譚超

（安康學(xué)院現(xiàn)代農(nóng)業(yè)與生物科技學(xué)院 陜西安康 725000）

不同處理對(duì)葡萄多糖提取率的影響

譚超

（安康學(xué)院現(xiàn)代農(nóng)業(yè)與生物科技學(xué)院 陜西安康 725000）

為獲得葡萄多糖提取的最佳條件，本研究以新鮮戶太8號(hào)葡萄為材料，采用水提醇沉法對(duì)不同的提取溫度、液料比、乙醇體積進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)，并在此基礎(chǔ)上采用三因素三水平正交試驗(yàn)對(duì)提取條件進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明，溫度為80℃，液料比為1：2，濃縮液的6倍體積的95%乙醇進(jìn)行沉淀可得到較好的提取效果。

葡萄；多糖提取

引言

多糖類物質(zhì)廣泛存在于動(dòng)植物和微生物體內(nèi)，具有一定的抗癌、抗病毒、降血壓、降血脂等作用，且對(duì)生物體內(nèi)正常細(xì)胞沒(méi)有危害。葡萄中含有大量多糖，類物質(zhì)對(duì)正常細(xì)胞無(wú)毒副作用，且具有多種生物活性，能夠激活免疫細(xì)胞，提高機(jī)體的免疫功能，逐漸引起人們?cè)絹?lái)越高的重視。本研究對(duì)葡萄多糖提取中溫度、液料比、乙醇的量三個(gè)因素進(jìn)行了分析，為葡萄種質(zhì)資源的充分利用提供一定科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

新鮮成熟的戶太8號(hào)葡萄，每天上午10時(shí)采摘，摘后立即預(yù)冷，未使用的材料4℃冷藏。

1.2 試劑

無(wú)水乙醇。

1.3 主要設(shè)備

打汁機(jī)、電熱恒溫水浴鍋、電子天平、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE-52A（上海亞榮生化儀器廠）、DZ-2A型真空干燥箱（天津市泰斯特儀器有限公司）、SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）、0406-1型臺(tái)式低俗離心機(jī)（上海醫(yī)療器械有限公司手術(shù)器械廠）。

1.4 試驗(yàn)方法

稱取3份清洗干凈的葡萄果實(shí)，每份100g，用打汁機(jī)搗碎并記錄混合液體積，然后加入蒸餾水浸提多糖。浸提溫度梯度分別為 70℃、80℃、90℃和 95℃，浸提料液比分別為 1：1、1：2和 1：3，浸提2h后12000rps離心10min，并重復(fù)1次，將兩次離心所得上清液合并后置于真空干燥箱。濃縮至破碎打漿后體積的12.5%時(shí)，加入一定體積的95%乙醇進(jìn)行沉淀，乙醇體積梯度為4、6、8倍。沉淀產(chǎn)物再次放入真空干燥箱于較低溫度下干燥。最后獲得固體物質(zhì)為粗多糖，并計(jì)算提取率。

2 結(jié)果與分析

2.1 溫度對(duì)提取率的影響（見(jiàn)表1）

表1顯示，葡萄多糖提取率與溫度值變化成正比關(guān)系，但高于90℃后提取率變化不大；同時(shí)，多糖類物質(zhì)在高溫下易分解，所以實(shí)際浸提溫度不能過(guò)高，低溫過(guò)低又影響多糖提取率。故80℃為較適宜的提取溫度。

表1 不同溫度的多糖提取率

2.2 料液比對(duì)葡萄多糖提取率的影響

表2 不同料液比多糖的提取率

由表2可知，料液比與葡萄多糖提取率呈反比關(guān)系，料液從1：1變化為1：2時(shí)提取率顯著提高，繼續(xù)降低料液比提取率增加不明顯。考慮浸提液過(guò)多將導(dǎo)致不易干燥濃縮，故料液比為1：2較為合適。

2.3 乙醇的量對(duì)葡萄多糖提取率的影響

表3 不同乙醇體積的多糖提取率

由表3可知，當(dāng)95%乙醇體積由4倍增加到6倍時(shí)提取率增加明顯，但8倍體積乙醇的提取率與6倍時(shí)沒(méi)有太大變化。同樣出于干燥濃縮難易程度的考量，選用6倍體積的95%乙醇效果較好。

2.4 正交試驗(yàn)

2.4.1 正交試驗(yàn)因素水平設(shè)計(jì)

稱取9份葡萄，每份100g。以上述單因素條件選擇實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果為依據(jù)，確定溫度、料液比、乙醇體積這三個(gè)因素的水平。通過(guò)L9（33）正交試驗(yàn)，以葡萄多糖的提取率為指標(biāo)，每組做三個(gè)平行試驗(yàn)，得出最佳提取條件（見(jiàn)表4）。

表4 正交實(shí)驗(yàn)因素水平表

2.4.2 正交試驗(yàn)結(jié)果與分析（見(jiàn)表5～6）

表5 正交試驗(yàn)結(jié)果及極差分析

由表5～6可知溫度對(duì)葡萄多糖的提取率影響最大，其次是液料比，而乙醇體積對(duì)多糖的提取率幾乎沒(méi)影響。

3 結(jié)語(yǔ)

通過(guò)正交試驗(yàn)與極差分析得出在三個(gè)影響葡萄多糖提取率的因素（提取溫度、料液比和乙醇體積）中，提取溫度為主要因素，其次是料液比，而乙醇體積對(duì)多糖的提取率影響較小。80℃時(shí)多糖的提取率基本達(dá)到最大值，繼續(xù)升溫會(huì)導(dǎo)致多糖失活，使得提取率幾乎不變甚至下降。料液比為1：2時(shí)提取率較高。乙醇體積對(duì)提取率影響較小，但乙醇體積太少會(huì)影響多糖沉淀效果，故以乙醇體積為濃縮液體積的6倍時(shí)為宜。

表6 正交試驗(yàn)方差分析表a=0.05

[1]陳 代，問(wèn)亞琴，潘秋紅.葡萄酒中多糖的研究進(jìn)展[J].釀酒科技，2009（9）：2282～2285.

[2]王存綱，郭 麗.葡萄多糖研究進(jìn)展[A].河南科技學(xué)院學(xué)報(bào)，2011（39）：60.

TQ28

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1005-7897（2016）12-0106-02

2016-6-12