張華

(山西省襄汾縣人民醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)科，山西 臨汾 041500)

利奈唑胺對(duì)顱內(nèi)感染小鼠血清心肌酶和腦脊液乳酸脫氫酶的影響

張華Δ

(山西省襄汾縣人民醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)科，山西 臨汾 041500)

目的 探討利奈唑胺對(duì)金黃色葡萄球菌菌液誘導(dǎo)建立的小鼠顱內(nèi)感染模型中血清心肌酶和腦脊液乳酸脫氫酶的影響。方法 將75只小鼠隨機(jī)分為5組：分別為對(duì)照組、模型組和利奈唑胺高、中、低劑量組(2.0、1.0、0.5 mg/kg)。通過顱內(nèi)定點(diǎn)注射金黃色葡萄球菌菌液的方法建立小鼠顱內(nèi)感染模型，利奈唑胺組給予不同劑量利奈唑胺治療，對(duì)照組和模型組給予0.9%NaCl注射液治療，給藥15 d后，測(cè)定小鼠血清心肌酶[天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate transaminase，AST)、乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase，LDH)、肌酸激酶(creatine kinase，CK)]以及腦脊液乳酸脫氫酶(cerebrospinal fluid lactate dehydrogenase，CSF LDH)水平。結(jié)果 模型組血清心肌酶及CSF LDH均明顯高于對(duì)照組(P<0.01)；與模型組相比，利奈唑胺低劑量組血清心肌酶及CSF LDH水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，中劑量組血清心肌酶及CSF LDH水平均有降低(P<0.05)，高劑量組血清心肌酶及CSF LDH水平降低明顯(P<0.01)，且高劑量組血清心肌酶及CSF LDH水平明顯低于中劑量組(P<0.01)。結(jié)論 利奈唑胺對(duì)金黃色葡萄球菌所致顱內(nèi)感染有確切療效，表現(xiàn)出明顯的量效關(guān)系。

利奈唑胺；顱內(nèi)感染；心肌酶；乳酸脫氫酶

顱內(nèi)感染是顱腦手術(shù)常見的并發(fā)癥，也是常見的中樞系統(tǒng)感染性疾病，如治療不及時(shí)，將導(dǎo)致嚴(yán)重后遺癥，甚至引起死亡[1]。因此，對(duì)顱內(nèi)感染的有效治療具有重要意義。心肌酶存在于心肌、骨骼肌、肝臟、腎臟及腦組織中，在發(fā)生顱內(nèi)感染時(shí)，血清心肌酶：天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate transaminase，AST)、乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase，LDH)、肌酸激酶(creatine kinase，CK)以及腦脊液乳酸脫氫酶(cerebrospinal fluid lactate dehydrogenase，CSF LDH)會(huì)有不同程度的改變[2]。利奈唑胺是一種人工合成的唑烷酮類新型抗生素，目前在感染性疾病的治療中有較好的效果，為了探討利奈唑胺對(duì)顱內(nèi)感染的治療效果，本研究通過注射金黃色葡萄球菌感染來建立顱內(nèi)感染動(dòng)物模型，并給予不同劑量的利奈唑胺治療，通過觀察利奈唑胺對(duì)顱內(nèi)感染小鼠血清心肌酶(包括AST、LDH、CK)和CSF LDH水平的影響，了解利奈唑胺對(duì)顱內(nèi)感染的治療效果。

1 材料與方法

1.1 材料 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：SPF級(jí)雌性昆明種小鼠75只，體質(zhì)量(20.0±1.3)g，6～8周齡，購自第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(批號(hào)：FFMULAC201410)，實(shí)驗(yàn)中對(duì)小鼠的飼養(yǎng)及相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按照國家科學(xué)技術(shù)委員會(huì)頒布的《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》進(jìn)行。

試劑：注射用戊巴比妥鈉購自濟(jì)寧辰欣醫(yī)藥(國藥準(zhǔn)字：H31021724)，金黃色葡萄球菌菌液購自中國食品藥品檢定研究院，利奈唑胺注射液購自Pfizer Pharmaceuticals LLC(批準(zhǔn)文號(hào)H20130609)，AST、LDH及CK試劑盒均購自寧波普瑞柏生物技術(shù)有限公司。其余國產(chǎn)試劑均為分析純。

儀器：小鼠用腦立體定向儀(深圳瑞沃德生命科技有限公司，型號(hào)68510)，全自動(dòng)生化分析儀(日本日立，型號(hào)7170A)。

1.2 方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理：將75只小鼠隨機(jī)分成5組，分別為對(duì)照組、模型組、利奈唑胺高劑量組、中劑量組和低劑量組，每組15只。所有小鼠用1%戊巴比妥鈉(30 mg/kg)經(jīng)腹腔內(nèi)注射進(jìn)行麻醉，麻醉后，用腦立體定向儀固定其頭部，定位額葉顱骨穿刺點(diǎn)并用標(biāo)記筆做好標(biāo)記，用碘伏將標(biāo)記處頭部皮膚消毒3遍，用經(jīng)滅菌后的微量進(jìn)樣器吸取5 μL金黃色葡萄球菌菌液(5×106CFU)，于穿刺點(diǎn)垂直進(jìn)針約2 mm，緩慢注入菌液[3]，對(duì)照組小鼠用相同方法注射等量的0.9%NaCl注射液。造模結(jié)束后，利奈唑胺高、中、低劑量組小鼠通過尾靜脈注射分別給予不同劑量(2.0、1.0、0.5 mg/kg)的利奈唑胺(利奈唑胺注射液濃度為2 mg/mL)，對(duì)照組和模型組給予等劑量的0.9%NaCl注射液，每天給藥2次(分別為8:00，16:00)，連續(xù)給藥15 d，治療結(jié)束后進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)。

1.2.2 血清心肌酶檢測(cè)：治療結(jié)束后，各組小鼠經(jīng)眼眶采取血樣約0.3 mL，離心后取其血清，置4 ℃保存。按照試劑盒步驟操作，采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清中AST、LDH、CK含量。

1.2.3 腦脊液乳酸脫氫酶檢測(cè)：治療結(jié)束后，采用硬脊膜穿刺抽取腦脊液法采集腦脊液樣本0.1 mL[4]，按照試劑盒步驟操作，并通過全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)CSF LDH的含量。

2 結(jié)果

2.1 利奈唑胺對(duì)血清心肌酶的影響 模型組AST、LDH、CK水平均高于對(duì)照組(P<0.01)。與模型組比較：利奈唑胺低劑量組AST、LDH、CK水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，利奈唑胺中劑量組AST、LDH、CK水平降低(P<0.05)，高劑量組AST、LDH、CK水平降低(P<0.01)。與高劑量組相比，中劑量組AST、LDH、CK水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

表1 利奈唑胺對(duì)AST、LDH、CK的影響

**P<0.01，與對(duì)照組比較，compared with control group；#P<0.05，##P<0.01，與模型組比較，compared with model group；△△P<0.01，與高劑量組比較，compared with high dose group

2.2 利奈唑胺對(duì)CSF LDH的影響 模型組CSF LDH水平明顯高于對(duì)照組(P<0.01)。與模型組比較：低劑量組CSF LDH水平無差異，利奈唑胺高劑量和中劑量組CSF LDH水平明顯降低，有顯著性差異(P<0.01)。與高劑量組相比，中劑量組CSF LDH水平有顯著性差異(P<0.01)。見表2。

表2 利奈唑胺對(duì)CSF LDH的影響

**P<0.01，與對(duì)照組比較，compared with control group；##P<0.01，與模型組比較，compared with model group；△△P<0.01，與高劑量組比較，compared with high dose group

3 討論

開顱術(shù)后的顱內(nèi)感染是一種嚴(yán)重的并發(fā)癥，也是常見的中樞系統(tǒng)感染性疾病，如不能及時(shí)有效治療，將導(dǎo)致嚴(yán)重后遺癥，死亡率和致殘率極高[5]。已有文獻(xiàn)[6]報(bào)道，其發(fā)生率為1.8%～8.9%，死亡率達(dá)3.8%～30%。顱內(nèi)感染大多發(fā)生在手術(shù)后3～7 d，通常由化膿性細(xì)菌所致，如葡萄球菌、大腸桿菌、腦膜炎雙球菌、鏈球菌以及肺炎球菌等，其中，金黃色葡萄球菌是引起顱內(nèi)感染的主要致病菌[1,7]。臨床上引發(fā)顱內(nèi)感染的途徑主要有4種：直接感染、病灶感染、血行感染和經(jīng)由腦脊液通路所致感染。顱內(nèi)感染一旦發(fā)生，發(fā)病異常迅速，病情十分嚴(yán)重，再加上大多數(shù)抗菌藥物難以通過血腦屏障，更是增加了其在臨床上的治療難度。由于神經(jīng)系統(tǒng)功能受損后難以恢復(fù)，因此，正確的早期診斷與及時(shí)有效的治療，是拯救患者和保護(hù)其神經(jīng)系統(tǒng)功能的關(guān)鍵所在。

目前，利奈唑胺是臨床上使用較多的抗感染藥物[8]。利奈唑胺是通過抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成來發(fā)揮其抑菌作用[9]。它與其他類抗菌藥無交叉耐藥，對(duì)葡萄球菌、抗甲氧西林金黃色葡萄球菌、甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等均有較強(qiáng)的抑菌作用，對(duì)甲氧西林耐藥或敏感葡萄球菌的抑制率均為100%。并且，利奈唑胺能夠高效通過血腦屏障，用于治療顱內(nèi)感染效果顯著。

研究表明，血清心肌酶含量的增高是顱內(nèi)感染的重要標(biāo)志之一[10-11]，血清心肌酶含量的增高可能是由于神經(jīng)細(xì)胞變性壞死、酶的漏出及血腦屏障的破壞而引起血心肌酶升高。本研究中，顱內(nèi)感染小鼠血清心肌酶水平與對(duì)照組相比均有明顯增高(P<0.05)。另有文獻(xiàn)報(bào)道[12-13]，顱內(nèi)感染期腦脊液中也有心肌酶改變，尤以LDH改變最為顯著，可作為鑒別診斷顱內(nèi)感染的有效指標(biāo)。本研究結(jié)果表明，顱內(nèi)感染小鼠的CSF LDH水平發(fā)生明顯改變，遠(yuǎn)高于對(duì)照組水平(P<0.01)，并經(jīng)過相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，CSF LDH水平與血清LDH水平不存在相關(guān)性，說明CSF LDH不是血清LDH通過血腦屏障而來。經(jīng)分析推測(cè)，升高的CSF LDH可能是來源于腦組織損害時(shí)神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)酶的溢出或滲出，有待于進(jìn)一步研究驗(yàn)證。

綜上所述，利奈唑胺能降低顱內(nèi)感染小鼠血清心肌酶和CSF LDH水平，對(duì)顱內(nèi)感染有確切療效，且呈現(xiàn)良好的量效關(guān)系。

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(編校：王儼儼)

Effect of linezolid on serum myocardial enzyme and cerebrospinal fluid lactate dehydrogenase in intracranial infection mice

ZHANG HuaΔ

(Department of Neurology, The Xiangfen People’s Hospital of Shanxi Province, Linfen 041500, China)

ObjectiveTo study the effect of linezolid on serum myocardial enzyme and cerebrospinal fluid lactate dehydrogenase (CSF LDH) in intracranial infection mice. MethodsThe seventy-five mice were divided into five groups randomly: control group, model group, linezolid of high, medium and low dose group. The model of intracranial infection was established by injecting staphylococcus aureus into mice cranium. The mice in linezolid group were treated with different doses of linezolid, the control group and model group were treated with physiological saline. After 15 days with drug, detect the serum myocardial enzyme and CSF LDH level.ResultsThe myocardial enzyme and CSF LDH level of model group were higher than control group obviously (P<0.01); compared with the model group, the myocardial enzyme and CSF LDH level of low dose group have no diffrence; the myocardial enzyme and CSF LDH level of medium dose group were reduced (P<0.05); the high dose group has an obvious reduction in myocardial enzyme and CSF LDH (P<0.01). And the myocardial enzyme and CSF LDH level of high dose group were lower than the low dose group significantly (P<0.01). ConclusionLinezolid has an exact effect on intracranial infection caused by staphylococcus aureus, with significant dose-effect relationship.

linezolid; intracranial infection; myocardial enzyme; lactate dehydrogenase

10.3969/j.issn.1005-1678.2016.06.15

張華，通信作者，男，本科，副主任醫(yī)師，研究方向：顱內(nèi)感染藥物，E-mail: zhanghua041500@yeah.net。

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