王　欣，蘇洪麗，李衛(wèi)敏，李永衛(wèi)，王嗣岑*

(1.西安市第一醫(yī)院藥劑科，西安　710002；2.西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥學(xué)院，西安　710061；3.西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院，西安　710061)

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貓眼草揮發(fā)油成分的GC-MS分析

王欣1，蘇洪麗2，李衛(wèi)敏3，李永衛(wèi)1，王嗣岑2*

(1.西安市第一醫(yī)院藥劑科，西安710002；2.西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥學(xué)院，西安710061；3.西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院，西安710061)

摘要：目的研究貓眼草全草的揮發(fā)油成分。方法采用水蒸氣蒸餾法提取貓眼草的揮發(fā)油，利用氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)對揮發(fā)油中的化學(xué)成分進(jìn)行分離分析，并采用峰面積歸一化法計算各成分相對百分含量。結(jié)果對其中的43種化學(xué)成分進(jìn)行了鑒定，所鑒定的成分占總流出峰面積的75.86%。其中醛類化合物14種，占30.77%；酮類8種，占19.02%；醇類14種，占17.08%。結(jié)論本文首次分析了貓眼草全草揮發(fā)油成分，為了解貓眼草的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)和進(jìn)一步開發(fā)研究提供了依據(jù)。

關(guān)鍵詞：貓眼草；水蒸汽蒸餾法；氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用

大戟屬(Euphorbia)為大戟科(Euphorbiaceae)最大的屬，該屬植物主要分布于西南橫斷山區(qū)和西北地區(qū)。貓眼草(EuphorbialunulataBunge)又名爛疤眼，為大戟科大戟屬植物貓眼草的全草，為多年生草本植物，主要分布于陜北、遼寧、吉林、新疆、河北、山西等地，根為圓柱狀，莖單生或叢生，高30～60 cm，葉線形至卵形[1]；性微寒，味苦，有毒；可祛痰、鎮(zhèn)咳、平喘、拔毒止癢等[2]。已有的研究表明[3-6]，貓眼草中含有黃酮類、萜類、酚酸類及木脂素類等化合物。肖寶紅等[7]發(fā)現(xiàn)，貓眼草水提物對Lewis肺癌有明顯的抑制作用，而且該作用呈現(xiàn)劑量依賴關(guān)系；王鈺等[8]研究發(fā)現(xiàn)，貓眼草中含有大戟素M、大戟苷A、澤瀉醇A、甘遂大戟萜酯D等，具有較強(qiáng)的腫瘤細(xì)胞抑制活性，尤其對人肝癌細(xì)胞HepG2的抑制能力較強(qiáng)；李榮等[9]發(fā)現(xiàn)，貓眼草中的金絲桃苷、quercetin-3-O-(6 ″-galloyl)-β-D-galactopyranoside、quercetin-3-O-(2″-galloyl)-β-D-galactopyranoside和槲皮素有較強(qiáng)的抗氧化活性。國內(nèi)外關(guān)于貓眼草揮發(fā)油成分的研究未見報道。為完善對貓眼草中化學(xué)成分的研究，開發(fā)貓眼草的臨床藥用價值，本文首次采用水蒸汽蒸餾法提取貓眼草全草揮發(fā)油，用GC-MS聯(lián)用技術(shù)對其進(jìn)行了分離鑒定，以面積歸一化方法測定各成分的相對含量，為進(jìn)一步開發(fā)利用貓眼草資源提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1儀器與試藥

1.1儀器GC-MS/QP2010 Plus型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(日本島津公司)；GC-MS solution色譜工作站和NIST質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(日本Shimadzu公司)；揮發(fā)油提取器(鄭州中天實(shí)驗(yàn)儀器有限公司)；Concentrator5301低溫旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(eppendorf)；YP5102電子天平(上海光正醫(yī)療儀器有限公司)。

1.2試藥 藥材采自陜北，經(jīng)西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院生藥教研室鑒定為大戟科植物貓眼草EuphorbialunulataBunge的全草；水為蒸餾水；其余試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1揮發(fā)油的提取取200 g貓眼草，粉碎，加入800 mL水，按照《中國藥典》附錄中揮發(fā)油提取方法，使用揮發(fā)油提取器蒸餾9 h，收集餾出液濃縮后用于氣質(zhì)聯(lián)用分析。

2.2GC-MS分析2.2.1GC條件色譜柱為Rtx-5MS柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)；載氣為高純氦氣，流速為1.0 mL·min-1；進(jìn)樣口溫度240 ℃，分流比5∶1；進(jìn)樣量2 μL；柱溫采用程序升溫，初始溫度為40 ℃，保持5 min，以1.5 ℃·min-1的速率升至80 ℃，保持1 min，再以10 ℃·min-1的速率升至260 ℃，保持5 min。

2.2.2MS條件電子轟擊離子源(EI)，離子源溫度200 ℃；電子能量70 eV；電子倍增電壓(EMV)0.97 kV；GC-MS接口溫度280 ℃；質(zhì)量掃描范圍m/z：50～800；質(zhì)譜檢測起測時間(溶劑切斷時間)5 min；質(zhì)譜圖計算機(jī)檢索譜庫：NIST147。

2.3結(jié)果采用GC-MS聯(lián)用技術(shù)對貓眼草揮發(fā)油檢測分析，得到其總離子流譜圖，見圖1。經(jīng)GC-MS聯(lián)用儀計算機(jī)的NIST譜圖庫自動檢索，得出相應(yīng)的化學(xué)成分，并以峰面積歸一化法測定各成分的相對含量，結(jié)果見表1。

圖1貓眼草揮發(fā)油總離子流圖

Fig.1 The TIC of the essential oil ofEuphorbialunulataBunge

表1貓眼草揮發(fā)油成分的GC-MS分析結(jié)果

Tab.1 GC-MS analysis of the essential oil ofEuphorbialunulataBunge

序號保留時間/min化合物分子式相似度/%相對含量/%15.539(cis/trans)-1,2-dimethyl-cyclohexane((順/反)-1,2-二甲基環(huán)己烷)C8H16910.2625.7272-methyl-1-penten-3-ol(2-甲基-1-戊烯-3-醇)C6H12O960.2135.900(E)-2-pentenal((E)-2-戊烯醛)C5H8O930.4446.412hexanal(正己醛)C6H12O973.9957.6342,3-dimethyl-1-butanol(2,3-二甲基-1-丁醇)C6H14O960.6367.933furfural(呋喃甲醛)C5H4O2910.3778.8462-hexenal(2-己烯醛)C6H10O972.46

表1(續(xù))貓眼草揮發(fā)油成分的GC-MS分析結(jié)果

Tab.1(Continued) GC-MS analysis of the essential oil ofEuphorbialunulataBunge

序號保留時間/min化合物分子式相似度/%相對含量/%89.135(Z)-3-hexen-1-ol((Z)-3-己烯-1-醇)C6H12O970.5399.9821-hexanol(正己醇)C6H14O981.221010.9652-heptanone(2-庚酮)C7H14O950.371111.615heptanal(庚醛)C7H14O960.511212.353(E,E)-2,4-hexadiena((E,E)-2,4-己二烯醛)C6H8O930.211314.706methyl-2-oxohexanoate(2-氧代己酸乙酯)C7H12O3912.311415.608(E)-2-heptenal((E)-2-庚烯醛)C7H12O961.201515.773benzaldehyde(苯甲醛)C7H6O981.651617.2173,5,5-trimethyl-1-hexene(3,5,5-三甲基-1-己烯)C9H18901.181717.8681-octen-3-ol(1-辛烯-3-醇)C8H16O982.151818.1836-methyl-5-hepten-2-one(甲基庚烯酮)C8H14O923.171918.952ethylidene-cyclohexane(亞乙基環(huán)己烷)C8H14900.892019.329octanal(辛醛)C8H16O900.362120.163trans-2-trans-4-heptadienal(反,反-2,4-庚二烯醛)C7H10O973.442220.7383-(1-methylethyl)-2-cyclopenten-1-one(3-異丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮)C8H12O850.432320.9513-isopropenyl-2-methylcyclohexanol(2-甲基-3-異丙烯基環(huán)己醇)C10H18O810.342421.188eucalyptol(桉油精)C10H18O950.602523.015benzeneacetaldehyde(苯乙醛)C8H8O9612.362624.191(E)-2-octenal((E)-2-辛烯醛)C8H14O951.542724.8433-methyl-benzaldehyde(3-甲基苯甲醛)C8H8O981.882825.2266-methyl-2-(2-oxiranyl)-5-hepten-2-ol(6-甲基2-(2-環(huán)氧乙基)-5-庚烯-2-醇)C10H18O2952.222925.442(E,E)-3,5-octadien-2-one((E,E)-3,5-辛二烯-2-酮)C8H12O890.623026.3958-oxo-2-nonenal(8-氧代-2-壬烯醛)C9H14O2840.363126.644trans-2-(2-(5-methyl-5-vinyl)tetrahydrofuran)-2-propanol(反-2-(2-(5-甲基-5-乙烯基)四氫呋喃)-2-丙醇)C10H18O2941.093227.470(E,E)-3,5-octadien-2-one((E,E)-3,5-辛二烯-2-酮)C8H12O920.563328.7893,4,4-trimethyl-2-cyclopenten-1-one(3,4,4-三甲基-2-環(huán)戊烯-1-酮)C8H12O8912.673431.014isopinocarveol(異松香芹醇)C10H16O940.413532.6104-(5-methyl-2-furanyl)-2-butanone(4-(5-甲基-2-呋喃基)-2-丁酮)C9H12O2900.943633.589borneol(龍腦)C10H18O910.663733.8603-acetoxy-4-(1-hydroxy-1-methylethyl)-1-methyl-cyclohexene(1-甲基-3-乙酰氧基-4-((1-羥基-1-甲基)乙基)-環(huán)己烯)C12H20O3860.643834.231(R)-4-methyl-1-(1-methylethyl)-3-cyclohexen-1-ol((R)-1-異丙基-4-甲基-3-環(huán)己烯-1-醇)C10H18O951.123935.083alpha,alpha-4-trimethyl-3-cyclohexene-1-methanol(α,α-1-甲基-4-三甲基-3-環(huán)己烯基-1-甲醇)C10H18O964.474038.8702-methoxy-4-vinylphenol(2-甲氧基-4-乙烯基苯酚)C9H10O2903.114140.101(E)-1-(2,6,6-trimethyl-1,3-cyclohexadien-1-yl)-2-buten-1-one((E)-1-(2,6,6-三甲基-1,3-環(huán)己二烯基)-2-丁烯醛-1-酮)C13H18O870.264241.7474-(2,6,6-trimethyl-1-cyclohexen-1-yl)-3-buten-2-ol(4-(2,6,6-三甲基-1-環(huán)己烯基)-3-丁烯-2-醇)C13H22O920.604343.100spathulenol(斯巴醇)C15H24O911.43

3討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，從貓眼草揮發(fā)油中鑒定出43種化合物，所鑒定成分占揮發(fā)油總流出峰面積的75.86%。其中醛類化合物14種，占30.77%；酮類8種，占19.02%；醇類14種，占17.08%；酚類1種，占3.11%；酯類1種，占2.31%；烯類2種，占1.82%；烷類2種，占1.15%；萜類1種，占0.60%。相對含量較高的依次是3，4，4-三甲基-2-環(huán)戊烯-1-酮(12.67%)，苯乙醛(12.36%)，α，α-1-甲基-4-((1-羥基-1-甲基)乙基)-環(huán)己烯(4.47%)，正己醛(3.99%)，反-2，4-庚二烯醛(3.44%)，甲基庚烯酮(3.17%)等。醛酮類化合物是化工原料、香料的重要來源。此外，貓眼草揮發(fā)油中的桉油精具有抗菌消炎、平喘、鎮(zhèn)咳祛痰等藥理作用[10]，龍腦具有抗炎、抗菌以及抗血栓作用[11]。氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)方法分離效率好、靈敏度高、用量少、分析速度快[12]，在揮發(fā)油化學(xué)成分的分析中已經(jīng)成為非常重要的手段[13-16]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為研究貓眼草的指紋圖譜、建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)以及合理開發(fā)貓眼草資源奠定了一定的基礎(chǔ)。

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基金項(xiàng)目：十二五“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)項(xiàng)目(編號：2012ZX09103201-054)

作者簡介：王欣，女，碩士研究生

*通信作者：王嗣岑，男，教授，博士生導(dǎo)師

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.04.008

中圖分類號：R284

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號：1004-2407(2016)04-0353-04

(收稿日期：2015-09-09)

Analysis of essential oil of Euphorbia lunulata Bunge by gas chromatography-mass spectrometry

WANG Xin1， SU Hongli2， LI Weimin3， LI Yongwei1， WANG Sicen2*

(1.Department of Pharmacy,the First Hospital of Xi′an，Xi′an 710002，China；2.School of Pharmacy，Health Science Center，Xi′an Jiaotong University，Xi′an 710061，China；3.The First Affiliated Hospital of Medical College, Xi′an Jiaotong University， Xi′an 710061， China)

Abstract:ObjectiveTo analyze the chemical constituents of the essential oil from the whole plant of Euphorbia lunulata Bunge. MethodsThe essential oil was extracted from Euphorbia lunulata Bunge by steam distillation. The constituents were separated and identified by GC-MS and the relative content of each component was calculated by area normalization method. Results43 compounds of the essential oil were separated and identified，representing 75.86% of the amount. The essential oil obtained shows that aldehydes were found to be the major class (30.77%)，followed by ketones (19.02%)，and alcohols (17.08%). ConclusionIt was the first time to analyze the essential oil from Euphorbia lunulata Bunge，and the results provide important foundation for understanding the constituents and further exploitation of Euphorbia lunulata Bunge.

Key words:Euphorbia lunulata Bunge；steam distillation；gas chromatography-mass spectrometry