20 L的敞口聚乙烯塑料桶中，桶口用雙層紗布包裹，防止果蠅等其他雜質污染和水分散失，空氣可自由進入聚乙烯桶中，置于室溫條件下保存。將多通道溫度記錄儀(MDL-1048A高精度溫度記錄儀，上海天賀自動化儀表有限公司)多個探頭分別放置于聚乙烯桶的幾何中心，同時在環(huán)境中放置6個探頭，用于測定環(huán)境溫度，每隔30 min記錄一次溫度。如果樣品溫度高于環(huán)境溫度2 ℃，說明發(fā)酵TMR開始腐敗變質。在有氧放置6，9和14 d后取樣分析有機酸、氨態(tài)氮、水溶性碳水化合物和微生物數(shù)量的動態(tài)變化。

1.4數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計

采用SAS 9.2統(tǒng)計軟件進行方差分析(ANOVA)，TMR發(fā)酵品質的數(shù)據(jù)采用單因素方差分析，有氧穩(wěn)定性數(shù)據(jù)采用雙因素方差分析，并用Tukey’s方法對處理間及有氧暴露天數(shù)間數(shù)據(jù)進行多重比較(P<0.05)。

2結果與分析

2.1啤酒糟TMR原料的營養(yǎng)及微生物成分

TMR各原材料的營養(yǎng)成分及緩沖能見表1，與其他材料相比，啤酒糟具有最高的粗蛋白及最低的干物質和粗灰分含量，箭筈豌豆和全株燕麥分別具有高的緩沖能和水溶性碳水化合物含量，青稞秸稈顯示最高的干物質、NDF、ADF含量及最低的粗蛋白含量。

TMR的原料組成、營養(yǎng)及微生物成分見表2。

表1　TMR原材料營養(yǎng)成分和緩沖能Table 1　Nutritional compositions and buffering capacity of original material of TMR

FW，鮮重Fresh weight；DM，干物質Dry matter；下同The same below.

表2　TMR的原料組成、營養(yǎng)和微生物成分Table 2　Ingredient ratio and the nutritional and microorganism compositions of TMR

2.2添加劑對啤酒糟TMR發(fā)酵品質、營養(yǎng)和微生物成分的影響

如表3所示，青貯70 d后，與對照組相比， LB組顯著(P<0.05)提高了pH，而SDA組顯著(P<0.05)降低了pH。相應地，LB組乳酸含量顯著(P<0.05)低于對照組和SDA組。添加劑組顯著(P<0.05)提高了乙酸含量，其中SDA組乙酸含量又顯著(P<0.05)高于LB組，但LB組和SDA組乳酸/乙酸值顯著(P<0.05)低于對照組。與對照組相比，添加劑組顯著(P<0.05)提高了丙酸和總揮發(fā)性脂肪酸含量，顯著(P<0.05)降低了丁酸和乙醇含量。LB組氨態(tài)氮/總氮顯著(P<0.05)高于對照組，而SDA組顯著(P<0.05)低于對照組。LB組干物質、粗蛋白和水溶性碳水化合物含量顯著(P<0.05)低于對照組和SDA組，SDA組和對照組無顯著(P>0.05)差異。與對照組相比，SDA組顯著(P<0.05)提高了干物質回收率，而LB組顯著(P<0.05)降低了干物質回收率。各組粗灰分、粗脂肪、酸性洗滌纖維和中性洗滌纖維含量無顯著(P>0.05)差異。青貯70 d后，各組乳酸菌數(shù)量在6.8～7.3 log cfu/g FW之間，其中LB組乳酸菌數(shù)量顯著(P<0.05)低于對照組和SDA組。添加劑組均降低了好氧性微生物、酵母菌和霉菌的數(shù)量，其中SDA組酵母和霉菌數(shù)量低于LB組(<2 log cfu/g FW)。

表3　青貯70 d后TMR發(fā)酵品質、營養(yǎng)和微生物成分Table 3　The fermentation qualities, nutritional chemical and microbial compositions of TMR after 70 days of fermentation

C：對照組 Control；LB：布氏乳桿菌組Lactobacillusbuchneri；SDA：雙乙酸鈉組 Sodium diacetate.同行不同大寫字母表示不同處理間差異顯著(P<0.05)，下同。Means followed by different letters within rows denote significant differences atP<0.05, the same below.

2.3添加劑對啤酒糟發(fā)酵TMR有氧穩(wěn)定性的影響

各組發(fā)酵TMR有氧暴露期間化學及微生物成分變化見表4。隨著有氧暴露時間的延長，各組乳酸含量呈逐漸下降的變化趨勢，其中有氧暴露9 d顯著(P<0.05)下降。相應地，各組pH逐漸上升，但上升幅度較小，有氧暴露期間無顯著變化(P>0.05)。各組乙酸含量隨著有氧暴露時間的延長呈下降趨勢，但添加劑組顯著(P<0.05)高于對照組。各組乙醇含量顯著(P<0.05)下降，SDA組和LB組分別在有氧暴露6和9 d未檢測到乙醇。各組水溶性碳水化合物含量隨著有氧暴露時間的延長呈下降趨勢，相反地各組氨態(tài)氮/總氮呈上升趨勢。在有氧暴露期間，各組乳酸菌數(shù)量均呈下降趨勢，其中LB組顯著(P<0.05)低于SDA組和對照組。好氧性微生物數(shù)量呈上升趨勢，添加劑組顯著低于(P<0.05)對照組。對照組酵母菌和霉菌數(shù)量隨著有氧暴露時間的延長逐漸上升，而添加劑組逐漸降低，整個有氧暴露期間SDA組酵母菌和霉菌數(shù)量始終低于LB組，均在可測水平以下。

表4　發(fā)酵TMR有氧暴露期間化學及微生物成分變化Table 4　Chemical and microbial composition variation of different FTMR during exposed to air

注：同行不同大寫字母或同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)；T:處理效應；D:有氧暴露天數(shù)效應；T×D:處理與有氧暴露天數(shù)相互作用效應。

Note: Values in the same row (A-D) or in the same column (a-d) with different following letters are significant differences (P<0.05); T: Effect of treatment; D: Effect of aerobic exposure day; T×D: Interaction between treatment and aerobic exposure day.

有氧穩(wěn)定性定義為當TMR暴露于空氣中溫度高于環(huán)境溫度2 ℃時所記錄的時間(h)。由圖1可知各組有氧暴露后穩(wěn)定的時間均超過336 h，即在有氧暴露14 d內各組溫度未超過環(huán)境溫度2 ℃，未發(fā)生有氧腐敗。

圖1　發(fā)酵TMR的有氧穩(wěn)定性Fig.1　Aerobic stability of fermentation TMR

3討論

3.1添加劑對啤酒糟TMR發(fā)酵品質的影響

經(jīng)過70 d的發(fā)酵，各組具有較高的乳酸含量(53.69～69.59 g/kg DM)，較低的氨態(tài)氮/總氮(66.08～78.92 g/kg TN)和微量的丁酸含量(0.46～0.78 g/kg DM)，pH值介于4.29～4.43之間，Catchpoole和Henzell[11]報道常規(guī)成功青貯的青貯飼料pH值應不高于4.2，乳酸含量介于30～130 g/kg DM之間，氨態(tài)氮/總氮值小于100 g/kg TN，丁酸含量小于2 g/kg DM。根據(jù)此標準，除了pH值未能降至4.2以下，其他指標均符合。許多研究證實[12-14]，干物質含量較高的材料青貯時pH值不必降到4.2以下也可使青貯飼料保存良好。本試驗中TMR青貯前干物質含量為563 g/kg FW，在這種干物質較高的條件下，植物細胞汁液變濃，滲透壓增加，導致某些有害微生物接近于生理干旱狀態(tài)，其活性被抑制，而乳酸菌相對更能耐受低水分條件，仍能保持活性，在一定程度上進行發(fā)酵，其結果是在pH相對較高條件下也能獲得品質優(yōu)良的青貯飼料[15]。

添加雙乙酸鈉提高了乳酸含量，顯著(P<0.05)降低了pH和丁酸含量。這是因為雙乙酸鈉能有效地抑制有害微生物的生長繁殖(如丁酸菌，酵母菌及霉菌)，從而使青貯過程中乳酸菌成為優(yōu)勢菌，產(chǎn)生大量的乳酸以降低pH，提高發(fā)酵品質。此外雙乙酸鈉是含有一個氫離子和鈉離子的乙酸鹽，其解離的氫離子也有利于青貯飼料pH的降低。而相對較低的pH條件下，可以更有效地抑制植物蛋白酶對蛋白質和氨基酸的水解，減少氨態(tài)氮的產(chǎn)生，因此雙乙酸鈉組的氨態(tài)氮/總氮顯著(P<0.05)低于對照組。與對照組相比，添加劑組顯著(P<0.05)提高了乙酸含量，其中雙乙酸鈉組乙酸含量在各組中最高，這可能是因為雙乙酸鈉有兩個乙酸根，在自然狀態(tài)下可解離為一分子乙酸和一分子乙酸鹽，因此乙酸濃度高于其他組。與對照組相比，添加雙乙酸鈉顯著(P<0.05)提高了干物質回收率，而對粗蛋白、粗灰分、粗脂肪、NDF和ADF含量無顯著(P>0.05)影響，說明添加雙乙酸鈉有效地抑制了有害微生物對青貯料中營養(yǎng)成分的消耗，較大程度地保留了營養(yǎng)物質，進一步改善了發(fā)酵品質。國衛(wèi)杰等[16]研究發(fā)現(xiàn)，添加0.3%的雙乙酸鈉可以顯著降低裹包TMR的pH和氨態(tài)氮/總氮。添加布氏乳桿菌顯著降低了(P<0.05)乳酸含量，顯著(P<0.05)提高了pH和氨態(tài)氮/總氮。這是由于布氏乳桿菌屬于異型發(fā)酵乳酸菌，利用水溶性碳水化合物和乳酸產(chǎn)生揮發(fā)性脂肪酸、二氧化碳等，造成發(fā)酵TMR干物質和營養(yǎng)成分的損失[17]，這也體現(xiàn)在布氏乳桿菌組干物質回收率和粗蛋白含量顯著(P<0.05)低于對照組，這與Kleinschmit和Kung[18]試驗結果一致。

3.2添加劑對啤酒糟TMR有氧穩(wěn)定性的影響

各組有氧暴露14 d內溫度均未超過環(huán)境溫度2 ℃，同時pH和氨態(tài)氮/總氮上升幅度較小，乳酸和水溶性碳水化合物含量下降幅度較小，由此說明各組在有氧暴露期間具有較高的有氧穩(wěn)定性。一般情況下，青貯飼料的腐敗變質主要由酵母菌增殖引起，McDonald等[19]曾提出當青貯飼料中酵母菌數(shù)量大于1×105cfu/g時，青貯飼料易發(fā)生腐敗變質，本試驗中對照組發(fā)酵70 d后酵母菌數(shù)量明顯減少，且在有氧暴露期間酵母菌數(shù)量增幅較小，從未超過1×105cfu/g，因而減少了有氧腐敗的幾率。其二與乙酸含量有關。Driehuis等[20]研究發(fā)現(xiàn)乙酸是一種抑制有氧暴露期間青貯飼料酵母菌和霉菌生長最有效的物質，并且乙酸濃度在36.0～50.0 g/kg DM能夠有效地抑制有氧腐敗。本試驗中發(fā)酵70 d后對照組具有較高的乙酸含量，達36.14 g/kg DM，足以抑制酵母菌和霉菌的生長，因而獲得了較高的有氧穩(wěn)定性。

雙乙酸鈉通常是直接作用于青貯飼料中的有害微生物，抑制細菌、霉菌、酵母菌等微生物生長繁殖，從而提高青貯飼料的有氧穩(wěn)定性，而布氏乳桿菌作為添加劑提高青貯飼料的有氧穩(wěn)定性是通過其利用乳酸生成乙酸從而抑制酵母菌的生長而實現(xiàn)的。試驗結果表明，在發(fā)酵TMR中分別添加2種添加劑都在不同程度上抑制了霉菌和酵母菌的數(shù)量，但相比較而言，雙乙酸鈉的抑菌效果更明顯。其原因可能和TMR原材料干物質含量有關，Nishino和Touno[21]研究發(fā)現(xiàn)布氏乳桿菌對高水分青貯飼料的作用效果要優(yōu)于凋萎青貯飼料，說明布氏乳桿菌的活性與青貯飼料干物質含量有關，過高的干物質含量可能會抑制布氏乳桿菌的活性。綜上所述，添加布氏乳桿菌雖降低了霉菌和酵母菌數(shù)量，提高了TMR的有氧穩(wěn)定性，但在一定程度上造成TMR干物質和營養(yǎng)成分的損失，而添加雙乙酸鈉不僅提高了TMR的發(fā)酵品質，而且在提高有氧穩(wěn)定性效果上優(yōu)于布氏乳桿菌。

4結論

在西藏地區(qū)生產(chǎn)啤酒糟發(fā)酵TMR時可添加0.5%的雙乙酸鈉，既能改善TMR發(fā)酵品質，又能提高其有氧穩(wěn)定性。

References：

[1]Wang F, Nishion N. Ensiling of soybean curd residue and wet brewer grain with or without other feed as a total mixed ration. Journal of Dairy Science, 2008, 91(6): 2380-2387.

[2]Makoto K, Masashi N. Ensiled green tea waste as partial replacement for soybean meal and alfalfa hay in lactating cows. Asian-Australasian Journal of Animal Science, 2004, 17(7): 960-966.

[3]He J. The present situation, difficulties and countermeasures of the development of animal husbandry in Tibet. The Science and Technology of Tibet, 2007, (5): 51-53.

[4]Chen L,Yuan X J, Shao T,etal. Effect of applying molasses and propionic acid on fermentation quality and aerobic stability of total mixed ration silage prepared with whole-plant corn in Tibet. Asian-Australasian Journal of Animal Science, 2014, 27(3): 349-356.

[5]Filya I. The effect ofLactobacillusbuchneriandLactobacillusplantarumon the fermentation, aerobic stability, and ruminal degradability of low dry matter corn and sorghum silages. Journal of Dairy Science, 2003, 86(11): 3575-3581.

[6]Zhang X H, Zhang Y G, He Y F. Effect of adding two types of sodium acetate compounds on corn silage quality and aerobic stability. Scientia Agricultura Sinica, 2008, 41(6): 1810-1815.

[7]Liu Q H, Li X Y, Li J F,etal. Effect of temperature and additives on fermentation and α-tocopherol and β-carotene content ofPennisetumpurpureumsilage. Acta Prataculturae Sinica, 2015, 24(7): 116-122.

[8]Helrich K C. Official Methods of Analysis of the AOAC (Volume 2)[M]. UK: Association of Official Analytical Chemists Inc, 1990.

[9]Yuan X J, Guo G, Shao T,etal. The effect of different additives on the fermentation quality,invitrodigestibility and aerobic stability of a total mixed ration silage. Animal Feed Science and Technology, 2015, 207: 41-50.

[10]National Referral Center (NRC). Nutrient Requirements of Dairy Cattle (7th revised edition)[M]. Washington, DC: National Academy Press, 2001.

[11]Catchpoole V R, Henzell E F. Silage and silage-making from tropical herbage species. Herbage Abstracts, 1971, 41(3): 213-221.

[12]Qiu X Y, Yuan X J, Guo G,etal. Effects of molasses and acetic acid on fermentation and aerobic stability of total mixed ration silage in Tibet. Acta Prataculturae Sinica, 2014, 23(6): 111-118.

[13]Wang Y, Yuan X J, Guo G,etal. Fermentation and aerobic stability of mixed ration forages in Tibet. Acta Prataculturae Sinica, 2014, 23(6): 95-102.

[14]Yuan X J, Yu C Q, Li Z H,etal. A study on fermentation quality of mixed silages of hulless barley straw and perennial ryegrass in Tibet. Acta Prataculturae Sinica, 2012, 21(4): 325-330.

[15]Qiu X, Guo G, Yuan X,etal. Effects of adding acetic acid and molasses on fermentation quality and aerobic stability of total mixed ration silage prepared with hulless barley straw in Tibet. Grassland Science, 2014, 60(4): 206-213.

[16]Guo W J, Wang J Q, Wang J,etal. Effect of the different levels of sodium diacetate supplementation on the storage of the baled TMR. Journal of Northwest A & F University, 2009, 37(12): 45-50.

[17]Lv W L, Diao Q Y, Yan G L. Effect ofLactobacillusbuchnerion the quality and aerobic stability of green corn-stalk silages. Acta Prataculturae Sinica, 2011, 20(3): 143-148.

[18]Kleinschmit D H, Kung L Jr. A meta-analysis of the effects ofLactobacillusbuchnerion the fermentation and aerobic stability of corn and grass and small-grain silages. Journal of Dairy Science, 2006, 89: 4005-4013.

[19]McDonald P, Hunderon A R, Heron S J E. The Biochemistry of Silage (2th edition)[M]. Aberystwyth: Cambrian Printers Ltd, 1991.

[20]Driehuis F, Elferink S J W H O, Wikselaar P G V. Fermentation characteristics and aerobic of grass silage inoculated withLactobacillusbuchneri, with or without homofermentative lactic acid bacteria. Grass and Forage Science, 2001, 56(4): 330-343.

[21]Nishino N, Touno E. Ensiling characteristics and aerobic stability of direct-cut and wilted grass silages inoculated withLactobacilluscaseiorLactobacillusbuchneri. Journal of the Science of Food and Agriculture, 2005, 85: 1882-1888.

參考文獻：

[3]何進. 西藏畜牧業(yè)發(fā)展的現(xiàn)狀、困難及對策. 西藏科技, 2007, (5): 51-53.

[6]張新慧, 張永根, 赫英飛. 添加兩種乙酸鈉鹽對玉米青貯品質及有氧穩(wěn)定性的影響. 中國農業(yè)科學, 2008, 41(6): 1810-1815.

[7]劉秦華, 李湘玉, 李君風, 等. 溫度和添加劑對象草青貯發(fā)酵品質、α生育酚和β胡蘿卜素的影響. 草業(yè)學報, 2015, 24(7): 116-122.

[12]邱曉燕, 原現(xiàn)軍, 郭剛, 等. 添加糖蜜和乙酸對西藏發(fā)酵全混合日糧青貯發(fā)酵品質及有氧穩(wěn)定性影響. 草業(yè)學報, 2014, 23(6): 111-118.

[13]王勇, 原現(xiàn)軍, 郭剛, 等. 西藏不同飼草全混合日糧發(fā)酵品質和有氧穩(wěn)定性的研究. 草業(yè)學報, 2014, 23(6): 95-102.

[14]原現(xiàn)軍, 余成群, 李志華, 等．西藏青稞秸稈與多年生黑麥草混合青貯發(fā)酵品質的研究. 草業(yè)學報, 2012, 21(4): 325-330.

[16]國衛(wèi)杰, 王加啟, 王晶, 等. 添加不同水平雙乙酸鈉對裹包TMR貯存效果的影響. 西北農林科技大學學報, 2009, 37(12): 45-50.

[17]呂文龍, 刁其玉, 閆貴龍. 布氏乳桿菌對青玉米秸青貯發(fā)酵品質和有氧穩(wěn)定性的影響. 草業(yè)學報, 2011, 20(3): 143-148.

DOI：10.11686/cyxb2015427

*收稿日期：2015-09-08；改回日期：2015-11-16

基金項目：中國科學院科技服務網(wǎng)絡計劃(STS)“西藏典型農業(yè)村(吉納村)草地農業(yè)體系建設與產(chǎn)業(yè)化示范”(KFJ-EW-STS-071)，國家星火計劃項目“優(yōu)質飼草種植與奶牛健康養(yǎng)殖技術集成與示范”(2013GA840003)，農業(yè)部成果轉化項目(2013GB2F40046)和“十二五”國家科技支撐計劃“藏北退化草地綜合整治技術與示范”(2011BAC09B03)資助。

作者簡介：丁良(1990-)，男，江蘇宜興人，在讀碩士。E-mail: 15251837709@163.com *通信作者Corresponding author. E-mail: taoshaolan@163.com

* 1Effects of additives on fermentation quality and aerobic stability of total mixedration silage containing wet brewers’grains in Tibet

DING Liang1, YUAN Xian-Jun1, WEN Ai-You1,2, WANG Jian1,3, GUO Gang1,4, LI Jun-Feng1,

WANG Si-Ran1, BAI Xi1, SHAO Tao1*

1.InstituteofEnsilingandProcessingofGrass,NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095,China; 2.CollegeofAnimalScience,AnhuiScienceandTechnologyUniversity,Fengyang233100,China; 3.CollegeofAgriculture,HainanUniversity,Haikou570228,China; 4.CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine,ShanxiAgriculturalUniversity,Taigu030801,China

Abstract:The aim of this study was to evaluate the effects of Lactobacillus buchneri (LB) and sodium diacetate (SDA) on the fermentation quality and aerobic stability of total mixedration (TMR) silage containing wet brewers’grains in Tibet. The treatments were as follows: control (no additives), LB (at 106 colony forming units/g fresh forage) and SDA (at 0.5% of fresh weight). All silos were opened after 70 days of ensiling, and a portion of silage was collected to analyze fermentation quality, and the chemical and microbial composition. A multi-channel temperature recorder was used to record the change in the temperature of the remaining silage during exposure to air, and the aerobic stability of silage samples was estimated after 6, 9 and 14 days of exposure to air. The results showed that all of the silages had good fermentation quality with high lactic acid contents, low ammonia/total nitrogen ratios, and low butyric acid contents. The addition of SDA increased the lactic acid content (P>0.05) and the dry matter recovery (P<0.05), and significantly (P<0.05) decreased the pH, ammonia/total nitrogen ratio, and butyric acid content, but did not significantly affect the crude protein content, ether extract, ash or neutral detergent fiber and acid detergent fiber contents. The addition of LB significantly (P<0.05) decreased the lactic acid content, crude protein content, and dry matter recovery, and significantly (P<0.05) increased the pH, and ammonia/total nitrogen ratio. During aerobic exposure for 14 d, the pH of all of the silages increased slowly, and the temperatures of the silages were no more 2 ℃ higher than ambient temperature, indicating that all of the TMR silages were highly stable under aerobic conditions. Treatment of the TMR silage with LB and SDA inhibited yeast and mold growth to different degrees, and improved the aerobic stability of TMR silage containing wet brewers’grains. The silage treated with SDA performed better than that treated with LB. These results indicated that adding SDA at 0.5% of fresh weight could not only improve the fermentation quality, but also the aerobic stability of TMR silage containing wet brewers’grains.

Key words:Lactobacillus buchneri; sodium diacetate; total mixed ration; fermentation quality; aerobic stability

http://cyxb.lzu.edu.cn

丁良， 原現(xiàn)軍， 聞愛友， 王堅， 郭剛， 李君風， 王思然， 白晰， 邵濤. 添加劑對西藏啤酒糟全混合日糧青貯發(fā)酵品質及有氧穩(wěn)定性的影響. 草業(yè)學報, 2016, 25(7): 112-120.

DING Liang, YUAN Xian-Jun, WEN Ai-You, WANG Jian, GUO Gang, LI Jun-Feng, WANG Si-Ran, BAI Xi, SHAO Tao. Effects of additives on fermentation quality and aerobic stability of total mixedration silage containing wet brewers’grains in Tibet. Acta Prataculturae Sinica, 2016, 25(7): 112-120.