□ 高 云 廣東省食品檢驗(yàn)所

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高效液相色譜法測(cè)定食品中10種合成著色劑的含量

□ 高 云 廣東省食品檢驗(yàn)所

本文建立了一種使用高效液相色譜儀檢測(cè)10種合成著色劑的方法。前處理使用乙醇和氨水的提取液，樣品處理時(shí)間極大縮短。利用C18色譜柱，使用高效液相色譜紫外檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，10種合成著色劑色譜分為兩個(gè)波長(zhǎng)段480 nm和629 nm，實(shí)現(xiàn)10種目標(biāo)物完全分離。方法簡(jiǎn)便，具有較高的準(zhǔn)確度和靈敏度。

著色劑又被稱(chēng)為食品色素，以食品著色為主要目的，是賦予和改善食品色澤的物質(zhì)?？墒怯行┎涣忌a(chǎn)企業(yè)違禁添加著色劑，長(zhǎng)期食用此類(lèi)產(chǎn)品將嚴(yán)重危害人體健康。尤其近幾年發(fā)生的染色饅頭、染色魚(yú)的食品事故，更讓消費(fèi)者產(chǎn)生擔(dān)憂(yōu)。

為了保障消費(fèi)者安全，維護(hù)我國(guó)食品行業(yè)健康發(fā)展，本文研究了食品中10種合成著色劑的檢測(cè)方法，更加簡(jiǎn)便、快速、易操作，為相關(guān)人員快速準(zhǔn)確檢測(cè)著色劑提供了參考。

實(shí)驗(yàn)條件

儀器

本實(shí)驗(yàn)使用島津高效液相色譜儀LC- 20AT。具體配置為在線脫氣機(jī)，SIL-20A自動(dòng)進(jìn)樣器，CTO-20A柱溫箱，CBM-20A系統(tǒng)控制器，LabSolutions Ver.5.53色譜工作站。

表1 梯度洗脫時(shí)間程序

分析條件

1 液相色譜條件

色譜柱流動(dòng)相：A-0.02 mol/L乙酸銨；B-甲醇

流速：1.0 mL/min

進(jìn)樣體積：10 μL

柱溫：40℃

洗脫方式：梯度洗脫，B相初始濃度為10%，時(shí)間程序見(jiàn)表1。

樣品制備

標(biāo)準(zhǔn)溶液制備：用超純水將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋成1 μg/mL、5 μg/mL、10 μg/mL、20 μg/mL、50 μg/mL不同濃度的10種混合合成著色劑標(biāo)準(zhǔn)曲線工作液。

樣品前處理方法：取5 g食品，加入提取液（乙醇+氨水）30 mL，超聲30 min后，過(guò)濾到雞心瓶中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，用超純水定容到5 mL，0.45 μm濾膜過(guò)濾后，上機(jī)待測(cè)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖

10種混合著色劑色譜圖分為兩個(gè)波長(zhǎng)段480 nm和629 nm，如圖1和圖2所示，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的分離時(shí)間為1 min以上，分離程度較好。

線性關(guān)系

將6個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液（包括空白標(biāo)準(zhǔn)工作液），在上文分析條件下進(jìn)行監(jiān)測(cè)分析，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，外標(biāo)法制作校準(zhǔn)曲線，線性回歸方程為Y=8.48 7259e- 005X-5.335223e- 002，線性范圍為1～50 μg/mL，相關(guān)系數(shù)r=0.9999832，各標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的線性關(guān)系良好。

檢出限和定量限

1 μg/mL的10種混合標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖如圖1和圖2所示，根據(jù)ASTM計(jì)算信噪比，信噪比、儀器檢出限和定量限如表3所示，都滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)要求。

重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)

取三個(gè)不同濃度標(biāo)準(zhǔn)工作液1 μ g/ mL、5 μg/mL、10 μg/mL，分別平行進(jìn)樣6次，目標(biāo)化合物的保留時(shí)間和峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.04%～0.12% 和0.06%～0.88%，檢測(cè)方法重現(xiàn)性良好。

基質(zhì)加標(biāo)實(shí)驗(yàn)

按照上文樣品制備方法，在空白食品樣品中加入標(biāo)樣，加標(biāo)含量為5 μg/mL。10種混合著色劑的加標(biāo)回收率為87.6%～92.4%。

圖1 混合樣品色譜圖波長(zhǎng)

圖2 混合樣品色譜圖波長(zhǎng)

表2 信噪比與檢出限和定量限關(guān)系

實(shí)驗(yàn)總結(jié)和討論

本方法參考《GB/T5009.35-2003》，以乙醇和氨水作為提取液進(jìn)行簡(jiǎn)單提取，極大縮短了前處理時(shí)間，而且重現(xiàn)性和穩(wěn)定性都滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)要求，可用于食品中合成著色劑的測(cè)定。