羅雯

(浙江省臺州市中醫(yī)院 病理科，浙江 臺州 318000)

癌胚抗原、鱗狀細胞癌抗原、HPV-E7蛋白檢測對宮頸癌診斷的價值

羅雯Δ

(浙江省臺州市中醫(yī)院 病理科，浙江 臺州 318000)

目的 探討癌胚抗原(carcino embryonic antigen,CEA)、鱗狀細胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCC)、HPV-E7蛋白檢測對宮頸癌診斷的價值。方法 將2013年7月～2015年7月浙江省臺州市中醫(yī)院收治的107例婦女患者按照病理檢查結(jié)果分為宮頸癌組60例和宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN組)47例，另選擇同期在醫(yī)院體檢的健康人群50例作為對照組，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測3組血清HPV-E7、CEA、SCC表達水平，并以血清HPV-E7、CEA、SCC水平繪制ROC曲線以分析3個指標的診斷價值。結(jié)果 宮頸癌組血清HPV-E7、CEA、SCC均顯著高于CIN組和對照組(P<0.05)，CIN組與對照組血清HPV-E7、CEA、SCC比較差異無統(tǒng)計學意義；Ⅰ～Ⅱ期宮頸癌患者血清HPV-E7、CEA、SCC水平顯著低于Ⅲ～Ⅳ期患者，2者比較差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。HPV-E7的ROC曲線下面積顯著高于CEA和SCC(Z=2.914,2.951,P<0.05)，CEA、SCC的 ROC曲線下面積比較差異無統(tǒng)計學意義(Z=1.580,P=0.057)。結(jié)論 宮頸癌患者血清HPV-E7、CEA、SCC均顯著升高，HPV-E7對宮頸癌早期診斷的價值更高，有望成為宮頸癌及時診斷的有效指標之一。

癌胚抗原；鱗狀細胞癌抗原；HPV-E7蛋白；人乳頭瘤病毒；宮頸癌；診斷

宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤，其發(fā)病率占女性所有惡性腫瘤的第3位[1]。宮頸癌的誘因較多，其中人乳頭瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染是宮頸癌最主要的致病因素，目前已證實90%以上的宮頸癌是由高危型HPV持續(xù)感染所導致的[2-3]。殷復粉等[4]報道稱高危型HPV持續(xù)感染會上調(diào)HPV-E7蛋白表達啟動，激活致癌過程；HPV-E7蛋白表達水平與宮頸癌發(fā)病、進展密切相關(guān)，因此HPV-E7蛋白是一個理想的腫瘤標記物，可以作為宮頸癌診斷、進展和轉(zhuǎn)歸的預測指標之一。鑒于此，本研究對醫(yī)院收治的60例宮頸癌患者、47例宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)患者以及50例健康人群血清HPV-E7蛋白、癌胚抗原(carcino embryonic antigen,CEA)、鱗狀細胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCC)水平進行檢測，觀察3種指標對宮頸癌診斷的效能，現(xiàn)將研究成果總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準，選擇2013年7月～2015年7月醫(yī)院收治的107例婦女患者作為研究對象，按照病理檢查結(jié)果分為宮頸癌組60例和CIN組47例，宮頸癌組年齡24～76歲，平均(52.5±6.8)歲，按照國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟[5](International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期標準分為Ⅰ期14例，Ⅱ期17例，Ⅲ期21例，Ⅳ期8例；CIN組年齡21～72歲，平均(52.1±6.2)歲，按照世界衛(wèi)生組織[6](WHO)分期標準分為CINⅠ期19例，Ⅱ期22例，Ⅲ期6例。宮頸癌組、CIN組均經(jīng)病理學檢查證實，同時排除生殖道炎癥及其他婦科合并癥。另選擇同期在醫(yī)院體檢的健康女性50例作為對照組，年齡19～81歲，平均(52.6±7.1)歲；對照組亦排除婦科疾病或自身免疫性疾病；3組受試對象均被告知研究過程，并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 病理學檢查：宮頸癌組、CIN組均于入院后行陰道鏡檢查，對于檢查結(jié)果異常者行宮頸組織病理學檢查，檢查結(jié)果由病理科2位副主任以上醫(yī)師進行診斷，診斷標準均嚴格按照WHO分類標準執(zhí)行。

1.2.2 血清學檢查：3組受試對象均于清晨空腹時抽取肘靜脈血3 mL，1400 g離心5 min，留取上清液，并置入-70 ℃冰箱保存待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測3組血清HPV-E7、CEA、SCC表達水平，檢測儀器為美國MD SpectraMax M5多功能酶標儀，檢測試劑盒購自上海拜力生物科技有限公司，嚴格按照檢測試劑盒說明書操作。HPV-E7臨界值為30U/L，CEA臨界值為5 μg/L，SCC臨界值為1.5 μg/L，超過臨界值判定為陽性。

2 結(jié)果

2.1 3組受試對象血清HPV-E7、CEA及SCC水平 宮頸癌組血清HPV-E7、CEA、SCC均顯著高于CIN組和對照組(P<0.05)，CIN組與對照組血清HPV-E7、CEA、SCC比較差異無統(tǒng)計學意義。見表1。

表1 3組受試對象血清HPV-E7、CEA及SCC水平

*P<0.05，與對照組比較，compared with control group;#P<0.05，與CIN組比較，compared with CIN group

2.2 不同分期宮頸癌患者血清HPV-E7、CEA與SCC水平 不同臨床分期宮頸癌患者：Ⅲ～Ⅳ期宮頸癌患者血清HPV-E7、CEA、SCC表達水平均顯著高于Ⅰ～Ⅱ期宮頸癌患者(P<0.05)。見表2。

表2 不同分期宮頸癌患者血清HPV-E7、CEA與SCC水平

△P<0.05，與Ⅰ～Ⅱ期比較，compared with stageⅠ-Ⅱ

2.3 血清HPV-E7、CEA與SCC對宮頸癌的檢測效能 以血清HPV-E7、CEA與SCC水平繪制ROC曲線，結(jié)果顯示HPV-E7的ROC曲線下面積為0.921，最佳臨界值為38.3 U/L，對應的敏感度為88.1%，特異度為96.8%；CEA的ROC曲線下面積為0.879，最佳臨界值為6.03 μg/L，對應的敏感度為84.1%，特異度為81.7%；SCC的ROC曲線下面積為0.885，最佳臨界值為5.17 μg/L，對應的敏感度為84.9%，特異度為84.3%，HPV-E7的ROC曲線下面積顯著高于CEA和SCC(Z=2.914,2.951,P<0.05)，CEA、SCC的 ROC曲線下面積比較差異無統(tǒng)計學意義(Z=1.580,P=0.057)。見圖1。

圖1 血清HPV-E7、CEA與SCC的ROC曲線Fig.1 The ROC of serum HPV-E7, CEA and SCC

3 討論

宮頸癌在婦科腫瘤中發(fā)病率僅低于乳腺癌，成為威脅女性健康的主要疾病之一。流行病學調(diào)查[7]顯示，我國宮頸癌發(fā)病率逐年升高，且發(fā)病呈年輕化趨勢。早期宮頸癌生存率較為滿意，韓雪等[8]報道稱Ⅰ～Ⅱ期宮頸癌患者5年生存率高達80%～90%，而Ⅲ～Ⅳ期5年生存率降低至30%～40%；此外早期發(fā)現(xiàn)宮頸癌患者能夠及時手術(shù)，遠期生存率更高。因此早期診斷宮頸癌對提高患者預后具有重要意義。然而遺憾的是，宮頸癌早期臨床癥狀并不明顯，多數(shù)患者出現(xiàn)臨床癥狀而就診時已是中晚期，錯過了最佳治療時間窗，為此臨床學者一直致力于尋找宮頸癌早期診斷的指標之一。

CEA是存在于人類胚胎、黏膜組織中的特異性酸性糖蛋白抗原，目前證實[9-10]結(jié)腸癌、乳腺癌、宮頸癌組織中CEA表達顯著上調(diào)，隨著病情的進展，CEA水平也逐漸升高。周炳輝等[11]報道稱宮頸癌患者血清CEA水平顯著高于健康人群，經(jīng)過有效放化療后，緩解(CR+PR)患者血清CEA水平顯著低于未緩解(MR+PD)患者，證實了CEA對宮頸癌分期檢測、診斷和療效觀察的價值。Ikeda等[12]也報道稱CEA是宮頸癌輔助診斷、分型判定的有效指標之一。然而CEA存在靈敏度不高的缺陷，特別是部分持續(xù)宮頸感染的患者，血清CEA存在升高的風險[13]，從而出現(xiàn)漏診或誤診。國外研究[14]證實CEA對宮頸癌診斷多需要聯(lián)合其他指標檢測，單純CEA檢測陽性預測值、陰性預測值均不高。SCC是一種絲氨酸蛋白酶抑制劑，最初從宮頸鱗癌組織中獲得，因此被認為是鱗癌腫瘤敏感的標記物之一[15]。Hashimoto等[16]報道稱在因?qū)m頸鱗癌死亡的患者中，45% 患者血清SCC濃度于復發(fā)3個月內(nèi)顯著升高，且SCC濃度與腫瘤的進展、瘤體體積和殘余腫瘤細胞密切相關(guān)。盧艷等[17]亦證實SCC濃度升高的宮頸癌患者存活較差，是患者預后的獨立風險因子。

宮頸癌患者血清HPV來源一直是研究的熱點，國外Khorasanizadeh等[18]研究認為HPV主要來源于脫落的宮頸癌細胞，且85%的患者治療后血清HPV DNA轉(zhuǎn)陰。姚時賢等[19]對宮頸癌患者血清HPV DNA的研究中證實，50%血清HPV DNA陽性的宮頸癌患者原發(fā)病灶亦呈陽性，且其亞型與血清HPV DNA亞型基本相同，進一步證實了宮頸癌血清HPV主要來源于脫落的腫瘤細胞。多數(shù)患者在HPV感染期無明顯臨床癥狀，然而持續(xù)HPV感染的患者無疑處于高風險的癌變前期。在眾多HPV DNA亞型中，主要致癌分型有E2、E6、E7，其中E7主要受E2調(diào)控。當HPV-E7整合于宿主染色體中，會抑制Rb、p53等抑癌基因的功能，端粒酶被激活，導致腫瘤細胞凋亡受到抑制，細胞周期受阻并轉(zhuǎn)化為癌細胞。Morales等[20]報道稱HPV-E7基因是宮頸上皮細胞發(fā)生癌變并持續(xù)進展的主要條件，HPV-E7基因表達為HPV-E7蛋白后能夠在血清中檢測出來，因此血清HPV-E7檢測也被認為是宮頸癌早期篩查的有效指標。

本研究對健康婦女、CIN患者及宮頸癌患者血清HPV-E7、CEA、SCC進行檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)宮頸癌組血清HPV-E7、CEA、SCC均顯著高于CIN組和對照組(P<0.05)，CIN組與對照組血清HPV-E7、CEA、SCC比較差異無統(tǒng)計學意義，證實了HPV-E7、CEA、SCC均是宮頸癌潛在的血清學診斷指標。李小華等[21]報道稱宮頸癌患者臨床資料進行回顧性分析，結(jié)果顯示宮頸癌血清HPV-E7、CEA、SCC明顯升高，且未分化腫瘤和高臨床分期患者HPV-E7、CEA、SCC明顯升高。本研究結(jié)果也顯示Ⅰ～Ⅱ期宮頸癌患者血清HPV-E7、CEA、SCC水平顯著低于Ⅲ～Ⅳ期患者(P<0.05)，證實了HPV-E7、CEA、SCC作為宮頸癌病情評估的可能，與奚美麗等[22]報道結(jié)論一致。對3種指標的檢測效能進行分析，結(jié)果顯示HPV-E7的ROC曲線下面積顯著高于CEA和SCC，說明HPV-E7對宮頸癌的診斷價值最高(P<0.05)。李萌輝等[23]也證實與常用的宮頸癌標志物(CEA、SCC)相比，HPV-E7特異度、準確度更高，HPV-E7檢測亦能減少HPV感染患者的過度檢查和治療，有利于早期篩查宮頸癌。

綜上所述，宮頸癌患者血清HPV-E7、CEA、SCC均顯著升高，HPV-E7對宮頸癌早期診斷的價值更高，有望成為宮頸癌及時診斷的有效指標之一。

[1] Balleyguier C, Fournet C, Ben HassenW,et al.Management of cervical cancer detected during pregnancy: Role of magnetic resonance imaging[J].Clin Imaging, 2013,37(1):70-76.

[2] Persano S, Valentini P, Kim JH,et al.Colorimetric detection of human papilloma virus by double isothermal amplification[J].Chem Commun (Camb),2013,49(90):10605-10607.

[3] 曾新,韓一栩,吳麗香,等.HPV在宮頸炎、宮頸癌前病變、宮頸癌中的檢測意義分析[J].中國實驗診斷學,2014,18(1):127-128.

[4] 殷復粉,王寧,于嘯,等.宮頸癌細胞系中HPV16 E6、E7及E6/E7基因?qū)TK31基因甲基化狀態(tài)及表達的影響[J].中國癌癥雜志,2015,(9):641-651.

[5] Le Boeuf F, Niknejad N, Wang J,et al.Sensitivity of cervical carcinoma cells to vesicular stomatitis virus-induced oncolysis: Potential role of human papilloma virus infection[J].Int J Cancer，2012，131(3):E204-215.

[6] DeCew AE, Hadler JL, Daley AM,et al.The prevalence of HPV associated cervical intraepithelial neoplasia in women under age 21: who will be missed under the new cervical cancer screening guidelines?[J].J Pediatr Adolesc Gynecol, 2013,26(6):346-349.

[7] 胡尚英,鄭榮壽,趙方輝,等.1989至2008年中國女性子宮頸癌發(fā)病和死亡趨勢分析[J].中國醫(yī)學科學院學報,2014,36(2):119-125.

[8] 韓雪,黃辰曦,趙佳,等.2002-2012年上海市楊浦區(qū)社區(qū)人群宮頸癌的發(fā)病和生存情況分析[J].第二軍醫(yī)大學學報,2014,35(1):26-29.

[9] 朱茜,劉巋然,鄧新,等.血清鱗狀細胞癌抗原和癌胚抗原及癌抗原125聯(lián)合檢測在宮頸癌診斷中的臨床意義[J].中國綜合臨床,2013,29(6):646-648.

[10] Pandey B, Demchenko AV, Stine KJ.Nanoporous gold as a solid support for protein immobilization and development of an electrochemical immunoassay for prostate specific antigen and carcinoembryonicantigen[J].Mikrochim Acta，2012，179(1-2):71-81.

[11] 周炳輝,張春訪.宮頸癌患者血清SCC、CYFRA21-1、CA125、CEA聯(lián)合檢測的臨床意義[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2014,23(13):1453-1454.

[12] Ikeda S, Yoshimura K, Onda T,et al.Combination of squamous cell carcinoma-antigen, carcinoembryonic antigen, and carbohydrate antigen 19-9 predicts positive pelvic lymph nodes and parametrial involvement in early stage squamous cell carcinoma of the uterine cervix[J].J Obstet Gynaecol Res,2012,38(10):1260-1265.

[13] 陳軍瑩,姚德生.宮頸癌血清腫瘤標志物臨床應用概況[J].醫(yī)學綜述,2015(19):3501-3504.

[14] Molina R, Filella X, Lejarcegui JA,et al.Prospective evaluation of squamous cell carcinomaandcarcinoembryonic antigen as prognostic factors in patients with cervical cancer.[J].Tumour Biol,2003,24(3):156-164.

[15] 閔玲,鐘亮星,陳琳娜,等.血清TSGF、SCC聯(lián)合檢測在宮頸癌診斷中的應用價值[J].實用醫(yī)學雜志,2014,(6):898-900.

[16] Hashimoto K, Yonemori K, Katsumata N,et al.Use of squamous cell carcinoma antigen as a biomarker of chemotherapy response in patients with metastatic cervical carcinoma[J].Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol,2011,159(2):394-398.

[17] 盧艷,王雷.血清骨涎蛋白和鱗狀細胞癌抗原檢測對宮頸癌的診斷價值[J].醫(yī)學臨床研究,2014(8):1631-1632.

[18] Khorasanizadeh F, Hassanloo J, Khaksar N,et al.Epidemiology of cervical cancer and human papilloma virus infection among Iranian women - Analyses of national data and systematic review of the literature[J].Gynecol Oncol,2013,128(2):277-281.

[19] 姚時賢,馮華英.HPV-DNA分型及SCCA在宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變與宮頸癌中的檢測和臨床意義[J].中國婦幼保健,2013,28(11):1743-1746.

[20] Morales-Campos DY, Markham CM, Peskin MF,et al.Hispanic mothers’ and high school girls’ perceptions of cervical cancer, human papilloma virus, and the human papilloma virus vaccine[J].J Adolesc Health, 2013,52(5 Suppl):S69-75.

[21] 李小華,王俊然,冬國友,等.高危型人乳頭瘤樣病毒DNA檢測在宮頸癌早期篩查中的作用[J].重慶醫(yī)學,2013,42(8):939-940.

[22] 奚美麗,李俊,鹿欣,等.Ezrin蛋白在宮頸癌中表達的臨床意義及其與PCNA、MMP-2、MMP-9、HPV E6蛋白的關(guān)系[J].中國癌癥雜志,2013(11):904-909.

[23] 李萌輝,李世霞,劉俊田,等.兩種高危型HPV檢測方法在宮頸癌早期篩查中的應用[J].中國腫瘤臨床,2013(21):1300-1303.

(編校：王儼儼)

Diagnostic value of carcino embryonic antigen,squamous cell carcinoma antigen, human papilloma virus-E7 in cervical carcinoma

LUO WenΔ

(Department of Pathology, Taizhou Hospital of Traditional Chinese Medicine, Taizhou 318000, China)

ObjectiveTo explore the diagnostic value of carcino embryonic antigen (CEA),squamous cell carcinoma antigen(SCC),human papilloma virus-E7 (HPV-E7) in cervical carcinoma.MethodsA total of 107 cases of women patients treated in hospital from July 2013 to July 2015 accorded to the pathological examination results were divided into cervical cancer group 60 cases and CIN group 47 cases,another 50 cases of healthy people were selected as control group, and serum expression levels of HPV-E7, CEA and SCC in the three groups were detected by enzyme-linked immunosorbent assay.ResultsThe serum HPV-E7, CEA and SCC in cervical cancer group were significantly higher than those in CIN group and control group (P<0.05).There was no significant difference in serum HPV-E7, CEA and SCC between CIN group and control group.The levels of serum HPV-E7, CEA and SCC in stage I-II were significantly lower than those of stage III-IV in patients with cervical cancer, and the difference with statistically significant between two groups(P<0.05).The area under the ROC of HPV-E7 was significantly higher than that of CEA and SCC (Z=2.914,2.951,P<0.05), and there was no significant difference in the area under the ROC between CEA and SCC (Z=1.580,P=0.057).ConclusionThe serum HPV-E7, CEA and SCC in cervical cancer patients are significantly higher, the diagnosis value of HPV-E7 is higher which is expected to become one of the effective indicators of cervical cancer diagnosis.

carcino embryonic antigen; squamous cell carcinoma antigen; HPV-E7 protein human papillomavirus; cervical cancer; diagnosis

10.3969/j.issn.1005-1678.2016.06.56

羅雯，通信作者，女，中專，主治醫(yī)師，研究方向：病理科，E-amil：elouse@163.com。

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