吳迪，趙穎，任會(huì)丹，司新紅，張琳，王澈,2Δ

(1.遼寧師范大學(xué) 化學(xué)與化工學(xué)院，遼寧 大連 116029；2.遼寧省生物技術(shù)與分子藥物研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧 大連 116081)

陽(yáng)離子抗癌肽Temporin-1CEa脂質(zhì)體的構(gòu)建及其體外抗乳腺癌活性評(píng)價(jià)

吳迪1?，趙穎1?，任會(huì)丹1，司新紅1，張琳1，王澈1,2Δ

(1.遼寧師范大學(xué) 化學(xué)與化工學(xué)院，遼寧 大連 116029；2.遼寧省生物技術(shù)與分子藥物研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧 大連 116081)

目的 建立陽(yáng)離子抗癌肽Temporin-1CEa藥物載體系統(tǒng)，并評(píng)價(jià)其體外抗乳腺癌活性。方法 本文選用陽(yáng)離子抗癌肽Temporin-1CEa利用逆向蒸發(fā)法構(gòu)建聚乙二醇(polyethylene glycol，PEG)修飾的脂質(zhì)體(Temporion-1CEa-liposomes, Temporin-1CEa-LIP)，并對(duì)其包封率、粒徑和Zeta電位進(jìn)行表征，同時(shí)對(duì)其體外血清穩(wěn)定性及其對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的體外活細(xì)胞毒性進(jìn)行初步評(píng)價(jià)。結(jié)果 采用逆向蒸發(fā)法制備PEG修飾的Temporin-1CEa-LIP，其包封率為(55.57±1.56)%，粒徑為(105.3±1.37)nm，Zeta電位為(-16.17±0.964)mV。Temporin-1CEa-LIP具有良好的血清穩(wěn)定性，能夠被人乳腺癌MCF-7細(xì)胞有效攝取，并在作用細(xì)胞24 h后與Temporin-1CEa具有相近的抑癌活性。結(jié)論 PEG修飾的脂質(zhì)體是一種很好的新型多肽類抗癌藥物遞送系統(tǒng)，Temporin-1CEa-LIP有望成為新型的抗癌制劑用于臨床。

抗癌肽；乳腺癌；脂質(zhì)體；聚乙二醇

乳腺癌是女性常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，嚴(yán)重威脅人類健康[1]。傳統(tǒng)化療藥物由于靶向性差和多藥耐藥現(xiàn)象的發(fā)生，往往導(dǎo)致乳腺癌臨床療效欠佳甚至治療失敗[2]。近年來(lái)，隨著對(duì)肽類抗癌藥物研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)某些陽(yáng)離子抗癌肽(cationic anticancer peptide，CAPs)具有獨(dú)特的作用機(jī)制和良好的抑癌作用，且不易產(chǎn)生耐藥性，因此逐漸成為目前新型抗癌藥物研究的熱點(diǎn)。但是由于陽(yáng)離子抗癌肽在體內(nèi)易水解，穩(wěn)定性較差等不足限制了其臨床使用。對(duì)陽(yáng)離子抗癌肽進(jìn)行藥學(xué)修飾并建立藥物載體系統(tǒng)以克服上述缺點(diǎn)并促進(jìn)其臨床轉(zhuǎn)化已經(jīng)成為目前亟待解決的問(wèn)題。

CAPs分子量較小，帶有正電荷，對(duì)腫瘤細(xì)胞有較好的選擇性[3-4]。與正常非腫瘤細(xì)胞相比，腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞膜表面通常帶有較多的負(fù)電荷，CAP能夠通過(guò)靜電作用結(jié)合到腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞膜上，從而達(dá)到靶向性的抗癌作用[5]。本文選取的Temporin-1CEa是從中國(guó)林蛙皮膚分泌物中提取的的天然CAP，由17個(gè)氨基酸組成，帶3個(gè)凈正電荷。本課題組已經(jīng)證明Temporin-1CEa具有良好的選擇性抗癌作用，能有效殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)對(duì)正常細(xì)胞無(wú)明顯毒副作用[6-7]。但是CAPs無(wú)論是口服或是靜脈注射，在體內(nèi)均具有易水解、穩(wěn)定性較差等性質(zhì)，所以迫切需要借助藥物載體將CAPs運(yùn)輸?shù)襟w內(nèi)避免其水解破壞，使其穩(wěn)定的靶向地作用于腫瘤，從而達(dá)到治療的效果[8-10]。

在眾多載藥系統(tǒng)中，脂質(zhì)體是最先應(yīng)用于臨床的藥物載體，主要由天然成分組成，具有良好的相容性和靶向性，且體內(nèi)降解無(wú)毒性[11]。聚乙二醇(polyethylene glycols，PEG)可以顯著延長(zhǎng)藥物載體在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間，PEG修飾的脂質(zhì)體不易被體內(nèi)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)作為異物吞噬、清除，并且能夠通過(guò)實(shí)體瘤的高通透性和滯留效應(yīng)(enhanced permeability and retention, EPR)[12-14]，將藥物有效地靶向腫瘤部位發(fā)揮治療作用。

本實(shí)驗(yàn)旨在構(gòu)建PEG-脂質(zhì)體藥物載體系統(tǒng)，在保留抗癌肽Temporin-1CEa良好的抑癌效果的基礎(chǔ)上，改善Temporin-1CEa在體內(nèi)易水解，穩(wěn)定性較差等缺點(diǎn)，提高抗癌肽Temporin-1CEa在腫瘤細(xì)胞內(nèi)的攝取效率，為今后肽類抗癌新藥制劑的研究和臨床應(yīng)用研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試劑：葡聚糖凝膠(Sephadex G-50)(Biosharp,日本)；MTT(Sigma公司)；DMSO(聯(lián)邦試劑公司)；96孔細(xì)胞培養(yǎng)板(Corning公司)；DSPE-PEG2000(上海艾偉特醫(yī)藥科技有限公司)；膽固醇(沈陽(yáng)市醫(yī)藥公司化玻站試劑分廠)；乙腈(色譜純)、氯仿、冰乙醚(天津市科密歐化學(xué)試劑)；Temporin-1CEa(上海吉爾生化有限公司)；人乳腺癌細(xì)胞MCF-7(凱基生物有限公司)；1640培養(yǎng)液、胎牛血清(Gibco公司，美國(guó))。

1.1.2 儀器：DF-101S 恒溫加熱磁力攪拌器(鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司)；JY92-2D 超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)(寧波新芝生物科技股份責(zé)任公司)；KQ5200B型高功率數(shù)控超聲波清洗器(昆明市超聲儀器有限公司)；SC-05離心機(jī)(安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司)；SPD-M20A 230V CN 高效液相色譜儀(SHIMADZU,日本)；NANO-ZS90激光粒度儀/Zeta電位分析儀；FACSAriaⅡ流式細(xì)胞儀；UV-7504PC型紫外可見(jiàn)分光光度儀。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)：人乳腺癌MCF-7細(xì)胞(凱基生物有限公司)用含10%胎牛血清(Gibco公司，美國(guó))的1640培養(yǎng)液(Gibco公司，美國(guó))。

1.2.2 Temporin-1CEa-LIP制備：分別精密稱取S100磷脂、膽固醇、DSPE-PEG2000適量溶于無(wú)水乙醚，加入抗癌肽Temporin-1CEa的水溶液，2者相互混合至500 mL茄形瓶中，進(jìn)行超聲波振蕩至形成穩(wěn)定的W/O型乳劑，在冰水浴條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑至形成薄膜。加入pH7.4 PBS溶液水化，在冰浴條件下探頭超聲(200W 2 min、400W 2 min、600W 2 min)。所形成的脂質(zhì)體于4 ℃條件下保存?zhèn)溆肹15]。

1.2.3 HPLC法測(cè)定Temporin-1CEa-LIP包封率：色譜條件：色譜柱為 Diamonsil C15柱(200 mm×4.6 mm, 5 μm);流動(dòng)相為乙腈:水(7:3, v/v);檢測(cè)波長(zhǎng)220 nm;柱溫25 ℃;流速1 mL/min;進(jìn)樣量10 μL。以抗癌肽Temporin-1CEa峰面積(A)對(duì)其濃度(C, mg/mL) 線性回歸得標(biāo)準(zhǔn)曲線。精密量取100 μL載藥過(guò)柱子脂質(zhì)體和100 μL載藥未過(guò)柱脂質(zhì)體，加入乳化劑破乳，過(guò)膜(0.22 μm)，進(jìn)樣測(cè)定。根據(jù)線性回歸方程得出藥物濃度，計(jì)算包封率EE%(entrapment efficiency, EE%)。包封率=(載藥過(guò)柱子脂質(zhì)體中含藥物的濃度)/(載藥未過(guò)柱脂質(zhì)體中含藥物的濃度)×100%。共檢測(cè)3次。

1.2.4 不同時(shí)間Temporin-1CEa-LIP的藥物泄露量：精密吸取Temporin-1CEa-LIP 100 μL，分別于0、3、5、9、24和48 h過(guò)葡聚糖凝膠柱去除游離藥物。加入破乳劑，用HPLC法測(cè)定(默認(rèn)0 h藥物含量為100%)。共檢測(cè)3次。

1.2.5 Temporin-1CEa-LIP粒徑和電位考察：取Temporin-1CE-LIP 100 μL，用超純水稀釋至1 mL，采用激光粒度儀/Zeta電位分析儀對(duì)其粒徑與Zeta電位進(jìn)行測(cè)定。共檢測(cè)2次。

1.2.6 Temporin-1CEa-LIP體外血清穩(wěn)定性考察：取Temporin-1CE-LIP與濾過(guò)的胎牛血清等體積1:1(v/v)混合，分別于0.5、1、2、4、8和24 h取100 μL，用超純水稀釋至1 mL，采用激光粒度儀/Zeta電位分析儀對(duì)其粒度進(jìn)行測(cè)定。共檢測(cè)3次。

1.2.7 Temporin-1CEa-LIP細(xì)胞攝取考察：將人乳腺癌MCF-7細(xì)胞以2×105個(gè)/mL的密度分瓶，37 ℃、5% CO2過(guò)夜培養(yǎng)。根據(jù)包封率計(jì)算加藥濃度，設(shè)置實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組為FITC標(biāo)記的Temporin-1CE-LIP，對(duì)照組為FITC標(biāo)記的Temporin-1CE抗菌肽，設(shè)每空加藥濃度為0、10、30、50 μM，分別作用4、24 h，將原培養(yǎng)液吸出后，用PBS漂洗3次，胰酶消化，離心后用500 μL PBS重懸細(xì)胞，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞對(duì)Temporin-1CE-LIP的攝取強(qiáng)度。共檢測(cè)3次。

1.2.8 Temporin-1CEa-LIP對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的細(xì)胞毒性考察：將人乳腺癌MCF-7細(xì)胞，以5×104個(gè)/mL接種于96孔板中，在37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。根據(jù)包封率計(jì)算加藥濃度，設(shè)10、20、40、60、80和100 μL濃度梯度。24 h后加入MTT溶液繼續(xù)培養(yǎng)，4 h后吸掉上清液，加入二甲基亞砜，用酶標(biāo)儀測(cè)定，波長(zhǎng)吸光度值492 nm。共檢測(cè)3次。

2 結(jié)果

2.1 Temporin-1CEa-LIP包封率 脂質(zhì)體的藥物包封率是對(duì)載藥脂質(zhì)體的一個(gè)重要評(píng)價(jià)。根據(jù)線性回歸方程：Y=3.8E+6X+7743.6，R2=0.9964，推導(dǎo)藥物濃度，計(jì)算Temporin-1CEa-Lip的包封率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，本實(shí)驗(yàn)室制備的Temporin-1CEa-LIP包封率為(55.57±1.56)%。

2.2 不同時(shí)間Temporin-1CEa-LIP的藥物泄露量 脂質(zhì)體的磷脂雙分子層將抗癌肽Temporin-1CEa包封在脂質(zhì)體內(nèi)水腔，由于抗癌肽Temporin-1CEa本身的性質(zhì)，可能會(huì)使脂質(zhì)體膜材料對(duì)其包封率產(chǎn)生影響。因此探究Temporin-1CE-LIP不同時(shí)間點(diǎn)藥物泄漏量，評(píng)價(jià)其穩(wěn)定性。由圖1可見(jiàn)，Temporin-1CE-LIP在48h后，藥物含量仍然在60%左右，說(shuō)明PEG修飾后的抗癌肽Temporin-1CEa脂質(zhì)體具有良好的穩(wěn)定性。

圖1 不同時(shí)間點(diǎn)Temporin-1CE-LIP藥物含量*P<0.05，1h與48h比較Fig.1 The drug content of Temporin-1CE-LIP at different time points( ±s，n=3)*P<0.05，compared 1h with 48 h

2.3 Temporin-1CEa-LIP粒徑和zeta電位 為了使Temporin-1 CE-LIP可以有效地遞送到腫瘤部位，對(duì)其粒徑和電位進(jìn)行測(cè)定。由表1和圖2可見(jiàn)，Temporin-1CE-LIP的粒徑為(105.3±1.37)nm，PDI為(0.215±0.0586)，表明Temporin-1CE-LIP具有良好的均一性。Temporin-1CE-LIP的Zeta電位為(-16.17±0.964)mV，由原來(lái)的正值變?yōu)樨?fù)值，且絕對(duì)值增大。

表1 Temporin-1CE-LIP的Size 和Zeta電位Tab.1 Size and Zeta potential of Temporin-1CE-LIP ±s，n=2)

圖2 Temporin-1CE-LIP粒徑Fig.2 Size of Temporin-1CE-LIP

2.4 Temporin-1CEa-LIP體外血清穩(wěn)定性 為了模擬體內(nèi)環(huán)境，考察Temporin-1CE-LIP進(jìn)入體內(nèi)的血清穩(wěn)定性，本課題將脂質(zhì)體與胎牛血清混合孵育，并在不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)其粒徑進(jìn)行測(cè)定，考察其血清穩(wěn)定性。由圖3可見(jiàn)，Temporin-1CE-LIP在不同的時(shí)間點(diǎn)，粒徑均在110 nm左右，且保持穩(wěn)定，說(shuō)明該脂質(zhì)體具有良好的血清穩(wěn)定性。

圖3 Temporin-1CE-LIP不同時(shí)間點(diǎn)在血清中粒徑大小Fig.3 Particle size of Temporin-1CE-LIP at various time points

2.5 Temporin-1CEa-LIP的細(xì)胞攝取 為了探究PEG修飾的Temporin-1CE-LIP能否被人乳腺癌MCF-7細(xì)胞攝取，本研究進(jìn)一步考察了4 h和24 h不同時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞攝取。由圖4、5可見(jiàn)，在相同時(shí)間條件下，隨著孵育濃度的增加，細(xì)胞對(duì)脂質(zhì)體的攝取強(qiáng)度顯著性增強(qiáng)；在相同濃度條件下，隨著孵育時(shí)間的增加，細(xì)胞對(duì)脂質(zhì)體的攝取強(qiáng)度顯著性增強(qiáng)，此結(jié)果表明，MCF-7細(xì)胞對(duì)Temporin-1CE-LIP的攝取呈時(shí)間和濃度依賴性。

圖4 MCF-7細(xì)胞對(duì)Temporin-1CE-LIP攝取的流式圖Fig.4 The flow cytometry of MCF-7 cell uptake of Temporin-1CE-LIP

圖5 MCF-7細(xì)胞對(duì)Temporin-1CE-LIP攝取量Fig.

2.6 Temporin-1CEa-LIP對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的細(xì)胞毒性 為了驗(yàn)證Temporin-1CE-LIP抑癌效果與Temporin-1CEa抗癌肽是否一致，效果是否顯著，本研究進(jìn)行了Temporin-1CE-LIP對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的細(xì)胞毒性考察。由圖6可見(jiàn)，Temporin-1CEa抗癌肽對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞IC50值為25.98 μM；Temporin-1CE-LIP對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞IC50值為29.32 μM，表明Temporin-1CE-LIP作用MCF-7細(xì)胞24h與Temporin1-CEa抗癌肽抑癌效果一致。

圖6 MTT法檢測(cè)Temporin1-CEa抗癌肽、Temporin-1CE-LIP對(duì)MCF-7 細(xì)胞的細(xì)胞毒作用Fig.6 Cytotoxic effects of Temporin1-CEa，Temporin-1CE-LIP by

3 討論

CAPs的抗癌活性顯著，對(duì)癌細(xì)胞不易產(chǎn)生耐藥性，能特異性識(shí)別癌細(xì)胞，且對(duì)正常細(xì)胞不會(huì)造成損害[16]。其中，抗癌肽Temporin-1CEa帶有3個(gè)正電荷，可以通過(guò)靜電作用與含負(fù)電荷成分的腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞膜結(jié)合，殺死癌細(xì)胞，達(dá)到抑癌效果。本課題組的前期研究表明Temporin-1CEa對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞具有良好的抑癌效果，在有效殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)對(duì)正常細(xì)胞無(wú)明顯毒副作用。然而，包括Temporin-1Cea在內(nèi)的CAPs具有體內(nèi)易降解，穩(wěn)定性差[17]等局限性。

對(duì)陽(yáng)離子抗癌肽進(jìn)行藥學(xué)修飾并建立藥物載體系統(tǒng)以克服上述缺點(diǎn)并促進(jìn)其臨床轉(zhuǎn)化已經(jīng)成為目前亟待解決的問(wèn)題。本研究構(gòu)建了含抗癌肽Temporin-1CEa的PEG修飾的脂質(zhì)體載藥系統(tǒng)。利用PEG的親水性，可以減少被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)攝取，同時(shí)脂質(zhì)體到達(dá)腫瘤部位后，作為“橋梁”直接與細(xì)胞膜接觸，增加其介導(dǎo)脂質(zhì)體入胞幾率[18-19]。前期研究發(fā)現(xiàn)甲醇和氯仿會(huì)對(duì)Temporin-1CEa抗癌肽理化性質(zhì)產(chǎn)生影響，且在進(jìn)行體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí)甲醇和氯仿的存在會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，因此不能選用甲醇和氯仿溶解Temporin-1CEa抗癌肽，而薄膜分散法一般采用氯仿作為溶劑，故排除薄膜分散法制備脂質(zhì)體，又由于抗癌肽Temporin-1CEa是一種水溶性藥物，所以本文采用逆向蒸發(fā)法制備Temporin-1CEa-LIP。

近年來(lái)，PEG被廣泛應(yīng)用在納米載體的構(gòu)建中。其通過(guò)滲透和EPR效應(yīng)到達(dá)腫瘤部位發(fā)揮作用的被動(dòng)靶向脂質(zhì)體的粒徑范圍是100～200 nm[20]。本實(shí)驗(yàn)中制備的Temporin-1CEa-LIP的粒徑為105.3 nm，表明通過(guò)逆向蒸發(fā)法制備的被動(dòng)靶向脂質(zhì)體Temporin-1CEa-LIP的粒徑滿足基本要求。此外，有研究表明，經(jīng)PEG修飾后的脂質(zhì)體，粒徑和Zeta電位等性質(zhì)的變化，使其更易進(jìn)入體內(nèi)，通過(guò)EPR效應(yīng)作用附集在瘤體周圍，發(fā)揮抑癌作用[21]。結(jié)果顯示，Temporin-1CEa-LIP的Zeta電位為-16.17 mV，由原來(lái)的正值變?yōu)樨?fù)值，且絕對(duì)值增大，說(shuō)明外層長(zhǎng)鏈 的PEG 可以有效屏蔽內(nèi)層帶正電的陽(yáng)離子抗癌肽Temporin-1CEa (表 1), 而對(duì)正電荷的屏蔽有利于減少脂質(zhì)體與血漿蛋白的相互作用, 延長(zhǎng)其在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間，增強(qiáng)了在生物體內(nèi)的穩(wěn)定性[22]。但是抗癌肽Temporin-1CEa本身帶正電荷，而本實(shí)驗(yàn)中的Temporin-1CEa-LIP帶有負(fù)電荷，這可能會(huì)妨礙脂質(zhì)體與癌細(xì)胞的相互作用。然而，本實(shí)驗(yàn)制備的陽(yáng)離子抗癌肽Temporin-1CEa-LIP克服了其體內(nèi)易降解，穩(wěn)定性差等局限性，并且PEG可以延長(zhǎng)脂質(zhì)體在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間, 改變脂質(zhì)體的組織分布，使其更好地發(fā)揮抑癌作用。

另一方面，體外血清穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)也進(jìn)一步證明了該載藥系統(tǒng)的穩(wěn)定性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該脂質(zhì)體與血清混合后，具有良好的穩(wěn)定性，這可能是因?yàn)镻EG修飾后的脂質(zhì)體可以延長(zhǎng)藥物載體在體內(nèi)外的循環(huán)時(shí)間[23]。此外，體外活性初步評(píng)價(jià)的實(shí)驗(yàn)表明，Temporin-1CE-LIP作用人乳腺癌MCF-7細(xì)胞24h與Temporin-1CEa抗癌肽具有相近的抑癌效果，說(shuō)明脂質(zhì)體載藥系統(tǒng)較好地保留了抗癌肽本身所具有的抑癌活性。

綜上所述，PEG修飾的Temporin-1CE-LIP不但提高了抗癌肽Temporin-1CEa在血清中的穩(wěn)定性還保留了抗癌肽Temporin-1CEa良好的抑癌效果，因此Temporin-1CE-LIP有望成為治療乳腺癌疾病的一種新型的載藥系統(tǒng)。

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(編校：王儼儼)

Construction of cationic anticancer peptide Temporin-1CEa liposomes and evaluation of anti-breast cancer activityinvitro

WU Di1?, ZHAO Ying1?, REN Hui-dan1, SI Xin-hong1, ZHANG Lin1, WANG Che1,2Δ

(1.School of Chemistry and Chemical Engineering, Liaoning Normal University, Dalian 116029, China; 2.Liaoning Province Key Laboratory of Biotechnology and Molecular Drug R & D, Dalian 116081, China)

ObjectiveTo constract and evaluate the cationic anticancer peptide Temporin-1CEa liposomes and evaluate anti-breast cancer activityinvitro.MethodsThe polyethylene glycol (PEG)-modified liposomes containing Temporin-1CEa, one recently discovered cationic anticancer peptide (CAP), were constructed by using reverse-phase evaporation method. The encapsulation efficiency, particle size and Zeta potential of the Temporin-1CEa-containing liposomes (Temporin-1CEa-LIP) were characterized. In addition, that had the furhter evaluated of the stability and specific toxicity against human breast cancer MCF-7 cellsinvitro.ResultsThe data suggested that the PEG-modified liposomes served a promising drug delivery system for CAPs, those indicated by the encapsulation efficiency was (55.57±1.56)%, the particle size was (105.3±1.37) nm and the Zeta potential was (-16.17±0.964) mV. Moreover, theinvitrotest also indicated that Temporin-1CEa-LIP exerted good stability in serum, and it could be efficiently uptaken by MCF-7 cells. Most importantly, after 24h exposure, Temporin-1CEa-LIP showed toxicity against MCF-7 cells, as potent as Temporin-1CEa.ConclusionThe results demonstrates that the PEG-modified liposome is a good drug-delivery system and Temporin-1CEa-LIP could serve as potential anti-tumor candidate for cancer therapy.

anticancer peptide; breast cancer; lipidosome; polyethylene glycol

10.3969/j.issn.1005-1678.2016.11.006

國(guó)家自然科學(xué)基金(81202448)

吳迪，女，本科在讀，研究方向：藥學(xué)，E-mail：1051067749@qq.com；趙穎，共同第一作者，女，碩士在讀，研究方向：靶向抗癌肽脂質(zhì)體的機(jī)理研究及應(yīng)用，E-mail：656684966@qq.com；王澈，通信作者，女，博士，副教授，研究方向：天然藥物抗腫瘤機(jī)制研究及應(yīng)用，E-mail：wangche126@126.com。

R915；TQ464.7；R737.9

A