□ 代君君 范 濤 章玉萍 劉 健 吳傳華 舒 蕊 陳 明 張麗麗 安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑研究所
?
桑葚成熟過程中多糖的動態(tài)變化
□ 代君君 范 濤 章玉萍 劉 健 吳傳華 舒 蕊 陳 明 張麗麗 安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑研究所
摘 要:桑葚具有抗氧化損傷、抗腫瘤、抗癌抗菌、免疫調(diào)節(jié)及抗炎癥等多種藥理作用,而桑葚多糖是其重要藥理活性成分。本實(shí)驗(yàn)測定了桑葚成熟過程中主要活性物質(zhì)多糖含量的動態(tài)變化。結(jié)果表明,在桑葚成熟過程中多糖的含量是逐漸增多的,前期多糖含量的增加速度比較慢,后期桑葚多糖的含量急速增加。本研究對桑葚資源開發(fā)利用提供了基礎(chǔ)。
關(guān)鍵詞:桑葚;多糖;活性成分
桑樹是一種木本種子植物,落葉灌木或小喬木,樹皮灰白色,有條狀淺裂。單葉互生,花單性,雌、雄花序均排列成穗狀葇荑花序,腋生,核果(桑葚),多數(shù)密集成一卵圓形或長圓形的聚花果,長1~2.5 c m,初時綠色,成熟后變?nèi)赓|(zhì)、黑紫色或紅色[1]。桑葚含糖、鞣酸、蘋果酸、維生素B1及B2、胡蘿卜素等多種對人體有益的多種營養(yǎng)成分[2],具有改善皮膚(包括頭皮)血液供應(yīng)、營養(yǎng)肌膚、使皮膚白嫩及烏發(fā)等作用,并能延緩衰老。中醫(yī)認(rèn)為桑葚性味甘寒,具有滋陰補(bǔ)血、補(bǔ)肝益腎、生津潤腸、烏發(fā)明目、生津潤燥等功效[3],[4]。桑葚是健體美顏、抗衰老的佳果與良藥,常食桑葚可以防治肝腎陰虛、眩暈耳鳴、心悸失眠、須發(fā)早白、津傷口渴、內(nèi)熱消渴、腸燥便秘,緩解眼睛疲勞干澀的癥狀[5]。
多糖是各種植物中的重要有效成分,具有抗氧化損傷、抗腫瘤、抗癌抗菌、免疫調(diào)節(jié)、抗炎癥等多種生物活性作用。桑葚為桑科植物桑的干燥果穗,營養(yǎng)豐富,其主要活性成分為葚多糖,桑葚多糖能夠清除自由基,阻斷自由基反應(yīng)鏈,具有一定的抗氧化、抗疲勞及防衰老作用[6]。本研究對桑葚生長不同時期的多糖含量進(jìn)行測定,以期為桑葚資源的開發(fā)利用提供理論基礎(chǔ)。
1.1 試驗(yàn)材料
桑葚采自安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑研究所試驗(yàn)桑園
1.2 桑葚多糖的提取
取新鮮桑葚10 g,研磨充分,放入100 mL的圓底燒瓶,再加入一定量的石油醚(浸沒桑葚為止),70℃水浴加熱,回流脫脂1 h,之后將上述溶液抽濾,得桑葚濾渣,將其放入100 mL的燒杯,加熱濃縮,冷卻,加入一定量的無水乙醇醇沉,使乙醇含量達(dá)到80%以上,靜置過夜。將上述溶液離心,將沉淀冷凍干燥。將上述沉淀溶解,加入等體積的3%的三氯醋酸溶液,振蕩充分,取水溶液即得粗多糖的提取液[7]。按上述方法對不同成熟時期的桑葚進(jìn)行多糖提取,得到不同濃度不同時期桑葚的多糖提取液。
1.3 桑葚多糖含量的測定
桑葚多糖含量的測定按吳洪新 等人的方法進(jìn)行[8],分別量取一定量的多糖提取液,采用硫酸-蒽酮法分別用紫外分光光度計(jì)在620 n m的波長下對不同時期桑葚的多糖提取液進(jìn)行測定,得出不同的吸光度值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線所得的線性回歸方程計(jì)算出不同時期桑葚多糖的含量。
2.1 回歸方程的確定
準(zhǔn)確吸取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0.10 mL、0.20 mL、0.40 mL、0.80 mL、1.00mL分別放進(jìn)帶蓋的試管中,用蒸餾水補(bǔ)到1.00 mL。以硫酸-蒽酮試劑作為顯色劑,用紫外分光光度計(jì)620 n m的波長下對不同濃度的葡萄糖溶液進(jìn)行測定,做5次平行實(shí)驗(yàn),取其平均值。以平均吸光度為縱坐標(biāo),葡萄糖質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。如圖1所示,計(jì)算得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為;Y=0.008 1+0.271 4X。
2.2 不同時期桑葚多糖含量的變化
通過對不同時期桑葚多糖的提取,對不同的提取樣品進(jìn)行檢測、分析和計(jì)算,得出不同時期桑葚中每克新鮮桑葚所含多糖的量。在桑葚成熟的過程中中,其多糖的含量是逐漸增多的,但是在花后前三周,多糖含量的增加速度比較慢,在花后四周之后,桑葚多糖的含量急速增加,這種趨勢也同桑葚在后期變得比較甜,而前期比較酸澀相符合(見表1)。
表1 不同時期桑葚中多糖提取液的吸光及其含量
圖1 多糖標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
我國食用桑葚的歷史已有2 000多年。古代醫(yī)書記載桑葚甘寒益血而除熱,消渴由于內(nèi)熱,津液不足,生津故止渴,為涼血補(bǔ)血益陰之藥?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明桑葚中含有蕓香苷、花色素、葡萄糖、果糖、蘋果酸、鈣質(zhì)、無機(jī)鹽、胡蘿卜素、多種維生素、鞣酸、脂肪酸及蘋果酸等營養(yǎng)物質(zhì),能幫助脂肪、蛋白質(zhì)及淀粉的消化,故有健脾胃助消化之功,可用于治療因消化不良而導(dǎo)致的腹瀉,預(yù)防腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散。同時桑葚中含有大量的水分、碳水化合物、多種維生素、胡蘿卜素及人體必需的微量元素等,能有效地?cái)U(kuò)充人體的血容量,能使頭發(fā)變得黑而亮澤。
近年來對桑葚活性物質(zhì)提取方面的研究很多,對多糖的分離純化、生物活性、化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)分析等方面的研究報(bào)道較多,藥理活性研究表明桑葚多糖對于降血糖、腫瘤、艾滋病等具有一定的療效。我國桑園種植面積大,桑葚產(chǎn)量可觀,資源豐富。本研究了不同時期桑葚中多糖含量的變化規(guī)律,結(jié)果表明,桑葚中多糖的含量是逐漸增多的,前期多糖的含量的增加速度比較慢,后期桑葚多糖的含量急速增加,因此,本研究對桑葚資源開發(fā)利用提供了基礎(chǔ)。
參考文獻(xiàn):
[1]談獻(xiàn)和,姚振生.藥用植物學(xué)[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,2009.
[2]中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所.中藥志[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1959.
[3]沈保安.中國常用中草藥[M].合肥:安徽科學(xué)技術(shù)出版社,1992.
[4]王忠,厲彥翔,駱新.桑葚多糖抗疲勞作用及其機(jī)制[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2012(17):234-236.
[5]劉曉露,劉勝利,郭立強(qiáng),等.酶法提取桑葚多糖的工藝研究[J].中國野生植物資源,2012(1).
[6]李穎,李慶典.桑葚多糖抗氧化作用的研究[J].中國釀造,2010(4).
[7]張先海,史麗巖,史景明.不同方法提取黃芪中黃芪多糖的比較[J].海峽藥學(xué),2010(10):79-80.
[8]吳洪新,單昌輝,李薇,等.紫外分光光度計(jì)法測定菊粉多糖[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008(13):5251-5253.
基金項(xiàng)目:學(xué)科建設(shè)項(xiàng)目(編號:15A0605);國家蠶桑產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系合肥綜合試驗(yàn)站(編號:CARS-22-SYZ09);院創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(編號:15C0606)。
作者簡介:代君君(1975-),女,安徽鳳陽人,碩士研究生,副研究員。研究方向:生化與分子生物學(xué)。
通訊作者:范濤(1962-),男,安徽合肥人,本科,研究員。研究方向:蠶桑。