亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        豬混合感染牛病毒性腹瀉病毒、豬瘟病毒、藍(lán)耳病病毒和大腸桿菌的診斷

        2016-07-31 21:00:51王宇婷常敬偉李超馬莉莉周玉龍倪宏波
        現(xiàn)代畜牧獸醫(yī) 2016年11期
        關(guān)鍵詞:耳病病毒性豬瘟

        王宇婷,常敬偉,李超,馬莉莉,周玉龍,倪宏波

        豬混合感染牛病毒性腹瀉病毒、豬瘟病毒、藍(lán)耳病病毒和大腸桿菌的診斷

        王宇婷,常敬偉,李超,馬莉莉,周玉龍,倪宏波?

        (黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,黑龍江大慶163319)

        牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)不僅感染奶牛和黃牛,還會(huì)感染豬、鹿和羊等多種動(dòng)物。豬感染BVDV會(huì)出現(xiàn)類(lèi)似于豬瘟的臨床癥狀和病理變化。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)黑龍江大慶市某豬場(chǎng)送檢的病豬進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷,確診該病豬為牛病毒性腹瀉病毒、豬瘟病毒、豬藍(lán)耳病病毒和大腸桿菌混合感染。

        牛病毒性腹瀉病毒;豬瘟病毒;豬藍(lán)耳病毒;大腸桿菌;混合感染

        牛病毒性腹瀉病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)屬于黃病毒科瘟病毒屬,與豬瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)和羊邊界病病毒(border disease virus,BDV)同為瘟病毒屬,三者病毒上血清學(xué)存在交叉反應(yīng)[1]。CSFV和BVDV均可感染豬,豬感染CSFV會(huì)引起高熱和敗血癥等致病性癥狀[2]。而豬感染BVDV表現(xiàn)出的癥狀與慢性豬瘟類(lèi)似,CSFV與BVDV之間還存在交叉感染的情況。豬藍(lán)耳病也稱(chēng)為豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine reproductive an-drespiratory syndrome,PRRS),該病主要引起豬的繁殖障礙和呼吸道癥狀,PRRSV感染豬后會(huì)導(dǎo)致免疫抑制,造成潛在感染其他病原體,從而給豬場(chǎng)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失[3]。豬大腸桿菌(Escherichia coli,E.Coli)病在臨床上主要表現(xiàn)為仔豬黃痢、仔豬白痢和豬水腫病等,該病具有較高的發(fā)病率和死亡率[4]。本文對(duì)黑龍江大慶市某豬場(chǎng)發(fā)病的保育豬,進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)室診斷,確診為牛病毒性腹瀉病毒、豬瘟病毒、豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒和大腸桿菌混合感染,診斷結(jié)果報(bào)告如下[5]。

        1 發(fā)病情況

        2016年5月,黑龍江省大慶市某豬場(chǎng)保育仔豬出現(xiàn)腹瀉,生長(zhǎng)遲緩,發(fā)病率高,死亡率10%~20%,用多種抗生素治療效果不佳。豬群曾接種過(guò)細(xì)胞源豬瘟活疫苗,但未完全控制疫情。

        2 臨床癥狀

        保育豬體溫升高、精神沉郁、食欲減退,消瘦、腹瀉,生長(zhǎng)緩慢,腹部膨脹,雙耳發(fā)藍(lán)發(fā)紺,體表有針尖狀出血點(diǎn),尤其是腹部皮膚和四肢。

        3 剖檢變化

        經(jīng)剖檢病豬,可見(jiàn)喉頭有出血點(diǎn);頜下淋巴結(jié)腫大,周邊有出血點(diǎn),切面呈大理石樣;彌漫性間質(zhì)性肺炎;脾邊緣出血性梗死;胃黏膜出血;腸道卡他性炎癥,腸系膜淋巴結(jié)充血腫大。

        4 細(xì)菌分離鑒定與藥敏試驗(yàn)

        無(wú)菌采取豬的肝臟、脾臟和肺臟和腸內(nèi)容物按常規(guī)方法分別接種于5%兔血營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌分離鑒定。次日,5%兔血營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌生長(zhǎng),但在麥康凱培養(yǎng)基上長(zhǎng)出桃紅色、圓形和邊緣整齊的菌落,通過(guò)鏡檢和生化試驗(yàn)確定為大腸桿菌[6]。將分離到的大腸桿菌進(jìn)行致病性試驗(yàn),小白鼠24 h內(nèi)死亡,說(shuō)明其具有較強(qiáng)致病性。藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示,鹽酸頭孢喹肟和多黏菌素B對(duì)大腸桿菌敏感。

        5 PCR檢測(cè)

        5.1 引物設(shè)計(jì)和合成CSFV和PRRSV特異性檢測(cè)引物由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所提供,BVDV特異性檢測(cè)引物參照參考文獻(xiàn)[7],引物序列如表1所示,引物由上海生物工程技術(shù)有限責(zé)任公司合成。

        表1 引物序列Table1 Primer squence

        5.2 樣品的處理與病毒基因組的提取將無(wú)菌采集的脾、肺和下頜淋巴結(jié)等病料混合加入4 mL的DEPC水,充分研磨均勻,吸取研磨好的液體,加入到無(wú)RNA酶的EP管內(nèi)。根據(jù)病毒基因組RNA試劑盒(購(gòu)自北京博凌科為生物科技有限公司)使用說(shuō)明的操作方法提取組織病料的病毒基因組RNA,并反轉(zhuǎn)錄為cDNA備用(購(gòu)自賽默飛世爾科技中國(guó)有限公司)。

        5.3 PCR PCR的擴(kuò)增與檢測(cè)以反轉(zhuǎn)的病毒基因組cDNA為模板,進(jìn)行CSFV、BVDV、PRRSV的PCR擴(kuò)增。PCR反應(yīng)體系為:Buffer 2.5μL、MgCl22μL、dNTP 2μL、上下游引物各1μL、模板1μL、加水至25μL。BVDV、CSFV、HPRRSV和PRRSV的PCR擴(kuò)增程序?yàn)椋?4℃3 min 30 s預(yù)變性;94℃35 s變性;72℃40 s延伸,72℃6 min終延伸,30個(gè)循環(huán),退火40 s,溫度分別是56、57、55和51℃。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè),如圖1和圖2所示,CSFV擴(kuò)增產(chǎn)物位于599 bp大小處均可見(jiàn)特異性條帶,與目的基因相符;HPRRSV和PRRSV PCR擴(kuò)增產(chǎn)物位于420 bp和 372 bp大小處均可見(jiàn)特異性條帶,與目的基因相符;BVDV PCR擴(kuò)增產(chǎn)物位于288 bp大小處均可見(jiàn)特異性條帶,與目的基因相符。

        圖1 CSFV和PRRS PCR擴(kuò)增結(jié)果Fig.1 The result of CSFV and PRRS PCR

        圖2 BVDV PCR擴(kuò)增結(jié)果Fig.2 The result of BVDV PCR

        5.4 核酸序列鑒定將臨床組織病料的BVDV陽(yáng)性擴(kuò)增產(chǎn)物膠回收(試劑盒購(gòu)自上海百賽生物技術(shù)有限公司)與pMD-18T連接后,選取陽(yáng)性菌送往哈爾濱博仕生物技術(shù)有限公司進(jìn)行序列測(cè)定,將測(cè)序結(jié)果應(yīng)用Blast在線(xiàn)軟件GenBank中登錄的序列進(jìn)行比較分析表明,BVDV陽(yáng)性PCR擴(kuò)增產(chǎn)物彼此間序列完全一致,其與GenBank中登錄的BVDV毒株序列(KF006975.1)同源性達(dá)97%。

        6 診斷結(jié)論

        經(jīng)豬場(chǎng)發(fā)病情況、臨床癥狀和病理剖檢變化等臨床診斷,以及細(xì)菌分離培養(yǎng)、PCR檢測(cè)、核酸序列鑒定等實(shí)驗(yàn)室診斷方法確定,該豬場(chǎng)混合感染牛病毒性腹瀉病毒、豬瘟病毒、豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒和大腸桿菌。

        7 討論

        豬感染BVDV主要途徑為豬免疫接種BVDV污染豬用疫苗及接觸到BVDV感染牛羊和BVDV污染的飼料兩種途徑。豬接觸感染BVDV的牛和羊,采食污染BVDV的飼料,飼喂BVDV污染的牛奶或牛羊內(nèi)臟以及用污染BVDV的飼養(yǎng)工具等都可引起豬感染BVDV。報(bào)道顯示,可在接觸到接種BVDV疫苗牛的豬體內(nèi)檢測(cè)到BVDV抗體[8]。

        本病例中的臨床組織樣品檢測(cè)結(jié)果為牛病毒性腹瀉病毒、豬瘟病毒、豬藍(lán)耳病毒和大腸桿菌混合感染。該豬場(chǎng)免疫接種過(guò)豬瘟疫苗,但未能完全控制疫情。其原因可能為BVDV的感染可對(duì)豬瘟活疫苗的免疫產(chǎn)生干擾作用,其在抑制豬瘟抗體產(chǎn)生的同時(shí),也刺激機(jī)體產(chǎn)生BVDV的抗體,從而導(dǎo)致豬瘟免疫失敗。BVDV在一定程度上干擾豬瘟活疫苗的免疫效果,影響CSFV抗體水平。牛病毒性腹瀉病毒、豬瘟病毒和豬藍(lán)耳病毒均具有免疫抑制特性,導(dǎo)致機(jī)體免疫力下降,容易混合感染大腸桿菌,并且前期報(bào)道過(guò)大腸桿菌對(duì)常用抗菌藥物耐藥的發(fā)展越來(lái)越令人擔(dān)憂(yōu)[9]。

        一般認(rèn)為豬感染BVDV主要原因是豬使用了被BVDV污染的生物制品,尤其是豬瘟疫苗,這給豬瘟的預(yù)防控制及凈化帶來(lái)了新的困難與挑戰(zhàn)。因此,預(yù)防控制BVDV在豬群的感染,要加強(qiáng)生物試劑的生產(chǎn)和安全管理,從源頭上遏制BVDV污染的可能性,加強(qiáng)對(duì)豬群中BVDV的監(jiān)測(cè),及時(shí)淘汰陽(yáng)性感染豬,這些應(yīng)引起廣大獸醫(yī)工作者重視。

        [1]陶潔,廖金虎,張倩,等.豬感染牛病毒性腹瀉病毒研究進(jìn)展[J].中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào),2014,36(5):410-413.

        [2]邱美珍,楊俊,杜麗飛,等.豬群中牛病毒性腹瀉病毒所致的類(lèi)似豬瘟及檢測(cè)方法[J].湖南畜牧獸醫(yī),2015,(2):4-6.

        [3]文麗,趙兵軍.豬藍(lán)耳病的研究進(jìn)展與防控策略[J].浙江畜牧獸醫(yī),2013,38(3):15-16.

        [4]劉峰,張進(jìn),劉毅.豬大腸桿菌病防治研究進(jìn)展[J].湖南畜牧獸醫(yī),2010(6):1-3.

        [5]吳建軍.豬感染牛病毒性腹瀉的診斷[J].畜牧與獸醫(yī),2014,46(11):109-110.

        [6]廖延雄.獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)診斷手冊(cè)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1995.

        [7]王樹(shù)成,林建輝,劉宏,等.用MDBK傳代細(xì)胞繁殖BVDV毒株的研究[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫,1995,12(4):6-8.

        [8]Stewart WC,Carbrey EA,Jenney E W,et al.Bovine viral diarrhea infection in pigs[J].J Am Vet Med Ass,1971,159(11):1556-1563.

        [9]教郁,高維凡,胡彩光.大腸桿菌耐藥性研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代畜牧獸醫(yī),2013,5:54-57.

        Diagnosis ofthe combined infection bovine viraldiarrhea virus,
        classicalswine fever virus,Porcine reproductive an-drespiratory syndrome virus and E.coilin pigs

        Wang Yuting,Chang Jingwei,Li Chao,Ma Lili,Zhou Yulong,Ni Hongbo*
        (College of Animal Science and Technology,Heilongjiang Bayi Agricultural University,Heilongjiang Daqing 163319)

        Bovine viral diarrhea virus(BVDV)not only infected cows and cattle,but also infected pigs,sheep,deer and other animals.Pigs infected with BVDV occurs clinical symptoms and pathological changes similar to classical swine fever.In this study of a farm in Daqing City in Heilongjiang infected of pigs for laboratory diagnosis,confirmed that pigs as bovine viral diarrhea virus,classical swine fever virus,porcine reproductive an-drespiratory syndrome virus and Escherichia coli combined infection.

        Bovine viral diarrhea virus;Classical swine fever virus;Porcine reproductive an-drespiratory syndrome virus;Escherichia coli;Combined infection

        S858.23

        B

        1672-9692(2016)11-0033-04

        2016-09-11

        王宇婷(1992-),女,在讀碩士研究生,研究方向:獸醫(yī)微生物與免疫學(xué)。

        倪宏波(1972-),男,教授,主要從事獸醫(yī)微生物與免疫學(xué)。

        猜你喜歡
        耳病病毒性豬瘟
        牛病毒性腹瀉病特征、診斷與防治研究
        湖南飼料(2021年4期)2021-10-13 07:32:40
        耳病治鼻,事出有因
        中老年保健(2021年4期)2021-08-22 07:07:22
        2030消除病毒性肝炎:未來(lái)10年該怎么做?
        肝博士(2021年1期)2021-03-29 02:31:58
        豬瘟爆發(fā),豬肉還敢吃嗎?
        幸福(2019年12期)2019-05-16 02:27:44
        豬瘟病毒感染的診治
        清熱利濕法聯(lián)合中醫(yī)辨證施護(hù)治療病毒性心肌炎
        如何防治子豬病毒性腹瀉
        豬藍(lán)耳病的防控
        廣東飼料(2016年2期)2016-12-01 03:43:08
        一例高致病性豬藍(lán)耳病的診治
        高致病性藍(lán)耳病的診斷和治療
        亚洲人成网站在线观看播放 | 久久红精品一区二区三区| 成人av鲁丝片一区二区免费| 女人大荫蒂毛茸茸视频| 亚洲AV秘 无码一区二区三| 中文字幕亚洲高清精品一区在线| 亚洲男女内射在线播放| 成人区人妻精品一熟女| 韩国精品一区二区三区 | 亚洲一区中文字幕视频| 国产精品一区二区av麻豆| 欧美老熟妇欲乱高清视频 | 少妇无套裸按摩呻吟无呜| 精品日产卡一卡二卡国色天香 | 日韩人妻免费视频一专区| 国产免费爽爽视频在线观看| 精品国产成人亚洲午夜福利| 亚洲专区在线观看第三页| 97超碰国产成人在线| 人人妻人人澡人人爽欧美精品| 亚洲精品第一国产麻豆| 一级黄片草逼免费视频| 国产精品久久久久久久久久红粉| 国产精品嫩草影院av| 国产熟女精品一区二区三区| 日本在线一区二区免费| 亚洲av日韩av永久无码下载| 亚洲黄色电影| 亚洲av综合色区久久精品天堂| 91日韩东京热中文字幕| 精品日产卡一卡二卡国色天香| 精品国产福利久久久| 亚洲一区二区三区在线高清中文 | 国产精品国产三级国产不卡| 亚洲精品国偷拍自产在线| 99精品国产兔费观看久久99| 久久久2019精品视频中文字幕| 女人天堂av人禽交在线观看| 黄瓜视频在线观看| 精品一区二区三区四区少妇| 国产精品一区二区三区在线观看|