張景云,王躍會(huì),李佳煒,毛　捷,秦啟忠

(重慶醫(yī)科大學(xué):1公共衛(wèi)生與管理學(xué)院；2.實(shí)驗(yàn)教學(xué)管理中心　400331)

?

富氫水對(duì)大鼠非酒精性脂肪肝的保護(hù)作用*

張景云1,王躍會(huì)1,李佳煒1,毛捷1,秦啟忠2△

(重慶醫(yī)科大學(xué):1公共衛(wèi)生與管理學(xué)院；2.實(shí)驗(yàn)教學(xué)管理中心400331)

[摘要]目的探討富氫水對(duì)大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)的保護(hù)作用及其可能機(jī)制。方法以150～180 g SD大鼠為研究對(duì)象，分為對(duì)照組(C組)、NAFLD組(M組)、非酒精性脂肪肝+富氫水組[(M+H2)組]、富氫水組(H2組)，每組12只；C組和H2組常規(guī)飼養(yǎng)，M組和(M+H2)組以高脂飼料+土霉素(10 mg/100 g劑量注射20 mg/mL，每5天1次)暴露建立大鼠NAFLD模型；連續(xù)暴露8周后各組隨機(jī)選取4只，HE染色檢測(cè)肝臟組織病理特征，觀察到脂肪空泡為模型建立成功；采用生化方法檢測(cè)各組大鼠外周血丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性；第9周起，各組常規(guī)飼養(yǎng)，前兩組注射生理鹽水(每只4 mL/d)，后兩組注射富氫水(每只4 mL/d)，連續(xù)腹腔注射24 d后，觀察各組肝臟組織病理特征，并檢測(cè)大鼠外周血ALT、MDA水平及SOD活性。結(jié)果各組暴露8周后，HE染色顯示：M組和(M+H2)組肝臟組織均有大小不等的脂肪空泡，C組和H2組肝臟組織細(xì)胞形態(tài)正常，無脂肪空泡；血液檢測(cè)顯示：與C組相比，M組和(M+H2)組ALT、MDA水平均顯著升高(P<0.05)，SOD活性顯著降低(P<0.05)。連續(xù)注射生理鹽水或富氫水24 d后，HE染色顯示：(M+H2) 組大鼠肝臟組織僅極少部分有脂肪空泡，多數(shù)肝細(xì)胞形態(tài)正常，無明顯損傷；M組大鼠肝臟組織一半以上區(qū)域有脂肪浸潤現(xiàn)象，并有脂肪滴出現(xiàn)，肝細(xì)胞受損明顯；血液檢測(cè)顯示：與M組比較，(M+H2) 組大鼠肝臟中ALT、MDA水平降低(P<0.05)，SOD活性增高(P<0.05)；但與C組相比，(M+H2) 組大鼠肝臟中ALT、MDA水平增高(P<0.05)，SOD活性降低(P<0.05)。結(jié)論成功建立大鼠NAFLD模型，富氫水處理對(duì)大鼠NAFLD有一定保護(hù)作用，其機(jī)制可能與富氫水抗氧化作用有關(guān)。

[關(guān)鍵詞]富氫水；非酒精性脂肪肝；脂肪空泡；氧化應(yīng)激

隨著人們生活水平的日益提高,非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的患病率逐年增加，成人NAFLD的患病率已達(dá)20%[1]。NAFLD的發(fā)生嚴(yán)重影響了患者生活質(zhì)量并增加患心血管疾病、糖尿病等風(fēng)險(xiǎn)，甚至發(fā)展成終末期肝病而死亡，這已成為危害人類健康的公共衛(wèi)生問題[2]。針對(duì)NAFLD發(fā)生的相關(guān)機(jī)制研究已成為學(xué)術(shù)界關(guān)注的焦點(diǎn)，但具體機(jī)制尚未明了，目前主要以氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過氧化的“二次打擊學(xué)說”為軸心[3]。這提示脂質(zhì)過氧化和炎癥反應(yīng)是NAFLD發(fā)病過程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。因此，具有抗炎癥和消除氧自由基的物質(zhì)可能是防治NAFLD的有效干預(yù)措施。富氫水(hydrogen water)中的氫可起到選擇性抗氧化作用和抗炎癥作用，同時(shí)氫具有特異性強(qiáng)、不良反應(yīng)小的特性[4]。因此，本研究擬建立高脂膳食并腹腔注射土霉素建立大鼠NAFLD模型[5]，通過檢測(cè)和比較各組大鼠外周血的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性，觀察大鼠肝臟的組織病理學(xué)特征，研究富氫水對(duì)NAFLD的防治作用及機(jī)制，為富氫水在臨床上的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料選取48只清潔級(jí)雌性SD大鼠，體質(zhì)量150～180 g，重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供[許可證號(hào)：SCXK(渝)2012-0001]。標(biāo)準(zhǔn)飼料[許可證號(hào)：SCXK(渝)2012-0002]，分籠(4只/籠)，自由飲水，溫度(24±2)℃，12 h光照，明暗交替(8∶00～20∶00明)，常規(guī)適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后用于實(shí)驗(yàn)。所有操作過程遵循實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理學(xué)要求。SOD南京建成生物工程所(生產(chǎn)批號(hào)：20150101；貨號(hào)：A001-1)；MDA南京建成生物工程所(生產(chǎn)批號(hào)：20140923；貨號(hào)：A003-1)；ALT試劑盒(速率法)中生北控生物科技股份有限公司(產(chǎn)品批號(hào)：201311132181)；注射用鹽酸土霉素，北京賽孚制藥有限公司(生產(chǎn)批號(hào)：120201)。

1.2方法

1.2.1動(dòng)物分組及模型建立本研究采用成組設(shè)計(jì)，將SD大鼠分為4組，即對(duì)照組(C組)、NAFLD組(M組)、NAFLD+富氫水組[(M+H2)組]、富氫水組(H2組)，每組12只；C組和H2組常規(guī)飼養(yǎng)，M組和(M+H2)組以高脂飼料[5]飼養(yǎng)，并按10 mg/100 g劑量注射土霉素(20 mg/mL,每5天1次)，暴露8周后各組選取4只，用HE染色檢測(cè)其肝臟組織病理變化，以觀察到脂肪空泡為模型建立成功[6]；第9周起，各組均常規(guī)飼養(yǎng)，前兩組腹腔注射生理鹽水每只4 mL/d，后兩組腹腔注射同體積富氫水，連續(xù)注射24 d。

1.2.2富氫水制備參照文獻(xiàn)[7]略改，將分析純的鋅粒與稀硫酸(2.5 mol/L)反應(yīng)制取的氫氣通入浸泡在冰水浴中的0.9%生理鹽水6 h以達(dá)到飽和，富氫水現(xiàn)用現(xiàn)制備。

1.2.3實(shí)驗(yàn)儀器低速離心機(jī)(LXJ-IIB，上海安亭科學(xué)儀器，中國)；純水器(ULPYS-210，成都超純科技有限公司,中國)；漩渦混合儀(XW-80A，海門市其林貝爾儀器制造有限公司，中國)；可見光分光光度計(jì)(722s，上海精密科學(xué)儀器有限公司，中國)；半自動(dòng)生化分析儀(PVS-2018，北京普朗新技術(shù)有限公司，中國)；冷凍石蠟兩用切片機(jī)(KD-2268-VI，金華科迪儀器設(shè)備有限公司，中國)。

1.2.4檢測(cè)指標(biāo)及方法大鼠處死前，隔夜禁食，次日稱體質(zhì)量后，用20%烏拉坦5 mL/kg麻醉大鼠，心臟采血約2 mL備用。采血后37 ℃孵育1～2 h后，3 000 r/min，15 ℃，離心5 min，取上清液備用。

1.2.5肝組織檢測(cè)(HE染色)肝組織HE染色制作過程及方法參考文獻(xiàn)[5]。各組大鼠均取肝左葉組織(約1 cm×1 cm×1 cm)，置入4%甲醛溶液中固定備用(其體積約為組織體積的10倍)，先后經(jīng)75%～100%乙醇梯度脫水，丙酮脫乙醇，二甲苯透明組織，石蠟包埋等，制備待測(cè)病理切片。

1.2.6ALT、MDA及SOD活性檢測(cè)取大鼠血上清液按ALT試劑盒說明操作，用半自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)ALT水平。取大鼠血液血清，嚴(yán)格按照MDA試劑盒說明書操作，用可見光分光光度計(jì)檢測(cè)樣本吸光度，并參照MDA試劑盒說明書計(jì)算其MDA含量。取大鼠血液血清，嚴(yán)格按照SOD試劑盒說明書操作，用可見光分光光度計(jì)檢測(cè)樣本吸光度，并參照試劑盒內(nèi)說明書計(jì)算SOD活性。

2結(jié)果

2.1一般情況在0～8周NAFLD大鼠造模過程中，C組和H2組大鼠生長及生活狀況正常；M組和(M+H2)組大鼠造模初期出現(xiàn)煩躁、易激怒等表現(xiàn)，造模5周后出現(xiàn)進(jìn)食量和飲水量減少，毛色暗淡無光澤，抓捕時(shí)掙扎劇烈。在第8周至8周+24 d腹腔注射富氫水和生理鹽水過程中，C組大鼠生長及生活狀況正常，H2組在腹腔注射富氫水后出現(xiàn)嗜睡癥狀，1～2 h后活動(dòng)正常；M組行動(dòng)遲緩，(M+H2)組大鼠腹腔注射后，出現(xiàn)打轉(zhuǎn)，活動(dòng)劇烈的現(xiàn)象。各組大鼠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中的體質(zhì)量變化見表1。

表1　各組大鼠體質(zhì)量結(jié)果±s,g)

a：P<0.05，與C組比較；b：P<0.05，與M組比較。

2.2肝臟病理學(xué)特征大體觀：在第8周，C組和H2組大鼠肝臟呈現(xiàn)暗紅色，包膜光滑，邊緣銳利，切面光潔。M組和(M+H2)組大鼠腹腔內(nèi)有大量脂肪組織，肝臟色澤更為暗淡，質(zhì)地偏硬，體積明顯增大，包膜緊張，邊緣圓頓，切面油膩。HE染色顯示：C組和H2組大鼠肝臟肝小葉結(jié)構(gòu)清晰，細(xì)胞索排列整齊，肝血竇正常，肝細(xì)胞無明顯病變，核結(jié)構(gòu)清晰；M組和(M+H2)組大鼠肝臟肝小葉分界不清，肝細(xì)胞索紊亂，出現(xiàn)程度不同的彌漫性肝細(xì)胞脂肪變性，可見大小不等的脂肪滴充滿細(xì)胞質(zhì)(圖1)。生理鹽水或富氫水注射24 d后，C組和H2組肝組織結(jié)構(gòu)完整，細(xì)胞索排列整齊，肝竇正常，肝細(xì)胞無明顯病變，核結(jié)構(gòu)清晰。(M+H2)組大鼠肝臟脂肪僅有極少部分有脂肪浸潤，肝索整齊，肝竇正常，組織完整，肝細(xì)胞無明顯損傷，核結(jié)構(gòu)清晰。M組大鼠肝索較為紊亂，一半以上區(qū)域均有脂肪浸潤現(xiàn)象，并有脂肪滴出現(xiàn)，肝細(xì)胞體積增大，肝索紊亂，細(xì)胞核被推向周邊。

2.3大鼠血液生化檢測(cè)第8周，各組血清學(xué)檢查顯示：與C組比較，M組和(M+H2)組ALT、MDA水平顯著升高(P<0.05)，SOD活性顯著降低(P<0.05)，見表2。連續(xù)注射生理鹽水或富氫水24 d后，與C組比較，M組大鼠ALT水平顯著升高(P<0.05)；(M+H2)組ALT水平顯著低于M組(P<0.05)；與C組與H2組比較，(M+H2)組ALT水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與C組比較，M組和(M+H2)組的MDA水平升高(P<0.05)，且(M+H2)組的MDA水平低于M組(P<0.05)；與C組比較，M組與(M+H2)組大鼠SOD活性顯著降低(P<0.05)，且(M+H2)組大鼠SOD活性高于M組(P<0.05)，見表3。

圖1　第8周各組大鼠肝臟切片(HE，×400)

組別ALT(U/L)SOD(U/mL)MDA(mmol/mL)C組41.49±13.32246.76±18.792.55±0.13M組87.43±22.95ab121.90±16.49ab4.69±0.37ab(M+H2)組82.93±18.55ab124.38±18.45ab4.59±0.61abH2組41.23±12.35247.14±15.502.58±0.17

a：P<0.05，與C組比較；b：P<0.05，與H2組比較。

表3　8周+24 d各組血清ALT、MDA水平及SOD活性

d：P<0.05，與C組比較；c：P<0.05，與M組比較。

3討論

NAFLD是一種對(duì)人體危害嚴(yán)重的疾病[8]。NAFLD的發(fā)生不僅影響患者的肝膽系統(tǒng)，還與動(dòng)脈粥樣硬化、多種血液系統(tǒng)疾病、肺部脂肪栓塞、病態(tài)肥胖、高脂血癥、胰島素抵抗等有著密切的聯(lián)系[9-11]。同時(shí)隨著生活水平的提高及飲食結(jié)構(gòu)的改變，受 NAFLD困擾的人群范圍已從中老年人擴(kuò)展到青春期的男性和女性[12]。NAFLD可發(fā)展為脂肪性肝炎(NASH)、肝纖維化、肝硬化，最終發(fā)展為肝細(xì)胞癌(HCC)而死亡[13]。隨著病毒性肝炎，特別是乙型肝炎的控制，NAFLD所致HCC比例在持續(xù)增加[14]。當(dāng)今醫(yī)療水平條件下尚無治療NAFLD的理想藥物[15]。NAFLD已成為危害人類健康的三大肝病之一，對(duì) NAFLD的防治研究已成當(dāng)前面臨的重要課題[16]。

在NAFLD所致肝臟損傷中，ALT是一種敏感且重要的標(biāo)志酶，其水平可反映出肝細(xì)胞損傷的程度[17]。SOD是廣泛存在于需氧代謝細(xì)胞中一種重要的ROS清除劑，反映了肝細(xì)胞抗氧化能力，在機(jī)體氧化和抗氧化平衡中有著至關(guān)重要的作用[18-19]。MDA反應(yīng)除可干擾肝內(nèi)脂質(zhì)代謝外，還可導(dǎo)致自由基生成增多，使得細(xì)胞膜脂質(zhì)氧化，肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)異常與功能損害[20]；因此，肝組織中SOD和MDA的改變也是導(dǎo)致脂肪肝的重要因素[18-19]。富氫水中的氫可起到選擇性抗氧化作用和抗炎癥作用[21]，同時(shí)氫具有特異性強(qiáng)、不良反應(yīng)小的特性。在本實(shí)驗(yàn)中，給予大鼠氫鹽水腹腔注射24 d后，與M組比較，(M+H2)組大鼠血清ALT和MDA水平降低和SOD活性增高(P<0.05)；這與文獻(xiàn)報(bào)道富氫水干預(yù)能夠增強(qiáng)大鼠肝臟的抗氧化能力是一致的[22]。但與C組相比，(M+H2)組在MDA和ALT水平及SOD活性比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；這提示(M+H2)組未完全恢復(fù)到正常水平，這可能與本實(shí)驗(yàn)富氫水處理的時(shí)間有關(guān)，有待進(jìn)一步研究。

本實(shí)驗(yàn)中，富氫水處理24 d后，與M組比較，(M+H2)組大鼠大體觀顏色和質(zhì)地顯著好轉(zhuǎn)；光鏡下，脂肪空泡減少，肝臟細(xì)胞僅有極少部分有脂肪浸潤，肝臟細(xì)胞損傷較輕，組織較為完整；但與C組相比，肝索排列相對(duì)正常，肝細(xì)胞尚未完全恢復(fù)；結(jié)合血清學(xué)指標(biāo)，(M+H2)組與M組相比有顯著改善，但與C組比較，(M+H2)組相應(yīng)指標(biāo)尚未恢復(fù)，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，這提示富氫水對(duì)NAFLD有一定保護(hù)作用。

本實(shí)驗(yàn)中，富氫水處理24 d對(duì)NAFLD有一定保護(hù)作用，但尚未完全使其恢復(fù)正常，這可能與富氫水中的氫水平有關(guān)，單位時(shí)間內(nèi)作用于肝臟損傷有效部位的劑量不足；或者是富氫水注射時(shí)間過短，在24 d內(nèi)氫分子作用于NAFLD劑量不足，尚不能使肝臟完全恢復(fù)。 本研究中，筆者觀察到富氫水顯著改善NAFLD模型中大鼠ALT，MDA水平和SOD活性及相應(yīng)病理學(xué)改變，為富氫水對(duì)NAFLD的治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，其具體機(jī)制有待深入研究。

參考文獻(xiàn)

[1]Bhatia LS,Curzen NP,Calder PC,et al.Non-alcoholic fatty liver disease:a new and important cardiovascular risk factor?[J].Eur Heart J,2012,33(10):1190-1200.

[2]David K,Kowdley KV,Unalp A,et al.Quality of Life in adults with nonalcoholic fatty liver disease:baseline data from the nonalcoholic steatohepatitis clinical research network[J].Hepatology,2009,49(6):1904-1912.

[3]Chen ZW,Chen LY,Dai HL,et al.Relationship between alanine aminotransferase levels and metabolic syndrome in nonalcoholic fatty liver disease[J].J Zhejiang Univ Sci B,2008,9(8):616-622.

[4]Ohsawa I,Ishikawa M,Takahashi K,et al.Hydrogen acts as a therapeutic antioxidant by selectively reducing cytotoxic Oxygen radicals[J].Nat Med,2007,13(6):688-694.

[5]邢凌翔，賀永文．氧四環(huán)素腹腔注射制備大鼠非酒精性脂肪肝模型的實(shí)驗(yàn)研究[J]．臨床肝膽病雜志，2007，23(1)：29-31．

[6]中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝臟病學(xué)分會(huì)脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組．非酒精性脂肪肝診斷標(biāo)準(zhǔn)(草案)[J]．現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué)，2002，14(2)：100．

[7]秦秀軍，安全，張偉，等．富氫水制備及保存方法的初步研究[J]．癌變·畸變·突變，2013，25(6)：457-460．

[8]Aygun C,Kocaman O,Sahin T,et al.Evaluation of metabolic syndrome frequency and carotid artery intima-media thickness as risk factors for atherosclerosis in patients with nonalcoholic fatty liver disease[J].Dig Dis Sci,2008,53(5):1352-1357.

[9]Alkhouri N,Tamimi TA,Yerian L,et al.The inflamed liver and atherosclerosis:a Link between histologic severity of nonalcoholic fatty liver disease and increased cardiovascular risk[J].Dig Dis Sci,2010,55(9):2644-2650.

[10]Schnedl WJ,Wallner SJ,Piswanger C,et al.Glycated hemoglobin and liver disease in diabetes mellitus[J].Wiener Medizinische Wochenschrift,2005,155(17/18):411-415.

[11]Inoue H,Sameshima N,Ishida T,et al.Vulnerability of experimentally induced fatty liver to heat stress in rats[J].J Gastroenterol,2006,41(1):55-61.

[12]Caballeria L,Auladel MP.Prevalence and factors associated with the presence of nonalcoholic fatty liver disease in an apparently healthy adult population in primary care units[J].BMC GastroenteroLogy,2007,5(7):41.

[13]Yeh MM,Brunt EM.Pathology of nonalcoholic fatty liver disease[J].Am J Clin Pathol,2007,128(5):837-847.

[14]陳紅霞，孟忠吉．非酒精性脂肪肝致肝細(xì)胞癌發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展[J]．臨床內(nèi)科雜志，2014，31(12)：858-860．

[15]王志剛，盧莉莉，潘智敏．非酒精性脂肪肝的綜合治療現(xiàn)狀[J]．浙江臨床醫(yī)學(xué)，2010，12(5)：540-542．

[16]張霖，呂志平．虎杖苷對(duì)非酒精性脂肪肝大鼠胰島素抵抗和血清腫瘤壞死因子影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]．時(shí)珍國醫(yī)國藥，2010，21(4)：1007-1008．

[17]張婧，熊正英．迷迭香對(duì)運(yùn)動(dòng)大鼠肝臟組織脂質(zhì)過氧化損傷保護(hù)作用的研究[J]．天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2011，23(2)：365-368,308．

[18]林育純，林忠寧．肝脂類水平與脂質(zhì)過氧化指標(biāo)的多元相關(guān)分析[J]．中國公共衛(wèi)生學(xué)報(bào)，1997，16(2)：22．

[19]曾民德．脂肪肝[J]．中華消化雜志，1999，19(2)：120-122．

[20]Rouach H,Fataccioli V,Gentil M,et al.Effect of chronic ethanol feeding on lipid peroxidation and protein oxidation in relation to liver pathology[J].Hepatology,1997,25(2):351-355.

[21]Dole M,Wilson FR,Fife WP.Hyperbaric Hydrogen therapy:a possible treatment for cancer[J].Science,1975,190(4210):152-154.

[22]陸朝暉．有氧運(yùn)動(dòng)與氫水對(duì)非酒精性脂肪肝SOD&MDA的影響[D]．上海：上海體育學(xué)院，2013．

Hydrogen-rich saline protects against nonalcoholic fatty liver in rat*

Zhang Jingyun1,Wang Yuehui1,Li Jiawei1,Mao Jie1,Qin Qizhong2△

(1.theSchoolofPublicHealthandManagement;2.ExperimentTeachingManagementCenter,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400331,China)

[Abstract]ObjectiveTo explore the protective effect of Hydrogen-rich saline against nonalcoholic fatty liver and its potential mechanism in rats.MethodsFurty-eight SD rats (weight:150-180 g) were randomly divided into control group (C),non-alcoholic fatty liver group (M),non-alcoholic fatty liver+Hydrogen-rich saline group (M+H2),Hydrogen-rich saline group (H2);group C and group H2 were fed with conventional breeding,group M and group(M+H2) were fed with high fat diet +Terramycin (10 mg/100 g.B.W,time/5 d,intraperitoneal injection) to establish the model of nonalcoholic fatty liver disease in rats;four rats were randomly selected from each group after consecutive exposure eight weeks,the pathology characteristics of liver tissue was tested by HE staining,and observed that fat cavitation symbolized the model established successfully.The content of alanine aminotransferase (ALT)，malondialdehyde (MDA) and superoxide dismutase (SOD) activity in each rat′s peripheral blood was tested by biochemical methods.From the ninth week,each group was starting to be fed with conventional breeding,group (C) and group (M) were treated with normal saline (4 mL/per/d),group (M+H2) and group (H2) were treated with Hydrogen-rich saline (4 mL/per/d);by consecutive intraperitoneal injection 24 days later,observed the change of the pathological features of liver tissue and detected the contents of ALT， MDA,and SOD activity of peripheral blood in rats.ResultsAfter eight weeks,the result of HE staining showed that there were a lot of fat vacuoles in the pathologic section of liver tissue from group M and group (M+H2);in contrast,there were no fat vacuoles were observed in liver tissue from group C and group H2.Blood tests results were showed that compared with group C,the content of ALT and MDA significantly increased in group M and group (M+H2) (P<0.05),and the SOD activity was significantly lower in group M and group (M+H2) (P<0.05).After Hydrogen-rich saline or normal saline injection for 24 days,the results of HE staining showed that only few fat cavitations of rat liver tissue in group (M+H2) was observed without obvious damage of the majority liver tissue in this group;whereas in group M,a lot of lipid deposition account for more than half of this area in these liver tissues,and the liver cells were damaged distinctly.Blood tests were showed that compared with group M rats,the content of ALT，MDA decreased in group (M+H2) (P<0.05),and the activity of SOD increased in group (M+H2) (P<0.05);however,by comparison,the content of ALT，MDA fostered more in group (M+H2) (P<0.05),and the activity of SOD decreased more percentage in group (M+H2) than those in group C(P<0.05),respectively.ConclusionThose results suggest that the model of nonalcoholic fatty liver disease was successfully established in rats,Hydrogen-rich saline treatment has certain protective effect on nonalcoholic fatty liver,and its underlying mechanism related to the antioxidant effective of rich hydrogen water probably.

[Key words]hydrogen water;nonalcoholic fatty liver disease;fat cavitations;oxidative stress

doi:論著·基礎(chǔ)研究10.3969/j.issn.1671-8348.2016.17.008

*基金項(xiàng)目：重慶醫(yī)科大學(xué)創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(201442)。

作者簡(jiǎn)介：張景云(1992-)，重慶醫(yī)科大學(xué)2011級(jí)預(yù)防醫(yī)學(xué)本科?！魍ㄓ嵶髡?Tel:13668083656；E-mail：qqizhong@sina.com。

[中圖分類號(hào)]R575.5；R965

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1671-8348(2016)17-2330-04

(收稿日期：2015-11-28修回日期：2016-02-26)