袁萬哲 崔元 經(jīng)美等
摘要:本文通過病原分離鑒定及動物回歸實驗,確定了鴨短喙-侏儒綜合征病原為鴨細(xì)小病毒。
關(guān)鍵詞:鴨短喙;鴨細(xì)小病毒
2014年11月份以來,我國江蘇、山東、安徽、江西、河北、河南等省份,商品肉鴨群發(fā)生了不明原因的以雛鴨發(fā)育遲緩,上下喙萎縮,舌頭外伸、腫脹、向下彎曲為特征的疾病,養(yǎng)殖戶俗稱為“鴨長舌病”或“鴨大舌病”(如圖1)。該病多發(fā)生于10~30日齡左右的肉鴨,發(fā)病率為5%~10%,患鴨后期癱瘓,不愿活動,部分患鴨因無法進(jìn)食而死亡。大多數(shù)患鴨出欄體重較健康鴨降低20%~30%,嚴(yán)重者僅為正常體重的50%?;鉴喸谧洹⑼涝走^程中脛骨等易發(fā)生骨折。根據(jù)其臨床表現(xiàn),該病暫定名為“鴨短喙——侏儒綜合征”。目前,該病的發(fā)病區(qū)域不斷擴(kuò)大,給我國養(yǎng)鴨業(yè)造成了一定的經(jīng)濟(jì)損失。
該病發(fā)生后,河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院袁萬哲博士課題組組織團(tuán)隊成員開展相關(guān)研究。根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果,初步確定該病為一種病毒性傳染病。將發(fā)病鴨脾臟經(jīng)研磨、凍融并過濾除菌,通過尿囊腔接種于9日齡鴨胚與雞胚,盲傳5代后,收集尿囊液,提取DNA后進(jìn)行PCR檢測。結(jié)果顯示,該病原可在鴨胚中可以增殖,感染鴨胚未見明顯病變。收集尿囊液,通過提取核酸和PCR檢測,成功利用一對鴨源細(xì)小病毒特異性引物擴(kuò)增得到目的大小條帶,連接pMD18-T載體后轉(zhuǎn)化DH5a大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞,挑陽性克隆測序。結(jié)果顯示,該目的片段大小為659bp,GenBank登錄號為KU516831。該序列同源性與鵝細(xì)小病毒較高,達(dá)98%。表明,成功分離到一株鴨細(xì)小病毒,將該分離株命名為SD1。
收集第5代尿囊液,采用口服與肌肉注射方式分別接種10日齡北京四系與櫻桃谷肉鴨,并設(shè)定對照組,隔離飼養(yǎng),一直觀察到攻毒后第28天感染組未出現(xiàn)死亡。從14d開始,攻毒組體重明顯低于感染組,隨機(jī)宰殺5只鴨,宰殺過程中發(fā)現(xiàn)感染組鴨子脛骨較脆,容易斷裂。感染組鴨子心、肝、脾、肺、腎、胸腺、舌頭中均有鴨細(xì)小病毒檢出。從20d開始,部分櫻桃谷肉鴨出現(xiàn)喙萎縮,舌頭外伸等表現(xiàn),28d宰殺部分感染組鴨子,均可從感染組鴨子體內(nèi)檢出鴨細(xì)小病毒。綜上所述,通過病原分離鑒定及動物回歸實驗,確定了鴨短喙——侏儒綜合征病原為鴨細(xì)小病毒。該病1971年在法國首次報道,1997年在波蘭的半番鴨中也有發(fā)生。2009年,Palya等對法國的半番鴨短喙與侏儒綜合征病例進(jìn)行了病毒分離與鑒定,確定病原為鵝細(xì)小病毒的變異株。我國臺灣地區(qū)1990年也曾有該病發(fā)生與流行的報道,大陸2014年以前未見該病大面積發(fā)生與流行的報道。目前,部分鴨場采用組織水苗與卵黃抗體預(yù)防具有一定效果。(編輯:趙曉松)