梁志剛，吳明玲，曾利才，姚尊偉，易思瑞，李 蓉，曹 東，畢鳳均，龔 立，曾 文，

（1.四川抗菌素工業(yè)研究所，成都 610052；2.四川普萊美生物科技集團有限公司，成都 610041）

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恒河猴幼猴出生后生長發(fā)育參數背景數據及其行為學特征

梁志剛1，吳明玲2，曾利才2，姚尊偉2，易思瑞2，李 蓉2，曹 東2，畢鳳均2，龔 立2，曾 文1，2

（1.四川抗菌素工業(yè)研究所，成都 610052；2.四川普萊美生物科技集團有限公司，成都 610041）

【摘要】目的 研究恒河猴幼猴出生后12個月的生長發(fā)育變化特征及神經行為學特征，建立生長發(fā)育參數背景參考數據。方法 選取單籠條件下出生的、遺傳背景清晰、出生天數明確的18只（雄性11只，雌性7只）恒河猴幼猴，于出生后第1天至360天每月進行體重、身高、頭圍、胸圍、前肢長、后肢長、冠臀長，尾長及肛門生殖器距離等生長發(fā)育指標的測量，出生后第28、175和360天進行血液學、血液生化學和淋巴細胞亞群分析檢測，出生后第208天進行手指迷路測試。結果 體重呈線性增長，性別間差異無顯著性（P＞0.05）；形態(tài)發(fā)育指標中除肛門生殖器距離雄性顯著大于雌性外（P＜0.01），其余指標在各檢測點性別間差異均無顯著性（P＞0.05）；血液學各指標性別間差異無顯著性（P＞0.05），出生后第175和360天的RBC和HGB顯著高于第28天（P＜0.05）；與出生后第28天相比，血液生化學中TP和BUN水平在出生后第175和360天均顯著升高（P＜0.01），ALP雖表現(xiàn)為降低，但差異不顯著（P＞0.05）；與出生后第28天相比，淋巴細胞亞群中CD4+及CD4+/CD8+比值在出生后第175 和360天均顯著降低（P＜0.01），而CD8+比例顯著升高（P＜0.01）；手指迷路測試中，學習期幼猴完成任務2所需測試次數顯著多于其他任務，且雌性顯著少于雄性（P＜0.05），其余任務性別間差異無顯著性（P＞0.05）；記憶期連續(xù)2天隨機測試雌性幼猴的正確率均顯著高于雄性幼猴（P＜0.05）。結論 體重及形態(tài)發(fā)育指標與出生天數呈線性增長，血液學、血液生化學和淋巴細胞亞群指標中RBC、HGB、LYMPH、TP、BUN、ALP、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+等出現(xiàn)了與幼猴器官系統(tǒng)生長發(fā)育相關的改變，在藥物評價中應重點關注，手指迷路測試提示雌性幼猴逆轉學習能力及長期記憶優(yōu)于雄性幼猴。本研究建立了恒河猴幼猴出生后12個月生長發(fā)育參數的背景數據及神經行為學特征，為恒河猴生殖發(fā)育毒性評價提供了參考依據及數據支持。

【關鍵詞】恒河猴；幼猴；生殖發(fā)育毒性；背景數據；手指迷路

近年來由于生物技術藥物的快速發(fā)展，利用NHPs進行生殖發(fā)育毒性評價已越來越普遍［8-12］。恒河猴是中國境內分布最多最廣的非人靈長類動物［13］，其作為藥物DART評價中最常用的NHPs之一［14-16］，在新藥安全性評價中扮演著重要角色。近幾年提出的“強化的”出生前后發(fā)育毒性試驗（enhanced pre-and postnatal development，ePPND）不僅可減少整體動物的使用，同時也能保證每組有足夠的動物數以完成對妊娠中晚期暴露的功能性評價［17-19］。其產后觀察期最常見為 6～12個月［20］，評價終點主要包括幼猴出生后的臨床觀察、體重及形態(tài)發(fā)育監(jiān)測、行為學測試，神經和免疫系統(tǒng)評價等［21］。然而，目前正常恒河猴幼猴生長發(fā)育的數據往往因為觀測指標或觀測時間有限［22，23］，往往不能全面地反映其正常的生長發(fā)育情況，從而無法為藥物DART評價提供足夠的參考信息。

本研究旨在通過動態(tài)監(jiān)測單籠飼養(yǎng)條件下出生的、遺傳背景清晰、且出生天數明確的正常恒河猴幼猴出生后12個月的體重、形態(tài)發(fā)育、血液學、血液生化學、淋巴細胞亞群及手指迷路測試的數據，明確其生長發(fā)育變化特征及神經行為學特征并建立背景數據，為恒河猴用于生物技術藥物DART評價提供參考依據和數據支持。

1　材料和方法

1.1F1動物選擇

我們前期的研究工作已經完成了妊娠猴的診斷及生理學特征背景數據的建立［24，25］。前期入選普通級性成熟的96只健康雌性恒河猴，體重5.0～8.5 kg，與16只健康雄性恒河猴（結核桿菌、寄生蟲、沙門氏菌屬、志賀菌屬以及帶狀皰疹B病毒查均為陰性），體重5.0～12.0 kg，采用后宮式交配法（雄∶雌=1∶6）同籠交配7 d。同籠第18天，雌猴肌肉注射氯胺酮注射液鎮(zhèn)靜后，行腹部B超妊娠診斷，以發(fā)現(xiàn)孕囊為確診懷孕，共得到孕猴28只，并進行單籠飼養(yǎng)（規(guī)格：100 cm×90 cm ×110 cm）。妊娠期間通過B超動態(tài)監(jiān)測妊娠狀態(tài)及胚胎/胎兒的存活狀態(tài)，并監(jiān)測胚胎/胎兒的頭圍、冠臀長和心率以評價胎兒宮內發(fā)育情況。用于交配的恒河猴均由雅安普萊美生物科技有限公司提供，生產許可證為SCXK（川）2014-027，使用許可證為SYXK（川）2014-186。

孕猴自然分娩，分娩當天確認幼猴存活狀態(tài)，并記為幼猴出生第0天（postnatal day 0，PND0）。在排除宮內發(fā)育不良、死產、疾病和棄嬰等異常動物后，共入選18只（雄性11只，雌性7只）正常恒河猴幼猴。所有動物均飼養(yǎng)于環(huán)境受控的動物房，室溫16℃～26℃，相對濕度40%～70%，換氣次數每小時8～10次，每日12 h/12 h交替照明。幼猴離乳前由母猴撫養(yǎng)，出生第180天離乳，隨機分籠后人工飼養(yǎng)于單籠，并按照少食多餐，營養(yǎng)均衡的原則給食，并配以適量果蔬，自由飲水，以保證幼猴的正常生長發(fā)育。

1.2實驗材料

B型超聲檢測儀（邁瑞DP50-Vet）、電子稱重顯示器（友聲XK3123）、軟尺、全自動五分類血液分析儀（Sysmex XT-2000i）、全自動生化分析儀（Beckman Coulter Synchron CX4 PRO）、高速冷凍離心機（Thermo Scientific Sorvall ST16R）、流式細胞儀（BD Accuri C6）、湘儀 L-550低速離心機、移液器（Eppendorf）、一次性真空采血管（河北鑫樂科技有限公司）、一次性真空采血針（上?？禎忉t(yī)療器械有限公司）、流式管（BD Falcon）、美國貝克曼庫爾特配套生化檢測試劑、小鼠抗人CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE、CD20-APC抗體（BD Biosciences）、紅細胞裂解液（eBioscience）、磷酸鹽緩沖液（Lonza）、鹽酸氯胺酮注射液（Bioniche Teoranta）、手指迷路裝置、蘋果。

當照相機的出現(xiàn)，美術作品由具象藝術開始轉向抽象藝術，隨著數碼相機、數碼攝像機的普及，手繪美術作品不再是美術界表達思想的主流，那些無法言喻的東西就會通過多媒體的方式呈現(xiàn)出來，這就是多媒體時代。目前，我們正在邁入這個時代?？偠灾?，現(xiàn)階段的美術教學，引入多媒體技術和電腦繪圖是時代發(fā)展的需要，是培養(yǎng)創(chuàng)新型人才和全面發(fā)展人才的需要。作為一名優(yōu)秀的人民教師，應從教育發(fā)展的角度，應用現(xiàn)代教育技術，推進教育信息化，帶動教育現(xiàn)代化，實現(xiàn)基礎教育跨越式的發(fā)展。

1.3實驗方法

1.3.1臨床觀察：幼猴出生后于每天上午下午觀察兩次，包括一般狀態(tài)、攝食量、飲水量，糞便情況以及母子間行為，如理毛、哺乳及社會探索等并觀察有無棄嬰行為的發(fā)生。

1.3.2體重與形態(tài)發(fā)育指標測量：幼猴于PND1、30、60、90、120、150、180、210、240、270、300，330及360進行體重和形態(tài)發(fā)育指標的測定。形態(tài)發(fā)育指標的測量方法參考鄒如金等［26］和崔偉等［22］的報道，包括：頭圍（head circumference，HC）、胸圍（chest circumference，CC）、前肢長（forelimb length，F(xiàn)LL）、后肢長（hind limb length，HLL）、冠臀長（crown-rump length，CRL）、身高（body height，BH），尾長（tail length，TL）以及肛門生殖器距離（anal-genital distance，AGD）。

1.3.3幼猴血樣采集及檢測：幼猴于PND28、175 及360日晨經后肢靜脈采集血液2 mL。其中1 mL全血EDTA-K2抗凝后用于血液學及淋巴細胞亞群檢測，剩余1 mL全血以5 000 r/min離心10 min后分離血清用于血液生化學檢測。

血液學檢測指標包括：紅細胞計數（RBC）、血紅蛋白含量（HGB）、紅細胞壓積（HCT）、平均紅細胞體積（MCV）、平均紅細胞血紅蛋白量（MCH）、平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC）、白細胞計數（WBC）、淋巴細胞計數（LYMPH）、中性粒細胞計數（NEUT）、單核細胞計數（MONO），血小板計數（PLT）和平均血小板體積（MPV）。血液生化學指標包括：總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、總膽紅素（TBIL）、直接膽紅素（DBIL）、谷草轉氨酶（AST）、谷丙轉氨酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）、谷氨酰轉肽酶（GGT）、膽固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、血糖（GLU）、血尿素氮（BUN）、肌酐（CR），尿酸（UA）和肌酸激酶（CK）。淋巴細胞亞群指標包括：CD3+（T淋巴細胞）、CD4+（輔助/誘導T淋巴細胞），CD8+（抑制/細胞毒T淋巴細胞）及CD20+（B淋巴細胞）。

1.3.4手指迷路測試：幼猴于PND208進行手指迷路測試，測試方法及測試裝置（圖1）參考Tsuchida等［27］和Negishi等［28］的報道。迷路由4段組成，每段設有降落口和誤差口，以蘋果作為報酬，幼猴用手指將蘋果成功地移動到降落口，最后可以從食盒獲得蘋果報酬。測試由適應期、學習期和記憶期組成，每天上午下午完成兩部分測試，每部分測試包含15次試驗。適應期幼猴須適應測試裝置和測試人員，以能迅速（＜2 s）從食盒（或測試人員手中）取回蘋果作為進入學習期的標準。學習期測試依次由任務1、2、3、4組成，分別對應測試裝置的第1、2、3、4步。在任務1開始前，蘋果被放置于裝置第1步，幼猴需在避免將蘋果落入誤差盒的前提下，將蘋果移至食盒并迅速取回。幼猴成功取回蘋果（試驗正確）或將蘋果落入誤差盒（試驗錯誤）記為1次試驗完成，當幼猴在連續(xù)的兩部分測試中，每部分均完成≥14次正確試驗時方可進入下一任務，在完成全部4個任務后整個學習期結束。記憶期測試在學習期結束2個月后的連續(xù)2 d進行，每天各完成一部分測試，每部分測試包含16次試驗，蘋果由測試人員隨機放置，每步放置4個。學習期及記憶期測試時記錄幼猴正確和錯誤試驗的次數。

圖1　4步非校正法手指迷路測試Note.（a）Schematic diagram of the finger maze test apparatus.Open area：maze section，shaded area：error box（EB）and feeding box，reward：a piece of apple，from the bottom：step 1，step 2，step 3，and step 4；（b）Photograph of an infant monkey trying the finger maze test to obtain a reward.Fig.1 Four-step non-correction-method-type finger maze test

圖2　雌、雄恒河猴幼猴出生后體重變化情況Fig.2 Changes of body weight of the male and female infant rhesus monkeys

圖3　恒河猴幼猴出生后體重與出生后天數的關系Fig.3 Relation between body weight and postnatal days in the infant rhesus monkeys

2　結果

2.1體重

雌、雄恒河猴幼猴出生后12個月的體重變化情況見表1，性別間無顯著差異（P＞0.05）。對雌、雄幼猴不同檢測時間點的體重進行作圖分析（圖2），可見雌、雄幼猴的體重隨出生天數的增加而增加，且雌、雄幼猴間體重呈同步增長（r=0.999）。進一步對所有幼猴的體重（y）與出生天數（x）進行線性回歸分析，得到關系式y(tǒng)=0.0046x+0.5365，R2= 0.9945（圖3）。

2.2形態(tài)發(fā)育

雌、雄恒河猴幼猴出生后各形態(tài)發(fā)育指標變化情況見表1，各指標均呈線性增長。除肛門生殖器距離表現(xiàn)為雄性顯著大于雌性外（P＜0.01），其余指標在各檢測點性別間差異均無顯著性（P＞0.05）。各指標中身高增長最快，約0.0668 cm/d，且與后肢長增長顯著相關（r=0.999）；而肛門生殖器距離增長最慢，雄性約 0.0066 cm/d，雌性約0.0019 cm/d。

2.3血液學與血液生化學

雌、雄恒河猴幼猴的血液學與血液生化學指標變化情況見表2、表3。與PND28相比，血液學指標中RBC、HGB和MCHC在PND175和360顯著升高（P＜0.05），MCV、MCH顯著降低（P＜0.05），HCT無顯著變化（P＞0.05）；WBC、LYMPH及NEUT在PND175顯著升高（P＜0.01）；PLT及 MPV在PND360顯著降低（P＜0.01）。血液學各指標在PND28、175和 360性別間差異無顯著性（P＞0.05）。與PND28相比，血液生化學指標中TP、ALT 和BUN在PND175及360均顯著升高（P＜0.05），ALB在PND360顯著升高（P＜0.01）；AST、ALP、CR 和LDL的變化不顯著（P＞0.05）。雌性幼猴的CHOL在PND360低于雄性幼猴（P=0.034）而TG則高于雄性幼猴（P=0.015），其余指標性別間差異不顯著（P＞0.05）。

2.4淋巴細胞亞群分析（免疫表型檢測）

雌、雄恒河猴幼猴淋巴細胞亞群的變化情況見表4。與 PND28相比，CD4+和 CD4+/CD8+在PND175及360顯著降低，而CD8+顯著升高（P＜0.01）；CD3+在 PND175顯著降低（P＜0.05）；CD20+在各檢測點均無顯著變化（P＞0.05）。雌性幼猴的CD8+在PND28顯著低于雄性幼猴（P= 0.001），CD20+則高于雄性幼猴（P=0.037），而CD4+/CD8+在PND28及360均高于雄性幼猴（P= 0.001，P=0.024）。

2.5手指迷路測試

雌、雄恒河猴幼猴手指迷路測試結果見圖4、圖5。在學習期測試中，完成4項任務所需測試次數由多到少依次為：任務2＞任務1＞任務3＞任務4，完成任務2所需的測試次數顯著多于任務1、3和4（P＜0.01），完成任務1所需測試次數顯著多于任務3和4（P＜0.05），完成任務3和4所需測試次數間差異無顯著性（P＞0.05）；除雄性完成任務2所需測試次數顯著多于雌性外（P＜0.05），完成其余任務所需測試次數性別間差異無顯著性（P＞0.05）。在學習期結束2個月后的連續(xù)2天隨機測試中，第2天較第1天的正確率升高，但差異無顯著性（P＞0.05）；而雌性幼猴的正確率在測試第1天和第2天均顯著高于雄性幼猴（P＜0.05）。

3　討論

建立正常恒河猴幼猴出生后12個月的生長發(fā)育背景數據對恒河猴用于生物技術藥物DART評價有著重要意義。體重及形態(tài)發(fā)育數據可為評價藥物子宮內暴露提供重要信息，血液學、血液生化學數據可評估藥物對子代各器官系統(tǒng)生長發(fā)育的影響以及評價組織器官的生理狀態(tài)，而免疫表型及學習能力和記憶力的數據對評價藥物對免疫系統(tǒng)和神經系統(tǒng)功能發(fā)育的影響也有著重要意義。

圖4　雌、雄恒河猴幼猴完成學習期各項任務所需的測試次數Note.Compared with the males，*P＜0.05.Fig.4 Number of sessions for the male and female infant rhesus monkeys to solve each task in the learning test

圖5　雌、雄恒河猴幼猴記憶期測試的正確率Note.Compared with the male，*P＜0.05.Fig.5 The correct rate of memory test in the male and female infant rhesus monkeys

本研究通過對正常恒河猴幼猴出生后12個月的體重和形態(tài)發(fā)育指標的動態(tài)監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，除雄性肛門生殖器距離顯著大于雌性外，其余指標性別間均無顯著差異，且幼猴的體重及各形態(tài)發(fā)育指標與出生天數呈線性增長關系。提示在藥物DART評價中，若幼猴體重及形態(tài)發(fā)育指標（肛門生殖器距離除外）在12個月的觀察期內出現(xiàn)顯著的性別差異，或與預期體重及形態(tài)發(fā)育指標相比顯著增加或降低時，可提示與藥物導致的幼猴發(fā)育障礙有關。形態(tài)發(fā)育指標中身高增長最快，且與后肢長骨的增長密切相關，提示幼猴處于長骨迅速增長的時期，而肛門生殖器距離增長最慢，可能與幼猴體內缺乏性激素刺激有關。此外，頭圍可反映腦及顱骨的發(fā)育，胸圍可反映肺及胸廓的發(fā)育，且胸圍的增長速度大于頭圍［29］。幼猴出生時胸圍平均約15.1 cm，比頭圍平均小4.6 cm，至出生后330 d超過頭圍，若該交叉點延遲，可提示幼猴營養(yǎng)不良或藥物導致發(fā)育遲緩［29］。

國內外關于恒河猴血液學及血液生化學的數據已有較多報道［30-36］，但大多都針對青少年或成年恒河猴，關于幼年恒河猴特別是用于DART評價的出生后12個月內的幼年恒河猴的數據則較缺乏。本研究通過對恒河猴幼猴出生后28、175和360天的血液學、血液生化學的測定發(fā)現(xiàn)，血液學各指標性別間差異不明顯。PND28的RBC和HGB水平顯著低于PND175和PND360，且低于Smucny等［31］報道的成年恒河猴的RBC水平，提示幼猴出生后可能存在造血功能的增強。HCT無顯著變化，MCV、MCH和MCHC的變化與RBC和HGB升高有關。幼猴LYMPH水平比周建華等［34］報道的成年恒河猴高，與人類嬰幼兒報道一致［37］，且表現(xiàn)為PND175升高，而PND360又回到與PND28相當的水平，可能與幼猴免疫系統(tǒng)的發(fā)育有關。與PND28相比，TP、ALB和BUN水平在PND175及360均升高，提示幼猴可能處于生長發(fā)育旺盛時期，其蛋白質合成與分解均增加。本研究中幼猴的ALP水平顯著高于Smucny［31］等和周建華等［34］報道的成年恒河猴的ALP水平，這一現(xiàn)象與人類的報道相似［38］，因ALP與骨的形成有關，其水平會隨著個體的生長發(fā)育而逐漸降低，Lee等［36］在青少年恒河猴中也發(fā)現(xiàn)了類似的現(xiàn)象。其余指標的變化不具有生理學意義。

目前關于NHPs免疫系統(tǒng)發(fā)育的報道主要集中在幼猴出生前［39-41］，而幼猴出生后的報道則較缺乏。雖然在出生時NHPs與人類的免疫系統(tǒng)在形態(tài)結構和細胞組成方面就已發(fā)展得較為完善，但其功能仍需在出生后階段發(fā)育成熟［39，40］。因此現(xiàn)有的報道中，絕大部分單克隆抗體類藥物的DART評價都會對免疫系統(tǒng)功能進行評估［8-11，42］。本研究中幼猴CD4+及CD4+/CD8+在PND175和360顯著高于PND28，而CD8+則顯著低于PND28，與Bowman等［42］報道的幼猴在 PND30、180及360的變化一致，可能與幼猴細胞免疫功能的發(fā)育有關。本研究中PND175及 PND360的 CD3+較 PND28降低，CD20+則相對穩(wěn)定，而Martin等［10］、Enright等［11］和Bowman等［42］報道的正常幼猴的CD3+則有不同程度升高，CD20+有不同程度的降低，可能與恒河猴和食蟹猴之間的種屬間差異有關。

學習能力及記憶力評價是DART神經行為學評價的重要組成部分［21］，也是藥物發(fā)育神經毒性評價的重要內容［43］。手指迷路測試作為評價學習能力和記憶力的一種快速而簡便的方法，已被列入兒科藥物非臨床安全性評價指南作為藥物評價的參考方法［44］。本研究通過手指迷路測試對恒河猴幼猴的學習能力及記憶力評價，發(fā)現(xiàn)幼猴學習期完成任務2所需測試次數顯著多于其他任務，提示任務2的難度最大，測試時出現(xiàn)錯誤的次數最多，與Tsuchida等［27］報道的一致。其主要原因一方面在于任務2移動蘋果的方向與任務1恰好相反，要在測試初期判斷移動蘋果的正確方向對幼猴有一定的難度；另一方面是因為任務2涉及到對幼猴逆轉學習能力及空間辨別能力的測試。雌性幼猴完成任務2所需的測試次數顯著少于雄性幼猴，而其他任務性別間無顯著差異，提示雌性幼猴的逆轉學習能力可能優(yōu)于雄性幼猴。學習期測試結束2個月后連續(xù)2 d的隨機測試屬于對幼猴長期記憶的測試，雌性幼猴2 d測試的正確率均顯著高于雄性幼猴，提示雌性幼猴的長期記憶可能優(yōu)于雄性幼猴，與人類女性的記憶力優(yōu)于男性的報道一致［45］。雌、雄幼猴記憶力測試第2天的正確率均較第1天升高，與Inoue等［44］的報道一致，可能與第1天的測試內容促進了幼猴長期記憶的回憶和再認或與第1天測試強化了長期記憶有關，具體原因有待進一步研究。

綜上所述，本研究通過對18只單籠飼養(yǎng)條件下出生的、遺傳背景清晰、出生天數明確的恒河猴幼猴體重和形態(tài)發(fā)育指標的連續(xù)監(jiān)測，獲得了幼猴出生后12個月的體重及形態(tài)發(fā)育指標的動態(tài)數據，并發(fā)現(xiàn)體重及形態(tài)發(fā)育指標與出生天數呈線性增長，且性別間無差異，為評價幼猴出生后生長發(fā)育情況提供了依據，同時也為DART試驗中評價藥物對幼猴生長發(fā)育的影響提供了參考數據。通過對出生后第28、175和360天的血液學、血液生化學和淋巴細胞亞群的測定分析，發(fā)現(xiàn)RBC和HGB的升高可能與幼猴出生后造血功能增強有關，LYMPH的變化及其水平高于成年猴可能與幼猴免疫系統(tǒng)的發(fā)育有關，TP、ALB和BUN升高可能與幼猴代謝旺盛、蛋白質合成和分解增加有關，ALP顯著高于成年猴可能與幼猴骨骼的生長發(fā)育旺盛有關，CD4+、CD4+/CD8+的升高及CD3+、CD8+的降低可能與幼猴細胞免疫功能的發(fā)育有關，提示在藥物DART評價中，要特別關注上述指標的變化，并區(qū)分這些變化是否由藥物引起。通過出生后第208天的手指迷路測試對幼猴的學習能力及記憶力評價，發(fā)現(xiàn)雌性幼猴的逆轉學習能力及長期記憶均優(yōu)于雄性幼猴，提示在藥物DART評價中同樣需要注意對這種正常的生理差異與藥物導致的差異進行區(qū)分。本研究建立了恒河猴幼猴出生后的生長發(fā)育背景參數，明確了各生長發(fā)育指標的變化特征及神經行為學特征，為恒河猴用于生殖發(fā)育毒性研究提供了參考依據和數據支持。

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〔修回日期〕2016-01-13

Growth and developmental parameters and behavioral characteristics of infant rhesus monkeys

LIANG Zhi-gang1，WU Ming-ling2，ZENG Li-cai2，YAO Zun-wei2，YI Si-rui2，LI Rong2，CAO Dong2，BI Feng-jun2，GONG Li2，ZENG Wen1，2
（1.Sichuan Industrial Institute of Antibiotics，Chengdu 610052，China；2.Sichuan Primed Bio-Tech Group Co.，Ltd，Chengdu 610041，China）

【Abstract】Objective To explore the growth and developmental parameters and behavioral characteristics of rhesus monkeys during the first year of birth and to establish the background data.Methods A total of 18（♂=11，♀= 7）infant rhesus monkeys born from individually caged mothers and with known genetic background and postnatal days were monitored monthly for body weight，body height，head circumference，chest circumference，forelimb length，hind limb length，crown-rump length，tail length and anal-genital distance from postnatal day（PND）1 to 360，while hematology，blood chemistry and lymphocyte subsets were examined on PND 28，175 and 360，and finger maze test was carried out on PND 208.Results The body weight showed linear growth with no significant difference between genders（P＞0.05）. Except for the anal-genital distance of male infants was significantly greater than that of female infants（P＜0.01），no significant differences were observed between sexes in other morphological parameters.No significant differences of hematology were seen between genders（P＞0.05）.Compared with that at PND28，TP and BUN were significantly increased（P＜0.01）while ALP decreased with no significant difference（P＞0.05）at PND 175 and 360.Compared with that at PND28，CD4+and CD4+/CD8+weresignificantly decreased（P＜0.01）while CD8+significantly increased（P＜0.01）at PND175 and 360.The number of sessions to solve task 2 in learning test was significantly greater than other tasks with females significantly less than males（P＜0.05）.The females had higher correct rate than males in the 2-day random memory test（P＜0.05）.Conclusions Body weight and morphological parameters show a linear growth.The PND.The RBC，HGB，LYMPH，TP，BUN，ALP，CD4+，CD8+and CD4+/CD8+in hematology，blood chemistry and lymphocyte subsets show relevant changes to the growth and development of organs and systems in infants，which should be highly concerned in drug evaluation.The finger maze test indicates that female infants have better reversal learning and long-term memory than male infants.Background data and behavioral characteristics of infant rhesus monkeys during the first 12 months of birth are established in this study，which provide useful reference and support the evaluation of developmental and reproductive toxicity of drugs in rhesus monkeys.

【Key words】Rhesus monkey；Infant；Developmental toxicity；Reproductive toxicity；Behavioral characteristics；Background data；Finger maze test

【中圖分類號】R-33

【文獻標識碼】A

【文章編號】1671-7856（2016）04-0024-11

doi：10.3969.j.issn.1671-7856.2016.04.005

［基金項目］四川省科技計劃項目青年基金（2015JQ0059）；四川省科技計劃項目支撐計劃（2015SZ0012）。

［作者簡介］梁志剛（1988-），男，碩士研究生，藥理毒理學。E-mail：liangzhigang88@163.com。

［通訊作者］曾文（1970-），女，博士，主要從事非人靈長類疾病模型及轉化醫(yī)學研究。E-mail：zengwen10@vip.163.com。