金光明,靳二輝,李升和,劉圣楠,丁常宏

(1.安徽科技學(xué)院　動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，安徽　鳳陽(yáng)　233100；2.安徽安豐堂動(dòng)物藥業(yè)有限公司，安徽　合肥　230036)

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中草藥免疫促進(jìn)劑對(duì)AA仔雞法氏囊和脾臟形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

金光明1,靳二輝1,李升和1,劉圣楠1,丁常宏2

(1.安徽科技學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，安徽鳳陽(yáng)233100；2.安徽安豐堂動(dòng)物藥業(yè)有限公司，安徽合肥230036)

摘要：試驗(yàn)研究了中草藥免疫促進(jìn)劑對(duì)AA仔雞法氏囊和脾臟形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響。選用1日齡健康的AA仔雞200只,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組100只，分四個(gè)重復(fù)組。中草藥免疫促進(jìn)劑按200 mg/kg添加基礎(chǔ)日糧中。在42日齡時(shí)，從每個(gè)重復(fù)組中隨機(jī)抽取10只仔雞，頸靜脈放血處死，采集各組雞法氏囊和脾臟的組織樣本，置于Bouin固定液中，應(yīng)用石蠟組織切片技術(shù)制作組織切片，顯微攝影系統(tǒng)觀察拍照。試驗(yàn)結(jié)果表明添加中草藥免疫促進(jìn)劑的試驗(yàn)組仔雞的法氏囊和脾臟的形態(tài)結(jié)構(gòu)較對(duì)照組雞退化延緩，其中脾臟的組織結(jié)構(gòu)變化比較明顯；試驗(yàn)組雞的法氏囊較對(duì)照組皺襞發(fā)達(dá), 法氏囊小結(jié)排列緊密；脾臟組織結(jié)構(gòu)中紅髓與白髓界線清晰，脾小結(jié)試驗(yàn)組較對(duì)照組明顯增多。結(jié)果表明，中草藥免疫促進(jìn)劑能夠促進(jìn)AA仔雞免疫器官的發(fā)育。

關(guān)鍵詞：中草藥免疫促進(jìn)劑；AA仔雞；法氏囊；脾臟；形態(tài)結(jié)構(gòu)；發(fā)育

改革開放以來，我國(guó)快速發(fā)展的家禽養(yǎng)殖業(yè)，已成為養(yǎng)殖從業(yè)者增收的重要來源，家禽肉產(chǎn)品也是廣大消費(fèi)者最受歡迎的肉類產(chǎn)品[1]。在禽類養(yǎng)殖業(yè)中, 依靠疫苗、血清、生物制劑、藥物和化學(xué)產(chǎn)品等來控制家禽疫病是目前家禽養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)中最為常見的方法，在飼料中添加抗菌藥、驅(qū)蟲藥、激素和促生長(zhǎng)的藥物或制劑較為常見，這些藥物和制劑均可在家禽體內(nèi)或禽肉產(chǎn)品中殘留，從而對(duì)人體健康產(chǎn)生嚴(yán)重的危害。禽肉產(chǎn)品的安全問題已經(jīng)得到國(guó)家相關(guān)管理部門的高度重視。隨著人們對(duì)禽肉產(chǎn)品綠色需求意愿的增加，國(guó)內(nèi)外禽類生產(chǎn)專家們均在尋找改進(jìn)和替代抗生素、生物制劑、藥物和化學(xué)產(chǎn)品等的飼料添加劑。

中草藥產(chǎn)品及制品多數(shù)是以天然植物為原料生產(chǎn)而來，具有價(jià)格低廉、毒副作用小、幾乎無(wú)殘留、無(wú)抗藥性、無(wú)污染，具有多種營(yíng)養(yǎng)成分和生物活性面份。兼有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和藥物的雙重作用，既可防治疾病、增強(qiáng)抗應(yīng)激、提高生產(chǎn)性能，又能通過非特異性免疫作用調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能等優(yōu)點(diǎn)[2]。中草藥免疫促進(jìn)劑是選用黃芪，板藍(lán)根，炒白術(shù)，茯苓，陳皮，山楂，甘草，山藥等多種中草藥類植物通過一定的加工方法與程序而獲取的中草藥產(chǎn)品，其主要成分具有抗菌抑菌、抗氧化、雙向調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能以及清熱解毒、消炎利膽、降血脂等生理功能。有些成份是一類植物化學(xué)物質(zhì)的簡(jiǎn)稱，又稱生物黃酮或植物黃酮，是一類重要的生物活性物質(zhì)，據(jù)報(bào)道植物黃酮不但具有抗炎、抗菌、抗病毒等作用，同時(shí)還具有廣泛的抗腫瘤活性。正是基于具有上述諸多優(yōu)點(diǎn)的中草藥，目前在國(guó)內(nèi)外畜禽養(yǎng)殖業(yè)中具有較為廣泛的應(yīng)用。

有關(guān)中草藥產(chǎn)品或制品對(duì)AA仔雞的免疫器官脾臟和法氏囊的組織結(jié)構(gòu)的影響研究甚少。實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹荚谘芯恐胁菟幗M方組成的免疫促進(jìn)劑對(duì)AA仔雞免疫器官脾臟和法氏囊組織結(jié)構(gòu)的影響，為中草藥組方組成的免疫促進(jìn)劑在家禽生產(chǎn)中的進(jìn)一步推廣應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)動(dòng)物

200只1日齡活潑健康的AA肉仔雞，由安徽科技學(xué)院畜牧科技園提供。

1.2中草藥免疫促進(jìn)劑

中草藥免疫促進(jìn)劑，由安徽安豐堂動(dòng)物藥業(yè)有限公司提供，主要成份由黃芪、板藍(lán)根、炒白術(shù)、茯苓、陳皮、山楂、甘草和山藥等多種中草藥植物經(jīng)過一定的加工程序與方法制作而成的中草藥免疫促進(jìn)制劑。

1.3基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧自配，其主要成份與營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1　基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.4飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)AA肉仔雞依據(jù)常規(guī)飼養(yǎng)管理方法進(jìn)行，立體籠養(yǎng)，自由采食和飲水，24h小時(shí)光照，嚴(yán)格按常規(guī)免疫程序進(jìn)行免疫接種。試驗(yàn)禽舍內(nèi)保持適宜的溫度和濕度，保持良好通風(fēng)，試驗(yàn)各組飼養(yǎng)管理?xiàng)l件完全相同。

1.5試驗(yàn)設(shè)計(jì)

200只1日齡AA肉仔雞，隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組，每組100只，每組設(shè)四個(gè)重復(fù)組，每個(gè)重復(fù)組25只AA肉仔雞。中草藥免疫促進(jìn)劑按0和200 mg/kg添加到對(duì)照組和試驗(yàn)組基礎(chǔ)日糧中，試驗(yàn)期為42 d。

1.6樣品采集與切片制作

42日齡時(shí)，從各重復(fù)組中隨機(jī)抽取10只仔雞進(jìn)行編號(hào)屠宰，屠宰前禁食12 h，僅供飲水，逐只稱重，頸靜脈放血致死后，采集免疫器官法氏囊和脾臟的組織樣品，置于Bouin固定液中，應(yīng)用石臘組織切片制作技術(shù)制作顯微組織切片，H·E染色, Olympus CH-30顯微攝影系統(tǒng)觀察、拍照。

1.7試驗(yàn)地點(diǎn)與時(shí)間

試驗(yàn)于2015年4月17日～5月28日在安徽科技學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心進(jìn)行。試驗(yàn)期為42d。

2結(jié)果與分析

2.1中草藥免疫促進(jìn)劑對(duì)AA仔雞法氏囊組織結(jié)構(gòu)的影響

中草藥免疫促進(jìn)劑對(duì)AA肉仔雞法氏囊組織結(jié)構(gòu)的影響見圖1和2。由圖1和2可以看出在42日齡時(shí)，對(duì)照組AA肉仔雞的法氏囊退化現(xiàn)象明顯，法氏囊皺襞較小，法氏囊小結(jié)體積大小不等，且不規(guī)則；試驗(yàn)組AA肉仔雞的法氏囊沒有出現(xiàn)退化現(xiàn)象，法氏囊小結(jié)的體積較大，排列緊密，有規(guī)則，皮質(zhì)較厚，法氏囊皺襞較發(fā)達(dá)。

圖1　對(duì)照組雞法氏囊(100×，H·E)

圖2　試驗(yàn)組雞法氏囊(100×，H·E)

2.2中草藥免疫促進(jìn)劑對(duì)AA仔雞脾臟組織結(jié)構(gòu)的影響

中草藥免疫促進(jìn)劑對(duì)AA肉仔雞脾臟組織結(jié)構(gòu)的影響見圖3和4。由圖3和4可以看出，在42日齡時(shí)，與對(duì)照組相比較，試驗(yàn)組AA肉仔雞脾臟的脾小體數(shù)量較對(duì)照組增多，其中淋巴細(xì)胞排列較對(duì)照組緊密有序；試驗(yàn)組AA肉仔雞脾臟組織結(jié)構(gòu)中紅髓與白髓的界線清晰，且脾小體的體積較對(duì)照組大，而對(duì)照組AA肉仔雞脾臟組織結(jié)構(gòu)中紅髓與白髓界線不清晰。

圖3　對(duì)照組雞脾臟(100×，H·E)

圖4　試驗(yàn)組雞脾臟(100×，H·E)

3結(jié)論與討論

法氏囊又稱腔上囊或泄殖腔囊，是禽類特有的中樞免疫淋巴器官, 是B淋巴細(xì)胞發(fā)育的場(chǎng)所，在淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)分化過程中起著重要作用，具有免疫應(yīng)答功能。正常健康家禽的法氏囊壁形成一些皺襞，皺襞內(nèi)分布著很多法氏囊淋巴小結(jié)，其周邊為皮質(zhì)，中央為髓質(zhì)[4]，干細(xì)胞在胚胎時(shí)期通過血液循環(huán)進(jìn)入法氏囊髓質(zhì)部，在上皮性網(wǎng)狀細(xì)胞構(gòu)成的微環(huán)境誘導(dǎo)下，不斷分裂分化，形成各種特異性的B淋巴細(xì)胞(囊依賴性淋巴細(xì)胞)，經(jīng)過法氏囊皮質(zhì)部的毛細(xì)血管遷移到全身各處的淋巴組織和淋巴器官。

法氏囊在有相應(yīng)抗原刺激時(shí)被激活，行使體液免疫功能；若法氏囊被過早摘除或受病毒(如傳染性法氏囊病病毒)感染，將導(dǎo)致體液免疫功能受損，抵抗力下降，法氏囊在家禽性成熟前體積發(fā)育達(dá)到最大，以后逐漸萎縮退化直至完全消失[5]；李升和等[6]研究表明，肉仔雞4周齡時(shí)法氏囊皺襞內(nèi)淋巴濾泡急劇減少，說明其法氏囊組織結(jié)構(gòu)在4周齡時(shí)開始出現(xiàn)退化現(xiàn)象。

本研究結(jié)果表明，在基礎(chǔ)日糧中添加一定量的中草藥免疫促進(jìn)劑，在42日齡時(shí)，試驗(yàn)組AA肉仔雞的淋巴器官法氏囊壁的皺襞仍然發(fā)達(dá)完整，法氏囊皺襞內(nèi)的淋巴小結(jié)排列緊密有序，有規(guī)則，淋巴小結(jié)的皮質(zhì)較厚。表明中草藥免疫促進(jìn)劑可延緩AA肉仔雞淋巴器官法氏囊的退化，對(duì)法氏囊的發(fā)育具有促進(jìn)作用，能提高法氏囊的免疫功能。

脾臟是家禽有機(jī)體免疫應(yīng)答的重要場(chǎng)所，家禽脾臟由白髓和紅髓構(gòu)成，白髓由脾小體和動(dòng)脈周圍淋巴鞘組成, 紅髓由脾索和脾竇組成[7]。脾臟是家禽體內(nèi)最大的免疫器官，含有大量的免疫活性細(xì)胞，是機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫的中心。健康家禽脾臟的白髓中脾小結(jié)數(shù)量較少，體積較小，當(dāng)發(fā)生體液免疫應(yīng)答時(shí)，數(shù)量增多，體積增大[8]。動(dòng)脈周圍淋巴鞘屬胸腺依賴區(qū)，當(dāng)發(fā)生細(xì)胞免疫應(yīng)答時(shí)，此區(qū)明顯增厚。脾臟的良好發(fā)育對(duì)提高家禽的免疫功能有著重要的作用。

試驗(yàn)研究的結(jié)果表明，基礎(chǔ)日糧中添加一定量的中草藥免疫促進(jìn)劑，在42日齡時(shí)，脾臟組織結(jié)構(gòu)發(fā)育較為明顯，試驗(yàn)組AA肉仔雞脾臟中紅髓與白髓界線較為清晰，試驗(yàn)組AA肉仔雞的脾小結(jié)較對(duì)照組明顯增多，脾小結(jié)中淋巴細(xì)胞排列緊密有序，表明中草藥免疫促進(jìn)劑同樣可延緩試驗(yàn)組AA肉仔雞脾臟的退化，促進(jìn)脾臟的發(fā)育。這與某些研究者采用中草藥單方或復(fù)方的結(jié)果基本一致[9]。金光明等[10]試驗(yàn)研究表明在飲水中添加中草藥免疫促進(jìn)劑對(duì)草雜雞生殖器官組織結(jié)構(gòu)的發(fā)育沒有影響。

總之，試驗(yàn)研究的結(jié)果表明，日糧中添加200 mg/kg中草藥免疫促進(jìn)劑能改善AA肉仔雞淋巴器官法氏囊和脾臟組織結(jié)構(gòu)的發(fā)育，增強(qiáng)免疫器官的免疫力。

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[10]金光明，靳二輝，李升和，等．中草藥免疫促進(jìn)劑對(duì)草雜雞生殖器官組織結(jié)構(gòu)的影響[J]．安徽科技學(xué)院學(xué)報(bào)，2014，28(2)：1-4．

(責(zé)任編輯：馬世堂)

收稿日期：2016-01-16

基金項(xiàng)目：安徽省科技攻關(guān)項(xiàng)目(1301042102)；安徽省農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化資金項(xiàng)目 (12040302012)。

作者簡(jiǎn)介：金光明(1962-)，男，安徽省桐城市人，學(xué)士，教授，主要從事中草藥免疫研究。

中圖分類號(hào)：S852.16+2

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-8772(2016)03-0001-04

Effects of Chinese Herbal Medicine Immune Promoter on AA Broilers in Morphological Structure of Bursa and Spleen

JIN Guang-ming1, JIN Er-hui1, LI Sheng-he1, LIU Sheng-nan1, DIN Chen-hong2

(1. Animal Science College，Anhui Science and Technology University; Fengyang 233100，China;2.Anhui AnFenTang Animal Medicine Ltd, Hefei 230036，China)

Abstract：It is to study the effect of Chinese herbal medicine immune promoter on AA broilers in morphological structure of bursal and spleen.200 healthy AA broilers at the age of 1 day old were selected and randomly divided into experimental and control group of 100. Every group have four repeating group. Chinese herbal medicine immune promoter by 0 and 200 mg / kg is added to basal diet. A trial period was 42 days. At the age of 42 days,10 broilers in each repeating group were randomly selected, killed by jugular vein blooding. The chicken bursa of Fabricius and spleen tissue samples were collected and placed in the Bouin fixative. The production technology is to use paraffin tissue sections for histologic examination, Olympus CH-30 microscope photographs. The results show that experimental groups bursa of Fabricius and spleen of AA broilers have a slower degradation than the control group, which changes the morphological structure of the spleen.This is more obvious in the spleen.The chicken bursa in the experimental group compared with the control group has more developed folds. Frances capsule lymphoid nodules arrange more closely , the structure of spleen red pulp and white pulp line more clear in the test group than in the control group.Spleen is significantly increased. The results show that the Chinese herbal medicine immune promoter can promote the development of immune organs of AA broilers.

Key words:Chinese herbal medicine immune promoter; AA broilers; Bursa; Spleen; Morphological structure; development