沈宏忠，翁柏岳

(浙江新昌人民醫(yī)院 耳鼻喉科，浙江 紹興 312500)

復(fù)方雙花片聯(lián)合西藥對(duì)急性分泌性中耳炎患者血清及分泌物炎癥因子的影響

沈宏忠Δ，翁柏岳

(浙江新昌人民醫(yī)院 耳鼻喉科，浙江 紹興 312500)

目的 探討復(fù)方雙花片聯(lián)合西藥對(duì)急性分泌性中耳炎(secretory otitis media，SOM)患者血清及分泌物腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、白細(xì)胞介素-10(interleukin-10，IL-10)的影響。方法 選擇2014年8月～2016年6月浙江新昌人民醫(yī)院收治的200例(244耳)SOM患者隨機(jī)分為2組，對(duì)照組100例(120耳)僅予常規(guī)西醫(yī)治療，治療組100例(124耳)在對(duì)照組基礎(chǔ)上聯(lián)合復(fù)方雙花片治療，治療前后分別采集患者外周靜脈血及中耳積液利用流式細(xì)胞術(shù)微球陣列法對(duì)TNF-α、IL-6及IL-10進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)比2組療效。結(jié)果 治療組的總有效率為97.58%高于對(duì)照組的85.00%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2組治療前后血清TNF-α、IL-6、IL-10水平無(wú)明顯變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2組治療后分泌物TNF-α、IL-6、IL-10水平明顯降低，且治療組明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 復(fù)方雙花片聯(lián)合西藥治療SOM的療效顯著，可有效減少中耳積液中的TNF-α、IL-6、IL-10等炎癥因子。

復(fù)方雙花片；急性分泌性中耳炎；TNF-α；IL-6；IL-10

急性分泌性中耳炎(secretory otitis media，SOM)是以中耳積液為主要特征的中耳非化膿性炎性疾病，臨床表現(xiàn)主要為耳悶塞感、耳痛及聽(tīng)力下降等，為臨床常見(jiàn)耳部疾病。研究顯示，感染、咽鼓管功能異常及自身免疫反應(yīng)是引發(fā)SOM發(fā)病的主要原因，且在“上下呼吸道炎癥一致性”概念得到闡述后，自身免疫反應(yīng)在SOM發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的作用越來(lái)越受關(guān)注[1]。腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)及白細(xì)胞介素-10(interleukin-10，IL-10)是機(jī)體在免疫應(yīng)答中產(chǎn)生的重要炎癥介質(zhì)，生物學(xué)活性多樣。研究表明，SOM患者耳積液中的TNF-α、IL-6及IL-10水平異常升高，參與了局部免疫反應(yīng)[2]。復(fù)方雙花片是國(guó)家中藥保護(hù)品種，主要成分包括金銀花、穿心蓮、連翹、板藍(lán)根，具有清熱解毒、反病開(kāi)竅、消腫散結(jié)的作用，對(duì)慢性咽炎、上呼吸道感染、流行性腮腺炎等均具有良好的治療效果。本文旨在觀察復(fù)方雙花片聯(lián)合西藥治療SOM的效果，并探討其對(duì)血清及分泌物TNF-α、IL-6及IL-10的影響，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年8月～2016年6月浙江新昌人民醫(yī)院收治的200例(244耳)SOM患者。隨機(jī)分為對(duì)照組100例(120耳)：男51例，女49例，年齡18～66歲，平均(42.39±3.36)歲，病程1～9d，平均(5.23±0.75)d，左耳77只，右耳43只；治療組100例(124耳)：男54例，女46例，年齡18～63歲，平均(40.05±5.11)歲，病程1～10d，平均(5.45±0.63)d，左耳75只，右耳49只。2組基線資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①滿足以下至少一項(xiàng)主訴：耳內(nèi)悶塞感，耳鳴，耳痛，聽(tīng)力下降；②耳內(nèi)鏡或鼓氣耳鏡見(jiàn)鼓室積液征象，鼓膜充血、內(nèi)陷或液平，活動(dòng)度受限，鼓膜完整；③純音聽(tīng)閾測(cè)試判斷為傳導(dǎo)性聽(tīng)力損失，聲導(dǎo)抗圖為平坦型(B型)或高負(fù)力型(C型)；④病程10 d以內(nèi)；⑤對(duì)本研究涉及藥物不過(guò)敏；⑥知情同意。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有嚴(yán)重肝腎心疾病或者對(duì)本次研究具有影響的其他疾??；②處于哺乳期或者妊娠期婦女；③依從性差，未按照醫(yī)囑或者研究要求進(jìn)行治療者。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：對(duì)照組僅予常規(guī)西醫(yī)治療，口服頭孢類抗生素7 d，1片/次，2次/天；噴0.5%鹽酸羥甲唑啉噴霧劑(云南盤(pán)龍?jiān)坪Ｋ帢I(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20113189)，2次/天；治療組在對(duì)照組基礎(chǔ)上聯(lián)合復(fù)方雙花片(陜西康惠制藥股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字90Z610992)治療，4片/次，3次/天。2組均治療7 d復(fù)診。

1.2.2 一般檢查：檢查癥狀及體征，進(jìn)行純音測(cè)聽(tīng)檢查以及聲阻抗鼓室導(dǎo)抗檢查。

1.2.3 標(biāo)本采集與檢測(cè)：治療前后分別采集外周靜脈血2 mL，EDTA抗凝，血清分離后保存于-80 ℃環(huán)境中備用；同時(shí)在耳內(nèi)鏡下在鼓膜緊張部前下象限穿刺抽取中耳積液0.3～0.5 mL，保存于-80 ℃環(huán)境中備用。利用流式細(xì)胞術(shù)微球陣列法檢測(cè)血清及中耳積液中的TNF-α、IL-6及IL-10水平。取連續(xù)倍比稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣品(樣品量為50 μL)，樣品孵育嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書(shū)執(zhí)行，通過(guò)流式細(xì)胞儀與BDCBA軟件對(duì)有關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析。具體方法見(jiàn)文獻(xiàn)[2]。

1.2.4 療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：參照生部頒發(fā)的分泌性中耳炎臨床研究指導(dǎo)[3]：①治愈：臨床癥狀消失，耳鏡檢查無(wú)異常，聲阻抗鼓室圖為A型，聽(tīng)力恢復(fù)正常；②好轉(zhuǎn)：臨床癥狀好轉(zhuǎn)，耳鏡檢查輕微異常，聲阻抗鼓室圖為C型，純音測(cè)聽(tīng)氣骨導(dǎo)減小，但未完全正常，聽(tīng)力有所恢復(fù)；③無(wú)效：不滿足前述2點(diǎn)。總有效率=(治愈例數(shù)+好轉(zhuǎn)例數(shù))/總例數(shù)×100%。

2 結(jié)果

2.1 2組患者療效比較 治療組患者的總有效率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2組患者治療期間無(wú)明顯不良反應(yīng)病例。見(jiàn)表1。

表1 2組療效比較[n(%)]Tab.1 Comparison of clinical efficacy between two groups[n(%)]

*P<0.05，與對(duì)照組比較，compared with control group

2.2 2組治療前后血清TNF-α、IL-6、IL-10水平比較 2組治療前后血清TNF-α、IL-6、IL-10水平無(wú)明顯變化，組間比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表2。

表2 2組治療前后血清TNF-α、IL-6、IL-10水平比較Tab.2 Comparison of serum levels of TNF-α,IL-6 and IL-10 pre-and post-treatment between two ±s,pg/mL)

2.3 2組治療前后分泌物TNF-α、IL-6、IL-10水平比較 2組治療后分泌物TNF-α、IL-6、IL-10水平明顯降低，且治療組明顯低于對(duì)照組，組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 2組治療前后分泌物TNF-α、IL-6、IL-10水平比較Tab.3 Comparison of the levels of TNF-α,IL-6 and IL-10 pre-and post-treatment between two ±s,pg/mL)

*P<0.05，與本組治療前比較，compared with same group pre-treatment；#P<0.05,與治療后對(duì)照組比較，compared with control group post-treatment

3 討論

SOM為臨床的常見(jiàn)病與多發(fā)病，兒童發(fā)病率高于成人，較多患者是繼發(fā)于上呼吸道感染，由于難以明確病因，所以較難實(shí)現(xiàn)個(gè)體化治療，導(dǎo)致預(yù)后差異較大，個(gè)別患者遷延不愈可致粘連性中耳炎、鼓室硬化等嚴(yán)重后果而造成聽(tīng)力損失。目前認(rèn)為，SOM的基本病因是咽鼓管功能異常，此外，其與感染、自身免疫學(xué)反應(yīng)也有關(guān)。研究指出，SOM患者的中耳腔內(nèi)可能存在一種局部細(xì)胞因子網(wǎng)，對(duì)炎癥因子的活化與黏膜酶的活性起著重要作用，直接或間接地決定SOM的轉(zhuǎn)歸[4]。SOM患者伴有淋巴細(xì)胞亞群異常情況，既往研究發(fā)現(xiàn)，與健康人比較，上呼吸道感染繼發(fā)的SOM患者外周血CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Tregs)的比例顯著提高[5]。Tregs具有免疫抑制功能，與TNF-α、IL-6、IL-10的關(guān)系緊密，Tregs可在自身抗原及多克隆激活劑的作用下活化，并分泌出TGF-β與IL-10等多種因子，且還可表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子Foxp3等，參與炎癥反應(yīng)、自身免疫性疾病以及腫瘤的發(fā)生發(fā)展[6]。IL-10具有多種效應(yīng)，不僅可干擾調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞與效應(yīng)T淋巴細(xì)胞的活性，而且還可抗血管生成及免疫抑制作用。IL-6參與機(jī)體抗感染免疫，并具有調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的作用。TNF分泌適量可參與免疫反應(yīng)，抑制Tregs功能，但分泌過(guò)量則會(huì)引起炎癥反應(yīng)性疾病及自身免疫性疾病，早有研究證實(shí)，在SOM耳積液中的TNF可能多由耳粘膜局部產(chǎn)生并起免疫抑制作用，且含量過(guò)高可能會(huì)致病情經(jīng)久不愈[7]。余少卿等[8]研究了多種細(xì)胞因子在SOM患者中的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)這類患者與健康對(duì)照組比較，外周血中TNF、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6及IL-10等細(xì)胞因子的表達(dá)并無(wú)明顯差異，差異僅存在于耳積液分泌物中，前者耳積液中細(xì)胞因子的表達(dá)明顯偏高。這提示中耳粘膜參與急性分泌性中耳炎患者局部的免疫反應(yīng)。中耳的原有保護(hù)性免疫被打破，處于免疫失衡狀態(tài)，炎癥因子參與中耳局部免疫反應(yīng)，清楚了這一點(diǎn)，曾有學(xué)者采取地塞米松骨室局部注射對(duì)本病進(jìn)行治療，結(jié)果發(fā)現(xiàn)患者病情緩解快，且全身用藥不良反應(yīng)少[9]。

在SOM的治療方面，西醫(yī)治療主要是通過(guò)抗生素抗炎癥、鹽酸羥甲唑啉或鹽酸氨溴索等抑制黏液分泌以及使用鼻部收斂劑等，雖然有一定療效，但部分患者無(wú)法達(dá)到預(yù)期效果；而鼓膜穿刺等治療又受到患者配合度的制約。中醫(yī)認(rèn)為，SOM屬“耳鳴”、“耳脹痛”、“卒聾”等范疇，耳僅為癥狀的表現(xiàn)，真正病因乃肺。目前，中西醫(yī)結(jié)合已成為臨床治療的一大趨勢(shì)。在中西醫(yī)聯(lián)合治療SOM的報(bào)道中，已出現(xiàn)香菊膠囊、檸蒎腸溶軟膠囊等幾種中成藥輔助西醫(yī)治療并取得滿意效果[10-11]。復(fù)方雙花片是來(lái)源于我國(guó)民間醫(yī)藥寶庫(kù)并經(jīng)現(xiàn)代工藝制成的中成藥，方中的金銀花、連翹、板藍(lán)根均具有清熱解毒的功效，幾味藥合用加強(qiáng)清熱解毒，而穿心蓮具有清肺解毒的功效。經(jīng)藥理研究證實(shí)，復(fù)方雙花片中4味藥材的提取物具有較強(qiáng)的殺菌、抗病毒、消炎作用，體內(nèi)外的抗菌效果均較為突出[12-13]。目前尚無(wú)關(guān)于復(fù)方雙花片聯(lián)合西藥治療SOM的報(bào)道，從本研究看，治療組的總有效率97.58%明顯高于對(duì)照組的85.00%(P<0.05)，這表明復(fù)方雙花片可有效增強(qiáng)療效，治療效果確切。

本研究結(jié)果顯示，2組治療后分泌物TNF-α、IL-6、IL-10水平明顯降低，且治療組明顯低于對(duì)照組(P<0.05)，但2組治療前后血清TNF-α、IL-6、IL-10水平無(wú)明顯變化，組間比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這提示復(fù)方雙花片對(duì)SOM中耳積液中的TNF-α、IL-6、IL-10有明顯影響，但對(duì)血清中的炎癥因子卻影響不大，這可能是與中耳粘膜參與SOM患者的局部免疫反應(yīng)有關(guān)。既往研究發(fā)現(xiàn)，SOM患者雖然Tregs比例異常增高，但外周血中的TNF-α、IL-6、IL-10卻與健康人無(wú)較大差異，三種因子僅在中耳積液中表達(dá)上調(diào)[14-15]，這體現(xiàn)出了免疫調(diào)節(jié)的復(fù)雜性。由表2也可看出，SOM患者血清中TNF-α、IL-6、IL-10處于較低表達(dá)狀態(tài)，且不受治療明顯影響，符合上述結(jié)論。

綜上所述，復(fù)方雙花片聯(lián)合西藥治療SOM的療效顯著，可有效減少中耳積液中的TNF、IL-6、IL-10等炎癥因子。

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(編校：薛雪)

Effect of compound Shuanghua tablets combined with western medicine on serum and secretions of inflammation factors in acute secretory otitis media

SHEN Hong-zhongΔ, WENG Bai-yue

(Department of ENT, Zhejiang Xinchang People’s Hospital, Shaoxing 312500, China)

ObjectiveTo investigate the effect of compound Shuanghua tablets combined with western medicine on serum secretions TNF-α,IL-6 and IL-10 of patients with secretory otitis media.MethodsA total of 200 cases(244 ears) with acute secretory otitis media in Zhejiang Xinchang People’s Hospital from August 2014 to June 2016 were randomly divided into two groups.The control group with 100 case (120ears) were only given conventional western medicine therapy,and the treatment group with 100 case (124ears) were given compound Shuanghua tablets on the basis of the control group.Peripheral venous blood and middle ear effusion of each patient was collected before and after treatment,and to detect the level of TNF-α,IL-6 and IL-10 by cytometric bead array,meanwhile the curative effect of the two groups were compared.ResultsThe curative effect of the treatment group( 97.58%) was higher than the control group(85.00%),the difference were statistically significant(P<0.05).There were no significant difference on serum TNF-α,IL-6 and IL-10 between the two groups before and after treatment.The secretions TNF-α,IL-6 and IL-10 of the two groups after treatment were significantly reducing,and the treatment group were lower than the control group,the difference were statistically significant(P<0.05).ConclusionCompound Shuanghua tablets combined with western medicine in traetment SOM is effective distinctly,and can reduce secretions TNF-α,IL-6 and IL-10 effectly.

compound Shuanghua tablets; secretory otitis media; TNF-α;IL-6;IL-10

10.3969/j.issn.1005-1678.2016.11.042

沈宏忠，通信作者，男，本科，主治醫(yī)師，研究方向：急性中耳炎的臨床治療，E-mail：lian0610@sina.com。

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